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靶向CD33的CAR修饰的NK92细胞对CD33^+急性髓系白血病细胞的杀伤作用
被引量：
1
1
作者
刘延众
潘丽娟
+7 位作者
唐取来
史江舟
赵文静
霍丽红
顾朝江
胡广
刘慧宁
张同存
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第5期462-468,共7页
目的:根据抗CD33-sc Fv序列构建CD33-CAR修饰的NK92细胞,探讨其对CD33^+急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞的杀伤作用。方法:通过基因合成以及分子克隆技术获得抗CD33-CAR片段,然后将其构建到慢病毒载体上,进行慢病毒包装...
目的:根据抗CD33-sc Fv序列构建CD33-CAR修饰的NK92细胞,探讨其对CD33^+急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞的杀伤作用。方法:通过基因合成以及分子克隆技术获得抗CD33-CAR片段,然后将其构建到慢病毒载体上,进行慢病毒包装,将得到的慢病毒转染NK92细胞,用流式细胞术检测细胞转染效率并通过嘌呤霉素筛选得到稳定表达抗CD33-CAR的细胞系CD33-CAR-NK92,利用钙黄绿素释放法检测该细胞的杀伤作用,ELISA法检测细胞因子IFN-γ分泌的变化。结果:成功构建p CDH-CD33-CAR重组慢病毒质粒,慢病毒转导后约18.7%的NK92细胞表达CD33-CAR(命名为CD33-CARNK92细胞),嘌呤霉素筛选后表达CD33-CAR的NK92细胞比例约86.3%。CD33-CAR-NK92细胞对CD33^+AML细胞MOLM-13的杀伤作用明显高于未被基因修饰的NK92细胞(P<0.01),而两者对CD33-肿瘤细胞JURKAT的杀伤作用没有明显差异(P>0.05)。效靶比为2∶1共培养6 h后,经CD33-CAR修饰的NK92细胞相比未被基因修饰的NK92细胞IFN-γ的分泌水平明显升高[(190.97±11.52)vs(88.41±2.75)pg/ml,P<0.01]。结论:CD33-CAR-NK92细胞能特异性识别CD33抗原并杀伤CD33^+AML细胞,其杀伤作用显著高于未被基因修饰的NK92细胞,为进一步开展靶向CD33的CAR-NK92细胞治疗AML的临床转化奠定了实验基础。
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关键词
嵌合抗原受体
cd
33
nk
92
细胞
cd
33
-
car
-
nk
92
细胞
急性髓系白血病
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题名
靶向CD33的CAR修饰的NK92细胞对CD33^+急性髓系白血病细胞的杀伤作用
被引量：
1
1
作者
刘延众
潘丽娟
唐取来
史江舟
赵文静
霍丽红
顾朝江
胡广
刘慧宁
张同存
机构
天津科技大学生物工程学院
武汉科技大学生命科学与健康学院
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第5期462-468,共7页
基金
国家自然科学青年基金资助项目(No.31401170)~~
文摘
目的:根据抗CD33-sc Fv序列构建CD33-CAR修饰的NK92细胞,探讨其对CD33^+急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞的杀伤作用。方法:通过基因合成以及分子克隆技术获得抗CD33-CAR片段,然后将其构建到慢病毒载体上,进行慢病毒包装,将得到的慢病毒转染NK92细胞,用流式细胞术检测细胞转染效率并通过嘌呤霉素筛选得到稳定表达抗CD33-CAR的细胞系CD33-CAR-NK92,利用钙黄绿素释放法检测该细胞的杀伤作用,ELISA法检测细胞因子IFN-γ分泌的变化。结果:成功构建p CDH-CD33-CAR重组慢病毒质粒,慢病毒转导后约18.7%的NK92细胞表达CD33-CAR(命名为CD33-CARNK92细胞),嘌呤霉素筛选后表达CD33-CAR的NK92细胞比例约86.3%。CD33-CAR-NK92细胞对CD33^+AML细胞MOLM-13的杀伤作用明显高于未被基因修饰的NK92细胞(P<0.01),而两者对CD33-肿瘤细胞JURKAT的杀伤作用没有明显差异(P>0.05)。效靶比为2∶1共培养6 h后,经CD33-CAR修饰的NK92细胞相比未被基因修饰的NK92细胞IFN-γ的分泌水平明显升高[(190.97±11.52)vs(88.41±2.75)pg/ml,P<0.01]。结论:CD33-CAR-NK92细胞能特异性识别CD33抗原并杀伤CD33^+AML细胞,其杀伤作用显著高于未被基因修饰的NK92细胞,为进一步开展靶向CD33的CAR-NK92细胞治疗AML的临床转化奠定了实验基础。
关键词
嵌合抗原受体
cd
33
nk
92
细胞
cd
33
-
car
-
nk
92
细胞
急性髓系白血病
Keywords
chimeric
antigen
receptor（
car
）
cd
33
nk
92
cell
cd
33
-
car
-
nk
92
cell
acute
myeloid
leukemia（AML）
分类号
R733.71 [医药卫生—肿瘤]
R730.51 [医药卫生—临床医学]
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被引量
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1
靶向CD33的CAR修饰的NK92细胞对CD33^+急性髓系白血病细胞的杀伤作用
刘延众
潘丽娟
唐取来
史江舟
赵文静
霍丽红
顾朝江
胡广
刘慧宁
张同存
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018
1
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