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右美托咪定对大鼠移植肝缺血/再灌注所致急性肺损伤中细胞凋亡及CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白的影响 被引量:20
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作者 褚立梅 杨光辉 +3 位作者 董丽娟 吕红杰 吴学敏 乔辉 《中国中西医结合急救杂志》 CAS 北大核心 2015年第3期262-266,共5页
目的探讨右美托咪定预处理对大鼠原位移植肝缺血/再灌注(I/R)所致急性肺损伤(ALI)中细胞凋亡及CCAAT增强子结合蛋白(C/EBP)同源蛋白(CHOP)的作用。方法选择雄性sD大鼠40只,按随机数字表法分为假手术组、I/R模型组、右美托... 目的探讨右美托咪定预处理对大鼠原位移植肝缺血/再灌注(I/R)所致急性肺损伤(ALI)中细胞凋亡及CCAAT增强子结合蛋白(C/EBP)同源蛋白(CHOP)的作用。方法选择雄性sD大鼠40只,按随机数字表法分为假手术组、I/R模型组、右美托咪定低剂量组和右美托咪定高剂量组,每组10只。采用二袖套法结扎并切断肝动脉,供体肝脏移植入后即可完全开放门静脉复制肝I/R模型;假手术组开腹后只游离肝周韧带,不进行其他特殊处理;右美托咪定低剂量组和高剂量组分别于I/R前1h静脉泵注右美托咪定2.5μg kg-1h-1和5.0μg kg-1h-1,1h内完成。实验结束后留取肺组织,检测肺组织湿/干质量(W/D)比值;光镜下观察肺组织病理学变化并进行肺泡损伤定量评估(IQA),电镜下观察肺组织超微结构变化;反转录一聚合酶链反应(RT—PCR)检测CHOPmRNA表达水平;蛋白质免疫印迹法(WesternBlot)检测CHOP的蛋白表达水平;原位末端缺刻标记法(TUNEL)检测肺组织细胞凋亡情况,并计算凋亡指数(AI)。结果与假手术组比较,I/R模型组肺w/D比值(4.94±0,84比2.29±0.54)、IQA[(40.52±5.15)%比(4.55±1.85)%]和AI[(36.57±5.85)%比(2.85±0.95)%]均明显升高(均P〈0.01);光镜和电镜下均显示肺组织结构发生明显的损伤。与I/R模型组比较,右美托咪定低剂量组和右美托咪定高剂量组肺W/D比值(3.29±0.85,2.68±0.78比4.94±0.84)、IQA[(23.69±2.62)%,(15.86±3.61)%比(40.52±5.15)%J和AI[(25.73±3.71)%,(14.66±2.61)%比(36.57±5.85)%]均明显降低(均P〈O.01),光镜和电镜下可见肺组织结构损伤明显减轻。I/R模型组有大量肺血管内皮细胞和肺泡上皮细胞发生凋亡,而右美托咪定低剂量组和高剂量组细胞凋亡� 展开更多
关键词 右美托咪定 ccaat增强子结合蛋白同源蛋白 细胞凋亡 肺损伤 急性 肝移植 缺血/再灌注
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右美托咪定对大鼠单肺通气后肺损伤中细胞凋亡及CHOP的影响 被引量:14
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作者 奚高原 王志涛 董铁立 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期184-188,共5页
目的评价右美托咪定对大鼠单肺通气(OLV)后肺损伤中细胞凋亡及CCAAT增强子结合蛋白(C/EBP)同源蛋白(CHOP)的影响。方法成年雄性SD大鼠40只,随机分为四组(n=10):对照组、OLV组、生理盐水处理组(OLV+生理盐水组)、右美托咪定处理组(OLV+... 目的评价右美托咪定对大鼠单肺通气(OLV)后肺损伤中细胞凋亡及CCAAT增强子结合蛋白(C/EBP)同源蛋白(CHOP)的影响。方法成年雄性SD大鼠40只,随机分为四组(n=10):对照组、OLV组、生理盐水处理组(OLV+生理盐水组)、右美托咪定处理组(OLV+右美托咪定组)。实验结束后处死大鼠,留取左肺组织以测定肺组织湿/干重比(W/D);光镜下观察肺脏组织的形态学改变;电镜下观察肺组织超微结构的改变;采用原位末端标记(TUNEL)法检测肺组织细胞凋亡指数(AI);采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CHOP mRNA和蛋白表达水平的改变。结果与对照组和OLV+右美托咪定组比较,OLV组和OLV+生理盐水组肺组织W/D和AI明显升高(P<0.01),GRP78、CHOP mRNA和蛋白表达均明显上调(P<0.01)。与OLV组和OLV+生理盐水组比较,OLV+右美托咪定组肺组织结构损伤明显减轻。结论右美托咪定预处理对大鼠单肺通气时的肺脏具有保护作用,其作用机制可能与其减轻细胞凋亡、抑制CHOP有关。 展开更多
关键词 ccaat增强子结合蛋白同源蛋白 细胞凋亡 肺损伤 单肺通气 右美托咪定
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心康冲剂对慢性心力衰竭大鼠心室重构的影响 被引量:10
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作者 刘蓉芳 孙玲 +5 位作者 张杼惠 谭雄 张辉 杨婷 吴玲娇 毛以林 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2017年第22期1947-1952,共6页
目的探讨心康冲剂治疗慢性心力衰竭的可能作用机制。方法 90只SD大鼠随机分为正常组10只,模型组,对照组及心康低、中、高剂量组各16只。除正常组外,其余各组通过腹腔注射注射用盐酸阿霉素1.5 mg/kg制造慢性心力衰竭大鼠模型。心康低、... 目的探讨心康冲剂治疗慢性心力衰竭的可能作用机制。方法 90只SD大鼠随机分为正常组10只,模型组,对照组及心康低、中、高剂量组各16只。除正常组外,其余各组通过腹腔注射注射用盐酸阿霉素1.5 mg/kg制造慢性心力衰竭大鼠模型。心康低、中、高剂量组分别给予0.5、1、2 g/(kg·d)心康冲剂。对照组给予0.06 g/(kg·d)芪苈强心胶囊。正常组、模型组予1.0 g/(kg·d)生理盐水灌胃。各组均每日1次,连续灌服8周。观察大鼠心功能,TUNEL染色法观察心肌细胞凋亡,Masson染色法观察心肌纤维化,采用Real-time PCR法及免疫组化法检测心肌组织半胱天冬酶12(Caspase-12)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)蛋白及mRNA表达水平。