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LncRNA CASC7/miR-98-5p/SIRT3轴调控慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症反应和平滑肌细胞变化 被引量：6
1
作者 梁海梅 欧宗兴 +1 位作者 王蕾 陈忠仁 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期142-148,共7页
目的:探讨LncRNA CASC7/miR-98-5p/SIRT3轴对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道炎症反应和支气管平滑肌细胞(BSMCs)的影响。方法:收集临床标本用于检测CASC7、miR-98-5p、SIRT3的表达。双荧光素酶报告实验用于验证CASC7/miR-98-5p、miR-98... 目的:探讨LncRNA CASC7/miR-98-5p/SIRT3轴对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道炎症反应和支气管平滑肌细胞(BSMCs)的影响。方法:收集临床标本用于检测CASC7、miR-98-5p、SIRT3的表达。双荧光素酶报告实验用于验证CASC7/miR-98-5p、miR-98-5p/SIRT3之间的靶向关系。建立COPD大鼠模型,ELISA检测大鼠血清中炎症相关因子表达。对BSMCs进行分组转染,使用ELISA、CCK-8、流式细胞术检测细胞炎症因子的表达、增殖能力、凋亡情况。Western blot检测PI3K信号通路相关因子的表达。结果:相对于正常样本,CASC7、SIRT3在COPD中低表达,miR-98-5p高表达,且CASC7、SIRT3与miR-98-5p的表达均呈负相关(均P<0.05)。CASC7能够调控miR-98-5p/SIRT3表达并影响PI3K信号通路变化。过表达CASC7或miR-98-5p抑制剂可阻滞炎症因子分泌和BSMCs增殖,促进BSMCs凋亡,但这种效果被SIRT3敲减部分挽救(均P<0.05)。结论:CASC7能够通过调控miR-98-5p/SIRT3轴进而减少气道炎症因子分泌,抑制BSMCs的增殖,并诱导其凋亡,CASC7在COPD的进展中扮演重要角色。 展开更多
关键词 LncRNA casc7 慢性阻塞性肺疾病 支气管平滑肌细胞 增殖 凋亡
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LncRNA CASC7/miR-21/Wnt2b轴介导糖尿病肾病小鼠肾纤维化的机制研究 被引量：4
2
作者 连欢 魏小宝 张娟 《分子诊断与治疗杂志》 2023年第1期60-64,共5页
目的 探究miR-21靶向调控肾纤维化的发生发展机制,为临床糖尿病肾病(DN)的治疗提供新的思路。方法 24只C57BLKS/J-Leprdb/db小鼠随机分为实验1组、实验2组与对照组,每组8只。实验1组进行单侧肾切除术,术后2月,实验1组和实验2组小鼠采用... 目的 探究miR-21靶向调控肾纤维化的发生发展机制,为临床糖尿病肾病(DN)的治疗提供新的思路。方法 24只C57BLKS/J-Leprdb/db小鼠随机分为实验1组、实验2组与对照组,每组8只。实验1组进行单侧肾切除术,术后2月,实验1组和实验2组小鼠采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立糖尿病肾病动物模型。HE染色法观察肾组织病理学改变,Masson染色法观察肾组织纤维化状况,qRT-PCR法检测各组肾组织中LncRNA CASC7、miR-21、Wnt2b、SMAD7表达水平,western blot法检测Wnt2b和SMAD7的蛋白表达水平,荧光素酶报告系统鉴定LncRNA CASC7和miR-21靶向关系。Pearson相关性分析肾组织中LncRNA CASC7和miR-21的表达水平与糖尿病肾病肾纤维化之间的关系。结果染色试验中观察到实验1组与实验2组小鼠肾小球肥大,系膜细胞及系膜基质增生,肾小管上皮细胞空泡变性。肾组织存在炎性细胞浸润、肾小管萎缩与间质纤维化。肾组织纤维化评分:实验1组(2.87±0.66)分>实验2组(2.17±0.62)分>对照组(0.57±0.14)分,差异有统计学意义(P>0.05);LncRNA CASC7、miR-21、Wnt2b、SMAD7表达水平:实验1组>实验2组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,实验1组和实验2组Wnt2b和SMAD7蛋白表达均升高,且实验1组高于实验2组,差异有统计学意义(P<0.05);荧光素酶报告表明LncRNA CASC7可与miR-21靶向结合。Pearson相关性分析结果显示,肾组织中LncRNA CASC7和miR-21的表达水平与糖尿病肾病肾纤维化呈正相关(r=0.412、0.371,P均<0.05)。结论 LncRNA CASC7可通过调控下游miR-21改变Wnt2b、SMAD7的表达,从而参与调控Wnt2b、SMAD通路,并介导DN肾纤维化的发展。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 肾纤维化 LncRNA casc7 MIR-21 Wnt2b
