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HGF和FGF4体外诱导人骨髓CD45^-CD117^-细胞向肝细胞分化的研究
被引量：
2
1
作者
李文晰
段芳龄
+1 位作者
马军
陈香宇
《世界华人消化杂志》
CAS
2004年第3期697-701,共5页
目的:探讨在HGF、FGF4诱导下人骨髓CD45-CD117-细胞能否向肝细胞分化,并探讨两种生长因子在诱导分化中可能的作用机制. 方法:骨髓来自4名4-40岁健康志愿者的胸骨或髂骨.用两步磁式分离法分离出CD45-CD117-细胞,分别用含有FGF4,HGF,HGF+F...
目的:探讨在HGF、FGF4诱导下人骨髓CD45-CD117-细胞能否向肝细胞分化,并探讨两种生长因子在诱导分化中可能的作用机制. 方法:骨髓来自4名4-40岁健康志愿者的胸骨或髂骨.用两步磁式分离法分离出CD45-CD117-细胞,分别用含有FGF4,HGF,HGF+FGF4或不加生长因子的DMEM培养基进行培养,相应地分为A,B,C,D四组.分别于新分离时和培养7 d,14 d,21 d,28 d时留细胞.备作免疫细胞化学检测AFP,CK18,白蛋白,PAS染色检测糖原等肝系细胞的特征型标志,RT-PCR检测C、D组细胞c-met(HGF受体)和FGFR2(FGF4R)mRNA表达情况. 结果:A,B,C三组加生长因子诱导培养后的细胞均可检测到肝系细胞的标志,D组细胞不加生长因子培养后没有检测到肝系细胞的标志.c-met和FGFR2mRNA在新分离的和D组培养7 d,14 d时的细胞均有较弱的表达,而在C组细胞诱导培养7 d,14 d时表达升高. 结论:HGF和FGF4可诱导人骨髓CD45-CD117-细胞向肝细胞样细胞分化.生长因子诱导分化的作用可能通过与其受体之间的正反馈调节.
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关键词
HGF
FGF4
体外诱导
骨髓干
细胞
^
cd
45^-
细胞
^
cd
117
^-
细胞
肝
细胞
细胞
分化
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职称材料
小鼠造血干细胞的分离、培养及重组慢病毒载体介导的离体hFⅨ基因表达
被引量：
1
2
作者
姚恒美
陈浩明
+3 位作者
黄璐
沈琦
贾韦国
薛京伦
《复旦学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期503-506,523,共5页
造血干细胞是基因治疗理想的靶细胞之一,尤其适用于遗传性血液病.而重组慢病毒载体能高效感染造血干细胞,成为造血干细胞途径基因治疗的理想载体.从小鼠骨髓细胞中分离出单个核细胞(MNCs)进行体外悬浮培养,并用免疫磁珠法分离得到高纯...
造血干细胞是基因治疗理想的靶细胞之一,尤其适用于遗传性血液病.而重组慢病毒载体能高效感染造血干细胞,成为造血干细胞途径基因治疗的理想载体.从小鼠骨髓细胞中分离出单个核细胞(MNCs)进行体外悬浮培养,并用免疫磁珠法分离得到高纯度的小鼠Lin-CD117+造血干细胞(HSCs).体外悬浮培养期间,添加细胞因子的造血干细胞的细胞数和集落数逐渐增加,而未添加细胞因子的对照组的细胞数量无明显增加,细胞集落递减.用磷酸钙介导的共转染法制备了携带FⅨ基因的FUXW重组慢病毒,用慢病毒载体分别感染从ICR小鼠和C57小鼠中分离得到的MNCs,7d后测得细胞上清中hFⅨ的表达量分别为41.7±4.2和34.5±6.6ng/mL,而慢病毒感染C57小鼠造血干细胞,添加细胞因子组上清中hFⅨ的表达量为46.6±5.7ng/mL,不添加细胞因子组为33.3±4.8ng/mL.实验结果表明,重组FUXW慢病毒载体可有效感染小鼠单个核细胞和Lin-CD117+造血干细胞,添加细胞因子可提高转移基因的表达量.
