目的:研究妊娠期高血压(PIH)患者血清中miR-204-5p、miR-1233-3p及miR-95-5p的表达水平及可能作用机制,以期为PIH的早期诊断及治疗提供临床及理论依据。方法:选取2017年12月至2019年1月河南省人民医院产科收治的20例PIH患者为病例组,同...目的:研究妊娠期高血压(PIH)患者血清中miR-204-5p、miR-1233-3p及miR-95-5p的表达水平及可能作用机制,以期为PIH的早期诊断及治疗提供临床及理论依据。方法:选取2017年12月至2019年1月河南省人民医院产科收治的20例PIH患者为病例组,同期20例正常妊娠者为对照组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析血清miR-204-5p、miR-1233-3p及miR-95-5p表达,通过生物信息学对miRNA的靶基因及生物作用途径进行预测。qRT-PCR法和Western blot法检测cAMP-PKA信号通路相关基因及蛋白含量。结果:与对照组比较,病例组中miR-204-5p和miR-1233-3p表达显著升高,差异均有统计学意义( P <0.05)。借助miRDB和TargetScan两个权威的miRNA靶基因数据库对两种miRNA靶基因进行预测并通过韦恩图进行交集筛选,结果显示miR-204-5p的靶基因为459个,miR-1233-3p的靶基因为117个。基因功能(GO)分析富集结果显示,排在第一位的生物过程(BP)、分子功能(MF)、细胞组分(CC)分别是RNA聚合酶II启动子转录的正调控(positive regulation of transcription from RNA polymerase II promoter)、转录激活活性(transcriptional activator activity)和细胞质(cytoplasm);Pathway分析排在首位的信号通路为Aldosterone synthesis and secretion信号通路。qRT-PCR和Western blot结果显示,与对照组比较,PKA、PHK、GP和CREB基因,以及PKA、PHK和CREB蛋白均显著下降,差异均有统计学意义( P <0.05)。结论: miR-204-3p和miR-1233-3p可能与PIH的发生发展相关,其可能作用途径为调控cAMP-PKA信号通路;mi-204-3p和miR-1233-3p可作为PIH血清检测的分子标记物,为PIH的靶向治疗提供理论依据。展开更多
目的研究ABHD2在不育症患者精子膜表面的表达差异,探究孕酮是否通过ABHD2调控cAMP-PKA进而影响精子的功能活性。方法收集男性正常生育组精子、少弱精子组和顶体异常组精子样本(各30例),通过RT-PCR、蛋白Western-Blot印迹等方法分析转录...目的研究ABHD2在不育症患者精子膜表面的表达差异,探究孕酮是否通过ABHD2调控cAMP-PKA进而影响精子的功能活性。方法收集男性正常生育组精子、少弱精子组和顶体异常组精子样本(各30例),通过RT-PCR、蛋白Western-Blot印迹等方法分析转录水平及蛋白表达的差异,且采用体外添加孕酮、ABHD2抗体、PKA拟制剂H-89,选择观测正常生育组(对照组)与少弱精子组(实验组)男性精子ABHD2的蛋白表达水平,以及cAMP、PKA浓度等变化。结果少弱精子组和顶体异常组中ABHD2 m RNA转录水平以及ABHD2蛋白表达水平显著减少,具有统计学意义(F:90.84,P<0.01);在正常生育组中加入孕酮处理后,ABHD2蛋白水平表达明显增加;而少弱精子组中加入孕酮处理后,与未加孕酮相比,ABHD2蛋白水平表达增加不明显。进一步研究,在正常生育组中加入孕酮(P4)处理后,cAMP、PKA浓度极显著增加(P<0.01),继续加入ABHD2抗体或PKA拟制剂H89后,cAMP、PKA浓度均显著减少(P<0.01)。结论临床不育与正常生育男性精子之间ABHD2的转录和表达存在差异,孕酮通过ABHD2受体介导的cAMP-PKA信号通路调控精子受精功能。展开更多
文摘目的:研究妊娠期高血压(PIH)患者血清中miR-204-5p、miR-1233-3p及miR-95-5p的表达水平及可能作用机制,以期为PIH的早期诊断及治疗提供临床及理论依据。方法:选取2017年12月至2019年1月河南省人民医院产科收治的20例PIH患者为病例组,同期20例正常妊娠者为对照组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析血清miR-204-5p、miR-1233-3p及miR-95-5p表达,通过生物信息学对miRNA的靶基因及生物作用途径进行预测。qRT-PCR法和Western blot法检测cAMP-PKA信号通路相关基因及蛋白含量。结果:与对照组比较,病例组中miR-204-5p和miR-1233-3p表达显著升高,差异均有统计学意义( P <0.05)。借助miRDB和TargetScan两个权威的miRNA靶基因数据库对两种miRNA靶基因进行预测并通过韦恩图进行交集筛选,结果显示miR-204-5p的靶基因为459个,miR-1233-3p的靶基因为117个。基因功能(GO)分析富集结果显示,排在第一位的生物过程(BP)、分子功能(MF)、细胞组分(CC)分别是RNA聚合酶II启动子转录的正调控(positive regulation of transcription from RNA polymerase II promoter)、转录激活活性(transcriptional activator activity)和细胞质(cytoplasm);Pathway分析排在首位的信号通路为Aldosterone synthesis and secretion信号通路。qRT-PCR和Western blot结果显示,与对照组比较,PKA、PHK、GP和CREB基因,以及PKA、PHK和CREB蛋白均显著下降,差异均有统计学意义( P <0.05)。结论: miR-204-3p和miR-1233-3p可能与PIH的发生发展相关,其可能作用途径为调控cAMP-PKA信号通路;mi-204-3p和miR-1233-3p可作为PIH血清检测的分子标记物,为PIH的靶向治疗提供理论依据。
文摘目的研究ABHD2在不育症患者精子膜表面的表达差异,探究孕酮是否通过ABHD2调控cAMP-PKA进而影响精子的功能活性。方法收集男性正常生育组精子、少弱精子组和顶体异常组精子样本(各30例),通过RT-PCR、蛋白Western-Blot印迹等方法分析转录水平及蛋白表达的差异,且采用体外添加孕酮、ABHD2抗体、PKA拟制剂H-89,选择观测正常生育组(对照组)与少弱精子组(实验组)男性精子ABHD2的蛋白表达水平,以及cAMP、PKA浓度等变化。结果少弱精子组和顶体异常组中ABHD2 m RNA转录水平以及ABHD2蛋白表达水平显著减少,具有统计学意义(F:90.84,P<0.01);在正常生育组中加入孕酮处理后,ABHD2蛋白水平表达明显增加;而少弱精子组中加入孕酮处理后,与未加孕酮相比,ABHD2蛋白水平表达增加不明显。进一步研究,在正常生育组中加入孕酮(P4)处理后,cAMP、PKA浓度极显著增加(P<0.01),继续加入ABHD2抗体或PKA拟制剂H89后,cAMP、PKA浓度均显著减少(P<0.01)。结论临床不育与正常生育男性精子之间ABHD2的转录和表达存在差异,孕酮通过ABHD2受体介导的cAMP-PKA信号通路调控精子受精功能。
