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人参皂甙对CD_(34)^+造血干/祖细胞的增殖和分化作用 被引量：43
1
作者 金锦梅 Tao Helen +1 位作者 高瑞兰 BH Chong 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第9期673-676,共4页
目的 :探索人参皂甙 (GS)对CD34 +造血干 /祖细胞的刺激增殖和诱导分化作用。方法 :采用免疫磁珠法 (MACS)分离纯化脐血CD34 +细胞 ,在造血细胞半固体和液体培养体系中加入不同浓度的GS ,检测对CD34 +造血干 /祖细胞增殖 ,形成祖细胞集... 目的 :探索人参皂甙 (GS)对CD34 +造血干 /祖细胞的刺激增殖和诱导分化作用。方法 :采用免疫磁珠法 (MACS)分离纯化脐血CD34 +细胞 ,在造血细胞半固体和液体培养体系中加入不同浓度的GS ,检测对CD34 +造血干 /祖细胞增殖 ,形成祖细胞集落的提高率 ,并用流式细胞仪检测液体培养后细胞表面标记的变化。结果 :GS( 5～ 50 μg/ml)能提高BFU E、CFU E、CFU GM、CFU GEMM集落产率 ( % ) ,分别为87 6± 2 6、63 3± 2 8、58 0± 3 1和 96 3± 5 5(均P <0 0 1)。GS 2 5μg/ml是液体培养刺激CD34 +细胞体外增殖的最佳浓度。GS诱导细胞 14天后 ,细胞表面表达CD33+细胞随GS的浓度升高而增加 ,在GS 50 μg/ml时以CD15+细胞数最高 ,CD71+细胞和G A+细胞数仅在 2 5μg/ml时高于未加GS的对照组。结论 :GS不但能促进CD34 +造血干 /祖细胞的增殖 ,并且能诱导定向分化 ,具有类生长因子和协同生长因子的作用。 展开更多
关键词 人参皂甙 ^cd34^+细胞 增殖 分化 造血干细胞
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CD34^+细胞的心肌细胞分化潜能研究 被引量：24
2
作者 陈运贤 钟雪云 +5 位作者 欧瑞明 陈惠珍 罗伟琼 钟立业 邢达 韩忠朝 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期117-119,共3页
目的 :了解粒细胞集落刺激因子 (G -CSF)动员的CD3 4 +细胞的心肌细胞分化潜能。方法 :用异丙肾上腺素 (ISO)复制急性心肌梗死大鼠动物模型 ,于 3h后用G -CSF动员骨髓造血干细胞进行心肌梗死动物模型的“自身干细胞移植” ,用免疫组化... 目的 :了解粒细胞集落刺激因子 (G -CSF)动员的CD3 4 +细胞的心肌细胞分化潜能。方法 :用异丙肾上腺素 (ISO)复制急性心肌梗死大鼠动物模型 ,于 3h后用G -CSF动员骨髓造血干细胞进行心肌梗死动物模型的“自身干细胞移植” ,用免疫组化和HE染色方法检测动物模型心梗区的CD3 4 +细胞浸润以及心肌细胞再生情况。结果 :用ISO后 2 4h ,G -CSF处理组大鼠心梗区可见大量CD3 4 +单个核细胞浸润 ,并有CD3 4 +的新生心肌细胞生长 ,2周后疤痕组织不明显 ;而对照组心梗坏死区有大量以中性粒细胞为主的炎症细胞浸润 ,无CD3 4 +细胞浸润及新生心肌细胞生长 ,2周后出现较大量的疤痕组织。结论 :G -CSF动员CD3 4 +细胞具有向心肌细胞分化的潜能 ,用G -CSF动员造血干细胞的“干细胞自身移植” ,可治疗急性心肌梗死。 展开更多
关键词 ^cd34^+细胞 心肌梗死 细胞分化 粒细胞集落刺激因子
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异基因造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病151例危险因素分析 被引量：29
3
作者 陈瑶 陆道培 +11 位作者 刘开彦 董陆佳 任汉云 黄晓军 陈欢 刘代红 江倩 陈育红 许兰平 张耀臣 路瑾 高志勇 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期74-77,共4页
目的探讨异基因造血干细胞移植(alloHSCT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发生及其危险因素。方法总结2001年11月至2004年1月在我院治疗的150例患者151次alloHSCT的临床资料。分析了受者年龄,供受者性别,供受者性别异同,供受者血型异同,... 目的探讨异基因造血干细胞移植(alloHSCT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发生及其危险因素。方法总结2001年11月至2004年1月在我院治疗的150例患者151次alloHSCT的临床资料。分析了受者年龄,供受者性别,供受者性别异同,供受者血型异同,患者移植前巨细胞病毒(CMV)、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒血清学检测,疾病种类、状态、病程,干细胞来源,HLA配型,预处理方案[含全身照射(TBI)或不含TBI],GVHD预防方案[含抗胸腺细胞球蛋白(ATG)或不含ATG],回输CD34+细胞、CD3+细胞数量,早期植活(≤14天或>14天)及移植早期感染(除外CMV感染)等因素与aGVHD发生的关系。结果60例患者发生Ⅰ~Ⅳ度aGVHD,累积发生率40.2%,发生时间为第1天至第85天,中位时间为第21天,其中43例发生Ⅰ~Ⅱ度aGVHD,17例发生Ⅲ~Ⅳ度aGVHD。完全缓解率为63.6%。发生Ⅰ~Ⅱ度aGVHD的患者早期生存率>90%,发生Ⅲ~Ⅳ度aGVHD的患者早期生存率为46%,两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。单因素分析显示受者年龄,供受者性别,供受者性别差异,供受者血型差异,疾病诊断,疾病状态,疾病病程,预处理方案(含TBI或不含TBI),移植物来源,回输CD34+细胞、CD3+细胞数量,早期植入以及移植早期感染均与aGVHD的发生无显著相关性(P>0.05)。多因素分析(Coxregression)确定HLA配型? 展开更多
