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hCGβ-C3d融合蛋白在CHO细胞中的表达 被引量：5
1
作者 王明雁 李磊 +2 位作者 李大金 申庆祥 朱影 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2003年第1期13-15,39,共4页
为了提高hCGβ的免疫原性 ,构建含新型分子佐剂C3d的hCGβ真核细胞表达质粒pcDNA3 hCGβ C3d3,使其转染稳定表达系统中国仓鼠卵细胞 (CHO )后 ,检测融合蛋白分泌情况。CHO细胞转染了pcDNA3 hCGβ C3d3质粒后 ,经 4 8h培养 ,1 0× 1... 为了提高hCGβ的免疫原性 ,构建含新型分子佐剂C3d的hCGβ真核细胞表达质粒pcDNA3 hCGβ C3d3,使其转染稳定表达系统中国仓鼠卵细胞 (CHO )后 ,检测融合蛋白分泌情况。CHO细胞转染了pcDNA3 hCGβ C3d3质粒后 ,经 4 8h培养 ,1 0× 10 6个CHO细胞可分泌 6 6 0ng的重组融合hCGβ C3d3蛋白。细胞免疫化学技术分析显示 ,表达产物既有hCGβ的组分也有C3d的成分。经SDS PAGE及免疫印迹试验发现CHO细胞培养上清液中含有三组蛋白成分 ,其相对分子质量分别为12 0 0 0 0、90 0 0 0和 6 5 0 0 0。利用新型分子佐剂C3d与hCGβ的连接 ,构建了pcDNA3 hCGβ C3d3真核细胞表达质粒 。 展开更多
关键词 HcGΒ c3D cHO RAJI细胞
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分子佐剂C3d3增强hCGβ蛋白疫苗免疫原性及其抗血清中和hCG生物学活性的作用 被引量：3
2
作者 王秀丽 李大金 +3 位作者 袁敏敏 王明雁 朱影 孟毅 《实验生物学报》 CSCD 北大核心 2004年第4期255-261,共7页
本文观察分子佐剂C3d3增强hCGβ蛋白避孕疫苗体液免疫效力的能力。采用分子生物学技术以phCMV1为载体分别构建分泌型、带有6个组氨酸纯化标签的真核表达质粒phCMV1-6His-hCGβ-C3d3和phCMV1-6His-hCGβ,在CHO 细胞中获得重组蛋白的稳定... 本文观察分子佐剂C3d3增强hCGβ蛋白避孕疫苗体液免疫效力的能力。采用分子生物学技术以phCMV1为载体分别构建分泌型、带有6个组氨酸纯化标签的真核表达质粒phCMV1-6His-hCGβ-C3d3和phCMV1-6His-hCGβ,在CHO 细胞中获得重组蛋白的稳定、高效表达,并用镍柱和凝胶过滤层析对其进行分离、纯化。分别用hCGβ-C3d3融合蛋白、hCGβ+弗氏佐剂和单用hCGβ免疫生育期雌性BALB/c 小鼠,共免疫两次,间隔4周。ELISA 测定血清中抗hCGβ抗体滴度,并对各组小鼠产生的抗血清中和hCG 生物学活性的能力进行比较。结果表明hCGβ单独免疫组在加强免疫后才见抗体生成,其抗体滴度比hCGβ-C3d3融合蛋白免疫组低1995倍,C3d3的佐剂能力是弗氏佐剂的10倍(初次免疫)-32倍(再次免疫),并且hCGβ-C3d3融合蛋白免疫小鼠产生的抗血清具有很强的中和hCG 生物学活性的作用。实验证明通过分子佐剂C3d3可以大幅提高机体对hCGβ的体液免疫应答能力。 展开更多
关键词 免疫避孕 分子佐剂 c3D3 hcGβ蛋白疫苗 避孕疫苗 抗血清
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FLK1_(265-2493)与C3d3融合基因真核表达质粒的构建及表达 被引量：3
3
作者 许桂莲 姜曼 +7 位作者 郭波 吕燕波 邹丽云 费蕾 黄云辉 陈永文 牟芝蓉 吴玉章 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期280-282,285,共4页
