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慢病毒载体介导CDK2基因沉默对黑素瘤B16-F1细胞生物学行为的影响
被引量：
3
1
作者
晋佳路
朱仁书
+1 位作者
谢育媛
刘红春
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第2期243-249,共7页
目的:探讨由慢病毒载体p UL介导的p UL-CDK2-shRNA3(CDK2-shRNA)沉默CDK2基因后对小鼠黑素瘤B16-F1细胞恶性生物学行为的影响,初步探索其作用机制。方法:利用重组慢病毒载体CDK2-shRNA转染B16-F1细胞,MTT法检测其对细胞增殖的影响,DAPI...
目的:探讨由慢病毒载体p UL介导的p UL-CDK2-shRNA3(CDK2-shRNA)沉默CDK2基因后对小鼠黑素瘤B16-F1细胞恶性生物学行为的影响,初步探索其作用机制。方法:利用重组慢病毒载体CDK2-shRNA转染B16-F1细胞,MTT法检测其对细胞增殖的影响,DAPI染色、Annexin V-FITC/PI双染流式术检测细胞凋亡情况,流式术检测细胞周期变化,细胞黏附实验、transwell小室实验分别检测细胞黏附、侵袭和迁移能力变化,Western blotting检测细胞周期信号通路上RB蛋白(成视网膜细胞瘤蛋白)、pRB蛋白、细胞周期相关转录因子E2F1及侵袭迁移相关蛋白基质金属酶-2(MMP-2)、基质金属酶-9(MMP-9)的表达水平。结果:与空白对照组和阴性对照组相比,CDK2-shRNA组细胞相对增殖率、细胞黏附率、细胞侵袭和迁移能力均显著下降(均P<0.05)。细胞凋亡率显著增加(均P<0.05);G1期细胞显著增加而S期和G2期显著降低(P<0.05)。细胞周期相关蛋白pRB、E2F1明显降低而RB显著升高(P<0.05),细胞侵袭和迁移相关蛋白MMP-2、MMP-9明显降低(P<0.05)。结论:慢病毒载体p UL介导的shRNA沉默CDK2基因对B16-F1细胞恶性生物学行为有显著的抑制作用,其机制主要与细胞周期和细胞侵袭迁移相关蛋白表达变化有关。
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关键词
黑素瘤
B16-F1细胞
cdk
2
基因
sh-RNA
恶性生物学行为
机制
下载PDF
职称材料
内蒙古绒山羊CDK2基因的克隆与序列分析
2
作者
关泽红
旭日干
+1 位作者
赵燕芳
毕力格
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期508-512,共5页
采用同源序列克隆技术结合RT-PCR和RACE技术,首次从内蒙古绒山羊睾丸组织中克隆出羊CDK2基因的全长cDNA序列(GenBank登录号为EF035041)。结果显示:羊CDK2基因的cDNA序列长为1 355 bp,5′端非翻译区为174 bp,3′端非翻译区为266 bp,开放...
采用同源序列克隆技术结合RT-PCR和RACE技术,首次从内蒙古绒山羊睾丸组织中克隆出羊CDK2基因的全长cDNA序列(GenBank登录号为EF035041)。结果显示:羊CDK2基因的cDNA序列长为1 355 bp,5′端非翻译区为174 bp,3′端非翻译区为266 bp,开放阅读框为894 bp,编码298个氨基酸。与牛CDK2基因cDNA序列同源性为98%,氨基酸序列完全一致;和其他哺乳动物CDK2基因的cDNA序列同源性也达92%以上;氨基酸序列同源性为93%以上。说明CDK2在结构和功能上有很高的保守性。
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关键词
内蒙古绒山羊
cdk
2
基因
克隆
RACE
下载PDF
职称材料
cyclin E、cdk2和PCNA在子宫肌瘤中的表达
被引量：
1
3
作者
张素丽
郑红兵
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第1期139-140,共2页
关键词
子宫肌瘤
细胞周期蛋白E
cdk
2
基因
PCNA
基因
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职称材料
题名
慢病毒载体介导CDK2基因沉默对黑素瘤B16-F1细胞生物学行为的影响
被引量：
3
1
作者
晋佳路
朱仁书
谢育媛
刘红春
机构
鹤壁职业技术学院医学院
湖北省食品药品监督检验研究院
郑州大学第一附属医院检验科
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第2期243-249,共7页
基金
河南省科技计划项目(No.122300410193)