关键词 GVHD 患者 受者 急性移植物抗宿主病 异基因造血干细胞移植 HLA配型 危险因素 细胞数量 疾病状态 ^cd34^+细胞
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肝细胞生长因子诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的实验研究 被引量：22
4
作者 张刚庆 方驰华 池达智 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期716-720,共5页
目的探讨成年大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)在体外是否可定向诱导分化为肝细胞及其方法。方法采用梯度离心法,分离纯化SD大鼠的MSCs,流式细胞仪检测和碱性磷酸酶染色鉴定细胞类型。根据培养基中肝细胞生长因子(HGF)浓度不同,将MSCs分为4... 目的探讨成年大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)在体外是否可定向诱导分化为肝细胞及其方法。方法采用梯度离心法,分离纯化SD大鼠的MSCs,流式细胞仪检测和碱性磷酸酶染色鉴定细胞类型。根据培养基中肝细胞生长因子(HGF)浓度不同,将MSCs分为4组进行诱导分化:A组0ng/ml,B组10ng/ml,C组20ng/ml,D组40ng/ml。倒置显微镜连续观察细胞分化过程的形态学变化。于培养的1,3,7,14,21,28d,分别以逆转录聚合酶链反应(RTPCR)和细胞免疫组化检测各组细胞甲胎蛋白(AFP)、细胞角蛋白18(CK18)和白蛋白的基因和蛋白表达。结果分离纯化的SD大鼠MSCs的表面标志为CD29+,CD44+,CD34-,CD45-和CD90+,细胞的碱性磷酸酶染色阴性,细胞纯度达98%以上。C组与D组的MSCs,于培养第7天出现AFP基因表达,第14天表达增强,第28天表达减弱;第14天始出现白蛋白、CK18基因表达,而后持续。B组和A组在培养过程中,未出现AFP、CK18和白蛋白的表达。C组与D组MSCs的AFP细胞免疫组化染色培养第7天即出现阳性,第14天白蛋白和CK18免疫组化染色阳性。A组和B组的MSCs的AFP、白蛋白和CK18的免疫组化染色均阴性。结论成年大鼠MSCs在较高浓度的HGF的诱导下,可分化为肝细胞。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 肝细胞生长因子 实验研究 细胞分化 逆转录聚合酶链反应 免疫组化染色 MSCs 流式细胞仪检测 碱性磷酸酶染色 CK18 定向诱导分化 免疫组化检测 ^cd29^+ ^cd44^+ ^cd34^- 成年大鼠 SD大鼠 分离纯化 基因表达
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人参五味子汤预防小鼠哮喘的作用机制研究 被引量：21
5
作者 曲政海 刘小梅 +1 位作者 谢宁 林荣军 《中国中西医结合急救杂志》 CAS 2008年第4期201-204,共4页
目的探讨中药人参五味子汤预防小鼠哮喘的作用及其机制。方法40只小鼠被随机分为正常对照组(A)、模型组(B)、布地奈德治疗组(C)、人参五味子汤治疗组(D)、人参五味子汤和布地奈德联合治疗组(E)5组,每组8只。用卵白蛋白致敏建立哮喘小鼠... 目的探讨中药人参五味子汤预防小鼠哮喘的作用及其机制。方法40只小鼠被随机分为正常对照组(A)、模型组(B)、布地奈德治疗组(C)、人参五味子汤治疗组(D)、人参五味子汤和布地奈德联合治疗组(E)5组,每组8只。用卵白蛋白致敏建立哮喘小鼠模型;分别给予布地奈德、人参五味子汤对哮喘小鼠进行早期治疗4周。观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞学变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定BALF中白细胞介素-4(IL-4)与γ-干扰素(IFN-γ);免疫组化测定肺组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1);原位杂交结合免疫组化测定骨髓细胞表达IL-5Ra mRNA^+的CD34^+细胞。结果与B组比较,C、D、E组BALF中细胞总数、中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸粒细胞比例及IL-4、IL-4/IFN-γ比值均显著降低,IFN-γ升高;肺组织中MMP-9、TIMP-1、MMP-9/TIMP-1比值亦显著降低(P均<0.01);C组和E组IFN-γ较D组升高,其余指标均较D组明显下降(P<0.05或P<0.01),而C组与E组间差异无统计学意义。与A组比较,B、C、D、E组小鼠骨髓CD34^+细胞数和IL-5RαmRNA^+的CD34^+细胞比例均明显升高(P<0.05或P<0.01);C组与B组差异无统计学意义,D组和E组较B组显著降低(P均<0.01)。结论人参五味子汤可通过影响小鼠骨髓CD34^+造血细胞和IL-5RαmRNA^+的CD34^+造血细胞向嗜酸粒细胞的转化和对气道炎症过程等途径,影响小鼠哮喘的病理过程。 展开更多