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LncRNA CASC7通过调控miR-19b-3p/SMG1轴抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭 被引量：4
3
作者 秦宝山 郭云霞 +1 位作者 王勇 马英杰 《热带医学杂志》 CAS 2021年第3期276-283,343,共9页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)癌易感性候选基因7(CASC7)对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测肝癌组织、对应癌旁组织和肝癌细胞系Huh7、HepG2和MHCC97H及正常肝细胞系THLE-2中CASC... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)癌易感性候选基因7(CASC7)对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测肝癌组织、对应癌旁组织和肝癌细胞系Huh7、HepG2和MHCC97H及正常肝细胞系THLE-2中CASC7、微小RNA-19b-3p(miR-19b-3p)和生殖器形成抑制基因1(SMG1)mRNA表达水平。以肝癌HepG2细胞为研究对象,转染CASC7过表达载体、miR-19b-3p抑制剂或SMG1过表达载体至HepG2细胞,3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)、Transwell和蛋白印迹(Western blot)分别检测过表达CASC7、沉默miR-19b-3p表达或过表达SMG1对HepG2细胞增殖、迁移和侵袭及细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(p21)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和E-钙粘附素(Ecadherin)蛋白表达的影响。双荧光素酶报告基因实验验证CASC7与miR-19b-3p及miR-19b-3p与SMG1之间的调控关系。结果与癌旁组织比较,肝癌组织中CASC7和SMG1 mRNA水平降低,miR-19b-3p水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与THLE-2细胞比较,肝癌细胞系Huh7、HepG2和MHCC97H中CASC7和SMG1 mRNA水平降低,miR-19b-3p水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。过表达CASC7、沉默miR-19b-3p表达或过表达SMG1均可降低HepG2细胞存活率、迁移和侵袭数及Cyclin D1和MMP-2蛋白表达,提高p21和E-cadherin蛋白表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。CASC7负调控miR-19b-3p表达,miR-19b-3p负调控SMG1表达。过表达miR-19b-3p或沉默SMG1表达逆转了过表达CASC7对HepG2细胞存活率、迁移和侵袭及相关蛋白Cyclin D1、p21、MMP-2和Ecadherin表达的影响。结论过表达CASC7可能通过调控miR-19b-3p/SMG1轴抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 肝癌 casc7 miR-19b-3p 生殖器形成抑制基因1 细胞增殖 迁移 侵袭
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LncRNA CASC7与miR-27b-3p在肺结核外周血单核细胞中的表达及意义 被引量：2
4
作者 肖欢容 王少锋 蔡志钢 《临床肺科杂志》 2021年第4期548-551,555,共5页
目的探讨长链非编码RNA CASC7(LncRNA CASC7)与微小RNA-27b-3p(miR-27b-3p)在肺结核外周血单核细胞中的表达及意义。方法结核菌H37Rv、H37Ra分别感染单核细胞,采用qRT-PCR法检测CASC7、miR-27b-3p的表达量;双荧光素酶报告基因实验检测CA... 目的探讨长链非编码RNA CASC7(LncRNA CASC7)与微小RNA-27b-3p(miR-27b-3p)在肺结核外周血单核细胞中的表达及意义。