目的探讨参苓白术散对胃癌IV期患者外周血CD4+CD25+Tregs、Foxp3 m RNA及血清细胞因子IL-10、TGF-β1的影响。方法将40例胃癌IV期患者随机分为观察组、对照组各20例。对照组予对症支持治疗,观察组对症支持治疗同时予参苓白术散治疗,治疗...目的探讨参苓白术散对胃癌IV期患者外周血CD4+CD25+Tregs、Foxp3 m RNA及血清细胞因子IL-10、TGF-β1的影响。方法将40例胃癌IV期患者随机分为观察组、对照组各20例。对照组予对症支持治疗,观察组对症支持治疗同时予参苓白术散治疗,治疗4 w后观察两组患者外周血CD4+CD25+Tregs、单核细胞Foxp3 m RNA及血清IL-10、TGF-β1浓度的变化。结果治疗后观察组患者外周血CD4+CD25+Tregs、单核细胞Foxp3 m RNA及血清IL-10、TGF-β1浓度均显著降低(P<0.05),对照组治疗后各项指标无明显变化(P>0.05),两组治疗后比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论参苓白术散能降低胃癌IV期患者外周血CD4+CD25+Tregs和单核细胞Foxp3 m RNA的表达,降低抑制性细胞因子IL-10、TGF-β1浓度,具有免疫调节作用。展开更多
目的研究职业性三氯乙烯药疹样皮炎(occupational medicamentosa-like dermatitis due to trichloroethylene,OMLDT)患者外周血调节性T细胞及T细胞亚群比例在不同病期中的动态变化特点。方法采用流式细胞术对28例OMLDT患者分别于急性期...目的研究职业性三氯乙烯药疹样皮炎(occupational medicamentosa-like dermatitis due to trichloroethylene,OMLDT)患者外周血调节性T细胞及T细胞亚群比例在不同病期中的动态变化特点。方法采用流式细胞术对28例OMLDT患者分别于急性期和临床治愈期进行外周血CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)及T细胞亚群比例检测,并与28例非接触三氯乙烯的健康对照进行比较。结果OMLDT临床治愈期CD4+CD25+Tregs比例为2.40%±0.42%,比急性期(比例0.97%±0.52%)明显增加,但仍低于健康对照组(4.77%±0.81%),差异均有统计学意义(P<0.01)。OMLDT临床治愈期的CD4+T细胞比例为43.29%±2.67%,显著高于急性期的30.57%±8.63%,差异有统计学意义(P<0.01),但与健康对照组(42.96%±2.48%)相比差异已无统计学意义(P>0.05)。OMLDT CD8+T细胞比例在临床治愈期为28.61%±5.14%,低于急性期的42.68%±13.07%,差异有统计学意义(P<0.01),但与健康对照组(28.38%±4.92%)相比差异已无统计学意义(P>0.05)。结论OMLDT患者调节性T细胞免疫紊乱,治疗后随病情好转有明显改善,提示三氯乙烯致药疹样皮炎与机体T细胞免疫调节功能紊乱有关。展开更多
肿瘤的发生是通过多种途径引起机体免疫系统调节紊乱导致的,因此抗自身抗原的免疫反应保护机理可以使肿瘤细胞免于被自身免疫系统识别。而FOXP3作为CD4^+CD25^+调节T细胞(regulatory T cells,Tregs)表面的特征性标志,可以通过下调免疫...肿瘤的发生是通过多种途径引起机体免疫系统调节紊乱导致的,因此抗自身抗原的免疫反应保护机理可以使肿瘤细胞免于被自身免疫系统识别。而FOXP3作为CD4^+CD25^+调节T细胞(regulatory T cells,Tregs)表面的特征性标志,可以通过下调免疫活化细胞因子的表达和上调Tregs相关的细胞表面分子的表达赋予CD4^+CD25^+Tregs细胞免疫抑制功能,并有效抑制机体抗肿瘤免疫反应,参与肿瘤免疫逃逸。展开更多
Background Immune inflammatory response is throughout the entire process of atherosclerosis （AS）. It was unclear whether the mechanism of mesenchymal stem cells （MSCs） transplantation for treatment of AS is involv...Background Immune inflammatory response is throughout the entire process of atherosclerosis （AS）. It was unclear whether the