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HBe(385-420)-ecdCD40L真核表达载体的构建及其融合蛋白生物活性预测 被引量：1
1
作者 张欢 吴金明 +1 位作者 陈娟 方红龙 《温州医学院学报》 CAS 2012年第2期146-150,共5页
目的:构建HBe(385-420)-ecdCD40L融合基因真核表达载体,探讨其所翻译的融合蛋白设计的合理性。方法:采用分子生物学技术将HBe(385-420)基因与CD40L胞外段(ecd)基因进行融合,构建融合基因的真核表达载体;应用生物信息学初步分析融合蛋白... 目的:构建HBe(385-420)-ecdCD40L融合基因真核表达载体,探讨其所翻译的融合蛋白设计的合理性。方法:采用分子生物学技术将HBe(385-420)基因与CD40L胞外段(ecd)基因进行融合,构建融合基因的真核表达载体;应用生物信息学初步分析融合蛋白的物理化学性质、柔性、抗原性、亲水性、表位以及二级结构等。结果:成功构建真核表达载体。通过分析,HBe(385-420)、ecdCD40L两个基因连接之后亲水性和疏水性未受影响,融合蛋白未出现新的抗原性及表位,连接链(Linker)不影响蛋白质的二级结构及融合蛋白的空间构象。结论:从生物软件分析结果可知重组体设计较合理,融合蛋白保留了HBe(385-420)和CD40L胞外段的生物学活性,为进一步研究该基因奠定了基础。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒e抗原(HBe) cd40-配体(cd40l) 生物活性预测
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表达CD40配体的溶瘤痘苗病毒(CD40L-VV)抑制结直肠癌细胞生长并增强荷瘤小鼠T细胞抗肿瘤活性 被引量：5
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作者 刘东涛 马俊文 +1 位作者 丁波 周海宁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期602-607,共6页
目的探索表达CD40配体的溶瘤痘苗病毒(CD40L-VV)对结直肠癌的抗肿瘤活性。方法通过将CD40L的基因序列整合至VV的DNA骨架中,获得CD40L-VV。通过体外感染肿瘤细胞,验证其溶瘤活性及检测CD40L的表达情况。利用CD40L-VV和单纯VV对结直肠癌... 目的探索表达CD40配体的溶瘤痘苗病毒(CD40L-VV)对结直肠癌的抗肿瘤活性。方法通过将CD40L的基因序列整合至VV的DNA骨架中,获得CD40L-VV。通过体外感染肿瘤细胞,验证其溶瘤活性及检测CD40L的表达情况。利用CD40L-VV和单纯VV对结直肠癌移植瘤模型进行治疗后,监测肿瘤生长状况,并通过流式细胞术分析肿瘤浸润T细胞的表型,细胞因子分泌水平及增殖活性来反映CD40L-VV的抗肿瘤活性。结果 CD40L-VV可有效感染肿瘤细胞并表达CD40L,细胞存活实验表明VV及CD40L-VV对肿瘤细胞存在剂量依赖的裂解能力。体内移植瘤实验结果显示,CD40L-VV较VV抑制肿瘤生长的能力更强,与VV治疗组相比,CD40L-VV治疗组肿瘤浸润T细胞具有更强的细胞因子分泌能力,更强的增殖活性及更多的记忆细胞表型。结论工程化CD40L-VV可以显著抑制结直肠癌细胞生长,增强体内T细胞的抗肿瘤活性。 展开更多
关键词 结直肠癌 溶瘤痘苗病毒(VV) 免疫疗法 cd40配体(cd40l)
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CD40L对单纯疱疹病毒2型DNA疫苗的免疫增强作用研究
3
作者 胡如西 陶薇 +4 位作者 傅婷 何卓晶 贾岚 洪艳 陈勇 《医学研究杂志》 2015年第10期29-33,37,共6页
目的研究重组质粒pc DNA3-Kan/CD40L辅佐HSV-2 DNA疫苗增强小鼠体液免疫和细胞免疫的作用效果,探讨其作为HSV-2 DNA疫苗佐剂的潜力。方法 (1)构建鼠CD40L基因的重组真核表达质粒pc DNA3-Kan/CD40L。(2)体外细胞实验:检测重组质粒p CD40... 目的研究重组质粒pc DNA3-Kan/CD40L辅佐HSV-2 DNA疫苗增强小鼠体液免疫和细胞免疫的作用效果,探讨其作为HSV-2 DNA疫苗佐剂的潜力。方法 (1)构建鼠CD40L基因的重组真核表达质粒pc DNA3-Kan/CD40L。(2)体外细胞实验:检测重组质粒p CD40L刺激小鼠外周血淋巴细胞增殖情况和脾细胞分泌IFN-γ的能力。(3)体内动物实验:48只雌性BALB/c小鼠随机分为4个免疫组p K组、pg D组、pc CD40L+pg D组和p K+pg D组。小鼠后腿肌内注射,共免疫2次,间隔3周。末次免疫3周后,每组随机取4只小鼠进行致死剂量攻毒实验验证疫苗的保护作用。ELISA检测小鼠血清抗HSV-2 Ig G抗体水平和趋化因子RANTES;流式细胞术检测全血中CD4+和CD8+T细胞百分率以及分泌IFN-γ和IL-4的T细胞的百分率;MTS法检测小鼠脾脏T细胞的增殖能力。结果 (1)体外实验结果:重组质粒pc DNA3-Kan/CD40L对小鼠外周血淋巴细胞的增殖能力和刺激脾细胞分泌IFN-γ的能力均显著大于空质粒pc DNA3-Kan(P<0.05)。(2)体内实验结果:小鼠血清抗HSV-2 Ig G水平、趋化因子RANTES、脾淋巴细胞刺激指数和外周血CD4+T细胞数和分泌IFN-γ的Th1细胞数均高于其他免疫组(P<0.05)。pc DNA3-Kan/CD40L+pg D组预防小鼠感染HSV-2效果好于其他免疫组。结论 (1)重组质粒pc DNA3-Kan/CD40L能够诱导外周血淋巴细胞增殖并刺激脾细胞分泌IFN-γ具有作为疫苗佐剂的潜力。(2)pc DNA3-Kan/CD40L可以辅助HSV-2 DNA疫苗诱导BALB/c小鼠产生特异性抗HSV-2的体液免疫和细胞免疫,具备作为HSV-2 DNA疫苗免疫佐剂的能力。 展开更多
关键词 cd40配体(cd40l) 单纯疱疹病毒2型(HSV-2)疫苗佐剂
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CD40L在肿瘤治疗中的作用
4
作者 魏枫 任秀宝 郝希山 《国外医学（免疫学分册）》 2005年第3期162-166,共5页
CD40L和CD40的相互作用在胸腺依赖的体液免疫和细胞免疫的调控中居于重要地位。研究表明,CD40L具有对肿瘤直接的生长抑制作用和对抗瘤免疫的激活作用。在对CD40L转染细胞诱导的抗肿瘤免疫的研究中,研究者们也取得了一些可喜的成果。这... CD40L和CD40的相互作用在胸腺依赖的体液免疫和细胞免疫的调控中居于重要地位。研究表明,CD40L具有对肿瘤直接的生长抑制作用和对抗瘤免疫的激活作用。在对CD40L转染细胞诱导的抗肿瘤免疫的研究中,研究者们也取得了一些可喜的成果。这些研究进一步揭示了CD40L在肿瘤免疫治疗方面的应用前景。 展开更多
关键词 CIMO cd40配体(cd40l) 肿瘤免疫治疗
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