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茶黄素对人鼻咽癌CNE2细胞增殖及凋亡的影响 被引量:8
1
作者 黄夏宁 余展鹏 +4 位作者 钟艳平 孟盈 吕安乔 杨建宇 黄元姣 《中药材》 CAS 北大核心 2019年第2期393-398,共6页
目的:探究茶黄素对人鼻咽癌CNE2细胞增殖和凋亡的影响及其可能机制。方法:采用不同浓度茶黄素处理人鼻咽癌CNE2细胞;使用CCK-8法检测CNE2细胞在24、48、72 h的增殖抑制情况并计算细胞抑制率;细胞平板克隆形成实验观察CNE2细胞的克隆形... 目的:探究茶黄素对人鼻咽癌CNE2细胞增殖和凋亡的影响及其可能机制。方法:采用不同浓度茶黄素处理人鼻咽癌CNE2细胞;使用CCK-8法检测CNE2细胞在24、48、72 h的增殖抑制情况并计算细胞抑制率;细胞平板克隆形成实验观察CNE2细胞的克隆形成能力;细胞划痕实验检测CNE2细胞的迁移情况;Hoechst 33258染色和流式细胞术检测CNE2细胞凋亡情况;实时荧光定量PCR检测相关基因的表达水平。结果:CCK-8检测结果显示随着茶黄素药物浓度的升高及作用时间的延长,药物对CNE2细胞的增殖有明显的抑制作用,其作用呈时间及浓度依赖性;细胞平板克隆实验显示茶黄素能显著降低CNE2细胞的克隆形成能力;Hoechst33258染色显示茶黄素作用于CNE2细胞后出现核固缩、碎裂等凋亡现象;细胞流式术检测显示经茶黄素处理后CNE2细胞凋亡率升高;RT-PCR显示茶黄素能上调CNE2细胞Bax、Bcl-2、Caspase-3、P21 mRNA的表达。结论:茶黄素能抑制人鼻咽癌CNE2细胞增殖,并诱导其凋亡,其作用呈时间及浓度依赖性,其作用机制可能与调节细胞增殖和凋亡基因的表达有关。 展开更多
关键词 茶黄素 鼻咽癌 cne2细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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水蛭素对人鼻咽癌细胞增殖的影响及机制 被引量:8
2
作者 陶义丰 黄玲莎 +4 位作者 刘冬华 劳明 黄浩 黄文成 谢娟 《山东医药》 CAS 2018年第33期43-46,共4页
目的探讨水蛭素对人鼻咽癌细胞(CNE2)增殖的影响及机制。方法取对数生长期的CNE2细胞随机分为对照组与水蛭素组。对照组常规培养,水蛭素组加入不同浓度的水蛭素进行培养。倒置显微镜下观察细胞形态学变化;MTT法测算CNE2细胞生长抑制率,... 目的探讨水蛭素对人鼻咽癌细胞(CNE2)增殖的影响及机制。方法取对数生长期的CNE2细胞随机分为对照组与水蛭素组。对照组常规培养,水蛭素组加入不同浓度的水蛭素进行培养。倒置显微镜下观察细胞形态学变化;MTT法测算CNE2细胞生长抑制率,计算不同时间点半抑制浓度(IC_(50));实时荧光定量PCR检测CNE2细胞内Bax、p21 mRNA表达。结果不同浓度不同时间点水蛭素组生长抑制率均高于对照组,水蛭素组各浓度各时间点生长抑制率比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。药物作用24、48、72 h的IC_(50)分别为(8.28±2.1)、(5.11±0.7)、(4.83±0.5)ATU/mL,48、72 h时间点IC_(50)比24 h高(P均<0.05)。与对照组比较,5、8 ATU/mL水蛭素组Bax、p21 mRNA相对表达量高(P均<0.05),8 ATU/mL水蛭素组最高(P均<0.05)。结论水蛭素可明显抑制CNE2细胞增殖,该作用可能与水蛭素上调Bax、p21 mRNA表达有关。 展开更多
关键词 水蛭素 鼻咽肿瘤 cne2细胞 BAX基因 P21基因
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二烯丙基二硫诱导人鼻咽癌CNE2细胞凋亡及其可能的分子机制 被引量:6
3
作者 唐海林 宋颖 +3 位作者 唐荣军 周秀田 曾希 苏琦 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2007年第8期598-602,共5页
背景与目的:二烯丙基二硫(DADS)是大蒜中的一种脂溶性单体化合物,对多种肿瘤细胞有促凋亡作用。本实验旨在探讨DADS抑制人鼻咽癌CNE2细胞增殖与诱导凋亡的生物学效应及可能的分子机制。方法:分别采用MTT、光学显微镜、流式细胞仪、DNA... 背景与目的:二烯丙基二硫(DADS)是大蒜中的一种脂溶性单体化合物,对多种肿瘤细胞有促凋亡作用。本实验旨在探讨DADS抑制人鼻咽癌CNE2细胞增殖与诱导凋亡的生物学效应及可能的分子机制。方法:分别采用MTT、光学显微镜、流式细胞仪、DNA琼脂糖凝胶电泳与Western blot检测DADS抑制CNE2细胞增殖与诱导凋亡作用及Bcl-2、Bax和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase3)蛋白的表达。结果:MTT结果显示,50、100、200及400μmol/LDADS作用CNE2细胞48h,抑制率分别为3.66%、14.25%、29.66%及61.28%,呈浓度依赖性(P<0.05)。形态学观察发现,DADS处理24h后,部分CNE2细胞变圆,体积明显缩小,胞质强嗜酸性,核固缩、深染,核染色质积聚至核膜周边,呈现凋亡细胞形态学改变。