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CRISPR/Cas技术在乳酸菌中的研究进展 被引量：1
1
作者 房思昌 宋馨 +1 位作者 薛玉玲 王世杰 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期317-323,共7页
乳酸菌是重要的食品发酵剂,其传统的基因遗传操作技术为同源重组,该技术为后续的基因编辑工作奠定了基础,但是也存在操作繁琐、效率低等不足。成簇的规则间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats... 乳酸菌是重要的食品发酵剂,其传统的基因遗传操作技术为同源重组,该技术为后续的基因编辑工作奠定了基础,但是也存在操作繁琐、效率低等不足。成簇的规则间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)及其相关蛋白(CRISPR-associated protein,Cas)以其高效、便捷性推动了乳酸菌基因编辑的发展。该文综述了CRISPR的原理、分类,重点阐述了CRISPR操作系统在乳酸菌方面的应用。 展开更多
关键词 乳酸菌 成簇的规则间隔短回文重复序列(crispr) crispr蛋白(cas)
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成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)介导的基因组编辑技术研究进展 被引量：3
2
作者 单琳琳 夏海滨 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期856-862,共7页
成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)介导的基因组编辑技术已成为生物医学领域中研究基因功能及其表达调控的重要手段之一。随着CRISPR技术的拓展,各种基于CRISPR技术的新型研究、诊断和治疗等工具得到进一步的开发,并在新型动物疾... 成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)介导的基因组编辑技术已成为生物医学领域中研究基因功能及其表达调控的重要手段之一。随着CRISPR技术的拓展,各种基于CRISPR技术的新型研究、诊断和治疗等工具得到进一步的开发,并在新型动物疾病模型的建立、疾病快速诊断、肿瘤及免疫相关性疾病的治疗等方面取得了重大进展和突破。我们重点对CRISPR/CRISPR相关蛋白(Cas)技术的发展现状及其在生物医学领域的应用进展进行综述,并对其未来应用前景和发展方向进行讨论和展望。 展开更多
关键词 成簇的规律间隔的短回文重复序列(crispr) crispr相关蛋白(cas) 基因编辑 基因诊断 基因治疗 综述
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应用CRISPR/Cas9基因编辑系统对HEK293细胞系TSC1基因稳定敲除效果的实验鉴定
3
作者 王晶 高倩 +1 位作者 陈健康 刘家云 《现代检验医学杂志》 CAS 2021年第4期129-131,161,共4页
目的利用成簇规律间隔短回文重复序列/成簇规律间隔短回文重复序列相关蛋白(clustered regularly interspaced short palindromic repeat/CRISPR-associated protein,CRISPR/Cas9)基因编辑系统在HEK293细胞系中对TSC1基因稳定敲除,并对... 目的利用成簇规律间隔短回文重复序列/成簇规律间隔短回文重复序列相关蛋白(clustered regularly interspaced short palindromic repeat/CRISPR-associated protein,CRISPR/Cas9)基因编辑系统在HEK293细胞系中对TSC1基因稳定敲除,并对其敲除效果进行鉴定。方法根据TSC1基因的序列设计sgRNA,将sgRNA克隆到载体lentilCRISPRv2上,将连接产物转化至Stbl3感受态细胞,对菌液进行测序鉴定。将鉴定成功的lentiCRISPRV2-sgTSC1质粒转染至HEK293细胞,加入嘌呤霉素进行筛选,挑选单细胞克隆进行PCR鉴定,选取条带单一的细胞株用Western blot鉴定TSC1基因的表达。结果成功构建lentiCRISPRV2-sgTSC1-1/2重组质粒,并利用该质粒完成对TCS1基因的定点切割,Western blot结果显示细胞中无TSC1表达。结论用CRISPR/Cas9系统成功构建TSC1基因敲除的稳定细胞株,为后续实验奠定了基础。 展开更多
关键词 成簇规律间隔短回文重复序列(crispr)/crispr相关蛋白9(cas9) 结节性硬化症 基因敲除 结节性硬化症1基因
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CRISPR/Cas9基因编辑技术在脑科学中的技术优化进展及在中医药领域应用
4
作者 邓硕秋 瞿水清 +5 位作者 张雨 杨源民 郑钟原 刘拓 陈利娜 李玉洁 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期169-180,共12页
成簇规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关蛋白(CRISPR/Cas9)是在细菌和古细菌中发现的一种自身防御系统,根据其原理可实现定向基因编辑,因其普适、高效、简便的特点,已为多个领域的疾病病理机制、预防或治疗等提供了良好的技... 成簇规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关蛋白(CRISPR/Cas9)是在细菌和古细菌中发现的一种自身防御系统,根据其原理可实现定向基因编辑,因其普适、高效、简便的特点,已为多个领域的疾病病理机制、预防或治疗等提供了良好的技术支持。脑血管疾病和神经系统疾病严重危害人类健康,卒中由遗传、不良生活习惯、慢性疾病等因素相关。脑组织结构复杂,细胞类型多样,普适的基因编辑平台较难安全、特异和高效地对靶基因进行研究。学者们不断改进和优化基因编辑技术,发掘了基因编辑技术的潜力和研究方法,推动了脑科学的研究进程。该文在简介CRISPR/Cas9技术原理的基础上,主要从递送方式、腺相关病毒组装、纳米新材料等方面综述了其在脑和神经科学领域中的系统优化进展,从血管稳态、小胶质细胞稳态、血管形成、血脑屏障、药物筛选等方面总结了其在脑血管研究和中风等相关疾病中的应用,并对其在中医药领域的发展进行了展望,以期为相关研究设计提供参考。 展开更多
关键词 成簇规律间隔的短回文重复序列(crispr)/crispr相关蛋白(crispr/cas9) 基因编辑 脑科学 中药
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