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miR-423-3p通过下调CARNS1促进乳腺癌细胞恶性生物学行为
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作者 李金洋 陈东旭 +1 位作者 傅腾超 吴琍 《临床医学进展》 2024年第3期415-423,共9页
目的:探讨miR-423-3p对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响及作用机制。方法:体外培养人乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-468、MCF-7、BT-549及正常乳腺上皮细胞MCF-10A,采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法和Western Blot方法,分别检测miR-423... 目的:探讨miR-423-3p对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响及作用机制。方法:体外培养人乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-468、MCF-7、BT-549及正常乳腺上皮细胞MCF-10A,采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法和Western Blot方法,分别检测miR-423-3p及CARNS1 mRNA和蛋白相对表达量。选取MCF-7细胞,将细胞分为转染mimics NC组(A组)、转染miR-423-3p mimics组(B组)、转染inhibitors NC组(C组)、转染inhibitors组(D组)。在239T细胞中分别转染并分为CARNS1-3'-UTR-wt+miR-423-3p mimics (E组)、CARNS1-3'-UTR-wt-mimics NC (F组)、CARNS1-3'-UTR-mut+miR-423-3p mimics (G组)及CARNS1-3'-UTR-mut+mimics NC (H组)。采用RT-qPCR和Western Blot法,检测A~D组细胞miR-423-3p及CARNS1 mRNA和蛋白表达情况,采用CCK8法、细胞划痕实验、Transwell法和流式细胞术检测细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡情况。在线数据库预测miR-423-3p与CARNS1基因3'非翻译区(3'-UTR)的互补结合位点,双荧光素酶报告基因实验验证预测结果。结果:RT-qPCR结果显示,MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-468及BT-549细胞中miR-423-3p的相对表达量均明显高于正常乳腺上皮细胞MCF-10A (P 0.05)。RT-qPCR检测结果显示,B组细胞的miR-423-3p相对表达量明显高于A组(P < 0.05),而CARNS1 mRNA相对表达量明显低于A组(P < 0.05),D组细胞的miR-423-3p相对表达量明显低于C组(P < 0.05),而CARNS1 mRNA相对表达量明显高于C组(P < 0.05)。结论:miR-423-3p可通过靶向调控CARNS1促进乳腺癌细胞的恶性生物学行为。 展开更多
关键词 乳腺癌 微小RNA miR-423-3p carns1
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