关键词 哮喘 小鼠 白细胞介素 Γ-干扰素 基质金属蛋白酶 金属蛋白酶组织抑制剂 ^cd34^+细胞
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脐血CD_(34)^+细胞和外周血单核细胞两种来源的树突状细胞特性的比较研究 被引量：14
6
作者 王晓 裴雪涛 +2 位作者 李梁 冯凯 白慈贤 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第11期583-585,共3页
目的　体外大量扩增和纯化具有典型表型、形态和功能的树突状细胞（ＤＣ），以进行相关基础研究和临床应用。方法　采用免疫磁珠法分离脐血ＣＤ３４ ＋ 细胞及外周血去Ｂ、去Ｔ淋巴细胞的单个核细胞（ 单核细胞） ，然后以ＧＭＣＳＦ... 目的　体外大量扩增和纯化具有典型表型、形态和功能的树突状细胞（ＤＣ），以进行相关基础研究和临床应用。方法　采用免疫磁珠法分离脐血ＣＤ３４ ＋ 细胞及外周血去Ｂ、去Ｔ淋巴细胞的单个核细胞（ 单核细胞） ，然后以ＧＭＣＳＦ、ＩＬ４、ＴＮＦα、Ｆｌｔ３ 配基（ＦＬ）、ＳＣＦ等不同的细胞因子配伍，分别诱生ＤＣ，通过流式细胞仪、电镜、光镜分析其特性，同时检测其刺激同种Ｔ细胞增殖的能力。结果　脐血与外周血诱生ＤＣ的方案不同，由脐血ＣＤ３４＋ 细胞诱导ＤＣ 时，ＧＭＣＳＦ＋ ＴＮＦα＋ ＳＣＦ＋ ＦＬ 组合可使ＣＤ１ａ＋ 细胞比例增至（２７ ．１８ ±１－５６）％ ，明显高于单独应用ＧＭＣＳＦ组［（０．６５±０ ．３８）％ ］ 。外周血单核细胞诱导的ＤＣ，则ＧＭＣＳＦ＋ 高剂量ＩＬ４（１０００ Ｕ／ｍｌ） 组合效率最高，诱生的ＣＤ１ａ ＋ 细胞可达（２１ ．８０ ±０－３２） ％ 。两种来源的ＤＣ在表型及形态上差异无显著性，两者同样具有刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力。结论　从脐血和外周血均可诱生ＤＣ，根据应用目的的不同对其进行选择，这为ＤＣ用于临床治疗选择不同细胞来源提供了实验基础。 展开更多
关键词 树突细胞 造血干细胞 单核细胞 脐血 ^cd34^+细胞
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脐血间充质干细胞的生物学特征及其对造血干/祖细胞体外扩增的支持作用 被引量：14
7
作者 王丽娟 张叶萍 +6 位作者 王金福 吴亦凡 项盈 解纯刚 贾冰冰 Jenny Harrington IanK. McNiece 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期65-68,共4页
目的探讨脐血间充质干细胞(MSC)的生物学特征及其对造血干/祖细胞体外扩增的支持作用。方法用液体培养法分离脐血贴壁细胞,采用ELISA方法检测贴壁细胞条件培养液中细胞因子的表达;用流式细胞术分析其免疫表型特征;在成软骨细胞诱导培养... 目的探讨脐血间充质干细胞(MSC)的生物学特征及其对造血干/祖细胞体外扩增的支持作用。方法用液体培养法分离脐血贴壁细胞,采用ELISA方法检测贴壁细胞条件培养液中细胞因子的表达;用流式细胞术分析其免疫表型特征;在成软骨细胞诱导培养条件下诱导细胞分化,并用RTPCR方法检测分化后细胞原胶原Ⅱ型基因的表达。采用分阶段共培养方法观察脐血贴壁细胞对CD34+细胞体外扩增的支持作用。结果脐血单个核细胞纤维样细胞集落形成率为(3.5±0.7)/106。脐血MSC体外至少可以扩增15代。没有分化的脐血MSC表型为CD13、CD29、CD90、CD105、CD166、SH2、SH3和SH4阳性,CD45、CD34和CD14阴性;脐血MSC培养上清中干细胞因子、IL6和肿瘤坏死因子α检测阳性。在成软骨细胞诱导培养基培养条件下,脐血MSC原胶原Ⅱ型基因mRNA表达阳性。脐血MSC与CD34+细胞共掊养14d,CD34+细胞扩增率高于未共培养组4倍。结论脐血MSC具有类似于成体骨髓MSC的特征,对造血干细胞增殖有明显的支持作用。 展开更多
关键词 脐血 体外扩增 ^cd34^+细胞 造血干/祖细胞 阳性 间充质干细胞 贴壁细胞 SH3 共培养 成体
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四色流式细胞术分析骨髓增生异常综合征原始细胞免疫表型 被引量：14
8
作者 吴雨洁 李建勇 +3 位作者 仇海荣 肖冰 张建富 宋君红 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期50-53,共4页
为了研究骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓原始细胞免疫表型特征,应用四色流式细胞术对常规设门及二次设门策略选取的29例MDS患者的骨髓细胞悬液中,CD34+细胞进行免疫表型分析。结果表明:①随着MDS的进展(RA/RAS→RAEB→RAEB-T),根据CD4... 为了研究骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓原始细胞免疫表型特征,应用四色流式细胞术对常规设门及二次设门策略选取的29例MDS患者的骨髓细胞悬液中,CD34+细胞进行免疫表型分析。结果表明:①随着MDS的进展(RA/RAS→RAEB→RAEB-T),根据CD45/SSC图中选取的原始细胞群中,CD34+细胞比例逐渐增高,分别为8.0%、46.4%、76.8%,各亚型之间差别有显著意义(P<0.05)。②在CD45vsSSC散点图上,设门所取的原始细胞抗原表达随着RA/RAS→RAEB→RAEBT的进展,HLA-DR、CD13、CD33、CD117表达逐渐增高,CD15表达逐渐减低,差别均有显著意义(P<0.05)。