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开发抗CD44抗体治疗急性髓系白血病 被引量：6
1
作者 张涛 屈浩 +7 位作者 张丽艳 张毅 王玫 王冬梅 何大水 黄丽华 朱卫彬 张宇光 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第2期190-197,共8页
为了探讨抗CD44抗体对急性髓系白血病(AML)细胞增殖和分化的影响,为肿瘤靶向药物的开发提供前提和基础.应用流式细胞术检测抗CD44单克隆抗体HI313的亲和力,MTS检测HI313是否抑制NB4细胞生长,并检测细胞周期的变化,与初筛AML病人标本共... 为了探讨抗CD44抗体对急性髓系白血病(AML)细胞增殖和分化的影响,为肿瘤靶向药物的开发提供前提和基础.应用流式细胞术检测抗CD44单克隆抗体HI313的亲和力,MTS检测HI313是否抑制NB4细胞生长,并检测细胞周期的变化,与初筛AML病人标本共培养检测其促分化作用.结果显示HI313抑制NB4细胞生长,能使细胞周期停留在G0/G1期,并能有效诱导AML病人血细胞的分化.通过以上实验证明抗CD44抗体HI313对NB4细胞具有增殖抑制作用,作用机制可能与阻滞细胞周期于G0/G1期相关,并对AML病人的细胞有一定的促分化作用,提示此抗体具有针对AML进行靶向治疗的潜力,为HI313人抗体的进一步基因工程改造及临床应用奠定了基础. 展开更多
关键词 AML cd44抗体 细胞周期 促分化 抗体治疗
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十例犬乳腺肿瘤病理组织p53及CD44抗体表达的解析 被引量：2
2
作者 崔文 彭丽艳 +2 位作者 张蓉蓉 任晓丽 刘云 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期893-898,共6页
对通过外科手术摘除的10例疑似犬乳腺肿瘤标本按国际标准进行了病理组织学分类,并采用鼠抗人p53和CD44抗体,用免疫组织化学方法对病料组织中的p53和CD44抗原进行了检测。结果表明,10例犬乳腺肿瘤中恶性肿瘤占50%,其中乳腺浸润性导管癌占... 对通过外科手术摘除的10例疑似犬乳腺肿瘤标本按国际标准进行了病理组织学分类,并采用鼠抗人p53和CD44抗体,用免疫组织化学方法对病料组织中的p53和CD44抗原进行了检测。结果表明,10例犬乳腺肿瘤中恶性肿瘤占50%,其中乳腺浸润性导管癌占30%;良性肿瘤占30%,乳腺非肿瘤性疾病占20%。p53在恶性乳腺肿瘤组织中的表达明显高于良性乳腺肿瘤组织,差异极显著(P<0.01)。CD44在恶性乳腺肿瘤组织、良性乳腺肿瘤组织和非肿瘤组织中均有表达,三者之间CD44的表达无显著差异(P>0.05)。证实,p53在病理组织中表达的强弱可作为动物乳腺肿瘤诊断和预后的判定标准之一,而CD44的表达对于乳腺肿瘤的诊断无临床意义。 展开更多
关键词 犬乳腺肿瘤 P53抗体 cd44抗体
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抗CD44mAbA3D8对卵巢癌球形体形成细胞增殖和凋亡的影响 被引量：1
3
作者 许静静 杜涌瑞 +4 位作者 张秋月 顾欣 谷超 李凤舞 邓为民 《天津医药》 CAS 北大核心 2012年第7期641-644,共4页
目的:探讨抗CD44单克隆抗体(mAb)A3D8对3种卵巢癌球形体形成细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:用MTS法检测A3D8对细胞增殖的影响;采用PI染色及流式细胞仪检测A3D8对细胞周期的影响;用AnnexinV-FITC/PI凋亡检测试剂盒检测A3D... 目的:探讨抗CD44单克隆抗体(mAb)A3D8对3种卵巢癌球形体形成细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:用MTS法检测A3D8对细胞增殖的影响;采用PI染色及流式细胞仪检测A3D8对细胞周期的影响;用AnnexinV-FITC/PI凋亡检测试剂盒检测A3D8在细胞凋亡中的作用;用罗丹明123试剂盒检测A3D8对细胞线粒体膜电位的影响;并采用WesternBlotting法检测A3D8作用于3种卵巢癌球形体形成细胞后,CDK2、cyclinA、Bcl-2和caspase-3的改变。