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猪瘟病毒E2基因真核表达质粒的构建及基因疫苗的研究 被引量：50
1
作者 余兴龙 涂长春 +5 位作者 李红卫 陈创夫 李作生 马正海 孙明 殷震 《中国病毒学》 CSCD 2000年第3期264-271,共8页
构建了猪瘟病毒 (classicalswinefevervirus,CSFV)主要保护性抗原E2基因 4种不同的真核表达质粒。小鼠免疫试验表明 ,E2基因上不同的功能区对基因疫苗的免疫应答有很大影响 ,有信号肽序列的E2基因可诱导产生特异性免疫反应 ,且无跨膜区... 构建了猪瘟病毒 (classicalswinefevervirus,CSFV)主要保护性抗原E2基因 4种不同的真核表达质粒。小鼠免疫试验表明 ,E2基因上不同的功能区对基因疫苗的免疫应答有很大影响 ,有信号肽序列的E2基因可诱导产生特异性免疫反应 ,且无跨膜区序列的E2基因所诱导的免疫应答反应比有跨膜区序列的强 ,而无信号肽序列的E2基因则不能诱导产生CSFV特异性的免疫反应。攻毒保护试验表明 ,免疫家兔最少可抵抗 10个最小感染剂量 (MID)的猪瘟兔化弱毒苗 (Hogcholeralap inizedvirus,HCLV)的攻击 ;免疫猪可抵抗致死剂量的CSFV石门株强毒的攻击。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 E2基因 真核表达质粒 基因疫苗
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多重PCR检测猪瘟病毒、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒 被引量：43
2
作者 刘建柱 崔玉东 +3 位作者 李鹏 王志强 石星明 朴范泽 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期535-537,共3页
根据猪瘟病毒 ( CSFV)、猪细小病毒 ( PPV)和猪伪狂犬病病毒 ( PRV) 3种病原体的基因保守序列 ,分别设计了与CSFV的 E2基因、PPV的 VP2基因和 PRV的 g 基因序列互补的 3对引物。用这 3对引物对人为混合的样品中的PPV和 PRV的 DNA模板及 ... 根据猪瘟病毒 ( CSFV)、猪细小病毒 ( PPV)和猪伪狂犬病病毒 ( PRV) 3种病原体的基因保守序列 ,分别设计了与CSFV的 E2基因、PPV的 VP2基因和 PRV的 g 基因序列互补的 3对引物。用这 3对引物对人为混合的样品中的PPV和 PRV的 DNA模板及 CSFV反转录后的 c DNA模板进行多重 PCR扩增和多重 PCR反应条件的优化 ,结果同时得到 3条与试验设计相符的 2 88bp( CSFV)、5 75 bp( PPV)和 70 0 bp( PRV)特异性条带 ;敏感性检测结果表明 ,该多重 PCR可以检测到 14 .5 ng/ L 的 CSFV、2 7.1pg/ L 的 PPV、31.4 ng/ L 的 展开更多
关键词 猪瘟病毒 细小病毒 伪狂犬病病毒 检测 多重PCR 早期诊断
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用RT-PCR方法检测猪瘟细胞苗中污染牛病毒性腹泻病毒 被引量：33
3
作者 范学政 宁宜宝 +2 位作者 王琴 徐璐 沈青春 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2010年第1期8-10,共3页
参考GenBank中牛病毒性腹泻病毒（BVDV）和猪瘟兔化弱毒病毒（HCLV）序列，设计和建立了一种PCR检测方法，通过试验证明，所建方法能够对HCLV和BVDV进行鉴别诊断；用此方法对23个批次的猪瘟细胞苗进行检测，发现有5批疫苗污染BVDV，均为... 参考GenBank中牛病毒性腹泻病毒（BVDV）和猪瘟兔化弱毒病毒（HCLV）序列，设计和建立了一种PCR检测方法，通过试验证明，所建方法能够对HCLV和BVDV进行鉴别诊断；用此方法对23个批次的猪瘟细胞苗进行检测，发现有5批疫苗污染BVDV，均为BVDVI型，污染率为21．74％。测定序列与BVDVOregonC24V株（AF091605）的核苷酸相似性为83．2％～83．5％，与NADL株（M31182）的核苷酸相似性为86．4％～86．7％。 展开更多
关键词 BVDV CSFV RT-PCR方法 鉴别
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猪繁殖障碍病毒性疫病六重PCR检测方法的建立及应用 被引量：30
4
作者 刘志杰 曾智勇 +3 位作者 汤德元 周莉 梁海英 肖超能 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1429-1436,共8页