③在CD45vsCD34散点图上二次设门取CD34+原始细胞行抗原表达的分析,同样异常表达HLA-DR及髓系抗原CD13、CD33和CD117,比例高于常规分析法(P<0.05),CD15比例减低,在RA/RAS中CD13、CD33、CD117和HLA-DR的表达较常规分析的原始细胞比例明显增高(P<0.05),相关抗原的表达率在各亚型间差别无显著意义(P>0.05)。结论:常规设门法能反映MDS疾病的进展,而二次设门策略则更能反映MDS原始细胞的生物学特征,CD34的异常表达代表原始细胞的不成熟性和异质性,在临床高度怀疑但形态学和细胞遗传学不能诊断时,原始细胞免疫分型对MDS的诊断更具意义。 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合征 免疫表型 四色流式细胞术 ^cd34^+细胞
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黄芪、三七促进骨髓干细胞体外转化并扩增血管内皮前体细胞(EPC)作用的研究 被引量：12
9
作者 杨博华 朱陵群 +2 位作者 张娟子 牛福玲 崔巍 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第22期1761-1763,共3页
目的:探讨黄芪、三七对骨髓干细胞体外转化并扩增EPC的促进作用及其可能的机制。方法:常规采集下肢缺血患者骨髓血,密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞,不同条件下贴壁扩增细胞。镜下细胞的形态学观察,流式细胞仪检测CD3+4细胞的百分比... 目的:探讨黄芪、三七对骨髓干细胞体外转化并扩增EPC的促进作用及其可能的机制。方法:常规采集下肢缺血患者骨髓血,密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞,不同条件下贴壁扩增细胞。镜下细胞的形态学观察,流式细胞仪检测CD3+4细胞的百分比。结果:细胞呈梭形,束状排列,间杂有少量圆形细胞。与对照组相比,黄芪中、低剂量组,三七中、高剂量组CD3+4细胞的百分比均显著增加。结论:黄芪、三七能促进EPC的转化和增殖。 展开更多
关键词 黄芪 三七 骨髓干细胞 ^cd34^+细胞 血管内皮前体细胞
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Cobe Spectra与Fenwal CS 3000 Plus血细胞分离器外周血造血干/祖细胞的采集效能比较 被引量：13
10
作者 杨申淼 刘开彦 陆道培 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期245-249,共5页
为了评价Cobe Spectra(Version 6.1)和Fenwal CS 3000 Plus两种血细胞分离机在造血干／祖细胞采集中的 采集效能,对36人64次外周血造血干／祖细胞的采集进行了回顾性分析。20人42次使用Cobe Spectra采集,16人 22次使用Fenwal CS 3000 P... 为了评价Cobe Spectra(Version 6.1)和Fenwal CS 3000 Plus两种血细胞分离机在造血干／祖细胞采集中的 采集效能,对36人64次外周血造血干／祖细胞的采集进行了回顾性分析。20人42次使用Cobe Spectra采集,16人 22次使用Fenwal CS 3000 Plus采集。对CD34+细胞采集量、采集效率以及红细胞与血小板的采集量进行比较。结 果表明:Cobe Spectra和Fenwal CS 3000 Plus在CD34+细胞采集量和采集效率上无显著差异。CD34+细胞采集量 与供者白细胞、单核细胞、造血祖细胞、CD34+细胞的动员情况呈正相关,在多因素stepwise线性回归模型中,采集 前外周血干／祖细胞浓度是唯一有意义的影响因素。Fenwal CS 3000 Plus的采集效率与外周血单核细胞量呈负相 关。Fenwal CS 3000 Plus对红细胞的收集量显著高于Cobe Spectra,并且采集后供者外周血血小板降低程度较Cobe Spectra更严重。结论:Cobe Spectra(Version 6.1)和Fenwal CS 3000 Plus在CD34+细胞的采集能力上无显著差别。 当外周血单核细胞数量高,或是血型不合移植的及血小板减少的供者,推荐使用Cobe Spectra血细胞分离机。 展开更多
关键词 血细胞分离机 外周血造血干细胞 COBE SPECTRA Fenwal CS 3000 PLUS ^cd34^+细胞 采集效率
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人参二醇促骨髓CD34^+细胞增殖和分化的研究 被引量：12
11
作者 方桂伦 高瑞兰 +1 位作者 林筱洁 金锦梅 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期776-779,共4页