方法结核菌H37Rv、H37Ra分别感染单核细胞,采用qRT-PCR法检测CASC7、miR-27b-3p的表达量;双荧光素酶报告基因实验检测CASC7与miR-27b-3p的靶向关系;选取2018年3月至2019年10月本院收治的肺结核患者120例为研究组,根据活动性肺结核诊断标准将肺结核患者分为非活动性肺结核组60例、活动性肺结核组60例,同时选取同期健康体检者60例为对照组;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测CASC7、miR-27b-3p的表达量;ROC分析CASC7与miR-27b-3p对肺结核的诊断价值。结果与感染前比较,H37Rv、H37Ra感染后单核细胞中CASC7的表达水平显著降低(P<0.05),miR-27b-3p的表达水平显著升高(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实CASC7可靶向结合miR-27b-3p;与对照组比较,研究组患者外周血单核细胞中CASC7的表达水平显著降低(P<0.05),且活动性肺结核组显著低于非活动性肺结核组(P<0.05),miR-27b-3p的表达水平显著升高(P<0.05),且活动性肺结核组显著高于非活动性肺结核组(P<0.05);ROC分析显示CASC7的敏感度为57.50%,特异度为91.67%,AUC面积为0.781;miR-27b-3p的敏感度为57.50%,特异度为81.67%,AUC面积为0.665;联合检测的敏感度为96.67%,特异度为60.00%,AUC面积为0.802。结论肺结核外周血单核细胞与结核菌感染单核细胞中CASC7表达下调,miR-27b-3p表达上调,对肺结核辅助诊断及靶向治疗均具有一定参考价值。 展开更多
关键词 肺结核 LncRNA casc7 miR-27b-3p 诊断
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长链非编码RNA CasC7对宫颈癌细胞增殖的影响 被引量：2
5
作者 严德文 胡盈盈 +3 位作者 梁宗文 项军淼 余丹扬 段萍 《温州医科大学学报》 CAS 2018年第2期91-95,共5页
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)CasC7在宫颈癌中的表达水平以及对宫颈癌发生发展的影响。方法:利用生物信息学方法分析宫颈癌芯片GSE9750中lncRNA CasC7的表达情况。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤变(CIN... 目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)CasC7在宫颈癌中的表达水平以及对宫颈癌发生发展的影响。方法:利用生物信息学方法分析宫颈癌芯片GSE9750中lncRNA CasC7的表达情况。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤变(CIN)组织、正常宫颈组织及正常宫颈上皮细胞(H8细胞)、宫颈癌细胞(SiHa、CaSki和HeLa细胞)中lnc RNA Cas C7的表达量,并分析CasC7的表达水平与宫颈癌临床病理特征的关系。同时,采用CCK-8实验检测下调CasC7的表达对宫颈癌细胞增殖情况的影响。结果:lncRNA CasC7在宫颈癌组织以及CIN组织中的表达水平较正常宫颈组织中高(P<0.01)。与H8细胞相比,CasC7在Si Ha、CaSki和HeLa细胞中的表达量均较高(P<0.05)。临床数据分析显示,CasC7的表达水平与FIGO分期(P=0.001)、肿瘤分化程度相关(P=0.015),而与年龄、肿瘤大小等因素无关(P>0.05)。CCK-8实验结果表明下调Cas C7的表达能抑制SiHa、CaSki和HeLa细胞的增殖(P<0.05)。结论:lncRNA CasC7在宫颈癌的发生发展过程中可能是起促癌基因的作用。 展开更多
关键词 长链非编码RNA casc7 宫颈肿瘤 细胞增殖
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IncRNA CASC7、miR-21、Wnt2b、Smad7在肾纤维化大鼠肾组织中的表达意义分析 被引量：1
6
作者 连欢 魏小宝 张娟 《湖南师范大学学报（医学版）》 2022年第6期23-28,共6页
目的:探讨长链非编码(Inc)RNA CASC7、微小RNA-21(miR21)、Wnt2b、Smad7在肾纤维化大鼠肾组织中的表达意义.方法:选取35只雄性8周龄健康SD大鼠,随机分为对照组(n=10)与模型组(n=25),模型组大鼠单侧肾切除后腹腔单次注射链脲佐菌素(40 mg... 目的:探讨长链非编码(Inc)RNA CASC7、微小RNA-21(miR21)、Wnt2b、Smad7在肾纤维化大鼠肾组织中的表达意义.方法:选取35只雄性8周龄健康SD大鼠,随机分为对照组(n=10)与模型组(n=25),模型组大鼠单侧肾切除后腹腔单次注射链脲佐菌素(40 mg/kg)建立糖尿病肾病模型,模型组大鼠在建模成功后2w、8w时随机选取10只处死后取肾脏组织,进行HE、Masson染色观察肾组织病理及纤维化程度,并通过qRT-PCT检测大鼠肾脏组织中IncRNA CASC7、miR-21相对表达水平,Western blot法检测Wnt2b、Smad7、I型胶原(Col-I)、IV型胶原(Col-IV)及纤维连接蛋白(FN)蛋白表达,并分析IncRNA CASC7、miR-21及Wnt2b、SMAD7与肾组织纤维化程度以及Col-I、Col-IV、FN的相关性.