流式细胞术分析显示,50、100、200和400μmol/LDADS作用24h,凋亡率分别为(10.8±1.3)%、(14.8±1.1)%、(21.7±2.0)%及(29.8±2.6)%,呈浓度依赖性诱导CNE2细胞凋亡(n=3,P<0.05)。200及400μmol/LDADS分别作用CNE2细胞24h后,DNA凝胶电泳出现典型梯形条带。Western blot检测显示,50、100、200和400μmol/LDADS处理CNE2细胞24h后,Bcl-2蛋白与β-Actin的灰度值比分别是1.92±0.21、1.21±0.18、0.89±0.14及0.41±0.09,与对照组(2.24±0.26)比较,差异有显著性(P<0.05);Bax蛋白与β-Actin的灰度值比分别是0.78±0.14、1.12±0.19、1.54±0.22及2.08±0.27,与对照组(0.33±0.08)比较,差异有显著性(P<0.05);随浓度的增加,Bcl-2蛋白下调,Bax蛋白表达上调。200、400μmol/LDADS处理CNE2细胞24h后,与对照组相比,Caspase3酶原蛋白条带变细并且可见到蛋白裂解产物,表明DADS可以促进Caspase3的活化。结论:DADS具有抑制人鼻咽癌CNE2细胞增殖和诱导凋亡的作用,其机制可能与Bcl-2蛋白下调,Bax蛋白表达上调导致Bcl-2/Bax比值下降,促进Caspase3的活化有关。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 鼻咽癌 cne2细胞 凋亡
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miR-10b调控PLK1蛋白对鼻咽癌细胞恶性生物学行为的作用 被引量:6
4
作者 席婕 戴皓 +1 位作者 刘晖 邵渊 《解放军医药杂志》 CAS 2019年第2期29-33,共5页
目的探讨微小核糖核酸-10b(miR-10b)调控PLK1蛋白对鼻咽癌细胞恶性生物学行为的作用。方法检测miR-10b鼻咽癌组织和细胞株中的表达水平,miR-10b和PLK1蛋白之间的关系; miR-10b对鼻咽癌细胞增殖和细胞周期影响; miR-10b对裸鼠移植瘤中PLK... 目的探讨微小核糖核酸-10b(miR-10b)调控PLK1蛋白对鼻咽癌细胞恶性生物学行为的作用。方法检测miR-10b鼻咽癌组织和细胞株中的表达水平,miR-10b和PLK1蛋白之间的关系; miR-10b对鼻咽癌细胞增殖和细胞周期影响; miR-10b对裸鼠移植瘤中PLK1表达的影响。结果鼻咽癌肿瘤组织中miR-10b的表达水平低于正常组织,且在CNE2细胞株中表达水平最低(P <0. 05);抑制miR-10b后PLK1蛋白的表达水平上调,增加miR-10b的表达可抑制鼻咽癌细胞的增殖(P <0. 05)。miR-10b-mimic组G1和M期细胞比例减少,S期和G2期的细胞比例增加; miR-10b组裸鼠肿瘤平均体积和平均质量均高于对照组(P <0. 05),miR-10b-mimic组裸鼠肿瘤中ki67和PCNA表达水平较强。结论 miR-10b靶向PLK1对鼻咽癌细胞增殖行为有一定的抑制作用,miR-10b在人鼻咽癌的发生发展过程中扮演着重要角色。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 cne2细胞 蛋白激酶类PLK1 增殖
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靶向PCNA基因的小干扰RNA对鼻咽癌CNE2细胞周期的影响 被引量:6
5
作者 练兵 王继群 金琳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1533-1537,共5页
目的:研究小干扰RNA抑制PCNA基因表达后对鼻咽癌CNE2细胞株增殖及细胞周期的影响。方法:利用体外合成法合成针对PCNA基因的小干扰RNA(siRNA)序列,应用脂质体转染鼻咽癌CNE-2细胞,实时定量PCR(real-timePCR)和免疫组织化学法观察siRNA干... 目的:研究小干扰RNA抑制PCNA基因表达后对鼻咽癌CNE2细胞株增殖及细胞周期的影响。方法:利用体外合成法合成针对PCNA基因的小干扰RNA(siRNA)序列,应用脂质体转染鼻咽癌CNE-2细胞,实时定量PCR(real-timePCR)和免疫组织化学法观察siRNA干扰后细胞中PCNA mRNA水平和PCNA蛋白表达,倒置相差显微镜观察转染前后CNE2细胞的生长变化,流式细胞仪检测siRNA干扰后的细胞周期。结果:在siR-NA转染CNE2细胞后,细胞增殖受到抑制,蛋白表达不同程度降低,对PCNA mRNA水平的抑制达98.5%,细胞周期在G0/G1停滞。结论:siRNA可在鼻咽癌中有效发挥RNA干扰效应,抑制PCNA mRNA及蛋白表达,降低PCNA活性,抑制鼻咽癌细胞增殖,为鼻咽癌基因治疗提供了新的方法。 展开更多
关键词 siRNA 鼻咽肿瘤 增殖细胞核抗原 cne2细胞
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人参皂苷单体Rh2对人鼻咽癌CNE2细胞株增殖、凋亡的影响及其机制 被引量:5
6
作者 袁轲 刘泽洪 +4 位作者 游智梅 夏菁 魏强 赵亮 李静 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第8期1029-1034,共6页
