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拟南芥 CPK10双元 TAP 载体的构建及原生质体表达
被引量：
2
1
作者
梁芸
魏凤菊
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2015年第4期43-46,共4页
为了研究拟南芥CPK10发挥功能的分子机理,通过PCR扩增克隆了CPK10基因,将该基因连接到带有FLAG和HA标签的双元串联亲和层析载体上,构建成p CM1307-3FLAG-3HA-CPK10植物表达载体,进而通过PEG介导转化拟南芥野生型原生质体,表达约10 h,通...
为了研究拟南芥CPK10发挥功能的分子机理,通过PCR扩增克隆了CPK10基因,将该基因连接到带有FLAG和HA标签的双元串联亲和层析载体上,构建成p CM1307-3FLAG-3HA-CPK10植物表达载体,进而通过PEG介导转化拟南芥野生型原生质体,表达约10 h,通过Western Blotting检测融合有FLAG和HA标签的CPK10蛋白的表达情况,结果显示,可以分别利用FLAG抗体和HA抗体特异检测到CPK10蛋白的条带。融合蛋白的成功表达,为进一步通过串联亲和纯化技术(TAP)筛选CPK10的互作蛋白奠定基础。
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关键词
TAP
双元表达载体
cpk
10
原生质体转化
下载PDF
职称材料
题名
拟南芥 CPK10双元 TAP 载体的构建及原生质体表达
被引量：
2
1
作者
梁芸
魏凤菊
机构
河北农业大学生命科学学院
出处
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2015年第4期43-46,共4页
基金
国家自然科学基金专项基金项目(31040052)
国家自然科学基金青年基金项目(31101022)
中国农业大学开放课题(SKLPPBKF1504)
文摘
为了研究拟南芥CPK10发挥功能的分子机理,通过PCR扩增克隆了CPK10基因,将该基因连接到带有FLAG和HA标签的双元串联亲和层析载体上,构建成p CM1307-3FLAG-3HA-CPK10植物表达载体,进而通过PEG介导转化拟南芥野生型原生质体,表达约10 h,通过Western Blotting检测融合有FLAG和HA标签的CPK10蛋白的表达情况,结果显示,可以分别利用FLAG抗体和HA抗体特异检测到CPK10蛋白的条带。融合蛋白的成功表达,为进一步通过串联亲和纯化技术(TAP)筛选CPK10的互作蛋白奠定基础。
关键词
TAP
双元表达载体
cpk
10
原生质体转化
Keywords
TAP
Binary expression vector
cpk
10
Protoplast transformation
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
拟南芥 CPK10双元 TAP 载体的构建及原生质体表达
梁芸
魏凤菊
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2015
2
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