参照GenBank中相关的基因序列,设计了6对引物分别用于扩增PRV gE、PPV NS1、PCV ORF2、PRRSV ORF7、CSFVE2、JEVE基因的部分片段。敏感性和特异性试验结果表明,该mPCR对6种病毒的最低核酸检测量分别为PRV 6.6pg、PPV 96pg、PCV 12.9pg、... 参照GenBank中相关的基因序列,设计了6对引物分别用于扩增PRV gE、PPV NS1、PCV ORF2、PRRSV ORF7、CSFVE2、JEVE基因的部分片段。敏感性和特异性试验结果表明,该mPCR对6种病毒的最低核酸检测量分别为PRV 6.6pg、PPV 96pg、PCV 12.9pg、PRRSV 10.5pg、CSFV 51pg、JEV 46pg,对猪流感病毒(SIV)、大肠杆菌(E.coli)的扩增结果均为阴性。103份临床病料检测结果表明,上述6种猪病毒性疫病在贵州省猪群中普遍存在且混合感染情况严重。该六重PCR方法不仅实现了上述6种病毒的同时检测,更实现了DNA病毒及RNA病毒的同步检测,能够对PRV、PPV、PCV、PRRSV、CSFV、JEV单个或混合感染的临床病料进行快速鉴别诊断。 展开更多
关键词 PRV PPV PCV2 PRRSV CSFV JEV 多重PCR
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猪流感病毒与繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、圆环病毒、伪狂犬病病毒、副猪嗜血杆菌混合感染的情况调查 被引量：29
5
作者 覃绍敏 梁安莉 +5 位作者 王仰杰 向晖 黄红梅 陈凤莲 马玲 吴健敏 《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第3期77-80,共4页
应用套式PCR方法对采自广西境内13个市122个不同规模猪场及农村散养户的126份病料,进行了SIV的检测,并对鉴定为SIV阳性的15份病料,再分别进行PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV、HPS的检测,以调查广西猪群中SIV与PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV、HPS混... 应用套式PCR方法对采自广西境内13个市122个不同规模猪场及农村散养户的126份病料,进行了SIV的检测,并对鉴定为SIV阳性的15份病料,再分别进行PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV、HPS的检测,以调查广西猪群中SIV与PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV、HPS混合感染的情况。结果发现:猪群中SIV感染率为11.9%(15/126),而在所检测的15份阳性病料中,SIV混合感染十分严重,感染率为73.3%(11/15)。混合感染病毒种类最多达四重感染(SIV+PRRSV+CSFV+PCV-2),占6.67%(1/15);三重感染(SIV+PRRSV+PCV-2、SIV+PRRSV+CSFV)占40%(6/15);二重感染(SIV+PRRSV,SIV+PCV-2)占26.6%(4/15)。调查结果表明广西发病猪群中SIV与PRRSV、CSFV、PCV-2混合感染普遍存在。 展开更多
关键词 猪 流感病毒 繁殖与呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 圆环病毒 伪狂犬病病毒 副猪嗜血杆菌 混合感染
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猪瘟病毒胶体金免疫层析检测方法的建立及应用 被引量：20
6
作者 陈龙宾 王爱华 +1 位作者 苏小庚 孙继国 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期496-499,共4页
为建立一种猪瘟病毒的快速检测方法,采用柠檬酸三钠还原氯金酸制备胶体金,选择15 nm胶体金标记兔抗猪瘟病毒抗体,对胶体金标记抗体采用低温超速离心法进行纯化,组装免疫层析试纸条。用试纸条对猪瘟可疑病料进行检测,同时用直接荧光抗体... 为建立一种猪瘟病毒的快速检测方法,采用柠檬酸三钠还原氯金酸制备胶体金,选择15 nm胶体金标记兔抗猪瘟病毒抗体,对胶体金标记抗体采用低温超速离心法进行纯化,组装免疫层析试纸条。用试纸条对猪瘟可疑病料进行检测,同时用直接荧光抗体试验和RT-PCR做平行试验。结果显示,用试纸条检测猪瘟病毒,10 min左右即可显示结果,试纸条、直接猪瘟荧光抗体试验和RT-PCR的阳性检出率依次为36.36%(4/11)、45.45%(5/11)和72.72%(8/11)。表明,用胶体金免疫层析试纸条检测猪瘟病毒操作简便,需时短,可以用于猪瘟的流行病学调查。 展开更多
关键词 胶体金 免疫层析 猪瘟病毒 荧光抗体 反转录聚合酶链式反应
