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P300/CBP相关因子(PCAF)表达水平对人子宫内膜间质细胞增殖的影响 被引量：1
1
作者 朱丽华 刘红玉 +4 位作者 沈晓月 甄鑫 王玢 颜桂军 孙海翔 《生殖与避孕》 CAS CSCD 2013年第3期159-166,共8页
目的:观察P300/CBP相关因子(P300/CBP associated factor,PCAF)对人子宫内膜间质细胞增殖的调控作用。方法:通过Western blotting、实时定量PCR及Cell Counting Kit-8(CCK-8)细胞增殖实验,观察分析Ad-FLAG-PCAF重组腺病毒介导的PCAF过... 目的:观察P300/CBP相关因子(P300/CBP associated factor,PCAF)对人子宫内膜间质细胞增殖的调控作用。方法:通过Western blotting、实时定量PCR及Cell Counting Kit-8(CCK-8)细胞增殖实验,观察分析Ad-FLAG-PCAF重组腺病毒介导的PCAF过表达及PCAF-siRNA介导的PCAF低表达对体外培养的人子宫内膜间质细胞增殖的影响。结果:获得滴度为8×1010ifu/ml的重组Ad-FLAG-PCAF腺病毒,转染体外培养的人子宫内膜间质细胞后,可有效介导细胞内FLAG-PCAF融合蛋白的高表达;而转染PCAF特异的siRNA后,可有效抑制人子宫内膜间质细胞中PCAF的表达。PCAF过表达的人子宫内膜间质细胞中,其细胞周期标志蛋白cyclinD1和cyclinD3的表达水平显著降低(P<0.05),而PCAF低表达的人子宫内膜间质细胞中,其cyclinD1和cyclinD3的表达水平显著升高(P<0.05);此外,CCK-8实验结果显示,PCAF过表达能显著抑制由雌、孕激素共同刺激所引起的人子宫内膜间质细胞的增殖,而基因沉默人子宫内膜间质细胞中内源性PCAF的表达后,间质细胞的增殖增加>20%(P<0.05)。结论:PCAF可能通过蛋白乙酰化修饰作用,参与调控人子宫内膜间质细胞的增殖过程。 展开更多
关键词 P300 cbp相关因子(pcaf) 人子宫内膜间质细胞 增殖
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沉默PCAF基因抑制人肾上腺皮质癌裸鼠移植瘤生长及血管生成的实验研究
2
作者 陈帅 胡卫列 +2 位作者 欧阳可育 聂奇伟 王尉 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期454-458,共5页
目的探讨靶向沉默肾上腺皮质癌SW13细胞PCAF基因表达对裸鼠移植瘤生长以及血管生成的抑制作用及其机制。方法 p Lenti6.3-Mi RNA-PCAF重组慢病毒及p Lenti6.3-Mi RNA-NC重组慢病毒分别感染SW13细胞,将感染后的两组细胞及未处理的SW13细... 目的探讨靶向沉默肾上腺皮质癌SW13细胞PCAF基因表达对裸鼠移植瘤生长以及血管生成的抑制作用及其机制。方法 p Lenti6.3-Mi RNA-PCAF重组慢病毒及p Lenti6.3-Mi RNA-NC重组慢病毒分别感染SW13细胞,将感染后的两组细胞及未处理的SW13细胞分别接种于15只裸鼠腋下,构建裸鼠移植瘤模型,分为实验组、阴性对照组、空白对照组,并观察各组肿瘤生长情况。Western blot、荧光定量PCR检测移植瘤组织PCAF蛋白、m RNA表达水平,HE染色法观察各组移植瘤组织形态学变化,免疫组织化学法检测VEGF表达及微血管密度。结果实验组小鼠的肿瘤体积较阴性对照组和空白对照组显著缩小,肿瘤抑制率分别为49.2%和52.9%;PCAF蛋白相对表达水平较阴性对照组下降58.4%,m RNA相对表达水平较阴性对照组下降74.3%;实验组与阴性对照组和空白对照组相比,瘤内VEGF蛋白表达明显下调;实验组微血管密度(19.4±4.2)与阴性对照组(42.7±6.5)和空白对照组(51.3±8.6)相比明显下降。结论慢病毒介导的p Lenti6.3-Mi RNAPCAF能有效抑制肾上腺皮质癌细胞裸鼠移植瘤的生长及血管生成。 展开更多
关键词 P300/cbp相关因子(pcaf) 肾上腺皮质癌 血管生成 血管内皮生长因子 移植瘤
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组蛋白乙酰转移酶PCAF通过与PML蛋白的作用而定位于细胞核ND10结构
3
作者 李平法 刘辉 詹合琴 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期21-27,共7页
PCAF(P300/CBP associated factor,P300/CBP相关因子)是一种重要的组蛋白乙酰转移酶,主要通过使核小体组蛋白发生乙酰化而参与基因转录的调控。P300/CBP是一种能够与PCAF相互作用的宿主细胞蛋白,定位于细胞核ND10结构(nuclear dot10)。N... PCAF(P300/CBP associated factor,P300/CBP相关因子)是一种重要的组蛋白乙酰转移酶,主要通过使核小体组蛋白发生乙酰化而参与基因转录的调控。P300/CBP是一种能够与PCAF相互作用的宿主细胞蛋白,定位于细胞核ND10结构(nuclear dot10)。ND10是由70余种蛋白质分子组成的、以分散的斑点或团块样方式存在于细胞核内的大分子复合物,与基因转录调控过程有着密切关系。早幼粒细胞白血病蛋白(promyelocytic leukemia protein,PML)是ND10的主要组成成分,对于维持ND10的正常结构与功能至关重要。在成功构建pGBK-PML3、pGAD-PCAF、pGEX-PCAF、pFlag-PCAF和pcDNA-PML3重组质粒的基础上,用酵母双杂交证明PCAF与PML3之间存在着相互作用;用GST-pull down技术证明GST-PCAF能够将PML3蛋白捕获并沉降下来,表明在体外条件下两者之间存在直接的相互作用;用免疫共沉淀和荧光共定位证明在体内PCAF能够与PML发生直接的相互作用而定位于ND10。这些结果为进一步深入研究PCAF的生物学功能和作用模式奠定了基础。 展开更多
关键词 P300/cbp相关因子(pcaf) 早幼粒细胞白血病蛋白(PML) 核斑10(ND10)
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