本研究探讨人参二醇(PDS)对正常人骨髓CD34+细胞的促进增殖和诱导分化作用。用吸附单克隆抗体的免疫磁珠技术从正常人骨髓分离出CD34+细胞,采用琼脂半固体多向祖细胞集落(CFU-Mix)培养方法观察PDS对CD34+细胞的增殖作用;用液体培养使CD... 本研究探讨人参二醇(PDS)对正常人骨髓CD34+细胞的促进增殖和诱导分化作用。用吸附单克隆抗体的免疫磁珠技术从正常人骨髓分离出CD34+细胞,采用琼脂半固体多向祖细胞集落(CFU-Mix)培养方法观察PDS对CD34+细胞的增殖作用;用液体培养使CD34+细胞增殖,并向红系、粒系定向生长,用流式细胞仪分析PDS诱导后细胞表面标记变化。结果显示:免疫磁珠分离CD34+细胞的获得率占骨髓有核细胞(MNC)的(1.0±0.15)%;活细胞比例占(95.6±1.2)%,CD34+细胞富集度达(86.8±2.8)%。中浓度PDS(25mg/L)能够有效地促进CD34+细胞增殖,生成CFU-Mix集落,提高率为(56.3±3.5)%,与对照相比较有显著差异(p<0.01)。液体培养生成粒系、红系细胞的数量明显增高,与对照相比差异有显著性,提高率分别为(35.6±3.2)%和(22.3±2.1)%,与对照相比差异有显著性(p<0.01),且呈剂量依赖性。经PDS诱导14天后,细胞表面分化标记明显增高,CD33+细胞在PDS50mg/L时最高,CD71+细胞在25mg/L时最高,G-A+细胞在10mg/L时最高,而CD15+细胞数量无明显变化。结论:PDS不但促进CD34+细胞增殖,且能诱导其定向分化,提示PDS具有类似造血生长因子和协同生长因子的效应。 展开更多
关键词 人参二醇 cd34+细胞 细胞增殖 细胞分化
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IL-12、IL-15对急性髓系白血病患者骨髓来源CD34+白血病细胞转化为NK细胞作用研究 被引量：12
12
作者 李焱 叶敬伟 郭晓玲 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2019年第1期32-37,共6页
目的应用细胞因子组合体外诱导CD34+白血病细胞转化为自然杀伤(NK)细胞,探讨白介素(IL)-12、IL-15对NK细胞分化增殖、细胞活性、细胞毒作用以及Granzyme B、TNF-α和IFN-γ基因表达的作用。方法提取26例2016年8月至2017年11月初治高白... 目的应用细胞因子组合体外诱导CD34+白血病细胞转化为自然杀伤(NK)细胞,探讨白介素(IL)-12、IL-15对NK细胞分化增殖、细胞活性、细胞毒作用以及Granzyme B、TNF-α和IFN-γ基因表达的作用。方法提取26例2016年8月至2017年11月初治高白细胞血症急性髓系白血病患者骨髓单个核细胞(BM-MNC),应用A组(SCF、IL-7、IL-12、IL-15)、B组(SCF、IL-7、IL-2、IL-15)两组细胞因子组合分别体外诱导分化5周,流式细胞术检测NK细胞比例及活化标志,实时定量PCR(QPCR)检测两组NK细胞Granzyme B、TNF-α、IFN-γ等基因的表达水平; CCK-8法分别检测两组NK细胞对患者来源白血病细胞和K562细胞的杀伤率。结果 A组NK细胞比例为(71. 22±2. 25)%,显著高于B组的(56. 32±3. 97)%(P <0. 05)。A组细胞增殖倍数与B组比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。A组NK细胞活化标志CD69+、NKp46+、NKG2D+NK细胞比例分别为(70. 72±3. 62)%、(70. 30±3. 45)%、(72. 75±3. 89)%,均显著高于B组的(59. 98±2. 86)%、(60. 38±2. 84)%和(62. 30±4. 25)%(P <0. 05)。Granzyme B、TNF-α和IFN-γ基因的表达水平较诱导前患者BM-MNC显著升高,A组上述基因表达水平分别为13. 36±1. 54、9. 38±0. 51和6. 26±0. 25,均显著高于B组的9. 82±1. 21、7. 06±0. 52和4. 28±0. 23(P <0. 05)。在效靶比为10∶1时,A组NK细胞对K562细胞和患者来源白血病细胞的杀伤率分别为(62. 20±2. 36)%和(70. 78±2. 54)%,均显著高于B组的(56. 77±3. 81)%和(62. 95±1. 94)%(P <0. 05);且相同效靶比时A、B两组NK细胞对患者来源白血病细胞的杀伤率显著高于K562细胞(P <0. 05)。结论 CD34+白血病细胞可在体外诱导分化为NK细胞,且具有杀伤活性。联合应用IL-12、1L-15细胞因子组合能够诱导分化的NK细胞活性,提高对白血病细胞的杀伤率以及Granzyme B、TNF-α和IFN-γ基因表达水平,且诱导分化的NK细胞对白血病细胞的杀伤具有同体特异性。 展开更多
关键词 急性髓细胞白血病(AML) 白介素-12(IL-12) 白介素-15(IL-15) ^cd34^+细胞 自然杀伤(NK)细胞
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富氢水对创伤性脑损伤大鼠脑创伤区CD34表达的影响 被引量：12
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作者 刘颖 兰青 +3 位作者 王迪芬 陈先俊 袁佳 张海玲 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期260-264,共5页