结果与模型组比较,心康低、中、高剂组心肌细胞凋亡和纤维化明显减少。与模型组比较,对照组及心康低、中剂量组左室舒张期内径(LVIDd)、左室收缩末期内径(LVESD)及Caspase-12、GRP78、CHOP蛋白,心康中剂量组Caspase-12、GRP78、CHOP mRNA明显下降,左室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)及心输出量(CO)明显升高(P<0.05);与对照组比较,心康低剂量组LVIDd、LVESD下降,LVEF及CO增大,心康中剂量组LVESD、Caspase-12表达下降,LVIDd、CHOP mRNA表达升高,心康低、中剂量组CHOP、Caspase-12 mRNA蛋白表达下降(P<0.05)。结论心康冲剂能下调心肌组织Caspase-12、GRP78、CHOP表达、减轻内质网应激凋亡、抗心室重构,可能是其治疗慢性心力衰竭的机制之一,以心康冲剂低、中剂量疗效更佳。 展开更多
关键词 慢性心力衰竭 心室重构 内质网应激 葡萄糖调节蛋白78 半胱天冬酶12 ccaat增强子结合蛋白同源蛋白 心康冲剂
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丹参酮IIA对帕金森大鼠中脑内Caspase-12和CHOP的影响 被引量:9
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作者 徐玉英 申采薇 +1 位作者 任秀花 田新红 《解剖学研究》 CAS 2020年第4期309-313,327,共6页
目的观察丹参酮IIA对帕金森病(PD)模型大鼠中脑黑质内CHOP蛋白、Caspase-12蛋白、Caspase-3蛋白和酪氨酸羟化酶(TH)蛋白表达的影响,探讨其对帕金森病模型大鼠的作用及相关机制。方法(1)帕金森病(PD)模型大鼠的制备:60只健康、雄性SD大鼠... 目的观察丹参酮IIA对帕金森病(PD)模型大鼠中脑黑质内CHOP蛋白、Caspase-12蛋白、Caspase-3蛋白和酪氨酸羟化酶(TH)蛋白表达的影响,探讨其对帕金森病模型大鼠的作用及相关机制。方法(1)帕金森病(PD)模型大鼠的制备:60只健康、雄性SD大鼠,采用数字表法随机分为模型组(30只)、假手术组(sham组)(15只)和正常对照组(15只)。对照组对照组正常饲养,不作任何处理;假手术组,采用在大鼠颈背部皮下注射不含鱼藤酮的葵花油乳化液;模型组采用在大鼠颈背部皮下注射鱼藤酮。每天注射1次,连续30 d。用药期间观察实验大鼠外观和行为学变化。(2)把制备成功的模型组先分为处理组(丹参酮IIA组,15只)和生理盐水组(NS组,15只)。两组大鼠分别被注射生理盐水和丹参酮IIA,每天注射1次,连续注射14 d。(3)用药期间观察实验大鼠外观和行为学变化。(4)第14 d,采用免疫组织化学染色检测3组大鼠中脑黑质内TH蛋白、CHOP蛋白、Caspase-12蛋白和Caspase-3蛋白的表达情况。结果与正常对照组及假手术组比较,模型组大鼠出现典型的帕金森病样症状,可以进行后续实验;免疫组织化学染色见NS组大鼠中脑黑质内可见CHOP蛋白、Caspase-12蛋白和Caspase-3蛋白的表达增多,TH蛋白的表达则降低,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。处理组大鼠中脑黑质内可见CHOP蛋白、Caspase-12蛋白和Caspase-3蛋白的表达降低,TH蛋白的表达则增多,与NS组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论丹参酮IIA通过减弱内质网应激反应介导的神经元调亡,从而减轻帕金森病模型大鼠中脑黑质内多巴胺能神经元的丢失。 展开更多
关键词 帕金森病 丹参酮IIA 鱼藤酮 ccaat增强子结合蛋白同源蛋白 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-12
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慢性HBV感染者外周血白细胞GRP78、CHOP和XBP1 mRNA水平变化 被引量:7
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作者 潘高峰 郜玉峰 +3 位作者 叶娇娇 姜同翠 沈玉君 沈玉先 《实用肝脏病杂志》 CAS 2015年第2期136-140,共5页
目的探讨慢性HBV感染者外周血白细胞内质网应激相关基因糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和X盒结合蛋白l(XBP1)m RNA水平及其与临床指标的相关性。方法采用实时荧光定量PCR技术检测40例正常人(NC)、43... 目的探讨慢性HBV感染者外周血白细胞内质网应激相关基因糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和X盒结合蛋白l(XBP1)m RNA水平及其与临床指标的相关性。方法采用实时荧光定量PCR技术检测40例正常人(NC)、43例慢性无症状HBV携带者(ASC)、47例慢性乙型肝炎(CHB)、41例乙型肝炎肝硬化(LC)和35例乙型肝炎相关肝细胞癌(HCC)患者外周血白细胞GRP78、CHOP和XBP1 m RNA水平,分析其与病毒学和生化学指标的相关性。结果 ASC、CHB、LC和HCC患者外周血白细胞GRP78 m RNA水平和XBP1 m RNA水平分别为(0.58±0.53)和(0.76±0.57)、(0.59±0.67)和(0.50±0.64)、(1.07±1.09)和(1.44±1.00)和(1.17±1.69)和(0.90±1.33),均显著高于健康人[分别为(0.01±0.61)和(0.01±0.97),P〈0.01和P〈0.05];在HBs Ag〈1500IU/ml、1500-20000IU/ml和〉20000IU/ml组患者,GRP78 m RNA水平分别为(0.48±0.59)、(0.76±0.56)和(0.74±0.56),三组间差异有统计学意义(P〈0.05);HBV DNA水平为1×10^3-10^5copies/ml组XBP1 m RNA水平为(0.86±1.13),显著低于HBV DNA〉1×105copies/ml组[(1.44±1.31),P〈0.05];在不同转氨酶水平间、HBe Ag阳性与阴性组间和胆红素正常与升高组间,以上三种基因m RNA水平差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论内质网应激可能与慢性HBV感染后的疾病进展相关。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 糖调节蛋白78 ccaat增强子结合蛋白同源蛋白 X盒结合蛋白l 内质网应激
