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清肺透邪汤对肺炎支原体感染小鼠CARDS TX/NLRP3炎性小体相关因子表达的影响 被引量:13
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作者 王子 王雪峰 +2 位作者 张秀英 吴振起 张童 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2020年第7期121-126,I0017,共7页
目的探讨清肺透邪汤对肺炎支原体(MP)感染后CARDS TX及NLRP3炎性小体相关因子的变化及相关性,试图进一步明确清肺透邪汤防治肺炎支原体肺炎(MPP)的效应靶点。方法随机将48只Balb/c幼鼠分成正常组、模型组、清肺透邪汤组、阿奇霉素组4组... 目的探讨清肺透邪汤对肺炎支原体(MP)感染后CARDS TX及NLRP3炎性小体相关因子的变化及相关性,试图进一步明确清肺透邪汤防治肺炎支原体肺炎(MPP)的效应靶点。方法随机将48只Balb/c幼鼠分成正常组、模型组、清肺透邪汤组、阿奇霉素组4组,每组12只。除正常组外,对其余3组Balb/c幼鼠采用滴鼻法进行MP感染。造模后,清肺透邪汤组每只幼鼠给予15 g/kg的对应方剂进行灌胃,1次/d,连续14 d;阿奇霉素组,每只幼鼠给予阿奇霉素90 mg/kg灌胃,1次/d,连续3 d,停药4 d,2个周期,停药期间给予蒸馏水灌胃;正常组、模型组每只幼鼠均给予0.3 mL蒸馏水灌胃。在感染后的第3、7、10、14天进行取材,运用Real-time PCR法检测肺组织CARDS TX、NLRP3、ASC及Caspase-1的表达,采用ELISA法检测血清中IL-1β表达水平,采用免疫组化法检测肺组织中NF-κB表达。结果MP感染后,幼鼠肺组织出现炎症改变,镜下可见肺泡壁增厚、肺泡上皮细胞破坏、浸润。MP感染后,幼鼠肺组织中的CARDS TX、NLRP3、ASC及Caspase-1基因表达明显升高;与模型相比,清肺透邪方组幼鼠肺组织中的CARDS TX、NLRP3、ASC及Caspase-1基因表达明显下降,其上游调控因子NF-κB减少,下游促炎因子IL-1β降低(均P<0.05)。结论清肺透邪汤可以有效地下调CARDS TX基因表达,降低MP毒力作用的主要效应靶点;初步证实了清肺透邪汤可以通过NF-κB通路调控,影响NLRP3炎性小体合成,促使IL-1β所致炎性反应减弱,可能是保护肺损伤的相关机制。 展开更多
关键词 肺炎支原体 清肺透邪汤 NLRP3 cards tx 小鼠
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儿童肺炎支原体肺炎的临床特征及其发病机制探讨 被引量:6
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作者 曲艳杰 高淑青 +3 位作者 孙红匣 王冬梅 董春凤 王佩霞 《包头医学院学报》 CAS 2022年第10期64-69,共6页
目的:观察儿童肺炎支原体肺炎的临床特征,探讨社区获得性呼吸窘迫综合征毒素(CARDS TX)及血清IL-1β的表达等因素在肺炎支原体肺炎发病中的作用。方法:选取本院2019年1月—2020年1月住院的社区获得性肺炎患儿120例为研究对象,分为重症... 目的:观察儿童肺炎支原体肺炎的临床特征,探讨社区获得性呼吸窘迫综合征毒素(CARDS TX)及血清IL-1β的表达等因素在肺炎支原体肺炎发病中的作用。方法:选取本院2019年1月—2020年1月住院的社区获得性肺炎患儿120例为研究对象,分为重症支原体肺炎组(SMPP)(30例)、非重症支原体肺炎组(NSMPP)(50例)及非支原体肺炎组(NMPP)(40例);所有研究对象检测支气管灌洗液CARDS TX水平及外周静脉血IL-1β、血生化、炎症指标、凝血功能等。结果:(1)CARDS TX和IL-1β:SMPP组明显高于NSMPP组,NSMPP组均高于NMPP组,差异均有统计学意义(P<0.05);(2)乳酸脱氢酶(LDH):SMPP组明显高于NSMPP和NMPP组,差异均有统计学意义(P<0.05);(3)炎性指标:C反应蛋白(CRP)和铁蛋白SMPP组明显高于NMPP组;降钙素原(PCT)NMPP组高于SMPP和NSMPP组,差异均有统计学意义(P<0.05);(4)凝血指标:凝血酶原时间(PT)、PT活动度(PT%)、部分凝血酶原时间(APTT)在SMPP组明显短于NSMPP组,又短于NMPP组;纤维蛋白原(FIB)SMPP组高于NSMPP,又高于NMPP组;D-二聚体(D-Di)SMPP组高于NSMPP、NMPP组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)CARDS TX可导致呼吸道损伤,同时诱导炎症因子IL-1β的产生增加,临床上可以通过CARDS TX的检测对支原体肺炎进行诊断,为进一步有针对性的治疗提供理论依据;(2)支原体感染后存在较严重的机体炎症反应,为抗炎治疗提供有力证据;(3)支原体感染时存在高凝血功能异常,是导致支原体感染出现血栓的原因,是引起支原体感染难治和重症的影响因素。 展开更多