目的观察富氢水对创伤性脑损伤（TBI）大鼠创伤周围脑组织CD34表达及新血管生成的影响。方法将54只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术（Sham）组、创伤组（TBI组）及创伤＋富氢水组（TBI＋HW组）3组，每组再按伤后不同时间点分为1... 目的观察富氢水对创伤性脑损伤（TBI）大鼠创伤周围脑组织CD34表达及新血管生成的影响。方法将54只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术（Sham）组、创伤组（TBI组）及创伤＋富氢水组（TBI＋HW组）3组，每组再按伤后不同时间点分为1、3、7d3个亚组，每个亚组6只。采用改良Feencv自由落体撞击法制作脑外伤模型；Sham组开颅窗后不给予颅脑撞击。TBI＋HW组于制模后立即腹腔注射富氢水5mL／kg，之后每日腹腔注射1次，直至处死；Sham组和TBI组均给予等量生理盐水。于伤后相应时间点进行神经损伤评分（NSS）；断头处死大鼠，取创伤边缘3mm内脑组织，苏木素-伊红（HE）染色后光镜下观察创伤周围脑组织病理学改变；采用免疫组化法观察CD34^＋细胞表达，以反映创伤周围脑组织新生毛细血管芽增生情况；采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测创伤周围脑组织CD34蛋白表达。结果Sham组各时间点NSS评分均为0；TBI组和TBI＋HW组大鼠伤后NSS评分随时间延长逐渐降低，以TBI＋HW组降低更为显著，3d、7d NSS评分均显著低于TBI组（分：3d为8．67±0．52比11．56±1．94，7d为7．33±0．52比8．17±0．98，均P〈0．05）。光镜下显示，Sham组大鼠脑组织形态正常；TBI组伤后脑组织出血、坏死明显，创伤周围脑组织水肿，有大量变性坏死的神经细胞和炎性细胞浸润，以伤后3d最为显著；TBI＋HW组水肿区范围较TBI组稍有缩小，周围水肿稍有减轻。免疫组化显示，Sham组仅有极少量新生毛细血管增生；TBI组随伤后时间延长，创伤周围脑组织新生毛细血管增生逐渐增多；TBI＋HW组新生毛细血管增生更为显著，伤后3d和7d新生毛细血管数明显多于TBI组（个／HP：3d为10．59±1．88比8．61±1．22，7d为23．20±3．16比17．01±2．64，均P〈0．05）。Western Blot显示，与Sham组比较，TBI组伤后各� 展开更多
关键词 脑损伤 创伤性 富氢水 血管生成 ^cd34^+细胞
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骨髓增生异常综合征患者骨髓细胞周期及CD34^+细胞增殖特征的研究 被引量：10
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作者 施均 邵宗鸿 +11 位作者 刘鸿 贾海蓉 孙娟 白洁 吴玉红 井丽萍 何广胜 曹燕然 王秀丽 梅峰 郝玉书 杨天楹 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期641-644,共4页
目的　探讨骨髓增生异常综合征 (MDS)患者骨髓细胞周期分布及CD34+ 细胞增殖特征。方法　碘化丙锭细胞核染色分析MDS、MDS转化的急性髓系白血病 (MDS AML)和原发性AML患者骨髓G0 /G1期、S期和G2 /M期细胞比例 ;免疫荧光双标法分析 3组... 目的　探讨骨髓增生异常综合征 (MDS)患者骨髓细胞周期分布及CD34+ 细胞增殖特征。方法　碘化丙锭细胞核染色分析MDS、MDS转化的急性髓系白血病 (MDS AML)和原发性AML患者骨髓G0 /G1期、S期和G2 /M期细胞比例 ;免疫荧光双标法分析 3组患者骨髓CD34+ 细胞中增殖性抗原Ki6 7的表达。结果　与正常组相比 ,MDS患者和原发性AML患者骨髓单个核细胞 (BMM NC)G0 /G1期细胞比例呈明显增高趋势 [(92 .4 8± 4 .4 8) %、(96 .71± 2 .75 ) %对 (86 .94± 6 .77) % ](P<0 .0 5 ) ,而MDS组与正常组相比 ,S期和G2 /M期比例呈明显降低趋势 [(6 .79± 3.98) %、(0 .86±0 .82 ) %对 (11.97± 7.0 0 ) %、(1.10± 0 .98) % ](P值均 <0 .0 5 )。MDS AML患者与原发性AML相比 ,G0 /G1期细胞为 (91.16± 7.0 9) %对 (96 .71± 2 .75 ) % ,S期为 (7.90± 6 .70 ) %对 (2 .87± 2 .4 9) %、G2 /M期为 (0 .96± 0 .99) %对 (0 .4 3± 0 .4 2 ) % ,S +G2 /M期为 (8.84± 7.0 9) %对 (3.34± 2 .83) % (P值均 <0 .0 5 )。MDS患者骨髓CD34+ Ki6 7+ 细胞明显高于正常组 [(1.13± 1.10 ) %对 (0 .2 4±0 .2 2 ) % ](P <0 .0 1) ,MDS低危组患者CD34+ Ki6 7+ 细胞为 (0 .5 4± 0 .4 9) % ,明显低于高危组 [(1.6 9± 1.6 6 ) % ](P <0 . 展开更多
关键词 MDS 患者 正常 ^cd34^+细胞 KI67 AML 原发性 细胞核 增殖期 骨髓
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凋亡在脐血造血干/祖细胞冷冻损伤中的作用及其机制研究 被引量：7
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作者 肖娟 邹萍 +3 位作者 黄士昂 胡中波 刘凌波 游泳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2004年第1期90-94,共5页