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内质网应激在白蛋白诱导肾小管上皮细胞凋亡中的作用 被引量:6
6
作者 吴小玮 何娅妮 +3 位作者 王惠明 李开龙 丁涵露 吕顺巧 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期198-203,共6页
目的探讨内质网应激在白蛋白超负荷诱导肾小管上皮细胞凋亡中的作用和分子机制。方法Western印迹法检测肾小管上皮细胞(HKC)内质网伴侣蛋白糖调节蛋白78(GRP78)和内质网应激蛋白CHOP(CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白,也称为GADD153... 目的探讨内质网应激在白蛋白超负荷诱导肾小管上皮细胞凋亡中的作用和分子机制。方法Western印迹法检测肾小管上皮细胞(HKC)内质网伴侣蛋白糖调节蛋白78(GRP78)和内质网应激蛋白CHOP(CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白,也称为GADD153)表达与人血清白蛋白(HSA)作用时间和浓度的关系。实时荧光定量PCR法检测CHOP siRNA对CHOP基因转录的抑制情况。Western印迹法检测CHOP siRNA转染后CHOP蛋白水平的变化。膜联蛋白V和碘化丙锭(Annexin V-FITC和PI)双染的流式细胞术检测白蛋白诱导HKC凋亡的变化以及CHOP siRNA对HKC凋亡的影响。结果(1)分别以0、5、10、20g/L白蛋白作用于HKC 24h,GRP78、CHOP蛋白表达及细胞凋亡均随白蛋白浓度的增加而上调,各组间差异有统计学意义(P〈0.01);以20g/L白蛋白分别作用于HKC 0、6、12、24、36h,GRP78蛋白表达在6h即显著增加,CHOP蛋白表达及HKC凋亡则在12h显著增加,各组间差异有统计学意义(P〈0.01)。(2)CHOP siRNA显著抑制白蛋白诱导的CHOP基因转录及蛋白表达(P〈0.01),对白蛋白诱导的HKC凋亡有显著抑制作用(P〈0.01)。结论白蛋白超负荷可诱导肾小管上皮细胞发生内质网应激,并通过上调促凋亡因子CHOP表达引起肾小管上皮细胞内质网相关的细胞凋亡,这可能是蛋白尿引起肾小管间质病变的重要机制。 展开更多
关键词 蛋白 内质网 细胞凋亡 ccaat增强子结合蛋白同源蛋白 肾小管上皮细胞
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内质网应激及蛋白激酶R样内质网激酶/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白/门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-12信号通路介导的细胞凋亡在糖尿病肾病发病机制中的作用研究进展 被引量:4
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作者 李蓉 宋宗良 +2 位作者 张效科 武宁静 游清啸 《新乡医学院学报》 CAS 2022年第5期491-495,共5页
糖尿病肾病(DN)是糖尿病微血管并发症,主要表现为血糖升高、蛋白尿、肾功能下降,也是患者后期肾功能衰竭的主要原因。临床上主要通过控制血压和血糖水平来抑制DN的进展,但效果不佳。现有研究发现,内质网应激及其介导的细胞凋亡是引起DN... 糖尿病肾病(DN)是糖尿病微血管并发症,主要表现为血糖升高、蛋白尿、肾功能下降,也是患者后期肾功能衰竭的主要原因。临床上主要通过控制血压和血糖水平来抑制DN的进展,但效果不佳。现有研究发现,内质网应激及其介导的细胞凋亡是引起DN的重要原因,蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)/门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-12(caspase-12)信号通路在其中发挥关键性作用,其中PERK是内质网应激启动的标志,CHOP是内质网应激由抗凋亡作用开始转为促凋亡作用的重要分子,caspase-12是内质网应激介导细胞凋亡的最终执行分子。本文就内质网应激及相关信号通路介导的细胞凋亡在DN发病机制中的作用进行综述。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 内质网应激 凋亡 蛋白激酶R样内质网激酶 ccaat增强子结合蛋白同源蛋白 门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-12
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木犀草素介导PERK/eIF2α/CHOP信号通路改善新生大鼠坏死性小肠结肠炎的作用研究 被引量:1
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作者 章捷 田由 +1 位作者 吴臻斐 黄玲莉 《浙江医学》 CAS 2023年第21期2248-2254,F0003,共8页
目的探讨木犀草素介导蛋白激酶RNA样内质网激酶(PERK)/真核翻译启动因子2α(eIF2α)/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)信号通路改善新生大鼠坏死性小肠结肠炎(NEC)的作用及相关机制。方法取新生SD大鼠30只,其中24只采用缺氧冷刺激法建... 目的探讨木犀草素介导蛋白激酶RNA样内质网激酶(PERK)/真核翻译启动因子2α(eIF2α)/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)信号通路改善新生大鼠坏死性小肠结肠炎(NEC)的作用及相关机制。方法取新生SD大鼠30只,其中24只采用缺氧冷刺激法建立NEC大鼠模型,按随机数字表法分为木犀草素17.5 mg/kg组、木犀草素35 mg/kg组、木犀草素70 mg/kg组、模型组,另6只大鼠设为正常组(仅予0.1 mL 0.9%氯化钠溶液干预处理),1次/d,连续灌胃给药4 d。