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猪瘟病毒野毒株TaqMan-MGB荧光定量PCR鉴别方法的建立与应用 被引量：22
7
作者 刘俊 王琴 +8 位作者 范学政 徐璐 赵启祖 黄伟 汤波 沙莎 周远成 陈蕾 邹兴启 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期4366-4371,共6页
【目的】建立一种快速、敏感、特异地检测猪瘟病毒野毒的一步TaqMan-MGB荧光定量PCR方法,为临床鉴别猪瘟野毒和HCLV疫苗毒提供了准确可靠的工具。【方法】在猪瘟病毒基因组5′端非编码保守区设计一对猪瘟病毒通用引物和一条特异性MGB探... 【目的】建立一种快速、敏感、特异地检测猪瘟病毒野毒的一步TaqMan-MGB荧光定量PCR方法,为临床鉴别猪瘟野毒和HCLV疫苗毒提供了准确可靠的工具。【方法】在猪瘟病毒基因组5′端非编码保守区设计一对猪瘟病毒通用引物和一条特异性MGB探针,通过优化,得到最佳反应体系和反应条件,进行特异性、灵敏度和临床样本符合检验。【结果】该方法在100～10-7范围内线性相关系数为0.998,检测极限达5.3×10-2pg病毒核酸;对24个质控样本检测结果显示,该方法能检测除猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV)以外的猪瘟流野毒株,其它猪相关致病病原检测阴性;对122份疑似猪瘟样本检测的结果与本实验室建立的RT-nPCR方法的符合率为94.3%(115/122),阳性和阴性符合率分别为86.4%(38/44)和98.7%(77/78),Kappa值为0.87>0.75【。结论】建立的一步TaqMan-MGB荧光定量PCR方法能鉴别猪瘟野毒和HCLV疫苗毒,且特异性好、灵敏度高、与笔者先前建立的RT-nPCR方法对临床样本的检测结果具有高度的一致性。 展开更多
关键词 猪瘟 荧光定量PCR TaqMan-MGB 兔化弱毒疫苗
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单克隆抗体捕捉猪瘟病毒抗原ELISA方法的建立 被引量：16
8
作者 刘建文 余兴龙 +1 位作者 张丽颖 涂长春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期474-479,共6页
分别用原核表达的猪瘟病毒(CSFV)主要抗原E2蛋白和猪瘟基因疫苗免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合与克隆筛选出5株稳定分泌CSFV抗体的杂交瘤细胞株1E2、1G7、3A2、3B7和4B6。间接免疫荧光和Western-blotting试验结果表明,5株单抗均与CSFV E2... 分别用原核表达的猪瘟病毒(CSFV)主要抗原E2蛋白和猪瘟基因疫苗免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合与克隆筛选出5株稳定分泌CSFV抗体的杂交瘤细胞株1E2、1G7、3A2、3B7和4B6。间接免疫荧光和Western-blotting试验结果表明,5株单抗均与CSFV E2蛋白和全病毒抗原反应。将筛选的CSFV特异性单抗1E2、3B7和4B6纯化后等量混合后包被酶标板(捕捉抗体),与兔抗CSFV IgG(检测抗体)联合应用,建立起CSFV抗原捕捉ELISA(AC-ELISA)方法。随后采用方阵滴定法确定了单抗与多抗的最适工作浓度及判定检测结果的OD450临界值。最后以建立的AC-ELISA检测CSFV细胞培养物、CSFV攻毒死亡猪的病料和临床猪瘟组织样品,结果表明,该方法敏感、特异、重复性好,与病毒分离和RT-PCR方法符合率分别为86.2%和90.3%。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 单克隆抗体 抗原捕捉ELISA
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猪瘟病毒在PK细胞和MPK细胞中繁殖过程的研究 被引量：15
9
作者 王镇 陆宇 +2 位作者 周鹏程 翟中和 丁明孝 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期189-195,共7页
以猪瘟病毒疫苗Ｔｈｉｖｅｒｖａｌ株（Ｔ株）为实验材料，研究该病毒株在ＰＫ１５细胞中增殖的基本特性与规律。在ＰＫ１５细胞中，猪瘟病毒Ｔ株在感染后１２ｈ即可检测到子代病毒粒子。接毒后４８ｈ，几乎所有的细胞都被病毒感染... 以猪瘟病毒疫苗Ｔｈｉｖｅｒｖａｌ株（Ｔ株）为实验材料，研究该病毒株在ＰＫ１５细胞中增殖的基本特性与规律。在ＰＫ１５细胞中，猪瘟病毒Ｔ株在感染后１２ｈ即可检测到子代病毒粒子。接毒后４８ｈ，几乎所有的细胞都被病毒感染；到６０ｈ，释放到培养液中有活性的病毒粒子达到最高峰，为１０７ＴＣＩＤ５０／ｍＬ。培养液中的病毒粒子在３７℃半寿期只有３个小时。同时，建立了ＭＰＫ细胞ＣＳＦＶＴ株的感染模式，其ＣＳＦＶ的滴度可达１０８ＴＣＩＤ５０／ｍＬ。在此基础上，用抗ＣＳＦＶ包膜蛋白Ｅ２和非结构蛋白ｐ１２０的单克隆抗体显示了病毒在细胞中增殖的部位。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 CSFV 免疫荧光 形态结构