目的研究人参皂苷单体Rh2对人鼻咽癌CNE2细胞株增殖、凋亡的影响及其可能的机制。方法取对数生长期的CNE2细胞,用不同浓度的Rh2(20、40、60、80、100μmol/L)处理不同时间(24、48、72 h),并设对照组(正常培养),采用MTT法检测各组细胞的... 目的研究人参皂苷单体Rh2对人鼻咽癌CNE2细胞株增殖、凋亡的影响及其可能的机制。方法取对数生长期的CNE2细胞,用不同浓度的Rh2(20、40、60、80、100μmol/L)处理不同时间(24、48、72 h),并设对照组(正常培养),采用MTT法检测各组细胞的增殖活力;用最适作用浓度的Rh2分别处理CNE2细胞24、48、72 h,采用Hoechst荧光染色法观察细胞凋亡形态;流式细胞术检测细胞凋亡率、周期分布以及膜电位的变化;Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3、CyclinD1、P53的表达水平。结果 Rh2对CNE2细胞的增殖具有明显的抑制作用,且呈时间和剂量依赖性,60μmol/L Rh2作用72 h为最适作用浓度和时间。经60μmol/L的Rh2作用48、72 h后,凋亡细胞数目增多,凋亡细胞体积变小,细胞核出现染色质不均匀,核浓缩聚集、碎裂,边集程度增大等现象。与对照组比较,经60μmol/L的Rh2作用24、48、72 h,CNE2细胞的凋亡率逐渐增加(P<0.01);G0/G1期细胞比例逐渐升高(P<0.01),S期(P<0.01)和G2/M期细胞比例逐渐下降;细胞的膜电位逐渐降低(P<0.05);促凋亡蛋白Bax、激活型Caspase-3和P53蛋白表达上调(P<0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2和细胞周期相关蛋白CyclinD1表达下调(P<0.05)。结论人参皂苷单体Rh2具有抑制CNE2细胞增殖,使细胞周期阻滞在G0/G1期,诱导细胞凋亡的作用,其机制可能是通过Caspase/CyclinD1信号通路实现的。 展开更多
关键词 人参皂苷 Rh2 鼻咽癌 cne2细胞 细胞增殖 细胞凋亡 CASPASE-3 CYCLIND1
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汉黄芩素对鼻咽癌CNE2细胞增殖及凋亡的影响 被引量:4
7
作者 陈琳 吕炎 +3 位作者 何文龙 胡晶 范婧莹 何迎春 《中国癌症防治杂志》 CAS 2020年第1期39-43,共5页
目的探讨汉黄芩素对鼻咽癌CNE2细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法采用不同浓度(2.5μmol/L、5.0μmol/L、10.0μmol/L、20.0μmol/L)汉黄芩素作用鼻咽癌CNE2细胞,以溶剂为对照组。采用实时无标记细胞功能分析仪监测细胞增... 目的探讨汉黄芩素对鼻咽癌CNE2细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法采用不同浓度(2.5μmol/L、5.0μmol/L、10.0μmol/L、20.0μmol/L)汉黄芩素作用鼻咽癌CNE2细胞,以溶剂为对照组。采用实时无标记细胞功能分析仪监测细胞增殖情况,双荧光法检测细胞凋亡情况,Western blot法检测PCNA、Survivin、XIAP、Bcl-2蛋白表达水平。结果不同浓度(2.5μmol/L、5.0μmol/L、10.0μmol/L、20.0μmol/L)汉黄芩素作用24 h后CNE2细胞增殖抑制率依次为20.3%、23.7%、33.4%、40.9%,IC50为42.41μmol/L;36 h依次为18.0%、22.0%、36.1%、40.5%,IC50为34.46μmol/L;48 h依次为7.4%、20.2%、35.0%、40.9%,IC50为22.81μmol/L。与溶剂对照组比较,10.0μmol/L、20.0μmol/L汉黄芩素组细胞凋亡率均升高(t=23.710,P=0.001;t=43.934,P<0.001)。20.0μmol/L汉黄芩素处理鼻咽癌CNE2细胞48 h后,与溶剂对照组比较,Bax蛋白表达水平上升(P<0.05),Survivin、XIAP、Bcl-2蛋白表达水平下降(P<0.05)。结论汉黄芩素可抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖并诱导其凋亡,可能通过促进Bax蛋白表达并抑制Survivin、XIAP、Bcl-2蛋白表达发挥作用。 展开更多
关键词 鼻咽癌 cne2细胞 汉黄芩素 增殖 凋亡
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高良姜素对人鼻咽癌CNE2细胞增殖及凋亡的研究
8
作者 齐相薇 陈稚 +3 位作者 吴都督 蔡康荣 石植真 程吟 《黑龙江医学》 2023年第21期2594-2597,共4页