取大鼠小肠上皮细胞系IEC-6细胞采用脂多糖刺激法建立NEC细胞模型并分为木犀草素5μmol/L组、10μmol/L组、20μmol/L组、模型组,取未经脂多糖处理的IEC-6细胞设为正常组(仅予0.9%氯化钠溶液干预处理);另取建模后的IEC-6细胞分为GSK26064140.5μmol/L组、GSK26064141.0μmol/L组、GSK26064142.0μmol/L组、GSK26064144.0μmol/L组、模型组(仅予等体积0.9%氯化钠溶液干预处理),采用噻唑蓝法筛选细胞存活率最高的药物浓度(木犀草素20μmol/L,GSK26064144.0μmol/L)作为后续实验浓度,增设木犀草素20μmol/L+GSK26064144.0μmol/L组。采用HE染色观察大鼠肠道组织病理学变化,采用原位末端转移酶标记法、ELISA法、Western blot法分别检测木犀草素对大鼠肠道组织凋亡率,大鼠肠道组织、血清及IEC-6细胞中TNF-α、IL-6水平,以及大鼠肠道组织及IEC-6细胞中PERK/eIF2α/CHOP信号通路相关因子表达水平的影响。结果与模型组比较,木犀草素35 mg/kg组、木犀草素70 mg/kg组大鼠肠道组织损伤均有不同程度的改善,且细胞凋亡率均明显较低(均P<0.05)。与模型组比较,木犀草素35 mg/kg组、木犀草素70 mg/kg组大鼠肠道组织中TNF-α、IL-6水平明显较低(均P<0.05),木犀草素17.5 mg/kg组、木犀草素35 mg/kg组、木犀草素70 mg/kg组大鼠肠道组织中p-PERK/PERK、p-eIF2α/eIF2α、CHOP表达水平以及血清中TNF-α、IL-6水平均明显较低(均P<0.05),木犀草素20 展开更多
关键词 木犀草素 坏死性小肠结肠炎 蛋白激酶RNA样内质网激酶 真核翻译启动因子2α ccaat增强子结合蛋白同源蛋白 信号通路 炎症反应
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姜黄素对大鼠视网膜缺血/再灌注损伤时内质网应激的影响 被引量:4
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作者 彭栋梁 王晓娜 杨军 《世界中医药》 CAS 2018年第4期929-935,共7页
目的:探讨姜黄素对大鼠视网膜缺血/再灌注损伤(RIRI)时内质网应激(ERS)的影响。方法:选取清洁级SpragueDawley(SD)雄性大鼠96只,采用随机数字表法分为3组(n=32):对照组(C组)、缺血/再灌注组(I/R组)和姜黄素组(CUR组)。I/R组和CUR组采用... 目的:探讨姜黄素对大鼠视网膜缺血/再灌注损伤(RIRI)时内质网应激(ERS)的影响。方法:选取清洁级SpragueDawley(SD)雄性大鼠96只,采用随机数字表法分为3组(n=32):对照组(C组)、缺血/再灌注组(I/R组)和姜黄素组(CUR组)。I/R组和CUR组采用前房灌注法使眼内压升高而制备大鼠RIRI模型,缺血60 min,再灌注24 h后结束实验。于缺血前60 min时,CUR组腹腔注射姜黄素100 mg/kg,C组和I/R组腹腔注射等容量生理盐水。各组于再灌注24 h时处死8只大鼠,取视网膜组织,光镜下观察病理学改变;采用TUNEL法检测视网膜组织细胞凋亡情况并计算凋亡指数(AI)。3组于再灌注24 h时处死8只大鼠,取视网膜组织,电镜下观察大鼠视网膜组织超微结构改变。3组于再灌注24h时处死8只大鼠,取视网膜组织,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测大鼠视网膜组织中CCAAT增强子结合蛋白(C/EBP)同源蛋白(CHOP)、活化的转录因子4(ATF4)和X-盒结合蛋白-1(XBP1)mRNA表达。3组于再灌注24 h时处死8只大鼠,取视网膜组织,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠视网膜组织中、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase-3)的蛋白表达,计算Bcl-2/Bax比值。结果:与C组比较,I/R组大鼠视网膜组织XBP-1、ATF4和CHOP mRNA表达明显上调(P<0.05);与I/R组比较,CUR组大鼠视网膜组织XBP-1、ATF4和CHOP mRNA表达明显下调(P<0.05)。与C组比较,I/R组大鼠视网膜组织CHOP、Bax和caspase-3蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/Bax比值均下降,与C组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),CUR组大鼠视网膜组织CHOP、Bax和caspase-3蛋白表达下降,Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/Bax比值均升高,与I/R组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。与C组比较,I/R组大鼠视网膜组织出现形态结构及超微结构损伤,AI值升高(P<0.05)。与I/R组比较,CUR组大鼠视网膜组织形态结构及超微结构损伤均 展开更多
关键词 姜黄素 ccaat增强子结合蛋白同源蛋白 活化的转录因子4 X-盒结合蛋白-1(XBP1) 内质网应激 细胞凋亡 再灌注损伤 视网膜
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冬凌草甲素对HepG2细胞内质网应激蛋白IRE-1、PERK和CHOP的作用研究 被引量:4
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作者 王辉 叶燕 禹志领 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期263-266,共4页
目的研究内质网应激对冬凌草甲素处理的肝癌细胞HepG2的作用。方法采用特异性小干扰RNA(siRNA)转染HepG2细胞72 h抑制内质网应激蛋白RNA激活蛋白激酶样内质网激酶(PERK)、抑制物阻抗性酯酶1(IRE-1)和CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)... 目的研究内质网应激对冬凌草甲素处理的肝癌细胞HepG2的作用。方法采用特异性小干扰RNA(siRNA)转染HepG2细胞72 h抑制内质网应激蛋白RNA激活蛋白激酶样内质网激酶(PERK)、抑制物阻抗性酯酶1(IRE-1)和CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)表达后,MTT法观察40μmol·L-1冬凌草甲素处理12h的转染细胞的细胞存活率。结果 PERK和IRE-1 siRNA转染抑制相应蛋白表达后增加冬凌草甲素诱导的HepG2细胞死亡(P<0.05);而抑制CHOP表达对冬凌草甲素处理的HepG2细胞存活率没有影响(P>0.05)。结论冬凌草甲素诱导的内质网应激对HepG2细胞具有保护作用。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 内质网应激 RNA激活蛋白激酶样内质网激酶 抑制物阻抗性酯酶1 ccaat增强子结合蛋白同源蛋白