mechanism of mesenchymal stem cells （MSCs） transplantation for treatment of AS is involved with inflammation regulation in the plaque area. The aim of this study was to explore the effects of MSCs in the formation of atherosclerosis plaque in hypercholesterolemic apoliprotein （apo）E-/- mice. Methods ApoE-/- mice MSCs were isolated and identified. At 8 weeks of age, 30 male ApoE-/- mice were randomly divided into negative control group （Neg, n = 10）, positive control group （Pos, n = 10） and mesenchymal stem cells group （MSCs, n = 10）. MSCs were injected through caudal vein into the body of Pos and MSCs group. The plaque area of all subjects were compared, the percentage of CD4^＋CD25^＋Tregs in different tissues were analyzed by fluorescence activated cell sorter （FACS）, proliferation response of splenocytes to MSCs was detected and cytokines in the supernatant were determined by enzyme linked immunosorbent assay （ELISA）. Results Compared with controls, MSCs resulted in a significant decrease of latherosclerotic plaques size （P 〈 0.05）, and a significant increase of CD4^＋CD25^＋ regulatory T cells in spleen （P 〈 0.05）. Specific proliferation response of CD4^＋CD25^＋ regulatory T cells in splenocytes to MCSs was significantly suppressed, the superanant level of TGF-[3 and IL-10 in MSCs group were increased while IFN-γ/ decreased significantly. Conclusion MSCs play an important role in regulating the inflammatory response and significantly inhibit the formation of the atherosclerosis plaque in ApoE-/-mice.展开更多
目的探讨动脉粥样硬化性心血管疾病(ACVD)患者CD4^+CD25^+调节性T细胞(Tregs)的Kv1.3通道活性与该疾病的关系,并验证依普利酮(EPL)对动脉血管粥样硬化有逆转作用。方法收集ACVD患者(n=70)及正常人志愿者(n=20)全血样本。免疫磁珠分选外...目的探讨动脉粥样硬化性心血管疾病(ACVD)患者CD4^+CD25^+调节性T细胞(Tregs)的Kv1.3通道活性与该疾病的关系,并验证依普利酮(EPL)对动脉血管粥样硬化有逆转作用。方法收集ACVD患者(n=70)及正常人志愿者(n=20)全血样本。免疫磁珠分选外周血CD4^+CD25^+Tregs,CCK-8技术检测ELP对CD4^+CD25^+Tregs增殖抑制的影响。分组进行培养:正常人外周血的Control组、ACVD患者外周血组(ACVD组)、ACVD患者+EPL组(ACVD+EPL组)。RT-qPCR检测各组培养体系中的Kv1.3(钾通道)、KCa3.1(钙通道)和内质网钙释放激活的钙通道(CRAC)基因的表达;In-cell western blotting技术检测CD4^+CD25^+Tregs的Kv1.3通道蛋白质水平的表达。