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非洲猪瘟病毒RAA-CRISPR/LbCas12a检测方法的建立与初步应用
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作者 李朝阳 胡文阳 +3 位作者 党梦 魏战勇 朱河水 陈宇 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1475-1481,共7页
本研究基于重组酶介导的扩增技术(recombinase-aid amplification,RAA),联合CRISPR/LbCas12a检测方法,筛选crRNA引物,对不同浓度阳性质粒、其他猪病病毒核酸样品、病料样品进行RAA扩增,随后进行荧光检测,探索检测ASFV的新方法。结果显示... 本研究基于重组酶介导的扩增技术(recombinase-aid amplification,RAA),联合CRISPR/LbCas12a检测方法,筛选crRNA引物,对不同浓度阳性质粒、其他猪病病毒核酸样品、病料样品进行RAA扩增,随后进行荧光检测,探索检测ASFV的新方法。结果显示,RAA-CRISPR/LbCas12a检测方法的灵敏度达1×103copies/μL,不与其他病毒核酸样品产生交叉反应。利用RAA-CRISPR/LbCas12a方法对22份灭活的猪组织病料进行临床ASFV检测,同时进行qPCR平行检测。结果显示,两种方法的检测结果相同,同时检出18份阳性。综上所述,本研究建立的ASFV RAA-CRISPR/LbCas12a检测方法具有较好的敏感性和特异性,能够在1 h内对ASFV核酸进行判定,且较为方便,在临床ASFV检测中有着一定的应用前景,对于预防非洲猪瘟有一定的推动作用。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 crispr/lbcas12a 重组酶介导等温扩增
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