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基因修饰技术研究进展
被引量:
13
1
作者
张白雪
孙其信
李海峰
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第8期1162-1174,共13页
基因修饰技术是用于基因组定点改造的分子工具,目前主要有锌指核酸酶(ZFN)技术、转录激活子样效应物核酸酶(TALEN)技术和CRISPR-Cas核酸酶(CRISPR-Cas)技术。这些核酸酶都可以在DNA靶位点产生双链断裂(DSB),诱发细胞内源性的修复机制,...
基因修饰技术是用于基因组定点改造的分子工具,目前主要有锌指核酸酶(ZFN)技术、转录激活子样效应物核酸酶(TALEN)技术和CRISPR-Cas核酸酶(CRISPR-Cas)技术。这些核酸酶都可以在DNA靶位点产生双链断裂(DSB),诱发细胞内源性的修复机制,激活体内非同源末端连接(NHEJ)或同源重组(HR)两种不同的修复机制,从而实现内源基因的敲除或外源基因的定点敲入。近年来,基因修饰技术已成功应用到细菌、酵母、人类细胞、果蝇、斑马鱼、小鼠、大鼠、家畜、食蟹猴、拟南芥、水稻、烟草、玉米、高粱、小麦和大麦等多种生物,显示了其强大的基因编辑优势。特别是新近出现的CRISPR-Cas9技术,降低了成本,使基因编辑变得简洁、高效和易于操作,得到了很多研究人员的关注。本文系统介绍了以上3种技术的原理及最新研究进展,并对未来的研究和应用做出了展望。
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关键词
基因修饰
锌指
核酸酶
(ZFN)
转录激活子样效应物
核酸酶
(TALEN)
crispr
-
cas
核酸酶
原文传递
基因编辑新技术研究进展
被引量:
15
2
作者
刘蓓
尉玮
王丽华
《亚热带农业研究》
2013年第4期262-269,共8页
基因编辑是一项旨在对基因组进行定点修饰的新技术,目前主要有人工核酸酶介导的锌指核酸酶(ZFN)技术、转录激活子样效应物核酸酶(TALEN)技术和RNA引导的CRISPR-Cas核酸酶(CRISPR-Cas RGNs)技术。它们都能特异性地识别靶位点,对其单链或...
基因编辑是一项旨在对基因组进行定点修饰的新技术,目前主要有人工核酸酶介导的锌指核酸酶(ZFN)技术、转录激活子样效应物核酸酶(TALEN)技术和RNA引导的CRISPR-Cas核酸酶(CRISPR-Cas RGNs)技术。它们都能特异性地识别靶位点,对其单链或双链进行精准切割后,由细胞内源性的修复机制来完成对靶标基因的敲除和替换。本文比较了这3种基因编辑技术,并对其应用进展做了介绍。
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关键词
基因编辑
锌指
核酸酶
转录激活因子样效应物
核酸酶
RNA引导的
crispr
—
cas
核酸酶
基因敲除
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职称材料
快速构建CRISPR/Cas9基因组靶向编辑系统
被引量:
7
3
作者
王令
张涛
+1 位作者
路宏朝
尹亚军
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第10期1117-1124,共8页
CRISPR/Cas9核酸酶作为一种新的基因组靶向编辑技术,已成功应用于多种动植物基因组修饰研究.CRISPR/Cas9作用后的阳性细胞筛选和富集是该技术的关键之一.本研究以鸡EAVHP(endogenous avian retrovirus-HP)基因和MSTN(myostatin)基因为例...