目的:研究高良姜素对人鼻咽癌CNE2细胞增殖及凋亡的影响。方法:实验设置空白对照组和实验组(分别加入不同浓度的高良姜素处理CNE2细胞),采用CKK-8法检测CNE2细胞增殖的抑制效果,采用流式细胞仪检测CNE2细胞周期和凋亡的影响。结果:高良... 目的:研究高良姜素对人鼻咽癌CNE2细胞增殖及凋亡的影响。方法:实验设置空白对照组和实验组(分别加入不同浓度的高良姜素处理CNE2细胞),采用CKK-8法检测CNE2细胞增殖的抑制效果,采用流式细胞仪检测CNE2细胞周期和凋亡的影响。结果:高良姜素能抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖,而随其浓度增加CNE2细胞阻滞于G0/G1期,S期、G2/M期细胞减少,同时细胞凋亡率也随其浓度增高而增加,呈浓度依赖性。结论:高良姜素对人鼻咽癌CNE2细胞株有抑制增殖作用,对细胞周期过程产生阻滞作用,并可以诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 高良姜素 鼻咽癌 cne2细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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甘蔗叶多糖对CNE_2细胞的体外抑制作用研究 被引量:4
9
作者 江恒 方锋学 +1 位作者 王仁君 苏纪平 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期259-262,共4页
目的:研究甘蔗叶多糖对鼻咽癌CNE2细胞株的体外抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法:采用热水浸提及DEAE-纤维素层析柱法提纯甘蔗叶多糖,以MTT法观察其体外抗肿瘤活性,透射电子显微镜观察凋亡细胞的超微结构,采用流式细胞术检测肿瘤细... 目的:研究甘蔗叶多糖对鼻咽癌CNE2细胞株的体外抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法:采用热水浸提及DEAE-纤维素层析柱法提纯甘蔗叶多糖,以MTT法观察其体外抗肿瘤活性,透射电子显微镜观察凋亡细胞的超微结构,采用流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡率,实时荧光定量PCR检测凋亡相关促凋亡基因(Bax)、凋亡抑制基因(Bcl-2)的变化。结果:浓度为10、20、40、80、160μg/mL的甘蔗叶多糖作用后,CNE2细胞抑制率及凋亡率均明显增加(P<0.01),且呈浓度依赖性。电镜下可见160μg/mL浓度的甘蔗叶多糖可使CNE2细胞出现凋亡小体。荧光定量PCR技术测定Bax在CNE2细胞中表达上调,Bcl-2则表达下调,并呈浓度依赖关系。结论:甘蔗叶多糖能明显抑制人鼻咽癌CNE2细胞增殖,诱导细胞凋亡,可能通过提高Bax表达及降低Bcl-2的表达,从而发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 甘蔗叶多糖 cne2细胞 细胞凋亡
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ApoG2联合放疗对鼻咽癌CNE-2细胞自噬与凋亡的影响研究 被引量:3
10
作者 刘洋 刘硕 孙建军 《疑难病杂志》 CAS 2015年第4期384-386,390,共4页
目的探讨ApoG2联合放射治疗对鼻咽癌(NPC)的CNE-2细胞自噬与凋亡的影响。方法将人NPC CNE-2细胞株分成空白对照组(仅加培养液,不加细胞)、放射治疗组、ApoG2组、联合组(放射+ApoG2),采用CCK-8法测定ApoG2+放射治疗对细胞增敏的作用,Hoec... 目的探讨ApoG2联合放射治疗对鼻咽癌(NPC)的CNE-2细胞自噬与凋亡的影响。方法将人NPC CNE-2细胞株分成空白对照组(仅加培养液,不加细胞)、放射治疗组、ApoG2组、联合组(放射+ApoG2),采用CCK-8法测定ApoG2+放射治疗对细胞增敏的作用,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡形态的变化,吖啶橙染色观察细胞自噬形态变化,检测细胞凋亡率的变化;Western bolt检测Beclin1、Bcl-2蛋白的表达情况变化。结果不同的放射剂量组间细胞增殖抑制率比较具有显著性差异(P<0.01),随着放射剂量的增加,鼻咽癌CNE-2细胞的抑制率也随之上升;不同的ApoG2药物浓度组间细胞增殖抑制率比较差异也具有显著性意义(P<0.01),随着药物浓度的增加,鼻烟癌CNE-2细胞的抑制率也上升。4组CNE-2细胞的凋亡率组间比较具有显著性差异,联合组凋亡率显著高于其他3组(F=140.2,P<0.01)。4组的Bcl-2、Beclinl的蛋白表达量组间比较差异具有统计学意义(Bel-2:F=71.24,P<0.01;Beclinl:F=107.53,P<0.01),其中联合组的Bcl-2蛋白表达量最低,Beclinl的蛋白表达量最高。结论ApoG2联合放疗能够通过诱导鼻咽癌CNE-2细胞的自噬与凋亡,从而抑制CNE-2细胞的增殖。 展开更多
关键词 ApoG2 鼻咽癌 cne-2细胞 自噬 凋亡
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二烯丙基二硫下调cyclin D1和CDK4的表达诱导人鼻咽癌CNE2细胞G_1期阻滞 被引量:3
11
作者 胡波 邱青朝 +2 位作者 贺修培 赵其辉 贺修胜 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1203-1207,共5页