目的构建FLK1265-2 493与C3d3融合基因真核表达质粒,并在体外进行表达和鉴定。方法采用PCR技术扩增FLK1265-2 493片段,将该片段插入到pMDT-18载体中后,亚克隆至真核表达载体pSG.SS.C3d3.YL,构建FLK1265-2 493与C3d3融合基因表达质粒。... 目的构建FLK1265-2 493与C3d3融合基因真核表达质粒,并在体外进行表达和鉴定。方法采用PCR技术扩增FLK1265-2 493片段,将该片段插入到pMDT-18载体中后,亚克隆至真核表达载体pSG.SS.C3d3.YL,构建FLK1265-2 493与C3d3融合基因表达质粒。经限制性酶切鉴定和DNA序列测定结果证实后,将重组质粒pSG.SS.FLK1265-2 493.C3d3.YL转染Hela细胞,检测其体外表达。结果免疫印迹和免疫细胞化学分析结果分别表明转染细胞上清液和胞浆内均有目的分子的存在。结论构建的DNA疫苗可在真核细胞内正确表达,这为进一步的动物实验打下了基础。 展开更多
关键词 FLK-1 c3D3 DNA疫苗
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分子佐剂C3d3增强hCGβ蛋白疫苗的体液免疫效应 被引量：2
4
作者 王秀丽 李大金 +3 位作者 袁敏敏 王明雁 朱影 孟毅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期652-655,658,共5页
目的:通过分子佐剂C3d3增强hCGβ避孕疫苗的免疫原性。方法:采用分子生物学技术以phCMV1为载体分别构建分泌型、带有6个组氨酸纯化标签的真核表达载体phCMV16HishCGβC3d3和phCMV16HishCGβ,在CHO细胞中获得重组蛋白的稳定、高效表达并... 目的:通过分子佐剂C3d3增强hCGβ避孕疫苗的免疫原性。方法:采用分子生物学技术以phCMV1为载体分别构建分泌型、带有6个组氨酸纯化标签的真核表达载体phCMV16HishCGβC3d3和phCMV16HishCGβ,在CHO细胞中获得重组蛋白的稳定、高效表达并用镍柱和凝胶过滤层析对其进行分离、纯化。分别用hCGβC3d3融合蛋白、hCGβ联合C3d3和单用hCGβ对BALBc与C57BL6小鼠进行免疫,共免疫两次,间隔4周,ELISA测定血清中的抗体滴度,比较各组的免疫效果。结果:无论是BALBc小鼠还是C57BL6小鼠,hCGβC3d3融合蛋白诱导产生的抗hCGβ抗体的出现时间都明显早于hCGβ与C3d3联合免疫和hCGβ单独免疫组。在BALBc小鼠,初次和再次免疫结果显示,C3d3使hCGβ的免疫原性增强了1995倍。C57BL6小鼠所显示出的体液免疫反应强度虽不如BALBc小鼠,但C3d3也使hCGβ的免疫原性增强了1259倍。结论:通过分子佐剂C3d3可以大幅地提高hCGβ避孕疫苗的免疫原性,在个性差异很大的不同品系小鼠,C3d3均能增强机体对hCGβ的体液免疫应答能力。 展开更多
关键词 分子佐剂 c3D3 HcGΒ 避孕疫苗 体液免疫
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HPV16 E6E7与C3d3融合基因真核表达质粒的构建及表达 被引量：2
5
作者 郑秀惠 李力 +4 位作者 郭建新 郑英如 李军果 林爽 陈竹钦 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期40-42,共3页