CRISPR/Cas9核酸酶作为一种新的基因组靶向编辑技术,已成功应用于多种动植物基因组修饰研究.CRISPR/Cas9作用后的阳性细胞筛选和富集是该技术的关键之一.本研究以鸡EAVHP(endogenous avian retrovirus-HP)基因和MSTN(myostatin)基因为例,从靶位点的选择、表达载体构建、双基因报告载体构建和核酸酶活性验证4个方面,系统研究了CRISPR/Cas9核酸酶技术平台.结果表明,利用寡聚核苷酸直接退火方法,构建表达载体和报告载体的阳性率分别高达100%和89.5%.报告载体的PuroR(puromycin resistant gene)和e GFP(enhanced green fluorescent protein)基因的成功表达表明,构建的CRISPR/Cas9系统能有效切割靶序列,并用于后续阳性克隆的筛选和富集.本方法摒弃了传统分子克隆的PCR扩增和酶切处理目标基因的方法,而是利用寡聚核苷酸直接退火获得含有黏性末端的目标DNA,简化了载体构建过程,低成本且快速获得CRISPR/Cas9基因组靶向编辑系统.
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关键词
crispr
/
cas
9
核酸酶
基因组靶向编辑
报告载体
活性验证
下载PDF
职称材料
基因编辑技术简介
4
作者
陈兆亮
康珍
《中学生物学》
2017年第2期3-4,共2页
基因编辑技术是对基因组进行精确定点改造的一项新技术,同时也是研究基因生物功能的一个有力工具。经过数年的发展,目前主要有锌指核酸酶、转录激活因子样效应物核酸酶和RNA引导的CRISPR/Cas核酸酶技术三种新型的基因编辑技术。综述...
基因编辑技术是对基因组进行精确定点改造的一项新技术,同时也是研究基因生物功能的一个有力工具。经过数年的发展,目前主要有锌指核酸酶、转录激活因子样效应物核酸酶和RNA引导的CRISPR/Cas核酸酶技术三种新型的基因编辑技术。综述了三种技术的结构原理和作用机理,并对基因编辑技术进行了展望。
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关键词
基因编辑
锌指
核酸酶
转录激活因子样效应物
核酸酶
crispr
/
cas
9
核酸酶
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职称材料
题名
基因修饰技术研究进展
被引量:
13
1
作者
张白雪
孙其信
李海峰
机构
西北农林科技大学旱区作物逆境生物学国家重点实验室/农学院
新疆农业职业技术学院
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第8期1162-1174,共13页
基金
陕西省自然科学基金(No.2014JM3065)
中央高校基本科研业务费专项资金(No.2014ZZ009)资助~~
文摘
基因修饰技术是用于基因组定点改造的分子工具,目前主要有锌指核酸酶(ZFN)技术、转录激活子样效应物核酸酶(TALEN)技术和CRISPR-Cas核酸酶(CRISPR-Cas)技术。这些核酸酶都可以在DNA靶位点产生双链断裂(DSB),诱发细胞内源性的修复机制,激活体内非同源末端连接(NHEJ)或同源重组(HR)两种不同的修复机制,从而实现内源基因的敲除或外源基因的定点敲入。近年来,基因修饰技术已成功应用到细菌、酵母、人类细胞、果蝇、斑马鱼、小鼠、大鼠、家畜、食蟹猴、拟南芥、水稻、烟草、玉米、高粱、小麦和大麦等多种生物,显示了其强大的基因编辑优势。特别是新近出现的CRISPR-Cas9技术,降低了成本,使基因编辑变得简洁、高效和易于操作,得到了很多研究人员的关注。本文系统介绍了以上3种技术的原理及最新研究进展,并对未来的研究和应用做出了展望。
关键词
基因修饰
锌指
核酸酶
(ZFN)
转录激活子样效应物
核酸酶
(TALEN)
crispr
-
cas
核酸酶
Keywords
genetic modification, zinc finger nucleases, transcription activator-like effector nucleases,
crispr
-
cas
nucleases
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
基因编辑新技术研究进展
被引量:
15
2
作者
刘蓓
尉玮
王丽华
机构
福建农林大学蜂学学院
出处
《亚热带农业研究》
2013年第4期262-269,共8页
基金
福建省自然科学基金资助项目(2009N0003)
文摘