结果EPL的最适浓度为30μmol;ACVD组Kv1.3通道的mRNA和蛋白质的表达分别是正常对照组3.35倍和1.83倍(P<0.01),ACVD+EPL组Kv1.3通道的mRNA和蛋白质的相对表达分别是ACVD组62.09%(P<0.01);ACVD组KCa 3.1和CRAC通道mRNA的表达分别是正常对照组的2.18、2.22倍(P<0.01),ACVD+EPL组KCa 3.1和CRAC通道mRNA的表达是ACVD组的61.01%、76.68%(P<0.01)。结论CD4^+CD25^+Treg细胞的三种离子通道在ACVD中均有高表达,EPL可抑制Kv1.3通道的活性,推测醛固酮受体拮抗剂可能通过抑制CD4^+CD25^+Tregs上的Kv1.3通道的激活,抑制了T淋巴细胞的活性,以抑制动脉粥样硬化病变中炎症作用的发生发展。展开更多
目的探讨CD4^+CD25^+调节性T细胞(Tregs)对日本血吸虫病疫苗保护性效果的影响及其机制。方法雌性BALB/c小鼠随机分成5组,即正常对照组、感染对照组、抗CD25单克隆抗体(anti-CD25 m Ab)组、谷胱甘肽-S-转移酶(Gluthatione-S-transferase,...目的探讨CD4^+CD25^+调节性T细胞(Tregs)对日本血吸虫病疫苗保护性效果的影响及其机制。方法雌性BALB/c小鼠随机分成5组,即正常对照组、感染对照组、抗CD25单克隆抗体(anti-CD25 m Ab)组、谷胱甘肽-S-转移酶(Gluthatione-S-transferase,GST)免疫组和GST/anti-CD25 m Ab联合组。分别在感染后2、3、4、5周剖杀小鼠,收集脾细胞及培养上清,采用流式细胞术检测脾细胞中CD4^+CD25^+Tregs比例,双抗夹心ELISA法测定脾细胞培养上清中的IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-5和TGF-β水平。感染后5周杀鼠,门静脉冲虫,统计每只小鼠虫荷及每克肝脏虫卵数;肝组织石蜡切片HE染色观察虫卵肉芽肿病理变化。结果感染后5周,GST免疫组小鼠减虫率为24.98%,而GST/anti-CD25 m Ab联合组减虫率达43.13%;GST免疫组小鼠脾细胞中CD4^+CD25^+Foxp3+比例显著高于感染对照组(P<0.05),而anti-CD25 m Ab组小鼠脾细胞中CD4^+CD25^+Foxp3+比例显著低于感染对照组(P<0.01)。使用anti-CD25 m Ab后2周,GST/anti-CD25 m Ab联合组小鼠脾细胞培养上清中IL-4、IL-5、IFN-γ和IL-2含量均较其他组高;各组小鼠肝脏病理变化和脾细胞培养上清中TGF-β水平间差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 GST疫苗可引起日本血吸虫感染宿主CD4^+CD25^+Tregs明显上升,从而导致其保护性效果欠佳;anti-CD25 m Ab部分封闭CD4^+CD25^+Tregs后有利于增强日本血吸虫病疫苗的免疫保护性效果,其机制可能与Th1、Th2型免疫反应增强有关。展开更多
目的:观察益气养阴方联合化疗对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤作用,并从CD+4CD+25Treg细胞及Foxp3m RNA表达、IL-2等变化探讨其抗肿瘤机制;方法:近交系雄性C57BL/6纯系小鼠,64只,随机分为对照组、联合组、益气养阴组、化疗组4组,对照组只行...目的:观察益气养阴方联合化疗对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤作用,并从CD+4CD+25Treg细胞及Foxp3m RNA表达、IL-2等变化探讨其抗肿瘤机制;方法:近交系雄性C57BL/6纯系小鼠,64只,随机分为对照组、联合组、益气养阴组、化疗组4组,对照组只行造模观察,联合组以化疗联合益气养阴方治疗,益气养阴组只行中药治疗,化疗组只行化疗,观察各组肿瘤体积及抑瘤率,并以ELISA法测定各组血浆IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ浓度,以流式细胞术检测脾脏CD+4CD+25Treg细胞数量,以RT-PCR法测定各组小鼠脾脏Foxp3 m