结果:A3D8可抑制3种卵巢癌球形体形成细胞的增殖,且此抑制作用呈现剂量和时间依赖性;A3D8可在阻滞S期的同时降低G0/G1期比例;A3D8可促进3种细胞凋亡,与顺铂(DDP)联用,细胞凋亡率较单独使用DDP增高;A3D8的处理可导致3种细胞的线粒体膜电位损失,CDK2、cyclinA、Bcl-2蛋白表达下调,caspase-3表达上调。结论:A3D8可能是通过影响p21/CDK2/cyclinA途径阻滞细胞周期达到抑制3种卵巢癌球形体形成细胞增殖的结果,并且可通过线粒体途径促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 抗原 cd44抗体 单克隆 卵巢肿瘤 细胞增殖 细胞凋亡 卵巢癌球形体形成细胞
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抗CD44抗体HI44a诱导THP-1细胞凋亡作用的研究 被引量：1
4
作者 宋国丽 廖晓龙 韩忠朝 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 2006年第3期190-193,共4页
背景与目的:研究抗CD44抗体HI44a体外诱导白血病细胞THP-1凋亡的作用及其机制。材料与方法:应用Annexin-Ⅴ/PI染色法、原位凋亡检测试剂盒及透射电镜分别检测形态学变化及其凋亡情况,RT-PCR及western-blot方法检测原癌基因c-mycmRNA及... 背景与目的:研究抗CD44抗体HI44a体外诱导白血病细胞THP-1凋亡的作用及其机制。材料与方法:应用Annexin-Ⅴ/PI染色法、原位凋亡检测试剂盒及透射电镜分别检测形态学变化及其凋亡情况,RT-PCR及western-blot方法检测原癌基因c-mycmRNA及蛋白水平的表达,JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位的变化,流式细胞仪检测抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。结果:采用多种方法均可证实,HI44a对THP-1细胞有明显的诱导凋亡作用。HI44a明显抑制THP-1细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达(P<0.05);同时c-myc在mRNA及蛋白水平的表达水平均明显降低;并可诱导细胞线粒体膜电位的改变。结论:HI44a能够有效诱导THP-1细胞凋亡。其作用机制可能与调节相关癌基因及抗凋亡蛋白的表达,降低线粒体膜电位有关。 展开更多
关键词 抗cd44抗体 细胞凋亡 急性白血病
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抗CD_(44)抗体HI44a对白血病细胞分化与凋亡作用的体外研究 被引量：1
5
作者 宋国丽 廖晓龙 +4 位作者 李彬 刁世勇 张丽艳 肖志坚 韩忠朝 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 2006年第5期355-358,共4页
背景与目的：探讨抗CD44抗体HI44a对新鲜白血病细胞分化及凋亡的作用。材料与方法：从细胞形态学、四氮唑蓝（NBT）还原反应和细胞分化特异性抗原CD11b，CD14和CD15的变化，体外研究HI44a对31例急性髓系白血病患者白血病细胞的诱导分化... 背景与目的：探讨抗CD44抗体HI44a对新鲜白血病细胞分化及凋亡的作用。材料与方法：从细胞形态学、四氮唑蓝（NBT）还原反应和细胞分化特异性抗原CD11b，CD14和CD15的变化，体外研究HI44a对31例急性髓系白血病患者白血病细胞的诱导分化作用：并利用Annexin-Ⅴ试剂盒检测HI44a对白血病细胞的凋亡诱导，RT-PCR方法检测其对细胞分化相关因子G-CSF，M-CSF及原癌基因C-myc表达的影响。结果：经HI44a作用后，白血病细胞形态向成熟方向转变；M2～M5各亚型的NBT还原反应阳性率分别升高到31％（对照为9％）、55％（对照为10％）、25％（对照为12％）和32％（对照为11％），与对照组相比，差异均有统计学意义（P〈0．01）。CD11b、CD14和CD15表达分别由对照组的9．65％、27．40％、57．38％升高到19．29％、40．60％和66．82％（P均〈0．01）。细胞的早期凋亡率由对照组的26．21％升高到41．18％。RT-PCR检测发现HI44a作用后，M-CSF表达增强，而原癌基因c-myc表达降低。结论：HI44a能够有效的诱导白血病细胞分化及凋亡，为治疗急性髓性白血病提供了一条新思路。 展开更多
