目的以雌性和雄性非肥胖糖尿病(nonobese diabetic,NOD)小鼠以及健康对照癌症研究所(institute for cancer research,ICR)小鼠为研究对象,比较分析初始、效应、记忆、耗竭以及调节性CD8^(+)T细胞分化亚群差异,探讨1型糖尿病(type 1 diab...目的以雌性和雄性非肥胖糖尿病(nonobese diabetic,NOD)小鼠以及健康对照癌症研究所(institute for cancer research,ICR)小鼠为研究对象,比较分析初始、效应、记忆、耗竭以及调节性CD8^(+)T细胞分化亚群差异,探讨1型糖尿病(type 1 diabetes,T1D)背景下的性别因素对CD8^(+)T细胞分化命运的影响。方法采用流式细胞术检测雌雄NOD小鼠脾脏、胰腺引流淋巴结(pancreatic draining lymph nodes,pLN)、胰腺浸润淋巴细胞(pancreas-infiltrating lymphocytes,PIL)、初始T细胞(naive T cells,T_(N))、中枢记忆T细胞(central memory T cells,T_(CM))、效应T细胞(effector T cells,T_(EFF))、效应前体样T细胞(effector precursor T cells,T_(EP))、耗竭T细胞(exhausted T cells,T_(EX))、耗竭前体T细胞(precursor exhausted T cells,T_(PEX))以及调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)等CD8^(+)T细胞分化亚群的频率和表型差异。结果与雄性NOD小鼠比较,雌性NOD小鼠pLN及PIL中IFN-γ^(+)、CD107a^(+)和CCL5^(+)CD8^(+)T_(EFF)频率显著升高(P<0.01,P<0.05,P<0.05),同时脾脏中CD8^(+)T_(N)、CD8^(+)T_(CM)、CD8^(+)T_(EX)、CD8^(+)T_(PEX)和CD122^(+)CD8^(+)Tregs亚群的频率均显著降低(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.001);而雌性和雄性ICR小鼠体内除CD122^(+)CD8^(+)Tregs差异变化与NOD小鼠一致(P<0.05),其余上述各CD8^(+)T细胞分化亚群无显著差异。结论雄激素可能通过抑制记忆T细胞向效应T细胞分化,同时促进效应T细胞功能耗竭,导致雌雄发病率差异。展开更多
目的:动态观察乙型肝炎e抗原(hepatitis B e antigen,HBeAg)阳性慢性乙型肝炎(chronic h e p a t i t i s B,C H B)患者聚乙二醇化干扰素α-2b(pegylated interferonα-2b,PEG-IFNα-2b)治疗过程中外周血CD8+记忆T细胞亚群的变化及其临...目的:动态观察乙型肝炎e抗原(hepatitis B e antigen,HBeAg)阳性慢性乙型肝炎(chronic h e p a t i t i s B,C H B)患者聚乙二醇化干扰素α-2b(pegylated interferonα-2b,PEG-IFNα-2b)治疗过程中外周血CD8+记忆T细胞亚群的变化及其临床意义.方法:30例HBeAg阳性CHB患者PEG-IFNα-2b治疗24 wk,在治疗前、治疗12和24 wk,分别以流式细胞术检测患者外周血CD8+记忆T细胞亚群百分比,全自动生化分析仪检测谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)水平,荧光定量PCR检测血清HBV DNA水平,酶联免疫吸附法检测HBV标志物.结果:PEG-IFNα-2b治疗24 wk后有效率为36.7%,E抗原血清学转换率6.7%,HBV DNA较低时使用效果较好.患者ALT随治疗时间延长逐渐下降(P<0.05),治疗12 wk时初始T细胞(na?ve T cell,Tnaive)百分率、HBV DNA滴度较治疗前下降明显(54.8±7.28 vs 60.73±6.67,4.57±1.41 vs 6.46±0.74,P<0.05),但治疗12wk与24 wk相比皆下降不明显(54.8±7.28 vs52.07±6.09,4.57±1.41 vs 3.93±1.51,P>0.05).中心记忆T细胞(central memory T cell,TCM),效应记忆T细胞(effector memory T cell,TEM)细胞分布频率随治疗时间延长逐渐增加(P<0.05).3个时间段终末分化效应细胞(terminal effector memory,TTEM)变化不明显.有效组治疗12 wk和24 wk的ALT,HBV DNA、T naive都较无效组下降(P<0.05);有效组TEM细胞频率在各时间点都较无效组增加;治疗12 wk有效组TCM跟无效组差别不大(15.91±5.07 vs 13.42±3.40,P>0.05),但24 wk时有效组明显增加(22.27±3.58 vs 15.21±3.38,P<0.01).两组TTEM细胞不同时间段变化不大.结论:PEG-IFNα-2b治疗CHB致患者初始T细胞下降,TCM、TEM细胞频率升高,可获得持续性病毒学及生化学应答的概率高,抗病毒效果好.展开更多