RNA表达;结果:联合组肿瘤体积缩小最明显,抑瘤率最高,DDP组、肺积方组体积缩小、抑瘤率相当;在给药第10、21天,DDP组、肺积方组、联合组血浆IL-2、INF-γ水平均较对照组有差异(P<0.05),其中DDP组较对照组降低(P<0.05),而联合组较对照组升高(P<0.05),DDP组较益气养阴组、联合组均降低明显(P<0.05),联合组较益气养阴组升高(P<0.05);在给药第10天,DDP组、肺积方组、联合组血浆IL-4、IL-10水平均较对照组有差异(P<0.05),其中联合组降低较DDP组、益气养阴组降低有差异(P<0.05),益气养阴组较DDP组降低有统计学差异(P<0.05);第21天DDP组、肺积方组、联合组血浆IL-4、IL-10水平均较对照组降低,降低有差异(P<0.05),但益气养阴组与DDP组比较无差异(P>0.05);在脾脏CD+4CD+25调节性T细胞比例比较中,在第10天,联合组CD+4CD+25调节性T细胞比例较对照组、DDP组、益气养阴组低下(P<0.05),而DDP组与益气养阴组CD+4CD+25调节性T细胞比例无统计学差异(P>0.05),在第21天,联合组CD+4CD+25调节性T细胞比例仍较DDP组、对照组、益气养阴组降低(P<0.05),益气养阴组较DDP组降低(P<0.05);益气养阴组、联合组组内比较,CD+4CD+25调节性T细胞比例无统计学差异(P>0.05),DDP组组内比较,CD+4CD+25调节性T细胞比例第21天较第10天升高(P<0.05);小鼠脾脏中Foxp3 m RNA表达情况:在第展开更多
文摘目的探讨参苓白术散对胃癌IV期患者外周血CD4+CD25+Tregs、Foxp3 m RNA及血清细胞因子IL-10、TGF-β1的影响。方法将40例胃癌IV期患者随机分为观察组、对照组各20例。对照组予对症支持治疗,观察组对症支持治疗同时予参苓白术散治疗,治疗4 w后观察两组患者外周血CD4+CD25+Tregs、单核细胞Foxp3 m RNA及血清IL-10、TGF-β1浓度的变化。结果治疗后观察组患者外周血CD4+CD25+Tregs、单核细胞Foxp3 m RNA及血清IL-10、TGF-β1浓度均显著降低(P<0.05),对照组治疗后各项指标无明显变化(P>0.05),两组治疗后比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论参苓白术散能降低胃癌IV期患者外周血CD4+CD25+Tregs和单核细胞Foxp3 m RNA的表达,降低抑制性细胞因子IL-10、TGF-β1浓度,具有免疫调节作用。
文摘目的研究职业性三氯乙烯药疹样皮炎(occupational medicamentosa-like dermatitis due to trichloroethylene,OMLDT)患者外周血调节性T细胞及T细胞亚群比例在不同病期中的动态变化特点。方法采用流式细胞术对28例OMLDT患者分别于急性期和临床治愈期进行外周血CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)及T细胞亚群比例检测,并与28例非接触三氯乙烯的健康对照进行比较。结果OMLDT临床治愈期CD4+CD25+Tregs比例为2.40%±0.42%,比急性期(比例0.97%±0.52%)明显增加,但仍低于健康对照组(4.77%±0.81%),差异均有统计学意义(P<0.01)。OMLDT临床治愈期的CD4+T细胞比例为43.29%±2.67%,显著高于急性期的30.57%±8.63%,差异有统计学意义(P<0.01),但与健康对照组(42.96%±2.48%)相比差异已无统计学意义(P>0.05)。OMLDT CD8+T细胞比例在临床治愈期为28.61%±5.14%,低于急性期的42.68%±13.07%,差异有统计学意义(P<0.01),但与健康对照组(28.38%±4.92%)相比差异已无统计学意义(P>0.05)。结论OMLDT患者调节性T细胞免疫紊乱,治疗后随病情好转有明显改善,提示三氯乙烯致药疹样皮炎与机体T细胞免疫调节功能紊乱有关。
文摘肿瘤的发生是通过多种途径引起机体免疫系统调节紊乱导致的,因此抗自身抗原的免疫反应保护机理可以使肿瘤细胞免于被自身免疫系统识别。而FOXP3作为CD4^+CD25^+调节T细胞(regulatory T cells,Tregs)表面的特征性标志,可以通过下调免疫活化细胞因子的表达和上调Tregs相关的细胞表面分子的表达赋予CD4^+CD25^+Tregs细胞免疫抑制功能,并有效抑制机体抗肿瘤免疫反应,参与肿瘤免疫逃逸。
基金supported by the grand from the Department of Education Project of Hubei Province to WANG Zhi-xiao (B20102108)