基因编辑是一项旨在对基因组进行定点修饰的新技术,目前主要有人工核酸酶介导的锌指核酸酶(ZFN)技术、转录激活子样效应物核酸酶(TALEN)技术和RNA引导的CRISPR-Cas核酸酶(CRISPR-Cas RGNs)技术。它们都能特异性地识别靶位点,对其单链或双链进行精准切割后,由细胞内源性的修复机制来完成对靶标基因的敲除和替换。本文比较了这3种基因编辑技术,并对其应用进展做了介绍。
关键词
基因编辑
锌指
核酸酶
转录激活因子样效应物
核酸酶
RNA引导的
crispr
—
cas
核酸酶
基因敲除
Keywords
gene editing
zinc-finger nucleases (ZFN)
transcription activator-like effector nucleases (TALEN)
crispr
-
cas
RGNs
gene knock-out
分类号
Q33 [生物学—遗传学]
Q78
下载PDF
职称材料
题名
快速构建CRISPR/Cas9基因组靶向编辑系统
被引量:
7
3
作者
王令
张涛
路宏朝
尹亚军
机构
陕西理工学院生物科学与工程学院
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第10期1117-1124,共8页
基金
国家自然科学基金项目(No.31402071)
陕西省教育厅专项科研计划项目(No.15JK1145)资助~~
文摘
CRISPR/Cas9核酸酶作为一种新的基因组靶向编辑技术,已成功应用于多种动植物基因组修饰研究.CRISPR/Cas9作用后的阳性细胞筛选和富集是该技术的关键之一.本研究以鸡EAVHP(endogenous avian retrovirus-HP)基因和MSTN(myostatin)基因为例,从靶位点的选择、表达载体构建、双基因报告载体构建和核酸酶活性验证4个方面,系统研究了CRISPR/Cas9核酸酶技术平台.结果表明,利用寡聚核苷酸直接退火方法,构建表达载体和报告载体的阳性率分别高达100%和89.5%.报告载体的PuroR(puromycin resistant gene)和e GFP(enhanced green fluorescent protein)基因的成功表达表明,构建的CRISPR/Cas9系统能有效切割靶序列,并用于后续阳性克隆的筛选和富集.本方法摒弃了传统分子克隆的PCR扩增和酶切处理目标基因的方法,而是利用寡聚核苷酸直接退火获得含有黏性末端的目标DNA,简化了载体构建过程,低成本且快速获得CRISPR/Cas9基因组靶向编辑系统.
关键词
crispr
/
cas
9
核酸酶
基因组靶向编辑
报告载体
活性验证
Keywords
crispr
/
cas
9 nuclease
target genomic editing
reporter vector
activity validation
分类号
Q783.1 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
基因编辑技术简介
4
作者
陈兆亮
康珍
机构
河北省秦皇岛市第一中学
河北省秦皇岛市开发区燕山大学附属中学
出处
《中学生物学》
2017年第2期3-4,共2页
文摘
基因编辑技术是对基因组进行精确定点改造的一项新技术,同时也是研究基因生物功能的一个有力工具。经过数年的发展,目前主要有锌指核酸酶、转录激活因子样效应物核酸酶和RNA引导的CRISPR/Cas核酸酶技术三种新型的基因编辑技术。综述了三种技术的结构原理和作用机理,并对基因编辑技术进行了展望。
关键词
基因编辑
锌指
核酸酶
转录激活因子样效应物
核酸酶
crispr
/
cas
9
核酸酶
分类号
G634.91 [文化科学—教育学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基因修饰技术研究进展
张白雪
孙其信
李海峰
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
13
原文传递
2
基因编辑新技术研究进展
刘蓓
尉玮
王丽华
《亚热带农业研究》
2013
15
下载PDF
职称材料
3
快速构建CRISPR/Cas9基因组靶向编辑系统
王令
张涛
路宏朝
尹亚军
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
7
下载PDF
职称材料
4
基因编辑技术简介
陈兆亮
康珍
《中学生物学》
2017
0
下载PDF
职称材料
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