目的构建可作为DNA疫苗的包含人乳头瘤病毒16型(HPV16)E6E7与C3d3融合基因真核表达质粒,并在体外进行表达和鉴定。方法采用PCR技术扩增HPV16 E6E7片段,将该片段插入到pMDT-18载体中后,亚克隆至真核表达载体pSG.SS.C3d3.YL和pSG.SS.YL,构... 目的构建可作为DNA疫苗的包含人乳头瘤病毒16型(HPV16)E6E7与C3d3融合基因真核表达质粒,并在体外进行表达和鉴定。方法采用PCR技术扩增HPV16 E6E7片段,将该片段插入到pMDT-18载体中后,亚克隆至真核表达载体pSG.SS.C3d3.YL和pSG.SS.YL,构建E6E7与C3d3融合基因及E6E7表达质粒pSG.SS.E6E7.C3d3.YL和pSG.SS.E6E7.YL。经限制性酶切鉴定和DNA序列测定后,将重组质粒pSG.SS.E6E7.C3d3.YL、pSG.SS.E6E7.YL转染COS-7细胞,用Western blot及免疫细胞化学技术检测其表达。结果经酶切、DNA测序及转染真核细胞后表达产物的鉴定结果显示,重组质粒构建成功。结论构建的质粒可在真核细胞内正确表达,为其作为DNA疫苗诱导免疫效应的动物实验打下了基础。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16型 c3D3 DNA疫苗
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真核表达质粒pSG.SS.C3d3.YL.Bin1b雄鼠免疫避孕效应研究 被引量：1
6
作者 周青松 靳风烁 +3 位作者 李彦锋 张军 张克勤 孙中义 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2015年第3期190-192,共3页
目的研究小鼠Bin1b真核表达重组质粒pSG.SS.C3d3.YL.Bin1b的DNA疫苗雄鼠免疫避孕效应。方法应用pSG.SS.C3d3.YL.Bin1b(C3d3-Bin1b组)肌注免疫雄鼠,观察其精子活力及避孕效应,ELISA法检测雄鼠血清抗Bin1b蛋白IgG抗体最大稀释度、IL-2、I... 目的研究小鼠Bin1b真核表达重组质粒pSG.SS.C3d3.YL.Bin1b的DNA疫苗雄鼠免疫避孕效应。方法应用pSG.SS.C3d3.YL.Bin1b(C3d3-Bin1b组)肌注免疫雄鼠,观察其精子活力及避孕效应,ELISA法检测雄鼠血清抗Bin1b蛋白IgG抗体最大稀释度、IL-2、INF-γ、IL-4、IL-10水平。PBS组、空载体pSG.SS.YL组(空载体组)和pSG.SS.YL.Bin1b组(Bin1b组)为对照组。结果 C3d3-Bin1b组雄鼠精子活力、雌鼠受孕率、平均产仔数量显著降低,免疫避孕效果显著好于Bin1b组。C3d3-Bin1b组雄鼠血清抗Bin1b蛋白IgG抗体滴度显著升高,血清IL-2、INF-γ浓度显著降低,血清IL-4、IL-10浓度显著增加。结论真核表达重组质粒pSG.SS.C3d3.YL.Bin1b可有效诱导雄鼠产生免疫性避孕效应,效果优于pSG.SS.YL.Bin1b。 展开更多
关键词 抗菌肽蛋白 避孕疫苗 c3D3
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C3d3与hCGβ基因融合质粒对不同品系小鼠DNA免疫增强抗hCGβ体液免疫效应 被引量：1
7
作者 余敏 李大金 +3 位作者 袁敏敏 王秀丽 姚晓英 李华萍 《生殖医学杂志》 CAS 2007年第1期40-45,共6页
目的通过分子佐剂C3d3增强人绒毛膜促性腺激素(hCG)β基因疫苗在不同品系小鼠的体液免疫效应。方法分别用pCMV4-hCG-βC3d3、pCMV4-hCGβ和pCMV4-hCGβ+pCMV4-C3d3联合免疫以辅助性T细胞(Th)2型优势的BALB/c小鼠和Th1型优势的C57BL/6小... 目的通过分子佐剂C3d3增强人绒毛膜促性腺激素(hCG)β基因疫苗在不同品系小鼠的体液免疫效应。方法分别用pCMV4-hCG-βC3d3、pCMV4-hCGβ和pCMV4-hCGβ+pCMV4-C3d3联合免疫以辅助性T细胞(Th)2型优势的BALB/c小鼠和Th1型优势的C57BL/6小鼠,免疫剂量分别为5、10、50、100和500 pmol,同一剂量免疫两次、间隔3周。