关键词 肺炎支原体肺炎 cards tx IL-1β 炎性指标 凝血指标 生化指标
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柴葛芩连汤对解脲脲原体肺炎小鼠肺功能及CARDS TX/NLRP3信号通路的影响 被引量:1
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作者 黄方 许诣 +4 位作者 杨雪 汪枝繁 王静 沈文婷 陈霞 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期2537-2542,共6页
目的探究柴葛芩连汤对解脲脲原体肺炎模型小鼠肺功能以及CARDS TX/NLRP3信号通路的影响。方法60只小鼠分为对照组,肺炎组,柴葛芩连汤低、高剂量组和阿奇霉素组。鼻腔滴注解脲脲原体菌液进行造模,柴葛芩连汤低、高剂量组灌胃5.4、16.2 g... 目的探究柴葛芩连汤对解脲脲原体肺炎模型小鼠肺功能以及CARDS TX/NLRP3信号通路的影响。方法60只小鼠分为对照组,肺炎组,柴葛芩连汤低、高剂量组和阿奇霉素组。鼻腔滴注解脲脲原体菌液进行造模,柴葛芩连汤低、高剂量组灌胃5.4、16.2 g/kg柴葛芩连汤;阿奇霉素组灌胃90 mg/kg阿奇霉素溶液2个周期(1周期为7 d,前3 d连续灌胃阿奇霉素溶液,后4 d灌胃等量蒸馏水);对照组和肺炎组灌胃等量蒸馏水,连续14 d。采用动物肺功能分析仪检测肺功能,ELISA法检测肺泡灌洗液中炎症因子水平,HE染色观察肺组织病理变化,RT-qPCR和Western blot法检测肺组织肺炎支原体外毒素(CARDS TX)、炎症小体(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)的mRNA和蛋白表达。结果与对照组比较,肺炎组小鼠PEF、FEV0.1、FEF-50降低(P<0.05),IL-6、TNF-α水平及CARDS TX、NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA和蛋白表达均升高(P<0.05),肺泡结构模糊,有炎性细胞浸润;与肺炎组比较,柴葛芩连汤各剂量组和阿奇霉素组小鼠PEF、FEV0.1与FEF-50升高(P<0.05),IL-6、TNF-α水平及CARDS TX、NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05),肺组织病理变化有不同程度缓解。结论柴葛芩连汤可以改善解脲脲原体肺炎小鼠受损的肺功能,该作用可能与抑制CARDS TX/NLRP3信号通路有关。 展开更多
关键词 柴葛芩连汤 肺炎 解脲脲原体 cards tx NLRP3
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重组CARDsTX融合蛋白的表达纯化与复性 被引量:2
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作者 牛健 于晓旭 +2 位作者 李雪 鲍会静 刘运德 《天津医科大学学报》 2014年第3期184-187,共4页
目的:构建pET28α-CARDs TX重组质粒,诱导CARDs TX融合蛋白表达,并对其进行纯化与复性研究。方法:将CARDs TX基因(MPN 372)克隆入pET28α载体,经8次点突变获得pET28α-CARDs TX重组质粒。转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达。利用亲和层析... 目的:构建pET28α-CARDs TX重组质粒,诱导CARDs TX融合蛋白表达,并对其进行纯化与复性研究。方法:将CARDs TX基因(MPN 372)克隆入pET28α载体,经8次点突变获得pET28α-CARDs TX重组质粒。转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达。利用亲和层析技术纯化蛋白并通过SDS-PAGE和Western blot检测CARDs TX的表达和纯化效果。利用尿素梯度复性法和扩大体积透析法对蛋白进行复性研究。结果:酶切和测序结果证明pET28α-CARDs TX重组质粒的DNA序列完全正确,在BL21中CARDs TX融合蛋白可高效表达,并可获得高纯度目的蛋白。利用扩大体积透析法对目的蛋白复性有较好的效果。结论:成功构建出pET28α-CARDs TX重组质粒,且CARDs TX可在大肠杆菌中高效表达,并可获得高纯度的目的蛋白,为深入研究CARDs 展开更多
