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嵌合跨膜型人CD55基因的重组逆病毒表达质粒的构建 被引量：1
1
作者 杜瑞琴 白云 +1 位作者 黎万玲 姜曼 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期48-51,共4页
目的　构建嵌合跨膜型CD5 5基因的重组逆病毒表达质粒。方法　采用PCR技术扩增编码CD5 5信号肽及成熟蛋白胞外区 (-3 4 -3 0 4aa)的DNA片段 ,双侧引入EcoRⅠ、SspⅠ位点 ,与编码CD46分子的跨膜区及膜内区 (2 70～ 3 5 0aa)的DNA片段的5... 目的　构建嵌合跨膜型CD5 5基因的重组逆病毒表达质粒。方法　采用PCR技术扩增编码CD5 5信号肽及成熟蛋白胞外区 (-3 4 -3 0 4aa)的DNA片段 ,双侧引入EcoRⅠ、SspⅠ位点 ,与编码CD46分子的跨膜区及膜内区 (2 70～ 3 5 0aa)的DNA片段的5’末端自身的StuI位点连接 ,构建嵌合跨膜型CD5 5DNA片段 ,序列测定后将此嵌合CD5 5片段与pLXSN逆病毒载体连接构建重组表达质粒 ,酶切鉴定插入片段的方向。结果　DNA序列测定证实所构建的嵌合跨膜型CD5DNA阅读框完整、连接部位序列正确 ;HindⅢ酶切鉴定得到了正向插入的CD5 5TM pLXSN重组表达质粒。结论　我们成功构建了嵌合跨膜型CD5 5DNA片段及含此片段的重组逆病毒表达载体CD5 5TM pLXSN ,为进一步在真核细胞中表达嵌合分子 ,比较研究GPI锚固型CD5 5分子与细胞活化信号转导的关系建立良好对照并为应用跨膜型的CD5 5分子对PNH进行基因治疗奠定了分子生物学基础。 展开更多
关键词 嵌合跨膜型分子 重组逆转录病毒表达载体 cd55基因 质粒
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慢病毒载体介导CD_(55)抑制对胰腺癌BxPC-3细胞迁移、侵袭和成瘤的影响
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作者 何政 王敏 +3 位作者 田锐 朱峰 林凡 秦仁义 《山东医药》 CAS 2012年第7期1-3,共3页
目的探讨慢病毒载体介导的RNA沉默CD55基因抑制胰腺癌BxPC-3细胞迁移、侵袭和成瘤的效果及机制。方法采用CD55-RNAi-LV(慢病毒包装靶向抑制CD55的shRNA载体)转染BxPC-3细胞(实验组),设转染NC-GFP-LV(慢病毒包装作对照的空载体)的BxPC-3... 目的探讨慢病毒载体介导的RNA沉默CD55基因抑制胰腺癌BxPC-3细胞迁移、侵袭和成瘤的效果及机制。方法采用CD55-RNAi-LV(慢病毒包装靶向抑制CD55的shRNA载体)转染BxPC-3细胞(实验组),设转染NC-GFP-LV(慢病毒包装作对照的空载体)的BxPC-3细胞为对照组,未转染的BxPC-3细胞为空白组。Transwell法检测各组细胞体外迁移、侵袭能力。三组细胞分别以1.0×107/200μL的浓度注入裸鼠皮下,7周观察成瘤情况。结果与对照组及空白组比较,实验组细胞迁移能力及侵袭能力明显减弱(P均<0.05);瘤体出现晚且瘤体体积小(P<0.05)。结论 CD55基因对胰腺癌细胞系BxPC-3细胞迁移、侵袭和成瘤能力有调控作用,可望成为胰腺癌新的治疗靶点。 展开更多
关键词 胰腺癌细胞 RNA干扰 cd55基因 慢病毒载体
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