目的研究二烯丙基二硫(DADS)对人鼻咽癌CNE2细胞的影响及其分子机制。方法采用MTT法检测DADS对CNE2细胞增殖抑制作用;流式细胞术分析DADS对CNE2细胞周期分布的影响;运用RT-PCR和Western blot方法分析DADS作用CNE2细胞后,cyclin D1和CDK... 目的研究二烯丙基二硫(DADS)对人鼻咽癌CNE2细胞的影响及其分子机制。方法采用MTT法检测DADS对CNE2细胞增殖抑制作用;流式细胞术分析DADS对CNE2细胞周期分布的影响;运用RT-PCR和Western blot方法分析DADS作用CNE2细胞后,cyclin D1和CDK4的表达变化。结果 MTT结果显示,不同浓度DADS(90、140、240、400μmol·L-1)处理CNE2细胞48h后,生长抑制率分别为4.0%、13.8%、25.8%、51.2%;流式细胞术分析显示,DADS阻滞CNE2细胞于G1期,并呈浓度依赖性;RT-PCR和Western blot结果表明,细胞周期调控基因cyclinD1、CDK4表达下调。结论 DADS对CNE2细胞的增殖抑制作用与其阻滞细胞G1期有关,并且可能是通过抑制cyclin D1、CDK4的表达使CNE2细胞阻滞于G1期。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 鼻咽癌 cne2细胞 细胞周期 CYCLIN D1 CDK4
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一种应用流式细胞术快速分选活的衰老细胞的方法 被引量:2
12
作者 阳晶 黄岚珍 +3 位作者 黄希仕 杨飞城 沈珂 蒋晓山 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2015年第1期74-78,共5页
衰老细胞是细胞老化研究的重要模型,目前还缺乏从混合细胞群中分选活的衰老细胞的有效方法。该研究以1.0μg/m L顺铂诱导的人鼻咽癌CNE 2细胞衰老为研究模型,根据细胞大小和自发荧光(脂褐素积累)两项物理特征,采用FACS Aria III流式细... 衰老细胞是细胞老化研究的重要模型,目前还缺乏从混合细胞群中分选活的衰老细胞的有效方法。该研究以1.0μg/m L顺铂诱导的人鼻咽癌CNE 2细胞衰老为研究模型,根据细胞大小和自发荧光(脂褐素积累)两项物理特征,采用FACS Aria III流式细胞仪在Purity模式下设门分选活的衰老细胞(SEN)和增殖细胞(PROL),收集细胞,再分别进行回测分析和衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色验证。结果从SEN门控获得分选纯度为74.7%的活的衰老细胞,分选出的细胞可重新贴壁;其中,72.1%的细胞呈SA-β-gal染色阳性,与PROL门控分选获得的细胞(8.01%)相比较有显著差异(P<0.01)。该研究提供了一种基于流式细胞仪快速分选活的衰老细胞的方法。 展开更多
关键词 衰老细胞 流式细胞术 细胞分选 衰老相关β-半乳糖苷酶 cne 2细胞
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鼻咽癌CNE2细胞生物钟基因Per1表达及其对生物学行为影响的研究 被引量:1
13
作者 周湾 罗盼 +6 位作者 曾艳 陈宇 唐红 龙金华 罗秀玲 金风 吴伟莉 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2022年第11期800-808,共9页
目的 研究Per1对鼻咽癌CNE2细胞增殖、凋亡、侵袭及细胞周期分布的影响,初步探讨Per1在鼻咽癌中可能扮演的角色。方法 通过实时荧光定量PCR法及蛋白质印迹法检测低分化鼻咽癌细胞CNE2及正常鼻咽上皮细胞NP69中核心生物钟基因Per1 mRNA... 目的 研究Per1对鼻咽癌CNE2细胞增殖、凋亡、侵袭及细胞周期分布的影响,初步探讨Per1在鼻咽癌中可能扮演的角色。方法 通过实时荧光定量PCR法及蛋白质印迹法检测低分化鼻咽癌细胞CNE2及正常鼻咽上皮细胞NP69中核心生物钟基因Per1 mRNA及蛋白的表达;采用基因过表达及干扰技术将实验分为过表达组(Per1-oe)、过表达对照组(Per1-oeNC)、干扰组(Per1-shRNA-646)、干扰对照组(CNE2)和空载体组(control-shRNA);采用CCK8测定Per1-shRNA、control-shRNA和CNE2组细胞增殖能力;采用流式细胞仪分析Per1对CNE2细胞周期分布的影响;采用Transwell小室及细胞划痕实验验证过表达和低表达各组细胞的迁移及侵袭能力。结果 CNE2细胞Per1 mRNA表达量为0.002±0.001,低于NP69细胞的1.000±0.001,t=4771.56,P<0.05;CNE2细胞Per1蛋白表达为0.60±0.15,低于NP69细胞的0.90±0.26,t=4.267,P<0.05。流式细胞分析显示,CNE2、control-shRNA和Per1-shRNA组S期比例分别为(36.54±0.19)%、(36.18±0.69)%和(44.31±0.36)%(F=323.423,P<0.001),G期比例分别为(52.88±1.27)%、(53.72±0.51)%和(37.68±0.62)%(F=55.356,P<0.001),G/M期比例分别为(10.58±1.21)%、(10.10±0.88)%和(18.00±0.98)%,F=296.47,P<0.001。