文摘目的以雌性和雄性非肥胖糖尿病(nonobese diabetic,NOD)小鼠以及健康对照癌症研究所(institute for cancer research,ICR)小鼠为研究对象,比较分析初始、效应、记忆、耗竭以及调节性CD8^(+)T细胞分化亚群差异,探讨1型糖尿病(type 1 diabetes,T1D)背景下的性别因素对CD8^(+)T细胞分化命运的影响。方法采用流式细胞术检测雌雄NOD小鼠脾脏、胰腺引流淋巴结(pancreatic draining lymph nodes,pLN)、胰腺浸润淋巴细胞(pancreas-infiltrating lymphocytes,PIL)、初始T细胞(naive T cells,T_(N))、中枢记忆T细胞(central memory T cells,T_(CM))、效应T细胞(effector T cells,T_(EFF))、效应前体样T细胞(effector precursor T cells,T_(EP))、耗竭T细胞(exhausted T cells,T_(EX))、耗竭前体T细胞(precursor exhausted T cells,T_(PEX))以及调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)等CD8^(+)T细胞分化亚群的频率和表型差异。结果与雄性NOD小鼠比较,雌性NOD小鼠pLN及PIL中IFN-γ^(+)、CD107a^(+)和CCL5^(+)CD8^(+)T_(EFF)频率显著升高(P<0.01,P<0.05,P<0.05),同时脾脏中CD8^(+)T_(N)、CD8^(+)T_(CM)、CD8^(+)T_(EX)、CD8^(+)T_(PEX)和CD122^(+)CD8^(+)Tregs亚群的频率均显著降低(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.001);而雌性和雄性ICR小鼠体内除CD122^(+)CD8^(+)Tregs差异变化与NOD小鼠一致(P<0.05),其余上述各CD8^(+)T细胞分化亚群无显著差异。结论雄激素可能通过抑制记忆T细胞向效应T细胞分化,同时促进效应T细胞功能耗竭,导致雌雄发病率差异。
文摘目的:动态观察乙型肝炎e抗原(hepatitis B e antigen,HBeAg)阳性慢性乙型肝炎(chronic h e p a t i t i s B,C H B)患者聚乙二醇化干扰素α-2b(pegylated interferonα-2b,PEG-IFNα-2b)治疗过程中外周血CD8+记忆T细胞亚群的变化及其临床意义.方法:30例HBeAg阳性CHB患者PEG-IFNα-2b治疗24 wk,在治疗前、治疗12和24 wk,分别以流式细胞术检测患者外周血CD8+记忆T细胞亚群百分比,全自动生化分析仪检测谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)水平,荧光定量PCR检测血清HBV DNA水平,酶联免疫吸附法检测HBV标志物.结果:PEG-IFNα-2b治疗24 wk后有效率为36.7%,E抗原血清学转换率6.7%,HBV DNA较低时使用效果较好.患者ALT随治疗时间延长逐渐下降(P<0.05),治疗12 wk时初始T细胞(na?ve T cell,Tnaive)百分率、HBV DNA滴度较治疗前下降明显(54.8±7.28 vs 60.73±6.67,4.57±1.41 vs 6.46±0.74,P<0.05),但治疗12wk与24 wk相比皆下降不明显(54.8±7.28 vs52.07±6.09,4.57±1.41 vs 3.93±1.51,P>0.05).中心记忆T细胞(central memory T cell,TCM),效应记忆T细胞(effector memory T cell,TEM)细胞分布频率随治疗时间延长逐渐增加(P<0.05).3个时间段终末分化效应细胞(terminal effector memory,TTEM)变化不明显.有效组治疗12 wk和24 wk的ALT,HBV DNA、T naive都较无效组下降(P<0.05);有效组TEM细胞频率在各时间点都较无效组增加;治疗12 wk有效组TCM跟无效组差别不大(15.91±5.07 vs 13.42±3.40,P>0.05),但24 wk时有效组明显增加(22.27±3.58 vs 15.21±3.38,P<0.01).两组TTEM细胞不同时间段变化不大.结论:PEG-IFNα-2b治疗CHB致患者初始T细胞下降,TCM、TEM细胞频率升高,可获得持续性病毒学及生化学应答的概率高,抗病毒效果好.
文摘目的探讨不同方法诱导小鼠产生CD8^(+)记忆性T细胞的效果。方法将100只雌性Bal B/C小鼠作为受体小鼠,并将其中75只小鼠按随机数字表法分为移植组、1×10^(6)注射组、5×10^(6)注射组、1×10^(7)注射组和空白对照组,每组15只。取1只C57小鼠(供体小鼠)的脾脏淋巴细胞,按上述不同个数溶于0.2 ml PBS缓冲液后注射于各注射组小鼠腹腔中;颈椎脱臼处死后,取15块0.25 cm^(2)背部皮肤移植到移植组小鼠背部。处理后1、2、3个月时采用流式细胞术检测上述5组小鼠脾脏CD8^(+)记忆性T细胞百分比和CD3^(+)T细胞总数。剩余25只小鼠(每组5只)按上述方法分组和处理,然后纯化分选CD8^(+)记忆性T细胞,与经过辐照后的C57小鼠脾脏淋巴细胞进行共培养,1周后用流式细胞仪检测CD8^(+)记忆性T细胞增殖指数。结果前5组小鼠在处理后1个月时产生的CD8^(+)记忆性T细胞百分比差异无统计学意义(P>0.05),但在2、3个月时3个注射组高于空白对照组和移植组(均P<0.05),3个月时更明显(均P<0.05)。其中1×10^(6)注射组在2个月时CD8^(+)记忆性T细胞比例最高;在CD3^(+)T细胞总数方面,移植组及3个注射组组内比较均在2个月时最高,差异均有统计学意义(均P<0.05),但组间比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。各组CD8^(+)记忆性T细胞的增殖指数差异无统计学意义(P>0.05)。结论通过体内注射脾脏淋巴细胞来诱导CD8^(+)记忆性T细胞是更高效的方法。
