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抗HIV融合多肽CP32M的制备工艺研究 被引量:1
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作者 付超 郭会芹 +2 位作者 王孝花 胡洁 戴秋云 《生物技术通讯》 CAS 2011年第6期859-863,共5页
目的:研究抗HIV融合多肽CP32M的制备工艺,为其临床前试验奠定基础。方法:采用固-液相混合策略规模合成目标肽,用离子交换色谱、反相高效液相色谱对粗肽进行纯化。结果:获得了利于提高合成及片段缩合效率的3条优选片段,CP32M粗品经DEAE... 目的:研究抗HIV融合多肽CP32M的制备工艺,为其临床前试验奠定基础。方法:采用固-液相混合策略规模合成目标肽,用离子交换色谱、反相高效液相色谱对粗肽进行纯化。结果:获得了利于提高合成及片段缩合效率的3条优选片段,CP32M粗品经DEAE离子交换色谱及C18反相纯化后纯度高于98%。结论:CP32M按3条片段(Ac-1-9-OH、Fmoc-10-21-OH、H-22-32-NH2)划分,可显著提高片段合成及缩合效率,DEAE阴离子交换色谱能除去大部分杂质,提高了第二步C18反相色谱纯化效率。 展开更多
关键词 抗HIV融合多肽 cp32M 多肽合成 固液相混合策略
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新型HIV-1 gp41融合抑制剂CP32M的构效关系研究 被引量:1
2
作者 王孝花 成健伟 +4 位作者 朱卫国 董铭心 种辉辉 何玉先 戴秋云 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期332-336,共5页
目的研究新型融合多肽CP32M中VEWNEMT序列的长短、残基的极性及其他部位残基的极性对其抑制gp41融合活性的影响。方法在多肽CP32M的基础上,通过对前7个氨基酸序列进行截取、部分替换、全部替换及改变其他位置氨基酸残基的极性设计合成... 目的研究新型融合多肽CP32M中VEWNEMT序列的长短、残基的极性及其他部位残基的极性对其抑制gp41融合活性的影响。方法在多肽CP32M的基础上,通过对前7个氨基酸序列进行截取、部分替换、全部替换及改变其他位置氨基酸残基的极性设计合成系列多肽,测定多肽抑制HIV-1融合活性。应用圆二色谱、分子排阻色谱测定多肽与N36的结合功能。结果截取、替换氨基酸后的肽抑制gp41融合的活性都不同程度降低,与N36结合形成六束螺旋的能力减弱。在CP32M中部及C端i与i+4位置引入Lys增加Glu-Lys离子对作用后,肽活性降低。用C34的C端氨基酸序列NEKDLLE及可与gp120结合的序列RINNIPWSEAM置换QIWNNMT后,多肽仍有很高活性。结论片段VEWNEMT是关键片段,其中VE及MT是关键功能氨基酸。其他片段替代该片段后仍有较强活性,也与N36形成螺旋结构,提示该片段含有共性结合区。 展开更多
关键词 HIV-1 HIV包膜蛋白质gp41 多肽 cp32M 构效关系
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抗HIV融合多肽CP32M的质量分析 被引量:1
3
作者 余硕 郭会芹 +2 位作者 付超 徐艳 戴秋云 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期839-842,共4页
目的建立一种适用于分析抗HIV融合多肽CP32M含量及有关物质的方法,以及测定其水分和三氟乙酸(TFA)含量的方法。方法采用高效液相色谱法(HPLC)测定CP32M原料药中CP32M的含量。色谱条件:Zor-bax XDB-C18色谱柱,含0.1%TFA的水为流动相A,含0... 目的建立一种适用于分析抗HIV融合多肽CP32M含量及有关物质的方法,以及测定其水分和三氟乙酸(TFA)含量的方法。方法采用高效液相色谱法(HPLC)测定CP32M原料药中CP32M的含量。色谱条件:Zor-bax XDB-C18色谱柱,含0.1%TFA的水为流动相A,含0.1%TFA的乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速1 ml/min,检测波长214 nm,柱温25℃。采用卡尔菲休库仑滴定法测定水分含量,采用高效液相色谱法测定样品中TFA含量。结果 3批CP32M原料药中,CP32M含量分别为(98.72±0.32)%,(99.48±0.52)%和(99.51±0.31)%(按无水物计算),总有关物质含量为1.07%~1.18%,样品中水分含量为2.99%~3.14%,TFA含量为3.89%~4.23%。结论该方法快速简便,结果准确可靠,可用于CP32M的质量分析。 展开更多
关键词 抗HIV融合多肽cp32M 质量分析 有关物质 水分 三氟乙酸
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