结果:2w、8w时,模型组大鼠尿白蛋白、尿肌酐、UACR、肾体比、肾纤维化严重程度评分、CVF均高于对照组(P<0.05);8w尿白蛋白、尿肌酐、UACR、肾体比、肾纤维化严重程度评分、CVF均高于2w(P<0.05);2w时模型组大鼠表现出肾皮质管壁增厚、炎性细胞浸润和胶原沉积,8 w时模型组大鼠纤维化和胶原沉积加重.与对照组比较,模型组2w、8w时大鼠肾组织CASC7 mRNA水平降低,miR-21 mRNA水平升高(P<0.05),Wnt2b、Smad7、Col-I、Col-IV、FN蛋白表达升高(P<0.05),且8w时上述指标变化趋势更显著(P<0.05).CASC7表达与DN大鼠肾纤维化程度、Col-I、Col-IV、FN呈负相关(P<0.05),miR-21、Wnt2b、Smad7与DN大鼠纤维化程度、Col-I、Col-IV、FN呈正相关(P<0.05).结论:IncRNA CASC7、miR-21、Wnt2b、Smad7参与肾纤维化大鼠疾病进展过程,其表达水平与肾纤维化程度存在关系. 展开更多
关键词 糖尿病肾病 肾纤维化 casc7 MIR-21 大鼠
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lncRNA CASC7靶向下调miR-181a-2-3p表达影响非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭 被引量：1
7
作者 蒙冲 谢甜 陈永倖 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第19期2327-2331,2337,共6页
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)CASC7对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法:收集2017年10月至2018年12月于本院行手术切除的39例NSCLC患者的癌组织和对应的癌旁组织,RT-qPCR检测组织中CASC7和miR-18... 目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)CASC7对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法:收集2017年10月至2018年12月于本院行手术切除的39例NSCLC患者的癌组织和对应的癌旁组织,RT-qPCR检测组织中CASC7和miR-181a-2-3p表达水平,Pearson相关性分析癌组织中CASC7和miR-181a-2-3p表达的相关性。体外培养NSCLC细胞A549,双荧光素酶报告基因实验验证CASC7和miR-181a-2-3p调控关系。A549细胞分为对照组、pcDNA组、pcDNA-CASC7组、pcDNA-CASC7+miR-NC组和pcDNA-CASC7+miR-181a-2-3p组,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、活化的半胱天冬酶-3(cleaved-caspase-3)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9的蛋白表达。结果:与癌旁组织比较,NSCLC患者癌组织中CASC7表达水平降低(P<0.05),miR-181a-2-3p表达水平升高(P<0.05)。NSCLC患者癌组织中CASC7与miR-181a-2-3p的表达呈负相关(r=−0.694,P<0.05)。CASC7负调控miR-181a-2-3p表达。与pcDNA组比较,pcDNA-CASC7组细胞OD值、迁移和侵袭数及Cy-clinD1、MMP-2和MMP-9蛋白表达降低(P<0.05),凋亡率和cleaved-caspase-3蛋白表达升高(P<0.05)。与pcDNA-CASC7+miR-NC组比较,pcDNA-CASC7+miR-181a-2-3p组细胞OD值、迁移和侵袭数及CyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白表达升高(P<0.05),凋亡率和cleaved-caspase-3蛋白表达降低(P<0.05)。而对照组与pcDNA组、pcDNA-CASC7组、pcDNA-CASC7+miR-NC组各检测指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:NSCLC患者癌组织中CASC7表达降低,过表达CASC7可能通过下调miR181a-2-3p抑制NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 NSCLC casc7 miR-181a-2-3p 细胞增殖 凋亡 迁移 侵袭
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