CCK8实验检测0~5 d的光密度值,CNE2、control-shRNA和Per1-shRNA组差异有统计学意义,F=10.63,P<0.001;两两比较显示,Per1-shRNA组高于CNE2和control-shRNA组,均P<0.05。细胞划痕实验显示,CNE2、control-shRNA和Per1-shRNA组24 h迁移率分别为(15.02±0.57)%、(14.46±1.08)%和(21.55±0.52)%,F=66.241,P<0.001;干扰Per1使细胞迁移率增高,Per1-oe组24 h迁移率(7.00±1.59)%低于Per1-oeNC组(14.00±2.36)%(t=3.394,P<0.05),Per1-oe组48 h迁移率(18.00±2.01)%低于Per1-oeNC组(25.00±3.04)%,t=4.292,P<0.05。Transwell实验显示,CNE-2、control-shRNA和Per1-shRNA组穿膜细胞数分别为64.00±1.73、62.00±2.08和90.00±1.00,F=256.447,P<0.001;Per1-oe组细胞数(109.00±3.10)低于Per1-oeNC组(168.00±2.00),t=6.804,P<0.05。结论 核心� 展开更多
关键词 鼻咽癌 cne2细胞 Per1基因 增殖 凋亡 侵袭
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热毒净对鼻咽癌细胞株CNE2抑制作用的研究 被引量:1
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作者 詹少兵 周玲 +1 位作者 叶树清 刘晓红 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2009年第3期41-43,共3页
目的:观察热毒净对表达EB病毒抗原的CNE2细胞致瘤的影响及其细胞毒作用。方法:用MTT法测定热毒净对CNE2细胞的细胞毒作用,抑瘤实验检测热毒净对CNE2细胞致瘤的影响。结果:MTT法显示在低浓度下,热毒净对体外培养的CNE2细胞生长没有明显... 目的:观察热毒净对表达EB病毒抗原的CNE2细胞致瘤的影响及其细胞毒作用。方法:用MTT法测定热毒净对CNE2细胞的细胞毒作用,抑瘤实验检测热毒净对CNE2细胞致瘤的影响。结果:MTT法显示在低浓度下,热毒净对体外培养的CNE2细胞生长没有明显的抑制作用,但在高浓度下,对细胞生长有抑制作用。热毒净在无细胞毒的浓度下,能抑制CNE2细胞在SCID小鼠体内所致肿瘤的生长。浓度越高,热毒净对肿瘤生长的影响越明显。结论:热毒净能抑制CNE2细胞在SCID小鼠体内的致瘤作用。 展开更多
关键词 热毒净 EB病毒 cne2细胞 抑瘤实验
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Pro-apoptotic effect of cecropin AD on nasopharyngeal carcinoma cells 被引量:1
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作者 XIAO Ye-chen HUANG Ya-dong +2 位作者 XU Pei-lin ZHOU Zhen-qing LI Xiao-kun 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2006年第12期1042-1046,共5页
Nasopharyngeal carcinoma (NPC) is one of the highly prevalent malignancies in Southeast Asia. Chemotherapy and radiotherapy are commonly administrated to treat nasopharyngeal carcinoma, but these therapies can not p... Nasopharyngeal carcinoma (NPC) is one of the highly prevalent malignancies in Southeast Asia. Chemotherapy and radiotherapy are commonly administrated to treat nasopharyngeal carcinoma, but these therapies can not prevent the recurrence and metastasis of tumor cells. Furthermore, these therapies have severe side effects. Therefore, it is important to find a more effective therapy, e. g., a gene therapy for treatment of nasopharyngeal carcinoma. Cecropin AD (Cad) is a hybrid peptide that exhibits higher antibacterial activity than natural cecropin. It consists of 1-11 amino acid residues in the N-end of cecropin A and 12-37 amino acid residues in the c-end of cecropin D. The role of Cad in the malignant cells remains unclear. In this study, the Cad gene was cloned and transferred into NPC CNE2 cells and its pro-apoptotic effect were investigated. 展开更多
