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马钱子碱通过调控线粒体凋亡途径诱导人胰腺癌CFPAC-1细胞凋亡 被引量:3
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作者 田龙夫 张琦 +4 位作者 崔立华 杨磊 周易 田余 马波 《中华胰腺病杂志》 CAS 2019年第6期425-429,共5页
目的探讨马钱子碱对人胰腺癌CFPAC-1细胞凋亡的影响及其可能机制。方法以不同浓度马钱子碱干预CFPAC-1细胞。采用MTT比色法和流式细胞仪检测细胞增殖和凋亡;采用花青染料(JC-1)染色法检测细胞线粒体膜电位的变化;采用蛋白质印迹法检测Ba... 目的探讨马钱子碱对人胰腺癌CFPAC-1细胞凋亡的影响及其可能机制。方法以不同浓度马钱子碱干预CFPAC-1细胞。采用MTT比色法和流式细胞仪检测细胞增殖和凋亡;采用花青染料(JC-1)染色法检测细胞线粒体膜电位的变化;采用蛋白质印迹法检测Bax、B cl-2蛋白表达情况。结果〇(对照组)及〇.4、0.8 m m ol/L马钱子碱组干预CFPAC-1细胞24、48、72 h后,细胞增殖抑制率分别为0;(30.23±0.55)%、(40.61±0.15)%、(46.98±1.27)%;(50.17±0.75)%、(61.23±0.91)%、(70.32±0.40)%,呈浓度及时间依赖性增加而升高,显著高于对照组,且不同时间两两组间比较差异均有统计学意义(/>值均<〇.〇5)。〇及0.4、0.8 mmol/L马钱子碱干预CFPAC-1细胞48 h后,细胞凋亡率分别为(2.92±0.46)%、(4.64±1.31)%、(13.09±0.65)%,随药物浓度增加而逐渐升高,其中0.8 mm ol/L干预组显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);随着药物浓度的增加,呈红色荧光的未凋亡活细胞逐渐减少,而呈绿色荧光的凋亡坏死细胞逐渐增多,提示CFPAC-1细胞线粒体膜电位受到重度破坏而降低;CFPAC-1细胞的B d-2蛋白表达量分别为(0.92±0.12)、(0.67±0.14)、(0.35±0.14)mmol/L,Bax蛋白表达量分别为(0.56±0.12)、(0•85±0.10)、(1.15±0.12)m m ol/L,随马钱子碱浓度增加,Bcl-2表达量显著下调,而Bax表达量显著上调,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论马钱子碱可能通过线粒体凋亡途径上调Bax和下调Bcl-2表达,从而诱导人胰腺癌CFPAC-1细胞凋亡。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 马钱子碱 cfpac-1细胞 细胞凋亡 线粒体途径
原文传递
去甲斑蝥素诱导CFPAC-1细胞凋亡及其与胞内[Ca^(2+)]i浓度的关系 被引量:3
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作者 陈武 陈鹏英 +1 位作者 刘鹏 廖艳林 《中国现代医生》 2011年第17期50-51,58,共3页
目的研究去甲斑蝥素对人胰腺癌CFPAC-1细胞的促凋亡活性及其与胞内[Ca2+]i浓度的关系。方法流式细胞术检测细胞凋亡;琼脂糖凝胶电泳检测断裂DNA;激光共聚焦显微镜分析细胞内游离Ca2+浓度变化。结果 CFPAC-1细胞经去甲斑蝥素作用24h后,... 目的研究去甲斑蝥素对人胰腺癌CFPAC-1细胞的促凋亡活性及其与胞内[Ca2+]i浓度的关系。方法流式细胞术检测细胞凋亡;琼脂糖凝胶电泳检测断裂DNA;激光共聚焦显微镜分析细胞内游离Ca2+浓度变化。结果 CFPAC-1细胞经去甲斑蝥素作用24h后,细胞凋亡率明显上升,且呈剂量依赖性,其基因组DNA在琼脂糖凝胶电泳中呈典型的梯状带型;CFPAC-1细胞内游离Ca2+浓度进行性升高。结论去甲斑蝥素触发的CFPAC-1细胞凋亡与胞内游离Ca2+浓度升高密切相关。 展开更多
关键词 去甲斑蝥素 cfpac-1细胞 凋亡 CA2+
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siRNA沉默EphB2表达对胰腺癌CFPAC-1细胞增殖和凋亡的影响
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作者 欧阳华强 谢广茹 +2 位作者 潘战宇 陈冲 李玲 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期605-610,共6页
目的:应用慢病毒介导的RNA干扰技术,靶向沉默人胰腺癌CFPAC-1细胞中的EphB2基因的表达,观察EphB2对CFPAC-1细胞增殖和凋亡的影响。方法:构建靶向EphB2基因的siRNA干扰质粒,通过Lipofectamine^(TM)2000将干扰质粒转染进293T细胞,筛选出... 目的:应用慢病毒介导的RNA干扰技术,靶向沉默人胰腺癌CFPAC-1细胞中的EphB2基因的表达,观察EphB2对CFPAC-1细胞增殖和凋亡的影响。方法:构建靶向EphB2基因的siRNA干扰质粒,通过Lipofectamine^(TM)2000将干扰质粒转染进293T细胞,筛选出能有效抑制EphB2蛋白表达的干扰序列。构建含有效序列的慢病毒载体pLentiGFP-EphB2,感染CFPAC-1细胞,筛选出稳定干扰EphB2蛋白表达的CFPAC-1细胞系。定量PCR、Western blotting检测CFPAC-1细胞中EphB2mRNA和蛋白的表达,CCK8法和流式细胞术检测EphB2下调对CFPAC-1细胞增殖和凋亡的影响。结果:成功构建了EphB2慢病毒干扰载体pLentiGFP-EphB2,获得稳定转染pLentiGFP-EphB2的CFPAC-1细胞(CFPAC-1 EphB2 RNAi)。CFPAC-1EphB2 RNAi细胞中EphB2 mRNA和蛋白表达较空载体组显著降低,EphB2 mRNA的沉默效率为63%。与空载体组和未转染组相比,pLentiGFP-EphB2感染显著促进CFPAC-1细胞的增殖(1.89±0.17vs1.63±0.13、1.71±0.22,P<0.05),抑制细胞的凋亡[(7.02±1.27)%vs(13.37±1.89)%、(15.71±2.35)%,P<0.05]。结论:pLentiGFP-EphB2可有效下调胰腺癌CFPAC-1细胞中EphB2的表达,促进CFPAC-1细胞增殖和抑制其凋亡。 展开更多
关键词 EPHB2 RNA干扰 胰腺癌 cfpac-1细胞 增殖 凋亡
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