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茯苓酸对人骨肉瘤细胞系MG-63的增殖凋亡、迁移侵袭影响及PERK/CCAAT信号通路调控作用
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作者 施擎宇 黄帆 王冬明 《山东医药》 CAS 2023年第30期1-5,共5页
目的观察茯苓酸(PA)对人骨肉瘤细胞系MG-63增殖、迁移、凋亡和侵袭的影响,并探讨PA对蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)信号通路的调控作用。方法体外培养MG-63细胞,分为对照组、低浓度PA组(PA-L组)、中浓... 目的观察茯苓酸(PA)对人骨肉瘤细胞系MG-63增殖、迁移、凋亡和侵袭的影响,并探讨PA对蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)信号通路的调控作用。方法体外培养MG-63细胞,分为对照组、低浓度PA组(PA-L组)、中浓度PA组(PA-M组)、高浓度PA组(PA-H组)、高浓度PA+蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)抑制剂GSK2606414组(PA-H+GSK2606414组),PA-L组、PA-M组及PA-H组分别用含20、40及80μmol/L PA的培养基培养,PA-H+GSK2606414组用含80μmol/L的PA和5μmol/L的GSK2606414培养基培养,对照组用空白培养基培养。分别于培养24、48、72 h时采用MTT法观察各组细胞增殖情况;培养24 h时采用细胞划痕实验观察各组细胞迁移情况;培养48 h时采用Transwell实验观察各组细胞侵袭情况;培养48 h时采用流式细胞术测算各组细胞凋亡率;培养48 h时,采用RT-qPCR法检测PERK及CHOP的mRNA表达,并采用WESTERN Blotting法检测PERK/CHOP信号通路相关蛋白及凋亡相关蛋白真核生物起始因子2α(eIF2α)、活化转录因子4(ATF4)、CHOP、BCL2相关X蛋白(Bax)及B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)。结果与对照组比较,PA-M组及PA-H组培养48与72 h时细胞OD_(570nm)值低、细胞迁移率低、细胞侵袭数少、细胞凋亡率高(P均<0.05);与PA-M组相比,PA-H组培养48及72 h时的细胞OD_(570nm)值低、细胞迁移率低、细胞侵袭数少、细胞凋亡率高(P均<0.05);与PA-H组相比,PA-H+GSK2606414组细胞培养48及72 h时的OD_(570nm)值高、细胞迁移率高、细胞侵袭数多、细胞凋亡率低(P均<0.05)。与对照组比较,PA-M组及PA-H组细胞PERK及CHOP mRNA相对表达量高,PERK及eIF2α磷酸化水平高,ATF4、CHOP、Bax蛋白相对表达量高,Bcl-2相对表达量低(P均<0.05);与PA-M组相比,PA-H组细胞PERK及CHOP mRNA相对表达量高,PERK及eIF2α磷酸化水平高,ATF4、CHOP、Bax蛋白相对表达量高,Bcl-2相对表达量低(P均<0.05);与PA-H组相比,PA-H+GSK2606414组细胞PERK及CHOP m 展开更多
关键词 茯苓酸 骨肉瘤 细胞增殖 细胞凋亡 细胞侵袭 蛋白激酶R样内质网激酶 ccaat增强子结合蛋白同源蛋白
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中药鹿血提取物联合顺铂抗小鼠黑色素瘤的作用研究
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作者 王赛雯 侯亚义 窦环 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2925-2930,共6页
目的:评价鹿血提取物鹿血晶(DBC)、鹿血浆(DP)分别与顺铂(DDP)联合使用对小鼠黑色素瘤的作用,并探索药物联用的抗肿瘤机制。方法:在小鼠右后肢注射B16F10细胞构建小鼠皮下黑色素荷瘤模型,流式细胞术检测荷瘤小鼠脾脏、肿瘤组织中CD8^(+)... 目的:评价鹿血提取物鹿血晶(DBC)、鹿血浆(DP)分别与顺铂(DDP)联合使用对小鼠黑色素瘤的作用,并探索药物联用的抗肿瘤机制。方法:在小鼠右后肢注射B16F10细胞构建小鼠皮下黑色素荷瘤模型,流式细胞术检测荷瘤小鼠脾脏、肿瘤组织中CD8^(+)CD69^(+)T细胞、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞以及CD11b^(+)Gr-1^(+)MDSCs细胞的ROS水平;Western blot法检测肿瘤组织p-ERK/CHOP信号通路及凋亡相关分子的差异变化。DP联合DDP体外预处理B16F10细胞,利用Annexin V/PI双染法分析细胞凋亡的比例;siRNA干扰CHOP分子,Western blot法检测联合用药对细胞凋亡的影响。结果:动物实验结果表明,与DDP组比较,DDP+DP组的肿瘤抑制率显著增加(P<0.01),瘤指数及肝功能指标水平显著降低(P<0.05,P<0.01),显著逆转荷瘤小鼠的免疫抑制状态(P<0.01,P<0.05)。体内外实验结果均表明,DP联合DDP处理通过诱导CHOP高表达促进肿瘤组织与B16F10细胞中的凋亡分子的表达,B16F10的早期与晚期凋亡比例均增强;siRNA干扰CHOP表达后,DDP+DP组阻断了B16F10细胞凋亡相关分子Bcl-XL、Bax、Caspase-3的表达,进而药物联用对细胞凋亡的促进作用也消失。结论:DP与DDP联用可辅助治疗黑色素瘤小鼠,保护小鼠肝脏、调节免疫,其作用机制可能与CHOP依赖的细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 黑色素瘤 鹿血浆 鹿血晶 肿瘤免疫 凋亡 ccaat增强子结合蛋白同源蛋白