关键词 cecropin AD nasopharyngeal carcinoma cne2 cells APOPTOSIS
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组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA抑制鼻咽癌CNE2细胞生长及对Skp2表达的影响 被引量:1
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作者 杨小丽 刘晓春 +1 位作者 覃蒙斌 黄林 《蛇志》 2009年第2期98-100,104,共4页
目的研究曲古抑菌素A(TSA)体外对鼻咽癌细胞CNE2的抑制作用及S期激酶相关蛋白2(Skp2)基因表达的影响,并探讨其作用机制。方法采用MTT法观察不同浓度TSA对CNE2细胞的生长抑制作用;采用RT-PCR分析TSA作用前后及不同TSA浓度下鼻咽癌细胞中... 目的研究曲古抑菌素A(TSA)体外对鼻咽癌细胞CNE2的抑制作用及S期激酶相关蛋白2(Skp2)基因表达的影响,并探讨其作用机制。方法采用MTT法观察不同浓度TSA对CNE2细胞的生长抑制作用;采用RT-PCR分析TSA作用前后及不同TSA浓度下鼻咽癌细胞中细胞周期调控基因Skp2的表达。结果不同浓度的TSA对CNE2细胞有明显的生长抑制作用,并呈现一定的量效关系;同时,TSA可降低CNE2细胞Skp2的基因表达,且这种表达与剂量有一定关系。结论TSA能明显抑制CNE2细胞的增殖,其作用机制与细胞周期调控基因Skp2异常表达有关。 展开更多
关键词 TSA cne2细胞系 抑制增殖 细胞周期
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17β-雌二醇对CNE2细胞κ阿片受体表达的抑制作用 被引量:1
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作者 韦耿泽 朱运龙 +1 位作者 胡玉珍 周京军 《第四军医大学学报》 北大核心 2006年第6期507-509,共3页
目的:观察雌激素对κ阿片肽受体(κOR)mRNA含量和蛋白表达的调节作用.方法:采用半定量RT—PCR和Western blot方法,检测17β-雌二醇作用24~72h后CNE2细胞κOR mRNA含量和蛋白表达的变化.结果:17β-雌二醇(μmol/L)作用24h后... 目的:观察雌激素对κ阿片肽受体(κOR)mRNA含量和蛋白表达的调节作用.方法:采用半定量RT—PCR和Western blot方法,检测17β-雌二醇作用24~72h后CNE2细胞κOR mRNA含量和蛋白表达的变化.结果:17β-雌二醇(μmol/L)作用24h后,CNE2细胞表达κOR mRNA和蛋白明显降低,mRNA和蛋白含量分别下降到对照组的(49.2±7.66)%(P〈0.01)和(60.8±8.36)%(P〈0.01);作用时间延长到48h后,CNE2细胞κOR蛋白含量为对照组的(32.9±7.13)%(P〈0.01);而延长到72h后,κOR mRNA和蛋白含量分别下降到对照组的(20.8±7.71)%(P〈0.01)和(29.8±8.41)%(P〈0.01).结论:雌激素能够从转录水平抑制κOR在CNE2细胞的表达. 展开更多
关键词 雌二醇 受体 阿片样 κ cne2细胞
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尼美舒利诱导人鼻咽癌CNE2细胞凋亡作用
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作者 金晶 袁玉林 +1 位作者 周绪红 曾繁典 《医药导报》 CAS 北大核心 2012年第8期985-990,共6页
目的观察尼美舒利(NIM)诱导人鼻咽癌CNE2细胞凋亡作用。方法 0,0.05,0.1,0.2,0.4,0.8 mmol·L-1NIM作用于体外培养的CNE2细胞株,光学显微镜观察细胞形态和数量变化,透射电子显微镜观察细胞形态和结构变化,噻唑蓝(MTT)法检测细胞悬... 目的观察尼美舒利(NIM)诱导人鼻咽癌CNE2细胞凋亡作用。方法 0,0.05,0.1,0.2,0.4,0.8 mmol·L-1NIM作用于体外培养的CNE2细胞株,光学显微镜观察细胞形态和数量变化,透射电子显微镜观察细胞形态和结构变化,噻唑蓝(MTT)法检测细胞悬液吸光度值,流式细胞术(FCM)检测细胞周期分布和凋亡率,蛋白免疫印迹反应(Western Blot)检测细胞环氧化酶2(COX-2)蛋白表达情况。结果不同浓度NIM作用3 d后,CNE2细胞皱缩,数量减少,与药物浓度呈正相关;透射电镜下,细胞形态结构随NIM浓度增加而出现不同程度破坏和死亡征象;相同作用时间下,NIM浓度越高,吸光度值越低;FCM结果显示,NIM各剂量组均在G0/G1峰前出现一个亚二倍体峰(凋亡峰),随着NIM浓度增高,G0/G1期细胞所占比例逐渐下降,G2/M期细胞比例升高,凋亡率逐渐增高;Western Blot结果显示,随着NIM浓度增加,COX-2蛋白表达量逐渐减少。上述结果均与NIM浓度相关,经统计学处理,与对照组和相邻前一浓度组比较,均差异有统计学意义(P<0.05)。结论 NIM能诱导人鼻咽癌CNE2细胞凋亡,且呈剂量依赖性,该作用与抑制COX-2有关。 展开更多