关键词 抗cd44抗体 白血病细胞 分化 凋亡
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抗CD44抗体单链抗体构建及表达
6
作者 宋国丽 李彬 +2 位作者 吴立华 刁世勇 韩忠朝 《医学研究通讯》 2005年第10期42-44,共3页
目的构建抗 CD44抗体的单链抗体(anti-CD44-ScFv),为进一步应用基因工程抗体研究打下基础。方法从分泌抗 CD44单克隆抗体的杂交瘤细胞系 HII44a 中提取总 RNA,经 RT-PCR 分离获得了轻、重链可变区(V_L、V_H)基因,用连接肽将其构建成具有... 目的构建抗 CD44抗体的单链抗体(anti-CD44-ScFv),为进一步应用基因工程抗体研究打下基础。方法从分泌抗 CD44单克隆抗体的杂交瘤细胞系 HII44a 中提取总 RNA,经 RT-PCR 分离获得了轻、重链可变区(V_L、V_H)基因,用连接肽将其构建成具有 V_L-Linker-V_H 结构的单链抗体基因,并将构建的单链抗体基因克隆到分泌型蛋白表达载体 PET22b(+)中进行表达。结果经测序表明,V_H、V_L 及 Linker 的序列正确。ScFv 在大肠杆菌中的表达量约占菌体总蛋白的16%。能够特异性与 CD44抗原结合。结论成功构建抗 CD44抗体单链抗体,为进一步制备基因工程抗体奠定了基础。 展开更多
关键词 基因 克隆 单链抗体 基因表达 抗cd44抗体
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pIRES-scFvCD_(44)-TRAIL对人乳腺癌细胞株抑制作用的研究
7
作者 魏杨辉 黄耀 张卫星 《山东医药》 CAS 北大核心 2015年第14期11-15,共5页
目的探讨CD44单链抗体sc Fv CD44、肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)双基因共表达真核载体(p IRES-sc Fv CD44-TRAIL)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞株的抑制作用。方法 1细胞实验:采用RT-PCR二步法构建p IRES-sc Fv CD44-TRAIL并转染MDA... 目的探讨CD44单链抗体sc Fv CD44、肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)双基因共表达真核载体(p IRES-sc Fv CD44-TRAIL)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞株的抑制作用。方法 1细胞实验:采用RT-PCR二步法构建p IRES-sc Fv CD44-TRAIL并转染MDA-MB-231细胞(转染组);设转染p IRES空质粒的空白组及不作任何处理的阴性组。转染24 h后采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,计算细胞凋亡率;行划痕试验比较各组细胞迁移情况,计算划痕愈合率。2移植瘤实验:建立乳腺癌荷瘤裸鼠模型8只并随机分为实验组及对照组。实验组皮下注射p IRES-sc Fv CD44-TRAIL 100μL/只,隔日1次,共5次;对照组注射等量生理盐水。观察两组移植瘤生长情况,计算抑瘤率;采用免疫组化法检测两组瘤组织中Ki67的表达水平。结果 1细胞实验:转染组细胞凋亡率明显高于、划痕愈合率明显低于空白组和阴性组。2移植瘤实验:观察组抑瘤率为79.8%;观察组Ki67的阳性细胞率明显低于对照组,P<0.05。结论 p IRES-sc Fv CD44-TRAIL可抑制人乳腺癌细胞及其移植肿瘤的生长及转移。 展开更多
关键词 cd44单链抗体 肿瘤坏死因子可溶性相关凋亡诱导配体 乳腺癌
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抗CD44单克隆抗体IM7在体外诱导慢性髓系白血病干／祖细胞的凋亡 被引量：2
8
作者 章龙珍 丁昕 +3 位作者 李向阳 沈宏杰 岑建农 陈子兴 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期601-605,共5页