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褪黑素对大鼠移植肝组织GRP-78及CHOP表达的影响 被引量:3
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作者 李萌 潘崎 +1 位作者 程颖 刘永锋 《器官移植》 CAS CSCD 2015年第4期262-267,共6页
目的通过检测褪黑素(MEL)对肝移植大鼠肝脏内质网应激(ERS)通路相关分子葡萄糖调节蛋白-78(GRP-78)及CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)表达的影响,探讨MEL对移植肝的作用。方法采用"磁环法"制作大鼠原位肝移植模型,雄性SD... 目的通过检测褪黑素(MEL)对肝移植大鼠肝脏内质网应激(ERS)通路相关分子葡萄糖调节蛋白-78(GRP-78)及CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)表达的影响,探讨MEL对移植肝的作用。方法采用"磁环法"制作大鼠原位肝移植模型,雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(Sham组)、原位肝移植组(OLT组)、原位肝移植+褪黑素处理组(OLT+MEL组),每组各8只。术后24 h,获取血清样本及肝脏标本。检测血清丙氨酸转移酶(ALT)及天冬氨酸转移酶(AST)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察各组肝组织病理学改变,采用聚合酶链反应和蛋白免疫印迹试验检测GRP-78及CHOP的信使核糖核酸(mRNA)和蛋白表达水平。结果与Sham组比较,OLT组血清ALT、AST显著升高(均为P<0.01),肝组织损伤严重,GRP-78及CHOP在mRNA和蛋白水平表达明显增加(均为P<0.01)。与OLT组比较,OLT+MEL组大鼠ALT、AST水平明显降低(均为P<0.05),肝组织损伤减轻,GRP-78及CHOP mRNA和蛋白表达水平明显降低(均为P<0.05)。结论褪黑素能降低移植肝ERS相关分子GRP-78及CHOP在mRNA和蛋白水平的表达,这可能是它减轻移植后肝脏损伤的机制之一。 展开更多
关键词 原位肝移植 大鼠 褪黑素 内质网应激 葡萄糖调节蛋白-78 ccaat增强子结合蛋白同源蛋白
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吸烟COPD患者中内质网相关凋亡基因CHOP表达研究 被引量:3
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作者 甘桂香 胡瑞成 +1 位作者 戴爱国 谭双香 《国际呼吸杂志》 2020年第11期822-827,共6页
目的:观察吸烟慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者中内质网相关凋亡基因肺内CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)基因和蛋白表达。方法:通过肺癌肺叶切除手术收集不吸烟非COPD、吸烟非COPD、吸烟COPD患者肺组织标本各10例;细胞凋亡情况选用TUNE... 目的:观察吸烟慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者中内质网相关凋亡基因肺内CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)基因和蛋白表达。方法:通过肺癌肺叶切除手术收集不吸烟非COPD、吸烟非COPD、吸烟COPD患者肺组织标本各10例;细胞凋亡情况选用TUNEL法检测,CHOP mRNA表达水平选用原位杂交和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测,CHOP蛋白的表达水平选用免疫组织化学和Western-blot方法检测。结果:TUNEL结果显示凋亡细胞主要是肺泡上皮细胞,血管内皮细胞和支气管上皮细胞。对照组人群肺组织的凋亡率最低(13.5±2.4)%,在吸烟非COPD组人群较对照组明显升高[(25.5±1.7)%比(13.5±2.4)%,P<0.05],在吸烟COPD组人群中则进一步明显升高[(32.0±2.9)%比(25.5±1.7)%,P<0.05],CHOP的表达在吸烟非COPD患者中明显增加,在吸烟COPD患者中则进一步增加。结论:吸烟能够诱导COPD患者肺内内质网相关凋亡基因CHOP表达增加,从而促进COPD的发生、发展。 展开更多
关键词 肺疾病 慢性阻塞性 细胞凋亡 ccaat增强子结合蛋白同源蛋白 内质网应激
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慢肾康宁对肾间质纤维化大鼠内质网应激PERK-ATF4通路的影响 被引量:2
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作者 孙升云 金鑫 +5 位作者 黄少君 徐梅 颜显欣 朱诗平 何玲 聂玲辉 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2013年第3期236-240,共5页
目的探讨慢肾康宁对肾间质纤维化大鼠肾脏组织的保护作用及机制。方法 60只雄性Wistar大鼠,随机选取7只为正常组,其余53只采用2.5%腺嘌呤悬浮液灌胃建立肾间质纤维化模型,21d后将50只造模成功的大鼠随机分为模型组、氯沙坦组[10mg/(kg&#... 目的探讨慢肾康宁对肾间质纤维化大鼠肾脏组织的保护作用及机制。方法 60只雄性Wistar大鼠,随机选取7只为正常组,其余53只采用2.5%腺嘌呤悬浮液灌胃建立肾间质纤维化模型,21d后将50只造模成功的大鼠随机分为模型组、氯沙坦组[10mg/(kg·d)]、慢肾康宁低剂量组[7.5g/(kg·d)]、慢肾康宁中剂量组[15g/(kg·d)]、慢肾康宁高剂量组[30g/(kg·d)],每组10只,分别给予相应药物灌胃,正常组和模型组以等量蒸馏水灌胃,连续30d。实验结束后,检测各组大鼠血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、24小时尿蛋白定量(24hMTP),估算肾小球滤过率(eGFR),HE和Masson染色观察肾组织病理变化,免疫组织化学方法检测肾组织内质网应激标志性蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78),TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡水平,实时定量PCR测定肾组织GRP78、转录激活因子4(ATF4)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)mRNA表达水平。