关键词 尼美舒利 鼻咽癌 cne2细胞株 环氧化酶-2
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人鼻咽癌吉西他滨耐药细胞系的建立及其生物学特性
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作者 刘辉 罗荣城 +3 位作者 孙婷婷 杨小民 李成浩 蔡艳军 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期555-557,共3页
目的建立人鼻咽癌吉西他滨耐药细胞系并研究其生物学特性。方法采用药物大剂量冲击法和浓度梯度递增法建立人鼻咽癌吉西他滨多药耐药细胞亚系CNE2/Gem,MTT法检测CNE2和CNE2/Gem对几种常用抗肿瘤药物的半数抑制浓度(IC50)和耐药系数(RI)... 目的建立人鼻咽癌吉西他滨耐药细胞系并研究其生物学特性。方法采用药物大剂量冲击法和浓度梯度递增法建立人鼻咽癌吉西他滨多药耐药细胞亚系CNE2/Gem,MTT法检测CNE2和CNE2/Gem对几种常用抗肿瘤药物的半数抑制浓度(IC50)和耐药系数(RI),流式细胞术测定细胞周期及细胞内荧光药物罗丹明的蓄积,绘制细胞生长曲线,计算倍增时间并在光镜下观察细胞形态。结果从生长曲线计算出CNE2和CNE2/Gem的倍增时间分别为17.13和23.13h。CNE2和CNE2/Gem对吉西他滨的IC50分别为2.84±1.63和42.95±7.53μg/ml,RI为23.61(P<0.001),对顺铂(DDP)、5-氟尿嘧啶(5-FU)及长春新碱(VCR)的RI分别为15.00(P<0.001)、6.98(P<0.01)及12.80(P<0.05),表明其具有多药耐药特征。流式细胞测定显示CNE2/Gem内罗丹明的蓄积明显低于CNE2(3.56vs220.35)。光镜下见CNE2/Gem胞体变圆,大小不一,胞质内有较多颗粒。结论成功建立了稳定的人鼻咽癌吉西他滨耐药细胞系CNE2/Gem,且耐药性能显著,可作为进一步研究鼻咽癌吉西他滨耐药机制较为理想的模型。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 CNF2细胞 吉西他滨 抗药性 肿瘤
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Ku80沉默增强鼻咽癌细胞放射敏感性并诱导凋亡 被引量:1
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作者 柳艳飞 金红艳 +3 位作者 田勇 王晓凤 何为 韩云峰 《临床与病理杂志》 2017年第11期2299-2304,共6页
目的:研究Ku80沉默对鼻咽癌细胞系放射敏感性和凋亡的影响。方法:q RT-PCR测定鼻咽癌细胞系和正常鼻咽部细胞系中Ku80 m RNA的相对表达水平;将鼻咽癌细胞系CNE2分成对照组、阴性对照Sh RNA组及Ku80 Sh RNA组,分别不感染慢病毒、感染阴性... 目的:研究Ku80沉默对鼻咽癌细胞系放射敏感性和凋亡的影响。方法:q RT-PCR测定鼻咽癌细胞系和正常鼻咽部细胞系中Ku80 m RNA的相对表达水平;将鼻咽癌细胞系CNE2分成对照组、阴性对照Sh RNA组及Ku80 Sh RNA组,分别不感染慢病毒、感染阴性Sh RNA慢病毒、感染Ku80 sh RNA慢病毒,测定3组的感染效率,将上述3组细胞分别照射0,2,4,6,8及10 Gy,测定三组细胞存活率;流式细胞术测定细胞凋亡率。结果:Ku80 m RNA在鼻咽癌细胞系CNE2,CNE1,HONE-1及C666中相对表达量分别为9.0±0.9,8.0±0.3,5.0±0.4及4.0±0.2,Ku80 m RNA在正常鼻咽上皮细胞系NP69中的相对表达量为1.0,Ku80 m RNA在鼻咽癌细胞系中的相对表达量显著高于正常鼻咽上皮细胞系NP69,差异有统计学意义(P<0.05)。慢病毒感染后,Ku80 sh RNA组Ku80 m RNA的相对表达量为0.1±0.03,显著低于阴性对照sh RNA组的0.93±0.04,差异有统计学意义(P<0.001);Ku80s h R N A组Ku 8 0蛋白相对表达量为0.1 5±0.0 5,显著低于阴性对照s h R N A组的1.0,差异有统计学意义(P<0.001)。Ku80 sh RNA组的细胞存活率显著低于对照组和阴性对照sh RNA组;照射后48 h,Ku80 Sh RNA组细胞凋亡率为20.0%±0.9%,对照组及阴性对照Sh RNA组凋亡率分别为4.3%±0.8%,5.0%±0.8%,Ku80 Sh RNA组凋亡率显著高于对照组和阴性对照Sh RNA组。结论:Ku80沉默表达可增强鼻咽癌细胞放射敏感性,并诱导细胞凋亡,沉默Ku80表达有望成为鼻咽癌放射增敏的靶点。 展开更多
关键词 鼻咽癌 放射敏感性 KU80 凋亡
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