初次及加强免疫后每周采血,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清抗hCGβ抗体水平。硫氰酸钠洗脱法ELISA分析抗hCGβ抗血清亲和力。结果两种品系小鼠pCMV4-hCG-βC3d3免疫产生抗hCGβ抗体的时间和效价均显著早(高)于pC-MV4-hCGβ和联合免疫组。在50 pmol免疫剂量时,C3d3在两种品系小鼠呈现出最强的佐剂活性,分别使hCGβ的免疫原性增强了400倍(BALB/c)和251倍(C57BL/6)。pCMV4-hCG-βC3d3组两个品系小鼠亲和力成熟较快。结论在Th2型及Th1型免疫优势的不同品系小鼠,分子佐剂C3d3均能增强hCGβ基因疫苗体液免疫效应。 展开更多
关键词 分子佐剂 c3D3 人绒毛膜促性腺激素β 基因疫苗 体液免疫
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phCMV1和pcDNA3表达人绒毛膜促性腺激素β-C3d3融合蛋白的表达效率比较
8
作者 王秀丽 李大金 +1 位作者 袁敏敏 朱影 《生殖医学杂志》 CAS 2004年第4期205-212,共8页
目的　比较真核表达载体 phCMV1和pcDNA3在中国仓鼠卵巢 (CHO)细胞中表达人绒毛膜促性腺激素 β(hCGβ) C3d3融合蛋白的表达效率 ,以获得hCGβ C3d3融合蛋白的高效表达。　 方法　利用高效真核表达载体 phCMV1,构建带有 6个组氨酸纯化... 目的　比较真核表达载体 phCMV1和pcDNA3在中国仓鼠卵巢 (CHO)细胞中表达人绒毛膜促性腺激素 β(hCGβ) C3d3融合蛋白的表达效率 ,以获得hCGβ C3d3融合蛋白的高效表达。　 方法　利用高效真核表达载体 phCMV1,构建带有 6个组氨酸纯化标签的融合蛋白表达质粒phCMV1 6His hCGβ C3d3;脂质体法介导phCMV1 6His hCGβ C3d3和pcDNA3 hCGβ C3d3转染CHO细胞 ,G4 18(80 0 μg/ml)筛选抗性克隆 ,G4 18(30 0 μg/ml)维持培养、扩增 ,待阳性克隆 95 % 汇片时换用无血清培养基培养。放射免疫法检测hCGβ表达量 ,Westernblot鉴定表达产物 ,Raji细胞免疫化学染色法鉴定hCGβ与C3d分子的成功融合。反复冻存和复苏高效表达hCGβ C3d3融合蛋白的阳性克隆 ,比较表达效率的变化。用镍柱和凝胶过滤层析纯化表达产物。　结果　酶切鉴定及测序证实 phCMV1 6His hCGβ C3d3构建正确 ,并成功地在CHO细胞中获得了 6His hCGβ C3d3融合蛋白的表达。无血清培液中 2 4、4 8、72h融合蛋白的表达量分别为 4 96、5 2 7、6 33mIU/ml/ 1× 10 6细胞 (以hCGβ含量计算 ) ,phCMV1比 pcDNA3载体的表达效率高 1.4倍。 3次冻存和复苏高效表达hCGβ C3d3融合蛋白的阳性克隆 ,表达效率无明显变化。表达产物经纯化后获得了所需的hCGβ C3d3? 展开更多
关键词 phcMV1 PcDNA3 人绒毛膜促性腺激素β c3D3 蛋白表达
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改革无机化学实验教学 培养学生的C_3H_3素质 被引量：26
9
作者 白广梅 王小逸 刘淑珍 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2012年第1期114-116,共3页
从改革实验教学制度、教学方式、教学内容三方面,就如何在无机化学实验教学中训练学生养成良好的实验习惯,形成规范性实验操作,训练学生勤于思考—善于思考—创新思维,逐步培养学生的C3H3素质进行了初步的探讨。
关键词 无机化学实验 教学改革 实验教学 c3H3素质