河南省高等学校青年骨干教师资助计划项目(No.2011GGJS-262)~~
文摘
目的:探讨由慢病毒载体p UL介导的p UL-CDK2-shRNA3(CDK2-shRNA)沉默CDK2基因后对小鼠黑素瘤B16-F1细胞恶性生物学行为的影响,初步探索其作用机制。方法:利用重组慢病毒载体CDK2-shRNA转染B16-F1细胞,MTT法检测其对细胞增殖的影响,DAPI染色、Annexin V-FITC/PI双染流式术检测细胞凋亡情况,流式术检测细胞周期变化,细胞黏附实验、transwell小室实验分别检测细胞黏附、侵袭和迁移能力变化,Western blotting检测细胞周期信号通路上RB蛋白(成视网膜细胞瘤蛋白)、pRB蛋白、细胞周期相关转录因子E2F1及侵袭迁移相关蛋白基质金属酶-2(MMP-2)、基质金属酶-9(MMP-9)的表达水平。结果:与空白对照组和阴性对照组相比,CDK2-shRNA组细胞相对增殖率、细胞黏附率、细胞侵袭和迁移能力均显著下降(均P<0.05)。细胞凋亡率显著增加(均P<0.05);G1期细胞显著增加而S期和G2期显著降低(P<0.05)。细胞周期相关蛋白pRB、E2F1明显降低而RB显著升高(P<0.05),细胞侵袭和迁移相关蛋白MMP-2、MMP-9明显降低(P<0.05)。结论:慢病毒载体p UL介导的shRNA沉默CDK2基因对B16-F1细胞恶性生物学行为有显著的抑制作用,其机制主要与细胞周期和细胞侵袭迁移相关蛋白表达变化有关。
关键词
黑素瘤
B16-F1细胞
cdk
2
基因
sh-RNA
恶性生物学行为
机制
Keywords
melanoma
B16-F1 cell
cdk
2
gene
sh-RNA
malignant biological behavior
mechanism
分类号
R730.59 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
内蒙古绒山羊CDK2基因的克隆与序列分析
2
作者
关泽红
旭日干
赵燕芳
毕力格
机构
内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期508-512,共5页
基金
国家"863"计划项目(2002AA242061)
国家自然科学基金(3060009)资助项目
文摘
采用同源序列克隆技术结合RT-PCR和RACE技术,首次从内蒙古绒山羊睾丸组织中克隆出羊CDK2基因的全长cDNA序列(GenBank登录号为EF035041)。结果显示:羊CDK2基因的cDNA序列长为1 355 bp,5′端非翻译区为174 bp,3′端非翻译区为266 bp,开放阅读框为894 bp,编码298个氨基酸。与牛CDK2基因cDNA序列同源性为98%,氨基酸序列完全一致;和其他哺乳动物CDK2基因的cDNA序列同源性也达92%以上;氨基酸序列同源性为93%以上。说明CDK2在结构和功能上有很高的保守性。
关键词
内蒙古绒山羊
cdk
2
基因
克隆
RACE
Keywords
Inner Mongolia Cashmere goats
cdk
2
gene
cloning
RACE
分类号
S827.2 [农业科学—畜牧学]
下载PDF
职称材料
题名
cyclin E、cdk2和PCNA在子宫肌瘤中的表达
被引量：
1
3
作者
张素丽
郑红兵
机构
华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科
出处
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第1期139-140,共2页
关键词
子宫肌瘤
细胞周期蛋白E
cdk
2
基因
PCNA
基因
分类号
R711.74 [医药卫生—妇产科学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
慢病毒载体介导CDK2基因沉默对黑素瘤B16-F1细胞生物学行为的影响
晋佳路
朱仁书
谢育媛
刘红春
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016
3
下载PDF
职称材料
2
内蒙古绒山羊CDK2基因的克隆与序列分析
关泽红
旭日干
赵燕芳
毕力格
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
0
下载PDF
职称材料
3
cyclin E、cdk2和PCNA在子宫肌瘤中的表达
张素丽
郑红兵
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006
1
下载PDF
职称材料
已选择
0
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