本研究探讨抗CD44单克隆抗体IM7在体外诱导慢性髓系白血病干/祖细胞(leukemic stem/progenitor cells,LSPC)凋亡情况及其可能的作用机制。取20例初诊的慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)病人骨髓液5-10ml,用免疫磁株分离法... 本研究探讨抗CD44单克隆抗体IM7在体外诱导慢性髓系白血病干/祖细胞(leukemic stem/progenitor cells,LSPC)凋亡情况及其可能的作用机制。取20例初诊的慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)病人骨髓液5-10ml,用免疫磁株分离法分离出CD34+、CD38-、CD123+LSPC。利用Annexin-V试剂盒检测IM7诱导CML-LSPC凋亡情况;荧光实时定量PCR及RT-PCR检测CML-LSPC中原癌基因c-myc、NF-κB表达水平;Western-blot检测IM7孵育后CML-LSPC中BCL-2蛋白表达变化。结果表明:经IM7孵育后CML-LSPC的早期凋亡率由对照组(5.42±1.84)(升高至(12.58±2.84)((p<0.05)。IM7孵育后CML-LSPC中原癌基因c-myc、NF-κB mRNA表达水平明显降低,IM7能有效抑制CML-LSPC中BCL-2蛋白表达下调,CML-LSPC中NF-κB的活性受到抑制。结论:抗CD44单克隆抗体IM7能有效诱导CML-LSPC凋亡,其可能机制为NF-κB的活性降低,作为下游靶基因c-myc及bcl-2表达下调,从而诱导LSPC凋亡。 展开更多
关键词 抗cd44单克隆抗体 IM7 慢性髓系白血病 白血病干/祖细胞
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荷人肺腺癌裸鼠的^(99)Tc^m-CD44-McAb放射免疫显像
9
作者 段东 朱玉泉 +1 位作者 李少林 王树兵 《同位素》 CAS 2009年第3期133-138,共6页
采用99Tcm直接标记法标记抗CD44的单克隆抗体,并对标记抗体的特性进行鉴定;利用99Tcm-CD44-McAb对荷人肺腺癌裸鼠进行放射免疫显像及体内分布研究。结果显示,99Tcm-CD44-McAb的标记率为92.3%±4.1%,比活度为2.9±0.5 TBq/g,放... 采用99Tcm直接标记法标记抗CD44的单克隆抗体,并对标记抗体的特性进行鉴定;利用99Tcm-CD44-McAb对荷人肺腺癌裸鼠进行放射免疫显像及体内分布研究。结果显示,99Tcm-CD44-McAb的标记率为92.3%±4.1%,比活度为2.9±0.5 TBq/g,放化纯度为96.2%±3.1%。放射免疫显像结果显示,肿瘤组织对99Tcm-CD44-McAb有较高的摄取,通过感兴趣区(Regional Interest,ROI)技术测得肿瘤部位与对侧相应部位的放射性摄取比(T/NT)为2.29±0.56,明显高于对照组(P<0.05)。标记抗体的小鼠体内分布结果与显像结果基本一致。以上研究结果说明,99Tcm-CD44-McAb用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像能得到较理想的T/NT,CD44是肺腺癌放射免疫显像研究值得推荐的目标抗原之一。 展开更多
关键词 99Tcm标记 cd44单克隆抗体 放射免疫显像 肺腺癌
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抗CD44抗体治疗急性髓系白血病的研究进展
10
作者 王伟强 宋增璇 韩忠朝 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期58-60,共3页
CD44分子是一种广泛分布的细胞表面跨膜糖蛋白,在许多方面发挥着重要的生理和病理作用,其中之一就是CD44分子参与血细胞的生成,在血细胞分化成熟的过程中发挥着关键性作用。CD44与一些特异的抗体结合后能够逆转急性髓系白血病幼稚细胞... CD44分子是一种广泛分布的细胞表面跨膜糖蛋白,在许多方面发挥着重要的生理和病理作用,其中之一就是CD44分子参与血细胞的生成,在血细胞分化成熟的过程中发挥着关键性作用。CD44与一些特异的抗体结合后能够逆转急性髓系白血病幼稚细胞的分化阻滞,从而逆转其恶性细胞的表型,最终使肿瘤细胞的抗原性、功能和细胞生物学特征与正常分化的骨髓系细胞相一致。 展开更多
关键词 跨膜糖蛋白 抗cd44单克隆抗体 急性髓系白血病 分化 凋亡
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