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猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株复合实时荧光定量RT-PCR鉴别方法的建立 被引量：16
10
作者 赵建军 成丹 +5 位作者 李娜 孙元 史子学 涂长春 童光志 仇华吉 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期406-412,共7页
根据GenBank中的猪瘟病毒强毒和弱毒株基因组序列设计了1对针对猪瘟病毒的通用引物和2条分别针对猪瘟病毒强毒和猪瘟兔化弱毒疫苗株的特异性TaqMan水解探针，建立了一种能区分猪瘟病毒强毒和兔化弱毒疫苗株的复合实时荧光定量RT—PCR检... 根据GenBank中的猪瘟病毒强毒和弱毒株基因组序列设计了1对针对猪瘟病毒的通用引物和2条分别针对猪瘟病毒强毒和猪瘟兔化弱毒疫苗株的特异性TaqMan水解探针，建立了一种能区分猪瘟病毒强毒和兔化弱毒疫苗株的复合实时荧光定量RT—PCR检测方法。结果显示，该方法能将我国大陆流行的不同基因亚群的猪瘟病毒强毒株与猪瘟兔化弱毒疫苗株完全区分开来，而不与其他猪源病毒发生非特异反应，分别可检测到初始模板中41．8和81．5个拷贝的病毒RNA，与已建立的复合RT-套式PCR的敏感性相近，两种方法对152份样品检测的符合率达96．9％～100％。通过对8份猪瘟兔化细胞疫苗效价的检测，证实本方法与兔体反应热测定法有一定的相关性，可用于猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗的定量和鉴别检测。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 猪瘟兔化弱毒疫苗 复合实时荧光定量RT—PCR 鉴别诊断
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采用PCR方法对猪场猪瘟病毒、猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒、猪圆环病毒2型混合感染的诊断研究 被引量：16
11
作者 吴志明 闫若潜 +3 位作者 赵明军 盛敏 赵雪丽 赵德明 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第1期86-89,共4页
采用猪瘟-猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒(CSFV-PRRSV)多重PCR诊断试剂盒和猪圆环病毒2型(PCV-2)PCR诊断试剂盒对来自河南省不同地区的6个规模猪场送检的60份临床疑似病料进行了病原学PCR检测。结果表明:60份样品中CSFV、PRRSV、PCV-2感... 采用猪瘟-猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒(CSFV-PRRSV)多重PCR诊断试剂盒和猪圆环病毒2型(PCV-2)PCR诊断试剂盒对来自河南省不同地区的6个规模猪场送检的60份临床疑似病料进行了病原学PCR检测。结果表明:60份样品中CSFV、PRRSV、PCV-2感染的阳性率分别为38.3%、30%和43.3%;3种病毒共感染样品数目占所有样品的13.3%,CSFV-PCV-2双感染的比例最高,达到31.7%,PRRSV-PCV-2双感染比例为18.3%,而CSFV-PRRSV双感染比例只有15%。自感染猪内脏器官和血清中均能成功检测出病毒。本研究结果表明PCR诊断可作为临床上这3种病的病原学快速、灵敏的诊断方法,并为猪场猪瘟、猪繁殖障碍与呼吸道综合征、猪圆环病毒2型3种病的流行病学和检测方法的研究奠定了一定的基础。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒 猪圆环病毒2型 PCR 检测
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猪瘟、猪蓝耳病、副猪嗜血杆菌和猪链球菌多重混合感染的诊断 被引量：17
12
作者 梁海英 张爱琼 +6 位作者 曾智勇 王彬 徐国 咸文 何小莉 陈娟 吴好叶 《猪业科学》 2019年第2期72-74,共3页
猪瘟(CSF)是由于猪只感染猪瘟病毒(CSFV)后所引起的一种具有传染性的疾病。该病高度接触性传染,短时间内急性发病可导致猪只死亡,临床感染表现为持续性高热、全身性点状出血、脾脏出现梗死阻塞,通常又称为“烂肠瘟”。