为探讨脐血造血干 /祖细胞冷冻损伤中凋亡的作用及其机制 ,应用流式细胞术检测脐血CD34+ 细胞冻存前后细胞凋亡率、线粒体膜势能和Fas抗原 ,用免疫组织化学法检测Bcl 2蛋白表达 ,用Westernblot和caspase 3蛋白活性分析检测caspase 3的表... 为探讨脐血造血干 /祖细胞冷冻损伤中凋亡的作用及其机制 ,应用流式细胞术检测脐血CD34+ 细胞冻存前后细胞凋亡率、线粒体膜势能和Fas抗原 ,用免疫组织化学法检测Bcl 2蛋白表达 ,用Westernblot和caspase 3蛋白活性分析检测caspase 3的表达 ,以甲基纤维素半固体培养进行造血祖细胞集落分析。研究结果显示 ,CD34+ 细胞在 - 196℃冻存 2周或 4周后凋亡率增加 ,电泳出现DNA梯形条带 ,CFUs分别下降了 2 5 .2 %和 30 .1%。冷冻过程中细胞内线粒体膜势能下降 ,Bcl 2蛋白表达下调 ,而Fas抗原表达无明显改变。新鲜分离的CD34+ 细胞中caspase 3以分子量为 32kD的非活性酶原形式存在 ,冷冻过程中caspase 3被激活 ,可检测到分子量为 2 0kD的裂解片段 ,cas pase 3蛋白活性分别增加了 1.2倍和 1.5倍。结论 :凋亡在脐血造血干细胞冷冻损伤中起着重要作用 ,其机制可能是通过线粒体介导的caspase依赖性途径执行 ,caspase 3是其中一个重要的效应蛋白酶。 展开更多
关键词 细胞凋亡 脐血 造血干/祖细胞 ^cd34^+细胞 冷冻保存 Caspase-3
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山东脐血库保存4000人份脐血资料的统计分析 被引量：7
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作者 潘杰 周胜利 +3 位作者 沈柏均 阎文瑛 旭日 宋道刚 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第3期257-260,共4页
对山东脐血库保存的 4 0 0 0人份脐血的部分结果进行了统计分析 ,每份脐血的平均有核细胞数超过 1.2× 10 9,每份脐血CD34+ 细胞总量平均为 3.9× 10 6,有 76 8人份脐血有核细胞数超过 1.5× 10 9,一般可满足体重 4 0kg以... 对山东脐血库保存的 4 0 0 0人份脐血的部分结果进行了统计分析 ,每份脐血的平均有核细胞数超过 1.2× 10 9,每份脐血CD34+ 细胞总量平均为 3.9× 10 6,有 76 8人份脐血有核细胞数超过 1.5× 10 9,一般可满足体重 4 0kg以上的患者使用。对基因频率的分析表明 ,常见基因与中国其他地区的统计结果相近 ,有 4 0 %的患者可以在山东脐血库找到 展开更多
关键词 山东脐血库 脐血 人类白细胞抗原 基因频率 ^cd34^+细胞 脐血移植 脐血保存
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中剂量rhG-CSF对正常供者外周血CD34^+细胞动员效果 被引量：6
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作者 李素霞 达万明 +2 位作者 高春记 黄文荣 靳海杰 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第6期1038-1040,共3页
本研究探讨中等剂量600μg/d粒细胞集落刺激因子(GCSF)对正常供者CD34+细胞的动员效果及动员前后外周血单个核细胞中T细胞亚群的变化。对2002-2004年我科31例健康供者给予rhGCSF600μg/d,在动员的第4天开始采集外周血干细胞(PBSC),并检... 本研究探讨中等剂量600μg/d粒细胞集落刺激因子(GCSF)对正常供者CD34+细胞的动员效果及动员前后外周血单个核细胞中T细胞亚群的变化。对2002-2004年我科31例健康供者给予rhGCSF600μg/d,在动员的第4天开始采集外周血干细胞(PBSC),并检测动员前后白细胞总数、动员后的有核细胞(NC)数、单个核细胞(MNC)数、CD34+细胞数及粒巨噬细胞集落形成单位(CFUGM),同时观察动员及采集过程中的不良反应。对12例供者GCSF动员前后外周血单个核细胞中T细胞亚群的变化进行了观察。结果显示:600μg/d组与既往使用的300μg/d组相比,rhGCSF动员后的外周血细胞中NC、MNC和CD34+细胞及CFUGM显著增加(P<0.05),受者造血重建时间缩短(P<0.05),动员和采集过程中的不良反应发生率无明显上升(P>0.05),无严重不良反应发生。动员后CD3+细胞在PBMNC中的比例较动员前下降(15.05±3.3)%,(P<0.05)。动员前后CD4+/CD8+淋巴细胞的比值无明显变化(P>0.05)。结论:600μg/d的GCSF对正常供者的动员效果好,受者造血重建快,无严重不良反应发生。动员后PBMNC中CD3+细胞的下降及CD4+/CD8+淋巴细胞比值无明显变化,从而使得移植后急性GVHD的发生率无明显上升。 展开更多
关键词 G-CSF ^cd34^+细胞 ^cd34^+细胞动员 T细胞亚群 外周血干细胞移植
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基质细胞衍生因子-1和血小板第4因子对体外扩增后脐血CD34^+细胞黏附特性和趋化功能的影响 被引量：8
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作者 李桥川 李云涛 +7 位作者 孟恒星 王亚非 万长春 李新 葛薇 李茜 韩俊领 邱录贵 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期83-88,共6页