文摘Background Immune inflammatory response is throughout the entire process of atherosclerosis （AS）. It was unclear whether the mechanism of mesenchymal stem cells （MSCs） transplantation for treatment of AS is involved with inflammation regulation in the plaque area. The aim of this study was to explore the effects of MSCs in the formation of atherosclerosis plaque in hypercholesterolemic apoliprotein （apo）E-/- mice. Methods ApoE-/- mice MSCs were isolated and identified. At 8 weeks of age, 30 male ApoE-/- mice were randomly divided into negative control group （Neg, n = 10）, positive control group （Pos, n = 10） and mesenchymal stem cells group （MSCs, n = 10）. MSCs were injected through caudal vein into the body of Pos and MSCs group. The plaque area of all subjects were compared, the percentage of CD4^＋CD25^＋Tregs in different tissues were analyzed by fluorescence activated cell sorter （FACS）, proliferation response of splenocytes to MSCs was detected and cytokines in the supernatant were determined by enzyme linked immunosorbent assay （ELISA）. Results Compared with controls, MSCs resulted in a significant decrease of latherosclerotic plaques size （P 〈 0.05）, and a significant increase of CD4^＋CD25^＋ regulatory T cells in spleen （P 〈 0.05）. Specific proliferation response of CD4^＋CD25^＋ regulatory T cells in splenocytes to MCSs was significantly suppressed, the superanant level of TGF-[3 and IL-10 in MSCs group were increased while IFN-γ/ decreased significantly. Conclusion MSCs play an important role in regulating the inflammatory response and significantly inhibit the formation of the atherosclerosis plaque in ApoE-/-mice.
文摘目的探讨动脉粥样硬化性心血管疾病(ACVD)患者CD4^+CD25^+调节性T细胞(Tregs)的Kv1.3通道活性与该疾病的关系,并验证依普利酮(EPL)对动脉血管粥样硬化有逆转作用。方法收集ACVD患者(n=70)及正常人志愿者(n=20)全血样本。免疫磁珠分选外周血CD4^+CD25^+Tregs,CCK-8技术检测ELP对CD4^+CD25^+Tregs增殖抑制的影响。分组进行培养:正常人外周血的Control组、ACVD患者外周血组(ACVD组)、ACVD患者+EPL组(ACVD+EPL组)。RT-qPCR检测各组培养体系中的Kv1.3(钾通道)、KCa3.1(钙通道)和内质网钙释放激活的钙通道(CRAC)基因的表达;In-cell western blotting技术检测CD4^+CD25^+Tregs的Kv1.3通道蛋白质水平的表达。结果EPL的最适浓度为30μmol;ACVD组Kv1.3通道的mRNA和蛋白质的表达分别是正常对照组3.35倍和1.83倍(P<0.01),ACVD+EPL组Kv1.3通道的mRNA和蛋白质的相对表达分别是ACVD组62.09%(P<0.01);ACVD组KCa 3.1和CRAC通道mRNA的表达分别是正常对照组的2.18、2.22倍(P<0.01),ACVD+EPL组KCa 3.1和CRAC通道mRNA的表达是ACVD组的61.01%、76.68%(P<0.01)。结论CD4^+CD25^+Treg细胞的三种离子通道在ACVD中均有高表达,EPL可抑制Kv1.3通道的活性,推测醛固酮受体拮抗剂可能通过抑制CD4^+CD25^+Tregs上的Kv1.3通道的激活,抑制了T淋巴细胞的活性,以抑制动脉粥样硬化病变中炎症作用的发生发展。