关键词 猪瘟病毒 混合感染 副猪嗜血杆菌 猪蓝耳病 猪链球菌 诊断 CSFV 临床感染
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猪瘟病毒分子生物学及检测技术研究进展 被引量：17
13
作者 刘坤 兰邹然 姜平 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第10期99-104,共6页
猪瘟是由猪瘟病毒引起猪的一种高度接触性传染病,感染后出现发热,出血,白细胞减少,流产等症状,而且死亡率很高,被世界动物卫生组织(OIE)列为必须报告的动物传染病。近年,猪瘟流行出现了新特点,这与猪瘟病毒变异存在一定的相关性。因此... 猪瘟是由猪瘟病毒引起猪的一种高度接触性传染病,感染后出现发热,出血,白细胞减少,流产等症状,而且死亡率很高,被世界动物卫生组织(OIE)列为必须报告的动物传染病。近年,猪瘟流行出现了新特点,这与猪瘟病毒变异存在一定的相关性。因此开展猪瘟分子生物学研究具有重要意义,主要对猪瘟病毒的基因组结构,主要蛋白功能进行了综述。另外,针对近年来猪瘟的发病特征,分子生物学检测技术在实验室诊断中发挥重要作用。还对几种重要分子生物学检测技术的研究进展以及各自的优缺点进行了阐述,为进一步了解猪瘟病毒及开展猪瘟相关研究提供参考。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 基因组 分子生物学 检测技术
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猪瘟病毒一步法RT-PCR检测方法的建立 被引量：16
14
作者 吴鑫 王军 张以芳 《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第2期64-66,共3页
本研究根据NCBI公布的猪瘟病毒石门毒株的E2基因序列,设计、合成了1对检测猪瘟病毒E2基因的RT-PCR引物。自疑似猪瘟病料及接猪瘟F114毒的PK-15细胞中提取总RNA,经一步法RT-PCR扩增E2基因。建立了猪瘟病毒E2基因RT-PCR检测方法,RT-PCR从2... 本研究根据NCBI公布的猪瘟病毒石门毒株的E2基因序列,设计、合成了1对检测猪瘟病毒E2基因的RT-PCR引物。自疑似猪瘟病料及接猪瘟F114毒的PK-15细胞中提取总RNA,经一步法RT-PCR扩增E2基因。建立了猪瘟病毒E2基因RT-PCR检测方法,RT-PCR从26份疑似猪瘟病料中检出阳性病料24份,阳性检出率为92.3%;结果表明,建立的RT-PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可用于CSFV的分离鉴定、临床病料的检测和分子流行病学调查。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 一步法RT-PCR 检测
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猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株与猪瘟病毒等混合感染的调查与分析 被引量：14
15
作者 王连想 马静云 +5 位作者 谢青梅 陈峰 薛春宜 曹永长 毕英佐 于康震 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2009年第10期3-5,共3页
从华南地区PRRSV变异株(NSP2 1 594-1 680 bp缺失)核酸阳性的23个规模场、42个个体养殖场和15个散养户,随机采集发病、同群猪血清197份、组织样品115份,调查猪群个体感染PRRSV变异株情况,并对PRRSV变异株核酸阳性样品进行CSFV、PRV、PCV... 从华南地区PRRSV变异株(NSP2 1 594-1 680 bp缺失)核酸阳性的23个规模场、42个个体养殖场和15个散养户,随机采集发病、同群猪血清197份、组织样品115份,调查猪群个体感染PRRSV变异株情况,并对PRRSV变异株核酸阳性样品进行CSFV、PRV、PCV2、SIV检测,调查PRRSV变异株混合感染情况。结果表明:312份样品中224份PRRSV变异株核酸阳性,阳性率71.79%;PRRSV变异株核酸阳性样品中CSFV、PRV、PCV2核酸阳性样品分别为12份、2份、35份,阳性率分别为5.35%、0.89%、15.6%;80个场(群)均未检测到SIV核酸的存在。25个场(群)存在病毒混合感染,其中PRRSV变异株/CSFV、PRRSV变异株/PRV、PRRSV变异株/PCV2二重感染和PRRSV变异株/CSFV/PCV2、PRRSV变异株/PRV/PCV2三重感染猪场(群)百分率分别为5%、1.25%、21.25%和2.5%、1.25%。PRRSV变异株(NSP2 1 594-1 680变异)是造成猪场(群)重大损失的直接原因,并可与CSFV、PRV、PCV2等病毒出现混合感染,与PCV2混合感染比率较高。 展开更多