关键词 cardstx 质粒构建 点突变 蛋白纯化 蛋白复性
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儿童肺炎支原体肺炎肺泡灌洗液CARDS TX、HMGB1、TLR2表达及临床意义
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作者 李玉琴 王喆 +2 位作者 丁莹 储矗 周卫芳 《右江医学》 2024年第5期399-404,共6页
目的研究肺炎支原体肺炎(MPP)患儿肺泡灌洗液中社区获得性呼吸窘迫综合征毒素(CARDS TX)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)、Toll样受体2(TLR2)表达,探讨其在MPP发病中的临床意义。方法回顾性分析55例MPP病例组及20例对照组临床资料,同时检测两... 目的研究肺炎支原体肺炎(MPP)患儿肺泡灌洗液中社区获得性呼吸窘迫综合征毒素(CARDS TX)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)、Toll样受体2(TLR2)表达,探讨其在MPP发病中的临床意义。方法回顾性分析55例MPP病例组及20例对照组临床资料,同时检测两组支气管肺泡灌洗液(BALF)中CARDS TX、HMGB1、TLR2、TLR4、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)及髓样分化因子88(MyD88)表达,体外检测不同浓度CARDS TX刺激下HMGB1、TLR2的表达并进行比较。结果与对照组相比,MPP组LYM绝对值计数、PA、CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)、CD3-CD19^(+)、NK cell、CD19^(+)CD23^(+)明显下降,CRP、LDH、D-二聚体、IgA、IgG、IgM、CARDS TX、HMGB1、TLR2、MyD88均升高,差异有统计学意义(P<0.05或0.001)。CARDS TX刺激后HMGB1、TLR2的表达升高,且呈正相关,差异有统计学意义(P<0.001)。结论CARDS TX可能通过HMGB1-TLR2-MyD88途径参与肺炎支原体(MP)的致病。 展开更多
关键词 肺炎支原体肺炎 社区获得性呼吸窘迫综合征毒素 高迁移率族蛋白1 TOLL样受体2 髓样分化因子88
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临床儿童感染肺炎支原体的临床分型以及CARDS TX基因的验证
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作者 麦荣嘉 黄研 +1 位作者 马丹娟 邓文喻 《国际医药卫生导报》 2021年第11期1607-1610,共4页
目的了解临床肺炎支原体(MP)分离株的临床分型以及验证获得性呼吸窘迫综合征毒素(CARDSTX)的基因序列保守性。方法收集本院2019年的儿童感染MP的呼吸道标本165例,使用液体培养分离获得MP菌株,并快速循环聚合酶链反应(Rapid-CyclePCR)鉴... 目的了解临床肺炎支原体(MP)分离株的临床分型以及验证获得性呼吸窘迫综合征毒素(CARDSTX)的基因序列保守性。方法收集本院2019年的儿童感染MP的呼吸道标本165例,使用液体培养分离获得MP菌株,并快速循环聚合酶链反应(Rapid-CyclePCR)鉴定MP的分型和验证CARDSTX基因。通过比对CARDSTX序列,分析本院临床分离的MP菌株的CARDSTX基因序列保守性。结果根据酚红指示剂显色结果,分离25株MP菌株以及通过Rapid-CyclePCR鉴定均为运用CARDSTX引物,均能扩增CARDSTX基因序列。通过比对MP临床株的CARDSTX基因序列与M129序列同源性,发现一致性达99.88%。结论本院分离的25例MP菌株均为P1-1型,并且临床MP分离株的CARDSTX基因具有高度保守性,可作为研究MP感染的核心靶标。 展开更多
关键词 肺炎支原体 基因分型 cardstx基因
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