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酸性成纤维细胞生长因子生物学特性及其应用研究进展 被引量：19
10
作者 靳波 徐盈斌 刘旭盛 《中华损伤与修复杂志（电子版）》 CAS 2010年第1期55-57,共3页
关键词 酸性成纤维细胞生长因子 生物学特性 Balb/c3T3 应用 分裂增生 分离纯化 功能相似 等电点
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人乳头瘤病毒16型E6和E7基因及其突变体转化活性的研究 被引量：16
11
作者 骆卫峰 韩立群 +4 位作者 任皎 田厚文 陆振华 谷淑燕 阮力 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期97-101,共5页
为筛选出可用于研制HPV治疗性疫苗的HPV16型E6和E7基因突变体 ,故将HPV16型原型株 (德国株 )E6和E7基因及其各种突变体分别转染Balb/c3T3细胞 ,观察转染后的细胞在软琼脂培养中的集落形成能力和在裸鼠体内的成瘤能力。结果表明 ,单独转... 为筛选出可用于研制HPV治疗性疫苗的HPV16型E6和E7基因突变体 ,故将HPV16型原型株 (德国株 )E6和E7基因及其各种突变体分别转染Balb/c3T3细胞 ,观察转染后的细胞在软琼脂培养中的集落形成能力和在裸鼠体内的成瘤能力。结果表明 ,单独转染和共转染HPV16野生型E6和E7基因的Balb/c3T3细胞系 ,在软琼脂中呈集落样生长 ,并在裸鼠体内成瘤 ;而转染E6基因突变体mE6 (5 0G)、E7基因的两种突变体mE7- 1(2 4G2 6G)和mE7- 3(2 4G2 6G6 7R)以及共转染mE6和mE7- 1的Balb/c3T3细胞 ,在软琼脂培养中极少形成集落 ,也不能在裸鼠体内成瘤。提示经结构改造后的HPV16E6和E7基因已失去了对Balb/c3T3细胞的转化活性 ,而保留了免疫原性 ,可用于HPV16相关肿瘤治疗性疫苗的构建。 展开更多
关键词 诱变 人乳头瘤病毒16型 E7基因 突变体 转化活性
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水体有机物和蓝藻对BALB/c3T3细胞的毒性作用 被引量：9
12
作者 吴静 蒋颂辉 +1 位作者 陈约 朱惠刚 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2001年第11期1019-1021,共3页
目的　研究水体有机物和蓝藻提取物的毒作用机理。方法　通过形态学观察、MTT法和中性红摄入法 ,从多个终点检测二者对BALB/c 3T3细胞的毒性作用。结果　二者达一定浓度时 ,可引起细胞形态改变 ;有机物在各个浓度、各个培养时相均可引... 目的　研究水体有机物和蓝藻提取物的毒作用机理。方法　通过形态学观察、MTT法和中性红摄入法 ,从多个终点检测二者对BALB/c 3T3细胞的毒性作用。结果　二者达一定浓度时 ,可引起细胞形态改变 ;有机物在各个浓度、各个培养时相均可引起细胞的存活率下降 ,有明显的剂量 -时间 -效应关系 ;而藻毒素在低浓度短时间染毒下可引起细胞数目的增加 ,在高浓度或长时间作用下 ,细胞存活率却明显下降。结论　两种比色法可敏感检测有机物及藻毒素对BALB/c 3T3细胞的毒性作用 ,两者对细胞膜均有损伤作用 ;有机物对线粒体有损伤作用 ,而藻毒素对线粒体具有刺激和损伤的双重作用。 展开更多
关键词 水体有机物 蓝藻根提物 MTT BALB/c 3T3细胞
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强化C3H3元素培养 提升学生综合素质 被引量：14
13
作者 曹小华 张康华 +1 位作者 徐常龙 陶春元 《化学教育》 CAS 2008年第12期58-60,共3页