结果与模型组比较,氯沙坦组和慢肾康宁各剂量组SCr、BUN、24hMTP均显著下降(P<0.01),eGFR上升(P<0.01)。病理观察,模型组可见肾小管上皮细胞凋亡、坏死、脱落,肾小管扩张、炎性细胞浸润,肾间质内腺嘌呤代谢产物沉积和胶原纤维增生,氯沙坦组和慢肾康宁各组较模型组病理变化轻。与模型组比较,各给药组GRP78表达水平及细胞凋亡水平均下降(P<0.05或P<0.01)。各给药组GRP78、ATF-4、CHOPmRNA表达水平较模型组降低(P<0.05)。结论慢肾康宁对肾间质纤维化大鼠肾脏组织内质网应激PERK-eIF2α-ATF4-CHOP通路过度表达有很好的抑制作用,具有肾脏保护功能,这可能是它减轻肾间质纤维化的重要机制之一。 展开更多
关键词 慢肾康宁 肾间质纤维化 内质网应激 葡萄糖调节蛋白78 转录激活因子4 ccaat增强子结合蛋白同源蛋白
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同型半胱氨酸经PERK磷酸化激活CHOP-ERO1α通路介导心肌细胞凋亡的研究 被引量:1
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作者 杜海林 杨绍兵 +2 位作者 丛广志 王凯 贾绍斌 《重庆医学》 CAS 2018年第5期584-587,共4页
目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对心肌的损伤作用及其可能机制。方法选用H9C2心肌细胞,分别用不同浓度Hcy、4-苯基丁酸(4-PBA)干预细胞。将H9C2细胞分为对照组、H400组、H400P2组,对照组使用普通培养基,H400组加入400μmol/L的Hcy,H400P2组... 目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对心肌的损伤作用及其可能机制。方法选用H9C2心肌细胞,分别用不同浓度Hcy、4-苯基丁酸(4-PBA)干预细胞。将H9C2细胞分为对照组、H400组、H400P2组,对照组使用普通培养基,H400组加入400μmol/L的Hcy,H400P2组在H400组基础上加入2mmol/L的4-PBA。CCK-8检测细胞存活率,TUNEL染色评估细胞凋亡,免疫细胞化学检测内质网氧化还原酶1α(ERO1α)表达,Western blot检测蛋白表达差异。结果 Hcy对H9C2心肌细胞损伤呈浓度依赖性(F=2 039.958,P<0.01)。与对照组比较,H400组细胞凋亡分数及胰腺内质网激酶(PERK)、磷酸化PEPK(p-PERK)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、ERO1α表达均增加(P<0.01);H400P2组细胞凋亡分数及PERK、p-PERK、CHOP、ERO1α表达均有所下降,与H400组比较均差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Hcy通过内质网应激机制介导心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 同型半胱氨酸 ccaat增强子结合蛋白同源蛋白 内质网氧化还原酶α 肌细胞 心脏 细胞凋亡
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锰对新生大鼠神经细胞凋亡及葡萄糖调节蛋白78和CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白表达的影响
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作者 徐斌 杨天瑶 +4 位作者 李乐慧 邓宇 岳烨 王澜霖 徐兆发 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期565-568,共4页
目的研究不同浓度锰对大鼠神经细胞凋亡及内质网应激信号分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)mRNA与蛋白以及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-12(caspase-12)蛋白表达的影响。方法以出生4~7d的SPF级Wi... 目的研究不同浓度锰对大鼠神经细胞凋亡及内质网应激信号分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)mRNA与蛋白以及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-12(caspase-12)蛋白表达的影响。方法以出生4~7d的SPF级Wistar大鼠脑片为模型,分别用0(对照)、25、100、400μmol/L锰暴露24h。检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的释放量,神经细胞凋亡率以及神经细胞内GRP78、CHOPmRNA和蛋白及caspase-12蛋白的表达。结果与对照组比较,100和400μmol/L锰暴露组培养液中LDH的释放量均较高,而各浓度锰暴露组大鼠神经细胞凋亡率均较高,差异有统计学意义(P〈0.01);且随着锰暴露浓度的升高,培养液中LDH的释放量和大鼠神经细胞凋亡率均呈逐渐升高的趋势。与对照组比较,100和400μmol/L锰暴露组神经细胞内GRP78mRNA及各浓度锰暴露组大鼠神经细胞内CHOPmRNA的表达均较高,而100、400μmol/L锰暴露组神经细胞内GRP78和CHOP蛋白及各浓度锰暴露组大鼠神经细胞内caspase-12蛋白的表达也均较高,差异有统计学意义(P〈0.01);且随着锰暴露浓度的升高,大鼠神经细胞内GRP78、CHOPmRNA和蛋白及caspase-12蛋白的表达均呈逐渐升高的趋势。结论锰可促使大鼠神经细胞凋亡及GRP78和CHOP表达升高。 展开更多
关键词 内质网应激 细胞凋亡 葡萄糖调节蛋白78 ccaat增强子结合蛋白同源蛋白 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-12
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氨基酸对IGF-I、IGFBP、CHOP和AS表达的调控