关键词 PRRSV CSFV PCV2 PRV SIV 混合感染
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2017—2020年浙江省猪主要病毒性传染病的流行病学调查与分析 被引量：14
16
作者 徐丽华 苏菲 +6 位作者 余斌 李军星 邓利荣 毛慧敏 吴一戈 杨富文 袁秀芳 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期223-229,共7页
为了解浙江省猪主要病毒性传染病的流行情况及变化规律,本试验对2017-2020年浙江省不同地区规模化猪场送检的血清和病料样品进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪伪狂犬病病毒(PRV)4种疫病病原... 为了解浙江省猪主要病毒性传染病的流行情况及变化规律,本试验对2017-2020年浙江省不同地区规模化猪场送检的血清和病料样品进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪伪狂犬病病毒(PRV)4种疫病病原和抗体检测。抗体检测结果显示:PRRSV、CSFV、PCV2、PRV-gE/gI、PRV-gB的抗体平均阳性率分别为81.4%,83.6%,91.4%,36.1%,94.3%;不同年份中,CSFV和PCV2抗体水平一直呈稳中上升趋势,2020年PRRSV和PRV-gE/gI抗体水平下降明显。病原检测结果显示:PRRSV、CSFV、PCV2和PRV的感染具有普遍性,病原平均阳性率分别为22.9%,2.5%,17.3%,6.6%,其中PRRSV/PCV2双重感染较多,阳性率为9.7%;不同日龄中,PRRSV、PCV2和CSFV保育猪病原阳性率最高,育肥猪次之,而PRV产房仔猪阳性率最高;此外,2019-2020年CSFV、PCV2和PRV的病原阳性率下降明显。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 猪圆环病毒2型 猪伪狂犬病病毒 猪病毒性传染病 流行病学调查
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5种猪病多重PCR检测方法的建立 被引量：15
17
作者 王隆柏 张志刚 +3 位作者 苏永裕 车勇良 吴学敏 周伦江 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第2期21-25,共5页
为建立猪群常见疫病多重PCR诊断方法,本研究据GenBank发表的猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,P... 为建立猪群常见疫病多重PCR诊断方法,本研究据GenBank发表的猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)、猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)和猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)基因序列,设计并合成了5对特异性引物。通过反应条件优化、特异性、敏感性和重复性测定,建立了能同时扩增CSFV、PRRSV、PRV、PCV2、PPV5种病毒的多重PCR方法。结果表明该方法只能检测出CSFV、PRRSV、PRV、PCV2、PPV 5种病毒,不能检测出猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)、猪乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)、猪链球菌(Streptococcus suis,SS)和猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV),能检测到CSFV、PRRSV、PRV、PCV2和PPV的核酸浓度分别为220、1.6、72、400和370pg。初步应用结果表明,建立的多重PCR方法适用于对CSFV、PRRSV、PRV、PCV2和PPV的快速诊断。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪伪狂犬病病毒 猪圆环病毒2型 猪细小病毒 多重PCR 建立
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非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒多重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量：15