为了研究基质细胞衍生因子-1(SDF-1)和血小板第4因子(PF4)对扩增后脐血CD34+细胞归巢相关功能的影响,将纯化的脐血CD34+细胞接种入无血清培养液中,加入不同组合的细胞因子FST(FL+SCF+TPO)、FST+SDF-1、FST+PF4或FST+SDF-1+PF4,分别于培... 为了研究基质细胞衍生因子-1(SDF-1)和血小板第4因子(PF4)对扩增后脐血CD34+细胞归巢相关功能的影响,将纯化的脐血CD34+细胞接种入无血清培养液中,加入不同组合的细胞因子FST(FL+SCF+TPO)、FST+SDF-1、FST+PF4或FST+SDF-1+PF4,分别于培养第7、10、14天检测CD34+细胞扩增倍数、集落形成能力、细胞的黏附分子表达、总黏附性、趋化功能。结果表明:①加入SDF-1的实验组CD34+细胞及造血祖细胞集落扩增倍数高于对照组;②加入SDF-1明显上调扩增的CD34+细胞CD49e的表达,加入PF4明显上调扩增的CD34+细胞CD49e、CD54的表达,在扩增体系中加入SDF-1或PF4均能够明显提高扩增的CD34+细胞的总黏附性;③在扩增体系中加入SDF-1能够明显提高扩增的CD34+细胞的自发迁移率,但导致CXCR-4的表达和SDF-1诱导迁移率降低;而PF4能够明显提高扩增的CD34+细胞的CXCR-4的表达和SDF-1诱导迁移率;在扩增体系中同时加入SDF-1和PF4能够明显提高扩增的CD34+细胞自发迁移率和SDF-1诱导迁移率。结论:体外扩增体系中加入SDF-1和PF4能够上调部分归巢相关黏附分子的表达,保持扩增的CD34+细胞的黏附和迁移能力,有利于降低体外扩增对造血干/祖细胞(HSPC)归巢相关功能的不利影响,维持扩增的HSPC的归巢潜能。 展开更多
关键词 ^cd34^+细胞 脐带血 基质细胞衍生因子-1 血小板第4因子 体外扩增 黏附特性 趋化功能
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参麦注射液对慢性再生障碍性贫血患者血清肿瘤坏死因子及骨髓CD_(34)^+细胞凋亡的影响 被引量：7
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作者 唐庆 胡慧 张恒 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第16期1296-1298,共3页
目的:探讨参麦注射液治疗慢性再生障碍性贫血(chronicaplasticanemia,CAA)的疗效及其作用机制。方法:将65例CAA患者随机分为治疗组和对照组,治疗组采用参麦注射液配合西药常规治疗,对照组单用西药治疗,治疗后进行疗效评价,并分别于治疗... 目的:探讨参麦注射液治疗慢性再生障碍性贫血(chronicaplasticanemia,CAA)的疗效及其作用机制。方法:将65例CAA患者随机分为治疗组和对照组,治疗组采用参麦注射液配合西药常规治疗,对照组单用西药治疗,治疗后进行疗效评价,并分别于治疗前后检测患者血清肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)水平,以及采用免疫磁珠分离系统(MACS)分离纯化骨髓CD34+细胞,用DNA末端原位标记(TUNEL)技术分析骨髓CD34+细胞原位凋亡状况。结果:治疗组总有效率为63.6%,对照组总有效率为40.6%,治疗组疗效明显优于对照组(P<0.01);治疗前,CAA患者血清TNF-α浓度、骨髓CD34+细胞凋亡率均明显高于健康对照组(P<0.01),治疗后,治疗组血清TNF-α浓度明显降低(P<0.01),骨髓CD34+细胞凋亡率减低(P<0.05),与对照组相比均有显著差异(尸<0.05)。结论:参麦注射液治疗CAA疗效确切,其机制可能为降低CAA患者血清TNE-α浓度,减少骨髓CD34+细胞凋亡。 展开更多
关键词 再生障碍性贫血 药物疗法 参麦注射液 肿瘤坏死因子α ^cd34^+细胞 细胞凋亡
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红细胞裂解液对CD34^+细胞相对计数的影响 被引量：8
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作者 巩文玉 刘怡 +3 位作者 李蓓 张瑞东 李志刚 吴敏媛 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期762-765,共4页
为了研究红细胞裂解液对CD34+细胞相对计数结果的影响,对37份外周血干细胞采集物进行CD34-PE及CD45-FITC双色免疫荧光染色后用FACS裂解液(FACSTM lysing solution,FACS)、IOTest3裂解液(IOTest 3 lysings olution,IOTest)及自配裂解液... 为了研究红细胞裂解液对CD34+细胞相对计数结果的影响,对37份外周血干细胞采集物进行CD34-PE及CD45-FITC双色免疫荧光染色后用FACS裂解液(FACSTM lysing solution,FACS)、IOTest3裂解液(IOTest 3 lysings olution,IOTest)及自配裂解液溶解红细胞,采用洗涤程序和运用ISHAGE设门策略,检测CD34+细胞相对数,同时记录细胞的前向散射(forward scatter,FSC)、侧向散射(side scatter,SSC)信号及CD45+细胞百分比。结果表明,FACS处理的样本CD34+细胞百分比低于IOTest(0.50±0.42vs0.92±0.59,p=0.004);而IOTest与自配红细胞裂解液处理结果的差异无统计学意义(0.92±0.59vs0.95±0.64,p=0.902)。经IOTest裂解后细胞的FSC、SSC信号均显著高于FACS(p<0.01)。IOTest裂解后的样本CD45+细胞百分比低于FACS。WBC数的多少与CD34+细胞百分比不存在相关关系(rs=0.192,p=0.357)。结论:某些红细胞裂解液对CD34等抗原阳性细胞的相对计数确有不良影响,用流式细胞术检测或计数时应慎重选择红细胞裂解液。 展开更多
关键词 红细胞裂解液 FACS裂解液 IDTest裂解液 ^cd34^+细胞
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