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作者 张军 张平 《牧草与饲料》 2007年第1期18-20,共3页
氨基酸是动物体内的重要营养素之一,氨基酸影响机体胰岛素样生长因子I(IGF-I)、胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、天冬酰胺合成酶(AS)等的表达,从而来调整机体的氨基酸水平。
关键词 氨基酸 胰岛素样生长因子 胰岛素样生长因子结合蛋白 ccaat增强子结合蛋白同源蛋白 天冬酰胺合成酶
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促红细胞生成素对高氧脑损伤新生大鼠CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白及葡萄糖调节蛋白78表达的影响
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作者 何欣 金福 +1 位作者 赵寒阳 许春花 《延边大学医学学报》 CAS 2019年第1期12-15,共4页
[目的]探讨促红细胞生成素(EPO)对高氧脑损伤新生大鼠CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达的影响.[方法]取足月新生Wistar大鼠随机分为正常对照组(FiO2为21%)、高氧组(FiO2高于85%)和高氧+EPO组(FiO2高于85... [目的]探讨促红细胞生成素(EPO)对高氧脑损伤新生大鼠CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达的影响.[方法]取足月新生Wistar大鼠随机分为正常对照组(FiO2为21%)、高氧组(FiO2高于85%)和高氧+EPO组(FiO2高于85%).将正常对照组新生大鼠置于室内空气中饲养,高氧组和高氧+EPO组大鼠置于FiO2高于85%的室内玻璃箱中饲养.实验第1 d起,高氧+EPO组大鼠每日腹腔注射给予EPO(800 U/kg),实验第1,3,7,14 d时测定各组大鼠脑组织湿/干质量(W/D)比值,采用蛋白免疫印记法检测脑组织中CHOP,GRP78蛋白表达水平.[结果]高氧组新生大鼠第1,3,7,14 d时的脑组织W/D值较正常对照组显著升高(P<0.05),高氧下暴露时间越长,W/D值升高越显著;高氧+EPO组新生大鼠脑组织含水量较高氧组显著降低(P<0.05).高氧组第1,3,7,14 d时的CHOP和GRP78蛋白表达水平较正常对照组显著升高(P<0.05),高氧+EPO组CHOP,GRP78蛋白表达水平较高氧组显著降低(P<0.05).[结论] EPO可缓解高氧引起的新生大鼠脑水肿,对高氧脑损伤具有神经保护作用,其机制认为可能与下调CHOP和GRP78蛋白表达有关系. 展开更多
关键词 高氧脑损伤 重组人促红细胞生成素 ccaat增强子结合蛋白同源蛋白 葡萄糖调节蛋白78 大鼠
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乌司他丁对肝部分切除术后小鼠远期学习记忆能力的影响
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作者 周东民 贾启明 +1 位作者 黄静 幸芳 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1226-1229,共4页
目的 观察乌司他丁(UTI)对肝部分切除术(PH)后小鼠远期学习记忆能力的影响.方法 无特定病原体(SPF)级成年雄性C57BL/6J小鼠45只,采用随机数字表法分为3组:对照组(C组)、PH组和UTI组,每组15只.UTI组小鼠术毕苏醒即刻经腹腔注射U... 目的 观察乌司他丁(UTI)对肝部分切除术(PH)后小鼠远期学习记忆能力的影响.方法 无特定病原体(SPF)级成年雄性C57BL/6J小鼠45只,采用随机数字表法分为3组:对照组(C组)、PH组和UTI组,每组15只.UTI组小鼠术毕苏醒即刻经腹腔注射UTI 50 000 U/(kg&#183;d),C组和PH组小鼠每日腹腔注射等量生理盐水,连续30 d.3组小鼠于末次给药后24h进行Morris水迷宫试验.学习记忆能力测试完毕后处死小鼠,留取海马组织,检测海马组织湿/干重比(W/D)和总含水量(TWC),反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Westem blot分别检测海马组织CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP) mRNA及蛋白表达,原位末端细胞凋亡检测(TUNEL)法检测海马组织细胞凋亡指数(AI).结果 与C组[(17.39 ±7.72)、(12.59 ±6.69)s;(2 122.57± 543.48)、(1 123.69±369.32) mm]比较,PH组小鼠第3、4天的逃避潜伏期[(54.48±9.69)、(56.63 ±7.74)s]及游泳距离[(4 789.48±677.67)、(4987.72 ±884.53) mm]均延长(P<0.05),海马组织W/D(5.47 ±0.98比2.79 ±0.78)、TWC(4.43±0.97比1.79±0.72)及AI[(36.32 ±2.62)%比(2.69±0.75)%]均增加(P<0.05),海马组织CHOP mRNA(0.92 ±0.36比0.38 ±0.08)及蛋白表达(2.79 ±0.79比1.06±0.23)均增加(P<0.05).与PH组比较,UTI组小鼠第3、4天的逃避潜伏期[(23.56 ±7.47)s、(13.62±6.36)s]及游泳距离[(2 234.64 ±890.58) mm、(1 120.67 ±389.74) mm]均缩短(P<0.05),海马组织W/D(2.92 ±0.64比5.47 ±0.98)、TWC(1.86±0.84比4.43 ±0.97)及AI[(13.65±1.74)%比(36.32±2.62)%]均减少(P<0.05),海马组织CHOP mRNA(0.54 ±0.11比0.92±0.36)及蛋白表达(1.41±0.47比2.79±0.79)均降低(P<0.05).结论 UTI可提高PH后小鼠远期学习记忆能力,其机制可能其与抑制海马组织中CHOP介导的细胞凋亡有关. 展开更多
关键词 乌司他丁 ccaat增强子结合蛋白同源蛋白 肝部分切除术 认知紊乱 术后并发症
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