在实验教学中强化C3H3元素，既是培养学生科学素养的重要方法，又是推进素质教育的重要途径，对提高学生的整体素质起着至关重要的作用。本文结合教学实践，就如何在化学实验教学中强化C3H3元素作了一些探讨和尝试。
关键词 c3H3 科学素养 化学实验教学 综合素质
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hCGβ与鼠补体片段C3d的连接及其在真核细胞中的表达 被引量：11
14
作者 王明雁 李磊 +2 位作者 李大金 孟毅 朱影 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第7期445-450,共6页
目的:构建含新型分子佐剂C3d的hCGβ真核细胞表达质粒,以提高hCGβ的免疫原性。方法:用pcr方法在hCGβ cDNA3’端引入BamHI位点,然后利用酶切位点的互补性,与C3d3　cDNA连接,构建了pBS-hCGβ-C3d3质粒,最后插入真核细胞表达质粒pcDNA3的... 目的:构建含新型分子佐剂C3d的hCGβ真核细胞表达质粒,以提高hCGβ的免疫原性。方法:用pcr方法在hCGβ cDNA3’端引入BamHI位点,然后利用酶切位点的互补性,与C3d3　cDNA连接,构建了pBS-hCGβ-C3d3质粒,最后插入真核细胞表达质粒pcDNA3的CMV启动子下游,以产生pcDNA3-hCGβ-C3d3。将此融合质粒转染瞬时表达系统 COS-7细胞表达相应产物。其无血清培养上清液用免疫亲和层析法纯化重组蛋白。Raji细胞免疫细胞化学技术鉴定表达产物准确性。结果:真核细胞瞬时表达系统 COS-7细胞经转染了pcDNA3-hCGβ-C3d3质粒后,可分泌hCGβ重组蛋白。1.0×105个 COS-7细胞转染了pcDNA3-hCGβ-C3d3质粒,经72h培养后,可产生152ng的hCGβ重组蛋白,且表达量随时间延长而增高。在有血清培养基中的分泌量明显高于无血清培养基。同时,用Raji细胞免疫细胞化学分析表达产物显示,纯化的表达产物既有C3d结合受体活性,亦有hCGβ抗原性。结论:利用新型分子佐剂C3d与hCGβ的连接,构建了pc-DNA3-hCGβ-C3d3真核细胞表达质粒,为提高hCGDNA免疫避孕疫苗的免疫原性及抗生育作用奠定了基础。 展开更多
关键词 真核细胞 hcGβ疫苗 cOS-7细胞株 免疫避孕 分子佐剂c3d 免疫原性 聚合酶链反应 pBS-hcGβ-c3d3质粒
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八氯二丙醚对BALB/c3T_3细胞恶性转化的研究 被引量：8
15
作者 董菊 唐萌 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期1063-1064,共2页
目的　检测八氯二丙醚 (S2 )的细胞恶性转化作用。方法　采用传代细胞系BALB/c3T3 细胞进行细胞毒性实验确定转化实验的剂量范围 ,再进行细胞转化实验并对转化细胞进行恶性行为鉴定。结果　S2 各剂量组均能诱发该细胞出现典型的细胞转化... 目的　检测八氯二丙醚 (S2 )的细胞恶性转化作用。方法　采用传代细胞系BALB/c3T3 细胞进行细胞毒性实验确定转化实验的剂量范围 ,再进行细胞转化实验并对转化细胞进行恶性行为鉴定。结果　S2 各剂量组均能诱发该细胞出现典型的细胞转化灶 ,并呈剂量 -反应关系 ;软琼脂培养证明转化细胞为恶性转化细胞。结论　S2 具有致BALB/c3T3 细胞恶性转化作用 ,有必要进行深入研究。 展开更多
关键词 八氯二丙醚 BALB/c3T3细胞 细胞恶性转化
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基于网络药理学技术研究桃红四物汤延缓成纤维细胞生长的分子靶标 被引量：12
16