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作者 王建华 陈小金 +5 位作者 赵丹 王玉玲 张俊哲 肖妍 董志珍 赵祥平 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期907-911,共5页
为建立同时检测非洲猪瘟病毒(ASFV)、猪瘟病毒(CSFV)和高致病性猪繁殖与呼吸道综合征病毒(HP-PRRSV)的方法,本研究根据ASFV CP530R基因、CSFV 5'UTR基因和HP-PRRSV NSP2基因,分别设计了3对特异性引物和Taq Man水解探针,建立了同时... 为建立同时检测非洲猪瘟病毒(ASFV)、猪瘟病毒(CSFV)和高致病性猪繁殖与呼吸道综合征病毒(HP-PRRSV)的方法,本研究根据ASFV CP530R基因、CSFV 5'UTR基因和HP-PRRSV NSP2基因,分别设计了3对特异性引物和Taq Man水解探针,建立了同时检测这3种病毒的多重荧光定量RT-PCR方法,并对其反应条件进行优化。结果表明,该方法仅对ASFV、CSFV和HP-PRRSV呈现特异性扩增,不与伪狂犬病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒2型的DNA以及猪流行腹泻病毒和猪流感病毒的c DNA发生交叉反应;该方法对ASFV、CSFV和HP-PRRSV的最低检出量分别为61拷贝/μL、11拷贝/μL和41拷贝/μL;组内和组间重复性试验的Ct值变异系数均小于2.5%,具有良好的重现性。用该方法对276份临床样品进行ASFV、CSFV和HP-PRRSV的检测,所有样品的ASFV检测结果均为阴性,CSFV检测单阳性样品6份,HP-PRRSV检测单阳性样品22份,CSFV和HP-PRRSV检测双阳性样品4份。本研究建立的方法为临床样品中ASFV、CSFV和HP-PRRSV的同时检测提供了一种快速、敏感和特异的技术手段。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 多重荧光定量RT-PCR
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2015-2017年山东地区CSFV、PRRSV和PRV的流行病学调查与分析 被引量：14
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作者 张树金 曾昊 +10 位作者 于江 陈智 张玉玉 王鑫 陈蕾 唐融志 郭立辉 任素芳 邱文彬 李玉保 吴家强 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1064-1069,共6页
为了解山东地区生猪主要病毒性疾病的发生情况,掌握疫病发生及变化规律。本试验对2015-2017年山东省各生猪养殖场送检的病料和血清进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪瘟病毒(CSFV)3种病原抗原和抗体检测及遗... 为了解山东地区生猪主要病毒性疾病的发生情况,掌握疫病发生及变化规律。本试验对2015-2017年山东省各生猪养殖场送检的病料和血清进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪瘟病毒(CSFV)3种病原抗原和抗体检测及遗传演化分析。结果显示:2015-2017年CSFV平均抗原阳性率为9.99%,抗体水平逐年提高,平均抗体阳性率为79.38%;样品序列测定结果显示,目前CSFV的主要流行毒株为2.1d亚型。PRRSV平均抗原阳性率为41.44%,平均抗体阳性率为83.28%,2015-2017年PRRSV抗原和抗体水平均趋于平稳趋势。2017年PRV平均抗原阳性率12.30%,gE平均抗体阳性率为30.95%,gB平均抗体阳性率为74.70%,2017年PRV野毒感染的风险有所提高。结果表明,虽然部分病毒性传染病的发生发展出现一些变化及风险,但仍处于可防可控的范围。该调查分析结果可为山东地区CSFV、PRRSV和PRV的流行和防控提供参考。 展开更多
关键词 流行病学调查 猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 伪狂犬病病毒
原文传递
猪瘟疫苗研究进展 被引量：13
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作者 胡鸿惠 娄高明 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第4期196-200,共5页
文章综述了国内外猪瘟(classical swine fever,CSF)疫苗的研究现状。对灭活疫苗、弱毒疫苗和新型疫苗的研究情况进行概述,重点阐述了新型疫苗的研究进展,为进一步研究和开发新的猪瘟疫苗、制定良好猪瘟免疫方案有效控制猪瘟提供参考。
关键词 猪瘟 猪瘟病毒 疫苗 免疫
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