纤维连接蛋白(FN)对CHO-C28细胞生长的影响 被引量：5

1

作者 王宇 吴学军 +6 位作者 谷丽娟 于漫伦 赵小琳 郝富勇 付琳娜 王德亮 胡太梅 《药物生物技术》 CAS CSCD 2009年第1期80-82,共3页

纤维连接蛋白(FN)最重要的功能是促进细胞的粘连、生长,因而对传代细胞的贴壁、增殖具有重要意义。试验通过观察不同含有FN的培养液对CHO-C28细胞的贴壁、集落形成、细胞增长速度的不同作用,比较FN对CHO-C28细胞的影响,同时对比进口与国... 纤维连接蛋白(FN)最重要的功能是促进细胞的粘连、生长,因而对传代细胞的贴壁、增殖具有重要意义。试验通过观察不同含有FN的培养液对CHO-C28细胞的贴壁、集落形成、细胞增长速度的不同作用,比较FN对CHO-C28细胞的影响,同时对比进口与国产FN之间的区别。证明FN对克隆形成及细胞增殖有明显的促进作用,进口FN组和国产FN组无明显区别。 展开更多

关键词 纤维连接蛋白 cho-c28细胞 克隆 增殖

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30L生物反应器连续灌注培养重组CHO-C_(28)细胞表达HBsAg的研究 被引量：4

2

作者 官桂范 李志强 +4 位作者 王妍 李云富 耿星涛 陈万革 叶世德 《微生物学免疫学进展》 1999年第4期45-54,共10页

应用３０ Ｌ生物反应器和微载体悬浮 培养技术，通过电脑全自动控制，连续灌注培养分泌ＨＢｓＡｇ 的重组ＣＨＯ－Ｃ２８细胞。试验了培养方式、连续灌流速度，反应器转速和细胞对葡萄糖消耗等工艺条件。观察培养６０ 天，细胞的生长形... 应用３０ Ｌ生物反应器和微载体悬浮 培养技术，通过电脑全自动控制，连续灌注培养分泌ＨＢｓＡｇ 的重组ＣＨＯ－Ｃ２８细胞。试验了培养方式、连续灌流速度，反应器转速和细胞对葡萄糖消耗等工艺条件。观察培养６０ 天，细胞的生长形态、ＨＢｓＡｇ 分泌动态和染色体数。研究结果表明，连续培养６０ 天，细胞密度可达７．０×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍ ｌ，平均维持在（５．０～６．０）×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍ ｌ，收液的ＲＰＨＡ 滴度可达１∶５１２，ＨＢｓＡｇ 每天平均产量为３０ ｍ ｇ。 展开更多

关键词 cho-c28细胞 表面抗原 乙型肝炎 生物反应器

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CHO-C_(28)细胞收集液中乙型肝炎病毒表面抗原收率的研究 被引量：4

3

作者 陈金元 耿毅 郑菊梅 《微生物学免疫学进展》 2001年第1期31-33,共3页

用CHO C2 8细胞表达乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)生产基因工程乙肝疫苗 ,其产量受到CHO C2 8细胞表达外源基因量的影响。本文通过CHO C2 8细胞连续培养过程中表达 (HBsAg)的参数、纯化过程中硫酸铵 (A·S)饱和度、细胞收集液放置... 用CHO C2 8细胞表达乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)生产基因工程乙肝疫苗 ,其产量受到CHO C2 8细胞表达外源基因量的影响。本文通过CHO C2 8细胞连续培养过程中表达 (HBsAg)的参数、纯化过程中硫酸铵 (A·S)饱和度、细胞收集液放置时间三个因素对RPHA滴度影响的研究结果表明 :细胞收集液以 45 %饱和度的A·S沉淀HBsAg能获得较高的HBsAg收率 ,细胞收集液 4℃放置时间不宜超过 15d ,RPHA滴度在 1∶32～ 1∶12 展开更多

关键词 cho-c28细胞 乙型肝炎表面抗原 反向血凝

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应用国产改良型DMEM培养基培养CHO-C28细胞 被引量：2

4

作者 姚伟 李玉 +6 位作者 张岩锐 任雅萍 林杰 梁争论 胡忠玉 郭振泉 陈文庆 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2003年第6期380-382,共3页

目的 解决CHO-C28细胞在大规模培养过程中易增厚、脱落和不易维持的难题。方法 试验组用国产改良型DMEM培养基连续培养CHO-C28细胞2个月,对照组用进口和国产DMEM培养基,观察细胞贴壁、增殖、维持和分泌HBsAg情况。结果 试验组细胞贴壁... 目的 解决CHO-C28细胞在大规模培养过程中易增厚、脱落和不易维持的难题。方法 试验组用国产改良型DMEM培养基连续培养CHO-C28细胞2个月,对照组用进口和国产DMEM培养基,观察细胞贴壁、增殖、维持和分泌HBsAg情况。结果 试验组细胞贴壁和长满单层时间明显快于对照组,维持2个月细胞未出现增厚和脱落,分泌HBsAg量明显高于对照组。结论 使用国产改良型DMEM培养基培养CHO-C28细胞效果显著优于现用进口和国产DMEM培养基。 展开更多