作者 马进 李振万 +3 位作者 罗月中 江湧 匡忠生 谢宇晖 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第17期4120-4128,共9页
桃红四物汤(Taohong Siwu Decoction,THSWD)作为活血化瘀方,对于延缓肾脏纤维化的进程有一定作用,但作为包含诸多单体成分的中药复方,应对复杂的病理过程,其研究方法的探讨和作用靶点的找寻一直是该方向的研究热点。活血化瘀法在阻滞Ig... 桃红四物汤(Taohong Siwu Decoction,THSWD)作为活血化瘀方,对于延缓肾脏纤维化的进程有一定作用,但作为包含诸多单体成分的中药复方,应对复杂的病理过程,其研究方法的探讨和作用靶点的找寻一直是该方向的研究热点。活血化瘀法在阻滞IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)纤维化进程方面有一定的临床疗效,但作用机制尚不明确。该研究先借助网络药理学方法,研究THSWD干预IgAN纤维化进程的有效活性成分,作用靶点及分子作用机制,在此基础上,通过离体实验,验证THSWD作用于3T3细胞对ERK因子表达的影响。通过中药系统药理学技术平台收集THSWD中的活性成分及作用靶点,筛选得到木犀草素、槲皮素等61个有效活性成分及240个作用靶点,与CTD数据库查找的IgAN相关靶点相交得到185个靶点。利用Cytoscape软件与STRING数据库构建"桃红四物汤-活性成分-靶点"网络和蛋白互作网络,筛选69个核心靶点;通过DAVID对核心靶点的GO富集分析和KEGG通路分析及进行细胞实验,结果表明,ERK因子是THSWD干预IgAN重要的因子,THSWD可以显著降低细胞活性、ERK1/2 mRNA表达、p-ERK1/2蛋白表达。该研究提示,THSWD可能通过影响ERK因子及其磷酸化水平,来延缓成纤维细胞生长。 展开更多
关键词 IGAN 桃红四物汤 血瘀 网络药理学 ERK BALB/c 3T3细胞
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氯化镍诱发BALB/c-3T3细胞转化 被引量：10
17
作者 刘云岗 陈家坤 《劳动医学》 1997年第1期9-11,共3页
为探讨氯化镍对不同靶细胞转化作用的差异，采用细胞灶法测定氯化镍对ＢＡＬＢ／ｃ－３Ｔ３细胞诱发转化的活性，结果表明当氯化镍浓度在＞５０μｍｏｌ／Ｌ时转化率增高（Ｐ＜０．０５），且有剂量反应关系。本文报道氯化镍诱发ＢＡＬ... 为探讨氯化镍对不同靶细胞转化作用的差异，采用细胞灶法测定氯化镍对ＢＡＬＢ／ｃ－３Ｔ３细胞诱发转化的活性，结果表明当氯化镍浓度在＞５０μｍｏｌ／Ｌ时转化率增高（Ｐ＜０．０５），且有剂量反应关系。本文报道氯化镍诱发ＢＡＬＢ／ｃ－３Ｔ３细胞转化的实验结果。 展开更多
关键词 氯化镍 镍化合物 细胞转化 致癌性
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结晶型硫化镍诱发BALB/c-3T3细胞恶性转化 被引量：9
18
作者 刘云岗 陈家 吴中亮 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 1999年第3期122-124,共3页
采用细胞灶法测定结晶型硫化镍对ＢＡＬＢ／ｃ－３Ｔ３诱发细胞转化的活性，结果表明当硫化镍浓度≥０．２５μｇ／ｃｍ２时转化率增高（Ｐ＞０．０５），且有剂量反应关系。各剂量组转化灶细胞共６份经软琼脂培养试验均获阳性结果，而... 采用细胞灶法测定结晶型硫化镍对ＢＡＬＢ／ｃ－３Ｔ３诱发细胞转化的活性，结果表明当硫化镍浓度≥０．２５μｇ／ｃｍ２时转化率增高（Ｐ＞０．０５），且有剂量反应关系。各剂量组转化灶细胞共６份经软琼脂培养试验均获阳性结果，而对照细胞则为阴性，提示硫化镍诱发的转化细胞具有锚着不依赖性，即恶性特征。 展开更多
关键词 结晶型 硫化镍 BALB/c-3T3细胞 细胞转化 恶性
