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微小RNA-K1-5p调控G1/S期相关基因的表达影响内皮细胞周期
1
作者 张静 彭靖淇 《安徽医药》 CAS 2023年第1期108-112,共5页
目的探讨卡波西肉瘤(Kaposi's sarcoma,KS)相关疱疹病毒(KSHV)编码的微小RNAs(miR),如miR-K1-5p,对KS细胞周期的调控作用及其机制。方法该研究进行于2020年1—12月,人脐静脉内皮细胞购自美国ScienCell。生物信息学软件预测miR-K1-5... 目的探讨卡波西肉瘤(Kaposi's sarcoma,KS)相关疱疹病毒(KSHV)编码的微小RNAs(miR),如miR-K1-5p,对KS细胞周期的调控作用及其机制。方法该研究进行于2020年1—12月,人脐静脉内皮细胞购自美国ScienCell。生物信息学软件预测miR-K1-5p的靶基因。双萤光素酶试验验证miR-K1-5p的靶基因[细胞周期素依赖性激酶抑制剂4(CDKN4)]。将miR-K1-5p模拟物转染后,行蛋白质印迹法(Western blotting)和q-PCR检测,分析G1/S期相关基因CDKN4、细胞周期蛋白A/细胞周期素依赖性激酶2(Cyclin A/CDK2)、细胞周期蛋白D2/细胞周期素依赖性激酶4(Cyclin D2/CDK4)的表达。碘化丙啶(PI)染色检测miR-K1-5p对内皮细胞(HUVECs)周期的影响。结果miR-K1-5p靶向CDKN4(miR-K1-5p mimics+CDKN4-WT组、mimics NC+CDKN4-WT组、miR-K1-5p mimics+CDKN4-MUT组、mimics NC+CDKN4-MUT组萤光素酶活性分别为0.42±0.05、0.81±0.04、0.82±0.03、0.80±0.05),负性调控CDKN4的表达(P<0.001),正性调控Cyclin A/CDK2和CyclinD2/CDK4的表达(P<0.05)。此外,miR-K1-5p可以加速细胞周期进程,促进G1/S期转换[S+G2期/G1+S+G2期:mimics组(23.37±0.29)%比mimics NC组(15.00±0.75)%,G1期:mimics组(76.63±0.28)%比mimics NC组(85.00±0.76)%,S期:mimics组(15.34±0.36)%比mimics NC(8.45±0.20)%,G2期:mimics组(8.02±0.17)%比mimics NC组(6.55±0.80)%]。结论miR-K1-5p调控G1/S期相关基因的表达影响内皮细胞周期。 展开更多
关键词 内皮细胞 微小核糖核酸-K1-5p 细胞周期素依赖性激酶抑制剂4 细胞周期蛋白A/细胞周期素依赖性激酶2 细胞周期蛋白D2/细胞周期素依赖性激酶4 细胞周期 卡波西肉瘤
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miR-K1-5p相关的G1/S期基因编码的蛋白在卡波西肉瘤中的表达
2
作者 张静 彭靖淇 《宁夏医科大学学报》 2022年第11期1100-1104,共5页
目的研究miR-K1-5p相关的G1/S期基因编码的蛋白在卡波西肉瘤中表达的意义。方法利用生物信息软件miRDB和TargetScan Custom筛选miR-K1-5p的靶基因。使用生物信息数据库确定靶基因参与的信号通路,分析通路上的关键基因。应用免疫组化法... 目的研究miR-K1-5p相关的G1/S期基因编码的蛋白在卡波西肉瘤中表达的意义。方法利用生物信息软件miRDB和TargetScan Custom筛选miR-K1-5p的靶基因。使用生物信息数据库确定靶基因参与的信号通路,分析通路上的关键基因。应用免疫组化法检测靶基因及关键基因(miR-K1-5p相关的G1/S期基因)编码的蛋白在卡波西肉瘤和作为对照的血管瘤中的表达,并分析患者性别、年龄与蛋白表达以及各蛋白表达之间的相关性。结果细胞周期素依赖蛋白激酶抑制剂4(CDKN4)是miR-K1-5p的靶基因,参与细胞周期信号通路,通路下游关键基因为细胞周期蛋白A(CCNA)、细胞周期蛋白D2(CCND2)、周期素依赖性激酶2(CDK2)、周期素依赖性激酶4(CDK4)。免疫组化检测各基因编码的蛋白,CDKN4在卡波西肉瘤中的阳性率低于血管瘤,CCNA、CCND2、CDK2、CDK4在卡波西肉瘤中的阳性率高于血管瘤(P均<0.05);在卡波西肉瘤中CDKN4、CCNA、CCND2、CDK2和CDK4的表达与性别、年龄均无关(P均>0.05);在卡波西肉瘤中CDKN4与CCNA、CCND2、CDK2和CDK4的表达均呈负相关,CCNA、CCND2、CDK2、CDK4各蛋白之间的表达互为正相关(P均<0.05)。结论miR-K1-5p相关的G1/S期基因编码的蛋白(CDKN4、CCNA、CCND2、CDK2、CDK4)的异常表达在卡波西肉瘤发生、发展中可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 卡波西肉瘤 miR-K1-5p 细胞周期素依赖蛋白激酶抑制剂4 细胞周期蛋白A 细胞周期蛋白D2 周期素依赖性激酶2 周期素依赖性激酶4
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