期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到8篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
CHO工程细胞(11G-S)悬浮培养的无血清培养基的设计 被引量：6
1
作者 刘兴茂 刘红 +5 位作者 叶玲玲 李世崇 吴本传 王海涛 谢靖 陈昭烈 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1116-1122,共7页
以悬浮适应的表达重组尿激酶原(Pro-urokinase,pro-UK)CHO工程细胞系11G-S为对象,采用Plackett-Burman实验设计及响应面分析法,设计支持CHO工程细胞(11G-S)悬浮生长的无血清培养基。以细胞密度为评价指标,在单因素实验的基础上采用Plack... 以悬浮适应的表达重组尿激酶原(Pro-urokinase,pro-UK)CHO工程细胞系11G-S为对象,采用Plackett-Burman实验设计及响应面分析法,设计支持CHO工程细胞(11G-S)悬浮生长的无血清培养基。以细胞密度为评价指标,在单因素实验的基础上采用Plackett-Burman实验设计对影响细胞生长的培养基添加成分进行考察,确定了3种对细胞生长明显促进作用的培养基添加成分:胰岛素、转铁蛋白及腐胺。继而利用响应面法分析了这3种添加成分的最佳水平范围,设计了一种适用于CHO工程细胞(11G-S)悬浮培养的无血清培养基SFM-CHO-S。11G-S细胞在SFM-CHO-S批次悬浮培养的细胞最大生长密度达到4.12×106cells/mL,pro-UK的最大累积活性达到5614IU/mL,培养效果优于商品化的同类无血清培养基。 展开更多
关键词 cho工程细胞 悬浮培养 无血清培养基 实验设计
原文传递
CHO细胞表达牛病毒性腹泻病毒E2蛋白及免疫原性分析 被引量：2
2
作者 李亚军 茹毅 +13 位作者 郝荣增 蒋成辉 王伟 张越 张贵才 刘华南 卢炳州 杨洋 陶世宇 杨锐 宋向东 陈娇 余四九 郑海学 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期4315-4324,共10页
旨在利用悬浮培养CHO细胞表达系统制备牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)E2蛋白,并鉴定纯化E2蛋白的免疫原性。本研究以BVDV-1 NADL株基因序列为基础,构建BVDV E2蛋白的重组真核表达质粒pcDNA3.1-BVDV-E2,转染经悬浮... 旨在利用悬浮培养CHO细胞表达系统制备牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)E2蛋白,并鉴定纯化E2蛋白的免疫原性。本研究以BVDV-1 NADL株基因序列为基础,构建BVDV E2蛋白的重组真核表达质粒pcDNA3.1-BVDV-E2,转染经悬浮培养的CHO细胞进行分泌表达,收集细胞培养上清,进行亲和层析法纯化,SDS-PAGE电泳鉴定蛋白表达和纯化,Western blot鉴定与His抗体和BVDV阳性血清反应性,利用纯化蛋白免疫新西兰大白兔,用细胞间接免疫荧光(IFA)和ELISA鉴定E2蛋白的反应活性。纯化E2蛋白经BCA蛋白定量试剂盒检测后表达量高达1.228 mg·mL^(-1);Western blot结果显示,利用His抗体和BVDV阳性血清均可检测到目的蛋白的特异性条带;新西兰大白兔一免后第7天利用间接ELISA可检测到血清抗体阳性,并持续至免疫后第28天,血清抗体效价水平达到1∶1024000;IFA试验结果显示,该血清抗体可检测到BVDV感染MDBK细胞中E2蛋白的表达,进一步证实纯化的E2蛋白具有良好的免疫原性和特异性。本研究成功利用CHO悬浮培养真核表达系统制备了纯化的BVDV E2蛋白,该蛋白具有良好的免疫原性,为BVDV的诊断方法及其新型亚单位疫苗研制奠定了基础。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 E2蛋白 真核表达 cho悬浮培养 免疫原性
下载PDF
生物反应器不同搅拌速度的计算流体力学模拟及对悬浮培养CHO细胞的影响 被引量：2
3
作者 侯仰帅 费保进 +7 位作者 梁洪 杨金亮 宋春雷 胡珍霞 张骞 黄娟 向雨秘 雷韬 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2020年第11期1285-1291,共7页