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人趋化素样因子 2对小鼠成纤维细胞BALB/c3T3的促增殖和凋亡抑制作用 被引量：7
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作者 夏东岚 陈英玉 +4 位作者 韩文玲 李现亭 宋泉声 张颖妹 马大龙 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期5-8,共4页
目的　探讨人趋化素样因子 2 (CKLF2 )对小鼠成纤维细胞BALB c 3T3增殖和凋亡的影响。方法　构建pcDI CKLF2真核表达载体 ;建立稳定表达人CKLF2的BALB c 3T3(3T3 CKLF2 )细胞系 ;以细胞计数和MTT法分析过表达人CKLF2后对 3T3细胞增殖的... 目的　探讨人趋化素样因子 2 (CKLF2 )对小鼠成纤维细胞BALB c 3T3增殖和凋亡的影响。方法　构建pcDI CKLF2真核表达载体 ;建立稳定表达人CKLF2的BALB c 3T3(3T3 CKLF2 )细胞系 ;以细胞计数和MTT法分析过表达人CKLF2后对 3T3细胞增殖的影响 ;以流式细胞术检测annexin Ⅴ阳性细胞为凋亡指标 ,分析 3T3 CKLF2细胞和 3T3 pcDI细胞对撤除血清诱导凋亡的反应情况。结果　成功地建立了稳定表达人CKLF2的BALB c 3T3细胞系 ,过量表达人CKLF2的 3T3细胞系增殖速度明显加快 ,同等接种量的细胞培养 40h以后 ,3T3 CKLF2细胞的数量 (1.0 7× 10 6 )比 3T3 pcDI细胞(2 .5 4× 10 5)及野生型 3T3细胞 (3 .0× 10 5)高 2～ 3倍 ;流式细胞术分析表明 ,撤除血清后 3T3 CKLF2的annexin Ⅴ阳性细胞数 (13.34% 48h、15 .44 % 96h)明显低于 3T3 pcDI细胞 (19.36 % 48h、39.2 % 96h)。结论　人CKLF2能够促进BALB c 3T3细胞的增殖和抵抗撤除血清诱导的细胞凋亡 ,这些研究为进一步探讨CKLF家族的生物学功能提供了实验依据。 展开更多
关键词 人趋化素样因子 小鼠 成纤维细胞 3T3细胞 细胞增殖 细胞凋亡
原文传递
甲基丙烯酸环氧丙酯对BALB/c 3T3细胞恶性转化的实验研究 被引量：10
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作者 张淑琪 许建宁 +1 位作者 徐凤丹 谢大英 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期129-133,共5页
利用建立的 BALB/c 3T3细胞转化系统进行甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)的细胞转化和裸鼠诱癌的实验研究。实验结果表明:GMA 可诱导 BALB/c 3T3细胞形态转化,并呈剂量-反应关系;从转化灶分离扩增细胞,经电镜扫描观察到转化细胞表面形态改变,... 利用建立的 BALB/c 3T3细胞转化系统进行甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)的细胞转化和裸鼠诱癌的实验研究。实验结果表明:GMA 可诱导 BALB/c 3T3细胞形态转化,并呈剂量-反应关系;从转化灶分离扩增细胞,经电镜扫描观察到转化细胞表面形态改变,可被植物凝集素 ConA凝集,并在半固体琼脂生长,在同品系裸鼠皮下形成了肿瘤,病理组织检查结果为分化程度较低的纤维肉瘤。GMA 有很强的诱导细胞恶性转化的能力,提示 GMA 有潜在的致癌危险性。 展开更多
关键词 细胞转化 甲基丙烯酸 环氧丙酯
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