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CELⅠ酶的粗提取及其活性检测
被引量：
16
1
作者
韩锁义
杨玛丽
+1 位作者
盖钧镒
喻德跃
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第9期1112-1116,共5页
CELⅠ酶是第一个从真核生物中提取的用于高效特异切割DNA双链碱基错配和DNA扭曲的内切酶,因而也是TILLING技术中用到的一种关键酶。文章对CELⅠ酶的粗提取及其活性检测进行了研究。错配切割实验表明,CELⅠ酶在包含有G→A点突变的杂合双...
CELⅠ酶是第一个从真核生物中提取的用于高效特异切割DNA双链碱基错配和DNA扭曲的内切酶,因而也是TILLING技术中用到的一种关键酶。文章对CELⅠ酶的粗提取及其活性检测进行了研究。错配切割实验表明,CELⅠ酶在包含有G→A点突变的杂合双链中,能有效地在错配位点进行切割,并可以通过ABI377测序仪获得直观的检测结果,从而可以用于TILLING分析。
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关键词
cel
ⅰ
酶
TILLING
点突变
活性
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职称材料
基于聚丙烯酰胺凝胶电泳的棉花EcoTILLING技术体系创建
被引量：
2
2
作者
邓康胜
吕远大
+4 位作者
陶涛
田亮亮
郭旺珍
周宝良
张天真
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期1-7,共7页
以棉花纤维发育相关基因GhSUS1为目标基因,从EcoTILLING技术中常用的关键酶CELⅠ的提取、活性检测、目标基因引物设计及酶切等方面入手,开展了棉花EcoTILLING技术体系的创建研究。结果表明:所提取的CELⅠ活性高,稳定性好。在42℃、酶切...
以棉花纤维发育相关基因GhSUS1为目标基因,从EcoTILLING技术中常用的关键酶CELⅠ的提取、活性检测、目标基因引物设计及酶切等方面入手,开展了棉花EcoTILLING技术体系的创建研究。结果表明:所提取的CELⅠ活性高,稳定性好。在42℃、酶切体系为8μL PCR扩增产物中加入2μL粗酶液,与缓冲液等量混合,酶切45 min,能有效地对单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)所在的异源双链错配位点进行酶切。对棉花GhSUS1基因设计A和D染色体亚组特异性引物进行等位基因的多态性分析,结果表明:EcoTILLING结果与测序结果一致,说明建立的基于PAGE的Eco-TILLING技术体系稳定可靠,可用于棉花复等位基因发掘研究。
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关键词
棉花
EcoTILLING
单核苷酸多态性
cel
ⅰ
酶
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职称材料
题名
CELⅠ酶的粗提取及其活性检测
被引量：
16
1
作者
韩锁义
杨玛丽
盖钧镒
喻德跃
机构
南京农业大学大豆研究所/国家大豆改良中心/作物遗传与种质创新国家重点实验室
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第9期1112-1116,共5页
基金
国家重点基础研究发展规划(973计划)项目(编号:2004CB117200)
中法合作项目(编号:PRABT02-01)资助~~
文摘
CELⅠ酶是第一个从真核生物中提取的用于高效特异切割DNA双链碱基错配和DNA扭曲的内切酶,因而也是TILLING技术中用到的一种关键酶。文章对CELⅠ酶的粗提取及其活性检测进行了研究。错配切割实验表明,CELⅠ酶在包含有G→A点突变的杂合双链中,能有效地在错配位点进行切割,并可以通过ABI377测序仪获得直观的检测结果,从而可以用于TILLING分析。
关键词
cel
ⅰ
酶
TILLING
点突变
活性
Keywords
cel
ⅰ
enzyme
TILLING
point
mutations
activity
分类号
Q783 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
基于聚丙烯酰胺凝胶电泳的棉花EcoTILLING技术体系创建
被引量：
2
2
作者
邓康胜
吕远大
陶涛
田亮亮
郭旺珍
周宝良
张天真
机构
南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室
出处
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期1-7,共7页
基金
国家自然科学基金项目(30971824)
文摘
以棉花纤维发育相关基因GhSUS1为目标基因,从EcoTILLING技术中常用的关键酶CELⅠ的提取、活性检测、目标基因引物设计及酶切等方面入手,开展了棉花EcoTILLING技术体系的创建研究。结果表明:所提取的CELⅠ活性高,稳定性好。在42℃、酶切体系为8μL PCR扩增产物中加入2μL粗酶液,与缓冲液等量混合,酶切45 min,能有效地对单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)所在的异源双链错配位点进行酶切。对棉花GhSUS1基因设计A和D染色体亚组特异性引物进行等位基因的多态性分析,结果表明:EcoTILLING结果与测序结果一致,说明建立的基于PAGE的Eco-TILLING技术体系稳定可靠,可用于棉花复等位基因发掘研究。
关键词
棉花
EcoTILLING
单核苷酸多态性
cel
ⅰ
酶
Keywords
cotton
EcoTILLING
single
nucleotide
polymorphism（SNP）
cel
ⅰ
enzyme
分类号
S562 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
CELⅠ酶的粗提取及其活性检测
韩锁义
杨玛丽
盖钧镒
喻德跃
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2006
16
下载PDF
职称材料
2
基于聚丙烯酰胺凝胶电泳的棉花EcoTILLING技术体系创建
邓康胜
吕远大
陶涛
田亮亮
郭旺珍
周宝良
张天真
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
2
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