目的考察搅拌式生物反应器不同搅拌速度对悬浮培养的CHO细胞生长、代谢及促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)表达的影响。方法采用计算流体力学(computational fluid dynamics,CFD)技术对5 L生物反应器在100、200、300、400 ... 目的考察搅拌式生物反应器不同搅拌速度对悬浮培养的CHO细胞生长、代谢及促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)表达的影响。方法采用计算流体力学(computational fluid dynamics,CFD)技术对5 L生物反应器在100、200、300、400 r/min搅拌速度下的内部流场进行模拟;对培养过程中的细胞密度、细胞活率、细胞直径、pH、生化参数及FSH浓度进行检测,根据细胞比生长速率、葡萄糖比消耗速率、谷氨酰胺比消耗速率、乳酸比生成速率、氨比生成速率以及FSH浓度变化,确定不同搅拌速度对细胞生长、代谢及FSH产量的影响。结果在100、200、300、400 r/min搅拌速度下,随着搅拌速度的增加,反应器内的剪切速率逐渐增大;导致最大细胞密度逐渐降低,依次为6.22×10^6、6.14×10^6、5.87×10^6、5.72×10^6个/mL;细胞比生长速率逐渐降低,依次为0.52、0.49、0.47、0.47/d;培养前5 d,在100 r/min搅拌速度下,较其他条件下细胞代谢变慢,培养后5 d无明显差异;搅拌速度对FSH产量无显著影响。结论本研究从微观角度了解了反应器内的流场特性,将仿真与实验结合,确定了不同搅拌速度下产生的剪切力对CHO细胞悬浮培养的影响,为细胞培养工艺参数的优化奠定了基础。 展开更多
关键词 生物反应器 搅拌速度 计算流体力学模拟 cho细胞 悬浮培养
原文传递
抗汉滩病毒鼠/人嵌合抗体工程细胞的驯化、抗体表达及鉴定
4
作者 张晓晓 冯伟 +12 位作者 张尧 程林峰 应旗康 马瑞雪 马铁军 刘梓谕 刘蓉蓉 王芳 张亮 叶伟 张芳琳 徐志凯 吴兴安 《生物技术通讯》 CAS 2016年第6期783-786,798,共5页
目的:通过对稳定表达抗汉滩病毒鼠/人嵌合抗体的CHO细胞进行驯化,检测其抗体的表达情况,并对所表达抗体的生物学活性进行初步鉴定。方法:将本课题组前期筛选得到的稳定高表达细胞株1-D9进行无血清驯化,使其适合悬浮培养后接种到摇瓶,通... 目的:通过对稳定表达抗汉滩病毒鼠/人嵌合抗体的CHO细胞进行驯化,检测其抗体的表达情况,并对所表达抗体的生物学活性进行初步鉴定。方法:将本课题组前期筛选得到的稳定高表达细胞株1-D9进行无血清驯化,使其适合悬浮培养后接种到摇瓶,通过调整不同的培养条件,每天检测细胞的活率和抗体表达量,并对表达的抗体进行生物学活性鉴定。结果:通过驯化得到了适合悬浮培养的CHO细胞株,其抗体表达量高,生产周期短;并优化了其悬浮培养条件,表达的抗体经鉴定其生物学活性稳定。结论:优化了抗汉滩病毒鼠/人嵌合抗体表达条件,为下一步工业化生产提供了实验依据。 展开更多
关键词 汉滩病毒 悬浮培养 cho细胞 工业化生产 嵌合抗体
下载PDF
牛病毒性腹泻病毒E^(rns)蛋白的中华仓鼠卵巢细胞表达及免疫原性分析 被引量：2
5
作者 李亚军 茹毅 +9 位作者 郝荣增 秦晓东 卢炳州 杨洋 刘华南 张越 龚真莉 刘艳红 余四九 郑海学 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期4861-4873,共13页
本研究利用中华仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞表达系统制备牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)E^(rns)蛋白,并分析其免疫原性。以BVDV-1 NADL标准毒株基因序列为基础,构建BVDV E^(rns)蛋白重组真核表达质粒... 本研究利用中华仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞表达系统制备牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)E^(rns)蛋白,并分析其免疫原性。以BVDV-1 NADL标准毒株基因序列为基础,构建BVDV E^(rns)蛋白重组真核表达质粒pcDNA3.1-BVDV-E^(rns),转染悬浮培养的CHO细胞,进行上清分泌表达。SDS-PAGE分析E^(rns)蛋白的表达和纯化,并用抗His单克隆抗体和BVDV阳性血清进行Western blotting鉴定纯化蛋白;进一步使用纯化的E^(rns)蛋白免疫新西兰大白兔,通过间接酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和细胞间接免疫荧光(indirect immunofluorescence,IFA)实验检测血清抗体水平及其免疫反应活性,用病毒中和实验测定免疫兔血清的中和抗体滴度。