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关键词
单个核
细胞
^
Lin^-
^
cd
117
^+造血干
细胞
重组慢病毒载体
人凝血因子Ⅸ
原文传递
题名
HGF和FGF4体外诱导人骨髓CD45^-CD117^-细胞向肝细胞分化的研究
被引量：
2
1
作者
李文晰
段芳龄
马军
陈香宇
机构
郑州大学消化疾病研究所
出处
《世界华人消化杂志》
CAS
2004年第3期697-701,共5页
基金
河南省卫生厅创新人才基金资助项目
No.2002223~~
文摘
目的:探讨在HGF、FGF4诱导下人骨髓CD45-CD117-细胞能否向肝细胞分化,并探讨两种生长因子在诱导分化中可能的作用机制. 方法:骨髓来自4名4-40岁健康志愿者的胸骨或髂骨.用两步磁式分离法分离出CD45-CD117-细胞,分别用含有FGF4,HGF,HGF+FGF4或不加生长因子的DMEM培养基进行培养,相应地分为A,B,C,D四组.分别于新分离时和培养7 d,14 d,21 d,28 d时留细胞.备作免疫细胞化学检测AFP,CK18,白蛋白,PAS染色检测糖原等肝系细胞的特征型标志,RT-PCR检测C、D组细胞c-met(HGF受体)和FGFR2(FGF4R)mRNA表达情况. 结果:A,B,C三组加生长因子诱导培养后的细胞均可检测到肝系细胞的标志,D组细胞不加生长因子培养后没有检测到肝系细胞的标志.c-met和FGFR2mRNA在新分离的和D组培养7 d,14 d时的细胞均有较弱的表达,而在C组细胞诱导培养7 d,14 d时表达升高. 结论:HGF和FGF4可诱导人骨髓CD45-CD117-细胞向肝细胞样细胞分化.生长因子诱导分化的作用可能通过与其受体之间的正反馈调节.
关键词
HGF
FGF4
体外诱导
骨髓干
细胞
^
cd
45^-
细胞
^
cd
117
^-
细胞
肝
细胞
细胞
分化
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
下载PDF
职称材料
题名
小鼠造血干细胞的分离、培养及重组慢病毒载体介导的离体hFⅨ基因表达
被引量：
1
2
作者
姚恒美
陈浩明
黄璐
沈琦
贾韦国
薛京伦
机构
复旦大学生命科学学院遗传学研究所
出处
《复旦学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期503-506,523,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30100102)
文摘
造血干细胞是基因治疗理想的靶细胞之一,尤其适用于遗传性血液病.而重组慢病毒载体能高效感染造血干细胞,成为造血干细胞途径基因治疗的理想载体.从小鼠骨髓细胞中分离出单个核细胞(MNCs)进行体外悬浮培养,并用免疫磁珠法分离得到高纯度的小鼠Lin-CD117+造血干细胞(HSCs).体外悬浮培养期间,添加细胞因子的造血干细胞的细胞数和集落数逐渐增加,而未添加细胞因子的对照组的细胞数量无明显增加,细胞集落递减.用磷酸钙介导的共转染法制备了携带FⅨ基因的FUXW重组慢病毒,用慢病毒载体分别感染从ICR小鼠和C57小鼠中分离得到的MNCs,7d后测得细胞上清中hFⅨ的表达量分别为41.7±4.2和34.5±6.6ng/mL,而慢病毒感染C57小鼠造血干细胞,添加细胞因子组上清中hFⅨ的表达量为46.6±5.7ng/mL,不添加细胞因子组为33.3±4.8ng/mL.实验结果表明,重组FUXW慢病毒载体可有效感染小鼠单个核细胞和Lin-CD117+造血干细胞,添加细胞因子可提高转移基因的表达量.
关键词
单个核
细胞
^
Lin^-
^
cd
117
^+造血干
细胞
重组慢病毒载体
人凝血因子Ⅸ
Keywords
mononuclear cell
^
Lin^-
cd
117
^＋ hematopoietic stem cell
recombinant lentiviral vector
hFⅨ
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HGF和FGF4体外诱导人骨髓CD45^-CD117^-细胞向肝细胞分化的研究
李文晰
段芳龄
马军
陈香宇
《世界华人消化杂志》
CAS
2004
2
下载PDF
职称材料
2
小鼠造血干细胞的分离、培养及重组慢病毒载体介导的离体hFⅨ基因表达
姚恒美
陈浩明
黄璐
沈琦
贾韦国
薛京伦
《复旦学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005
1
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