文摘目的探讨CD4^+CD25^+调节性T细胞(Tregs)对日本血吸虫病疫苗保护性效果的影响及其机制。方法雌性BALB/c小鼠随机分成5组,即正常对照组、感染对照组、抗CD25单克隆抗体(anti-CD25 m Ab)组、谷胱甘肽-S-转移酶(Gluthatione-S-transferase,GST)免疫组和GST/anti-CD25 m Ab联合组。分别在感染后2、3、4、5周剖杀小鼠,收集脾细胞及培养上清,采用流式细胞术检测脾细胞中CD4^+CD25^+Tregs比例,双抗夹心ELISA法测定脾细胞培养上清中的IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-5和TGF-β水平。感染后5周杀鼠,门静脉冲虫,统计每只小鼠虫荷及每克肝脏虫卵数;肝组织石蜡切片HE染色观察虫卵肉芽肿病理变化。结果感染后5周,GST免疫组小鼠减虫率为24.98%,而GST/anti-CD25 m Ab联合组减虫率达43.13%;GST免疫组小鼠脾细胞中CD4^+CD25^+Foxp3+比例显著高于感染对照组(P<0.05),而anti-CD25 m Ab组小鼠脾细胞中CD4^+CD25^+Foxp3+比例显著低于感染对照组(P<0.01)。使用anti-CD25 m Ab后2周,GST/anti-CD25 m Ab联合组小鼠脾细胞培养上清中IL-4、IL-5、IFN-γ和IL-2含量均较其他组高;各组小鼠肝脏病理变化和脾细胞培养上清中TGF-β水平间差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 GST疫苗可引起日本血吸虫感染宿主CD4^+CD25^+Tregs明显上升,从而导致其保护性效果欠佳;anti-CD25 m Ab部分封闭CD4^+CD25^+Tregs后有利于增强日本血吸虫病疫苗的免疫保护性效果,其机制可能与Th1、Th2型免疫反应增强有关。
文摘目的:观察益气养阴方联合化疗对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤作用,并从CD+4CD+25Treg细胞及Foxp3m RNA表达、IL-2等变化探讨其抗肿瘤机制;方法:近交系雄性C57BL/6纯系小鼠,64只,随机分为对照组、联合组、益气养阴组、化疗组4组,对照组只行造模观察,联合组以化疗联合益气养阴方治疗,益气养阴组只行中药治疗,化疗组只行化疗,观察各组肿瘤体积及抑瘤率,并以ELISA法测定各组血浆IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ浓度,以流式细胞术检测脾脏CD+4CD+25Treg细胞数量,以RT-PCR法测定各组小鼠脾脏Foxp3 m RNA表达;结果:联合组肿瘤体积缩小最明显,抑瘤率最高,DDP组、肺积方组体积缩小、抑瘤率相当;在给药第10、21天,DDP组、肺积方组、联合组血浆IL-2、INF-γ水平均较对照组有差异(P<0.05),其中DDP组较对照组降低(P<0.05),而联合组较对照组升高(P<0.05),DDP组较益气养阴组、联合组均降低明显(P<0.05),联合组较益气养阴组升高(P<0.05);在给药第10天,DDP组、肺积方组、联合组血浆IL-4、IL-10水平均较对照组有差异(P<0.05),其中联合组降低较DDP组、益气养阴组降低有差异(P<0.05),益气养阴组较DDP组降低有统计学差异(P<0.05);第21天DDP组、肺积方组、联合组血浆IL-4、IL-10水平均较对照组降低,降低有差异(P<0.05),但益气养阴组与DDP组比较无差异(P>0.05);在脾脏CD+4CD+25调节性T细胞比例比较中,在第10天,联合组CD+4CD+25调节性T细胞比例较对照组、DDP组、益气养阴组低下(P<0.05),而DDP组与益气养阴组CD+4CD+25调节性T细胞比例无统计学差异(P>0.05),在第21天,联合组CD+4CD+25调节性T细胞比例仍较DDP组、对照组、益气养阴组降低(P<0.05),益气养阴组较DDP组降低(P<0.05);益气养阴组、联合组组内比较,CD+4CD+25调节性T细胞比例无统计学差异(P>0.05),DDP组组内比较,CD+4CD+25调节性T细胞比例第21天较第10天升高(P<0.05);小鼠脾脏中Foxp3 m RNA表达情况:在第