关键词 DMEM培养基 cho-c28细胞 HBSAG 贴附型细胞

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不同时间采集的小牛血清对CHO-C_(28)细胞培养及表达的影响 被引量：2

5

作者 周长军 戴长河 +3 位作者 何巍 乔宏雷 宋泽民 赵小琳 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第4期68-70,共3页

通过研究小牛血清对CHO-C28细胞培养及HBsAg表达的影响,探讨小牛血清的不同采集时间对血清质量的影响。采集出生后4、8、12h(未进食)小牛的血清,对CHO-C28细胞进行传代、换液培养,并检测乙肝表面抗原(HBsAg)表达量。结果可见:①在细胞传... 通过研究小牛血清对CHO-C28细胞培养及HBsAg表达的影响,探讨小牛血清的不同采集时间对血清质量的影响。采集出生后4、8、12h(未进食)小牛的血清,对CHO-C28细胞进行传代、换液培养,并检测乙肝表面抗原(HBsAg)表达量。结果可见:①在细胞传代4次时,4h采集的血清细胞生长状态良好,8h采集的血清细胞出现明显的衰老,12h采集的血清细胞大面积死亡;②在细胞维持换液方面,4h采集的血清可维持细胞换液25次以上,8h采集的血清可勉强维持20次,12h采集的血清维持细胞换液10次时已大部分死亡;③乙肝表面抗原(HBsAg)表达量的检测结果,同批培养上清,4h采集的血清培养细胞表达量最高。可见,小牛出生后采集血清时间越早越好。 展开更多

关键词 小牛血清 cho—c28细胞 细胞培养 HBsAg表达量

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重组CHO-C_(28)细胞染色体鉴定方法的研究 被引量：1

6

作者 张岩锐 段丽娟 +1 位作者 苟凝虹 徐枫 《微生物学免疫学进展》 2006年第4期40-43,共4页

分别采用五种不同条件鉴定重组CHO-C28细胞染色体。对其影响因素如用秋水仙素处理时间的长短、固定液的使用方法等进行了试验,选择出了细胞分散好、染色体形态正常、边缘清晰、便于鉴定的两种最佳条件。此方法操作简单、成功率高,适于CH... 分别采用五种不同条件鉴定重组CHO-C28细胞染色体。对其影响因素如用秋水仙素处理时间的长短、固定液的使用方法等进行了试验,选择出了细胞分散好、染色体形态正常、边缘清晰、便于鉴定的两种最佳条件。此方法操作简单、成功率高,适于CHO-C28细胞染色体鉴定。 展开更多

关键词 cho—c28细胞 染色体 鉴定

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pH值和新生牛血清浓度对CHO-C_(28)细胞分泌HBsAg的影响 被引量：1

7

作者 寇桂英 林杰 +2 位作者 张平 徐枫 姚伟 《药物生物技术》 CAS CSCD 2006年第2期112-114,共3页

为解决CHO-C28细胞在大规模培养中易增厚、大片脱落、不易维持以及HBsAg滴度低的问题,对细胞培养液pH值和新生牛血清(NCS)浓度进行调整。结果表明,CHO-C28细胞在2个月维持时间内未出现明显增厚和大片脱落,HBsAg表达量明显提高。该实验... 为解决CHO-C28细胞在大规模培养中易增厚、大片脱落、不易维持以及HBsAg滴度低的问题,对细胞培养液pH值和新生牛血清(NCS)浓度进行调整。结果表明,CHO-C28细胞在2个月维持时间内未出现明显增厚和大片脱落,HBsAg表达量明显提高。该实验为大规模培养CHO-C28细胞提供了依据。 展开更多

关键词 cho-c28细胞 乙型肝炎表面抗原 培养

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生物反应器规模化培养重组CHO-C28细胞表达HBsAg的研究

8

作者 张英 徐枫 +1 位作者 张平 宋涛 《微生物学免疫学进展》 2007年第1期22-25,共4页

应用新型聚酯纤维盘片,采用连续灌注培养方式,分别试验了细胞接种量、pH、DO、罐流速度等因素对CHO-C28细胞生长分泌HBsAg的影响,初步建立了5L生物反应器生产重组乙型肝炎疫苗的生产工艺。经3次试验培养,每次培养60d,较适宜的培养条件... 应用新型聚酯纤维盘片,采用连续灌注培养方式,分别试验了细胞接种量、pH、DO、罐流速度等因素对CHO-C28细胞生长分泌HBsAg的影响,初步建立了5L生物反应器生产重组乙型肝炎疫苗的生产工艺。经3次试验培养,每次培养60d,较适宜的培养条件确定为:pH6.80-7.10,DO 20%-30%,温度36-37℃,灌流速度138ml/h,接种浓度1.9×106cell/ml。收获液的HBsAg平均滴度是1∶256,最高滴度可达1∶512,纯化后的HBsAg产率为0.912mg/L。最后对反应器培养工艺与现行的转瓶培养工艺进行了比较,生物反应器培养具有可控制培养条件、不易污染和可使HBsAg产率提高等优点。 展开更多

