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拟南芥CDF家族基因AtMTP6编码一个锌离子转运蛋白 被引量:4
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作者 吴平治 陈键 +1 位作者 栾升 李东屏 《生命科学研究》 CAS CSCD 2006年第3期244-247,共4页
CDF家族蛋白在金属离子的动态平衡和耐受过程中起重要作用,拟南芥基因组序列分析表明,拟南芥中CDF家族至少由12个成员构成.本研究通过功能互补的方法研究其中的一个成员AtMTP6的功能.应用RT-PCR克隆得到其cDNA,克隆至pMD18-T载体并测序... CDF家族蛋白在金属离子的动态平衡和耐受过程中起重要作用,拟南芥基因组序列分析表明,拟南芥中CDF家族至少由12个成员构成.本研究通过功能互补的方法研究其中的一个成员AtMTP6的功能.应用RT-PCR克隆得到其cDNA,克隆至pMD18-T载体并测序,结果显示与AtMTP6的ORF序列一致.然后亚克隆至表达载体pTrc99A并转化至大肠杆菌突变株KAM3.IPTG诱导表达后进行功能互补分析,结果表明AtMTP6能转运锌离子进入KAM3,使细菌对高浓度的Zn2+更加敏感. 展开更多
关键词 拟南芥 AtMTP6 cdf家族 功能互补分析
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茶树锌转运蛋白基因CsMTP1的克隆和功能鉴定 被引量:1
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作者 张徐杨 徐文鸾 +2 位作者 马梦君 倪德江 王明乐 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1655-1663,共9页
阳离子扩散促进蛋白(cation diffusion facilitator protein,CDF)是一类重要的金属转运蛋白,对维持细胞中Zn、Fe和Mn等元素的动态平衡起着重要作用。本研究利用RT-PCR技术,从茶树中克隆得到1个CDF家族基因,命名为CsMTP1(GenBank登录号:M... 阳离子扩散促进蛋白(cation diffusion facilitator protein,CDF)是一类重要的金属转运蛋白,对维持细胞中Zn、Fe和Mn等元素的动态平衡起着重要作用。本研究利用RT-PCR技术,从茶树中克隆得到1个CDF家族基因,命名为CsMTP1(GenBank登录号:MN061493)。该基因开放阅读框长度为1353 bp,编码450个氨基酸,蛋白质相对分子质量为49.20 kDa,理论等电点5.99;不稳定指数为38.68,属于稳定蛋白;N端序列保守性较低,C端序列保守性相对较高;与猕猴桃(Actinidia chinensis)和木薯(Manihot esculenta)的序列相似性较高;位于细胞质膜,共含有6个跨膜结构域。系统发育树分析表明,CsMTP1与山萮菜(Eutrema salsugineum)、拟南芥(Arabidopsis thaliana)、菥蓂(Thlaspi arvense)和欧洲油菜(Brassica napus)的进化关系较近,属于Zn-CDF亚族。启动子分析发现,CsMTP1启动子序列中含有多个脱落酸和茉莉酸甲酯响应元件、光响应元件及MYB结合位点。实时荧光定量PCR分析发现,高浓度Al处理条件下,CsMTP1在茶树根部和第1叶中的转录变化相反,在根中先升后降,而在第1叶中先降后升;高浓度Mn处理诱导了CsMTP1在根中和第1叶中的转录;高浓度Fe和高浓度Zn处理均抑制了CsMTP1在茶树根中的转录,并不同程度地诱导了该基因在茶树第1叶中的转录。这表明,CsMTP1对高浓度Al、Fe、Zn和Mn有不同的响应模式。酵母功能互补实验证实CsMTP1具有转运Zn的功能。 展开更多
关键词 茶树 cdf家族 CsMTP1 基因表达 锌转运蛋白
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丛枝菌根真菌Funneliformis mosseae锌转运体基因FmZnT1的克隆与表达分析 被引量:1
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作者 韩亚超 谢贤安 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期867-878,共12页
丛枝菌根(AM)真菌中锌(Zn)平衡或抗性的机制仍未被完全理解,主要是由于响应Zn压力抗性基因的分子信息有限。为了揭示AM真菌中Zn抗性的分子基础,利用兼并PCR与RACE技术从摩西管柄囊霉(Funneliformis mosseae)中分离到一个全长cDNA,命名... 丛枝菌根(AM)真菌中锌(Zn)平衡或抗性的机制仍未被完全理解,主要是由于响应Zn压力抗性基因的分子信息有限。为了揭示AM真菌中Zn抗性的分子基础,利用兼并PCR与RACE技术从摩西管柄囊霉(Funneliformis mosseae)中分离到一个全长cDNA,命名为Zn转运体FmZnT1,它与根内球囊霉(Rhizophagus intraradices)的GintZnT1基因密切相关。根据其序列与系统进化分析,FmZnT1属于阳离子扩散促进体(CDF)家族的Zn型亚家族。通过RT-PCR与定量RT-PCR的结果表明FmZnT1基因在AM真菌的各组织中组成型表达,与生长阶段和侵染率无关。在Zn^(2+)(300μmol/L)处理的紫云英菌根中FmZnT1基因的转录水平被迅速诱导,然而在长时间暴露于低Zn^(2+)(30μmol/L)浓度的菌根中FmZnT1的表达被显著上调。因此这些数据表明编码CDF家族Zn转运体的Fm Zn T1基因可能对摩西管柄囊霉(F.mosseae)中的Zn^(2+)压力具有抗性。总而言之,从本研究获得的数据能够对AM真菌中Zn平衡与Zn抗性有初步的理解。 展开更多
关键词 丛枝菌根真菌 摩西管柄囊霉 FmZnT1 cdf家族 Zn抗性
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