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肾脏特异性高表达支架蛋白JLP转基因小鼠的构建
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作者 袁小涵 宋远 +5 位作者 朱凯 田茂青 张璐 陈朝威 颜奇 王惠明 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 2020年第1期10-14,共5页
目的:构建肾脏特异性高表达支架蛋白JLP的转基因小鼠模型。方法:将遗传背景为C57BL/6N的loxp-stop-loxp-mSpag9阳性小鼠与KSP-CreERT2阳性小鼠进行饲养和繁殖,提取其子鼠脚趾DNA,采用PCR方法鉴定基因型,获取基因型为loxp-stop-loxp-mSpa... 目的:构建肾脏特异性高表达支架蛋白JLP的转基因小鼠模型。方法:将遗传背景为C57BL/6N的loxp-stop-loxp-mSpag9阳性小鼠与KSP-CreERT2阳性小鼠进行饲养和繁殖,提取其子鼠脚趾DNA,采用PCR方法鉴定基因型,获取基因型为loxp-stop-loxp-mSpag9+/KSP-CreERT2+小鼠,待其长至4~6周龄时予以他莫昔芬诱导Cre重组酶表达。选择同窝C57BL/6N野生型小鼠作为对照,并通过Western Blot及组织免疫荧光检测小鼠各脏器中JLP的表达量,进一步验证肾脏特异性高表达mSpag9转基因小鼠的准确性及特异性。结果:Western Blot及组织免疫荧光结果显示:经他莫昔芬诱导的loxp-stop-loxp-mSpag9+/KSP-CreERT2+小鼠肾脏中JLP表达量显著高于同窝野生型小鼠,心脏、脾、肺、睾丸等组织中表达量无差异。结论:成功构建肾脏特异性高表达支架蛋白JLP的转基因小鼠,为进一步研究JLP在肾脏疾病中的作用及其机制提供了动物模型。 展开更多
关键词 JLP c57bl/6n转基因小鼠 KSP-creERT2 cre-Loxp系统
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