关键词 cho-c28细胞 乙型肝炎表面抗原 生物反应器 聚酯纤维盘片(NWFP)

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重组CHO-C_(28)细胞生长动态的研究

9

作者 周长军 陈万革 +4 位作者 董雪林 赵丽剑 杨文冲 周安广 赵小琳 《药物生物技术》 CAS CSCD 2004年第1期19-21,共3页

观察CHO C2 8细胞在大生产过程中 ,生长状态曲线 ,为细胞培养过程中换液及培养条件提供依据。人为控制培养液中血清含量、加液量、pH值等条件。从生产种子 2 2代左右开始传代 ,经 5～ 6 d形成致密细胞单层 ,一般维持换液次数为 30次左... 观察CHO C2 8细胞在大生产过程中 ,生长状态曲线 ,为细胞培养过程中换液及培养条件提供依据。人为控制培养液中血清含量、加液量、pH值等条件。从生产种子 2 2代左右开始传代 ,经 5～ 6 d形成致密细胞单层 ,一般维持换液次数为 30次左右。如果生产种子代次高 ,其维持换液次数也相应减少 ,根据不同换液次数细胞增殖数量不同 ,总结出重组CHO C2 8细胞生长动态曲线。并根据换收液的HBsAg滴度 ,绘出换液次数和HB sAg相关曲线。结论 :7～ 2 3次换液期间 (缓慢生长期 )HBsAg收获最高。 展开更多

关键词 cho-c28细胞 动态曲线 HBSAG

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两种DMEM培养基培养CHO-C28细胞的研究 被引量：1

10

作者 路东 寇桂英 +3 位作者 苟凝虹 徐枫 林杰 姚伟 《药物生物技术》 CAS CSCD 2005年第6期366-369,共4页

在同一实验条件下,比较了赛尔生物化工厂的DMEM培养基(国产DMEM)和Gibco公司的DMEM培养基(进口DMEM),在基因工程乙肝疫苗生产过程中,对细胞的生长状况、HBsAg的分泌、及纯化收率的影响。结果显示:国产DMEM更有利于重组(CHO)乙肝疫苗的... 在同一实验条件下,比较了赛尔生物化工厂的DMEM培养基(国产DMEM)和Gibco公司的DMEM培养基(进口DMEM),在基因工程乙肝疫苗生产过程中,对细胞的生长状况、HBsAg的分泌、及纯化收率的影响。结果显示:国产DMEM更有利于重组(CHO)乙肝疫苗的大规模生产。 展开更多

关键词 乙型肝炎表面抗原 DMEM培养基cho-c28细胞

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国产和进口DMEM培养基培养CHO-C_(28)工程细胞的质量评价

11

作者 艾智武 吕东升 +1 位作者 陈文庆 孙燮钧 《细胞生物学杂志》 CSCD 1999年第4期203-207,共5页

我们用10L转瓶培养能高效表达HBsAg的重组中国仓鼠卵巢细胞(CHO-C_(28)细胞株),在相同的培养条件下比较国产和进口DMEM培养基的质量。结果表明,两种DMEM培养的细胞之生长及分泌的HBsAg之滴度没有显著改变,国产DMEM培养的细胞收液的沉淀... 我们用10L转瓶培养能高效表达HBsAg的重组中国仓鼠卵巢细胞(CHO-C_(28)细胞株),在相同的培养条件下比较国产和进口DMEM培养基的质量。结果表明,两种DMEM培养的细胞之生长及分泌的HBsAg之滴度没有显著改变,国产DMEM培养的细胞收液的沉淀收率略高于进口DMEM的,前者的最后收率也不低于后者。两种DMEM培养的细胞收液经纯化后,HBsAg的各项指标都符合基因工程乙肝疫苗制造及检定规程的标准,从试验结果可以看出,用国产DMEM培养基替代进口DMEM培养基是完全有可能的。 展开更多

关键词 DMEM培养基 cho-c28细胞株 HBSAG 纯化 乙肝疫苗

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CHO—C28细胞株种子细胞培养方法的改进

12

作者 李利 何巍 等 《吉林医学信息》 1999年第11期47-48,共2页

关键词 cho-c28细胞株 种子细胞 方法 改进 细胞培养

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