BCA蛋白定量试剂盒检测纯化的E^(rns)蛋白浓度为0.886 mg/m L,Western blotting结果显示,抗His单克隆抗体和BVDV阳性血清均能够与纯化的E^(rns)蛋白发生特异性免疫反应。间接ELISA和IFA实验结果显示,一免后第7天血清抗体呈阳性,并持续至免疫后第28天,血清抗体效价水平可达1:128000,且该血清抗体可以与MDBK细胞中感染的BVDV病毒发生特异性免疫反应。重组E^(rns)蛋白免疫兔可诱导动物机体产生病毒中和抗体,中和效价为log10=2.71。本研究利用CHO细胞表达系统成功制备了纯化的BVDV E^(rns)蛋白,并通过体内和体外实验证明,该重组蛋白具有良好的免疫原性,为牛病毒性腹泻(bovine viral diarrhea,BVD)诊断方法及新型亚单位疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 E^(rns)蛋白 真核表达 中华仓鼠卵巢(cho)细胞悬浮培养 免疫原性
原文传递
CHO-K1细胞的悬浮驯化及无血清培养 被引量：2
6
作者 刘华敏 漆彦斌 雷志斌 《顺德职业技术学院学报》 2019年第4期1-3,8,共4页
以CHO-K1细胞为研究对象,首先对贴壁细胞进行了悬浮驯化,之后比较了自配无血清培养基CHO-SFM、Sigma Ex-CELL CD CHO培养基和Gibco CD CHO培养基驯化悬浮细胞CHO-K1-S的培养效果。在相同实验条件下,统计细胞的增长率和存活率。结果表明... 以CHO-K1细胞为研究对象,首先对贴壁细胞进行了悬浮驯化,之后比较了自配无血清培养基CHO-SFM、Sigma Ex-CELL CD CHO培养基和Gibco CD CHO培养基驯化悬浮细胞CHO-K1-S的培养效果。在相同实验条件下,统计细胞的增长率和存活率。结果表明,自配无血清培养基CHO-SFM优于Sigma CD-CHO和Gibco CD-CHO两种商业化培养基。 展开更多
关键词 cho-K1-S细胞 悬浮培养 无血清培养基 增长率
下载PDF
无血清悬浮培养CHO-K1-SFS细胞系的建立及其生物学特性 被引量：1
7
作者 杨妍梅 冯若飞 +3 位作者 谢晶莹 李向茸 王丹 马忠仁 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第2期180-184,共5页
目的建立无血清悬浮培养CHO-K1-SFS细胞系,并检测其生物学特性。方法将CHO-K1贴壁细胞通过逐步降低血清浓度,获得低血清CHO-K1贴壁细胞,以3×105个/ml接种于含无血清培养基SFM4CHO的150 ml三角瓶中,摇床无血清适应培养,获得CHO-K1-... 目的建立无血清悬浮培养CHO-K1-SFS细胞系,并检测其生物学特性。方法将CHO-K1贴壁细胞通过逐步降低血清浓度,获得低血清CHO-K1贴壁细胞,以3×105个/ml接种于含无血清培养基SFM4CHO的150 ml三角瓶中,摇床无血清适应培养,获得CHO-K1-SFS细胞。对该细胞进行生长曲线绘制、微生物污染检测、代谢分析及外源基因表达检测。结果所获得的CHO-K1-SFS细胞系可无血清悬浮培养,以3×105个/ml的初始密度接种,最大增殖浓度可达3.8×106个/ml,平均倍增时间为29.7 h;无细菌、真菌、病毒和支原体污染;对葡萄糖利用率较高,乳酸产生较多;能较好地表达外源基因。结论成功建立了无血清悬浮培养CHO-K1-SFS细胞系,为建立高效的外源基因表达平台奠定了基础。 展开更多
关键词 cho-K1细胞 无血清培养 悬浮培养 生物学特性
原文传递
水解物对CHO细胞培养工艺的影响
8
作者 胡振湘 黄盼盼 +2 位作者 邓钦培 徐乐意 孙梦梅 《中国医药指南》 2023年第34期69-72,共4页
目的对比3种水解物对CHO悬浮培养细胞生长的影响,以及对细胞分泌表达的抗体质量的影响。方法应用3种不同来源的水解物,采用摇瓶培养CHO细胞,观察培养过程中细胞密度、活性和代谢产物的变化,以及抗体质量的影响。结果水解物对CHO生长无... 目的对比3种水解物对CHO悬浮培养细胞生长的影响,以及对细胞分泌表达的抗体质量的影响。方法应用3种不同来源的水解物,采用摇瓶培养CHO细胞,观察培养过程中细胞密度、活性和代谢产物的变化,以及抗体质量的影响。结果水解物对CHO生长无显著促进作用、但可大幅度提高抗体产量;对抗体糖型无显著影响,可显著影响抗体电荷分布。结论3种水解物中,Preteose peptone和Phytone peptone对CHO有很好的促进作用。但Preteose peptone含有动物然产分,随着各国药监对动物来源成分监管制度的严格,将进一步限制Preteose peptone的应用,因此Phytone peptone具有优势。 展开更多
关键词 cho细胞悬浮培养 水解物 糖型 抗体电荷分布
下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部