红景天苷通过JAK2/STAT3通路影响宫颈鳞癌C33A细胞的增殖、侵袭和凋亡 被引量：7

1

作者 黄进 刘福蓉 +3 位作者 温婷 唐倩 徐祥梅 廖大忠 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期522-527,共6页

目的:观察红景天苷对宫颈鳞癌C33A细胞增殖、侵袭及凋亡的影响并初步探讨其可能的机制。方法:将C33A细胞分为4组:对照组、低剂量组(红景天苷50μg/ml)、高剂量组(红景天苷150μg/ml)、抑制剂AG490组(JAK2/STAT3信号通路抑制剂AG49050μm... 目的:观察红景天苷对宫颈鳞癌C33A细胞增殖、侵袭及凋亡的影响并初步探讨其可能的机制。方法:将C33A细胞分为4组:对照组、低剂量组(红景天苷50μg/ml)、高剂量组(红景天苷150μg/ml)、抑制剂AG490组(JAK2/STAT3信号通路抑制剂AG49050μmol/L),采用MTT法、EdU标记实验、Transwell实验、Rh123染色和流式细胞术分别检测红景天苷和AG490对C33A细胞增殖、侵袭和凋亡的影响,Western blotting检测红景天苷和AG490对C33A细胞中JAK2/STAT3通路相关蛋白(pJAK2、p-STAT3)和凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、caspase-3)表达的影响。结果:与对照组相比,低剂量组C33A细胞的增殖和DNA的合成明显受到抑制(均P<0.05)、侵袭能力明显降低(均P<0.05)、Rh123荧光强度明显减弱(均P<0.05)、线粒体膜结构受到破坏、细胞凋亡率明显增加(均P<0.05);p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2水平显著下降(均P<0.05)、Bax、caspase-3的表达水平显著升高(P<0.05);与低剂量组相比,高剂量组、抑制剂组对C33A细胞增殖、侵袭、凋亡及相关蛋白表达的影响更为显著(P<0.05);而高剂量组、抑制剂组间无显著差异。结论:红景天苷可以抑制C33A细胞的增殖和侵袭、促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关。 展开更多

关键词 红景天苷 宫颈鳞癌 c33A细胞 JAK2/STAT3通路 增殖 凋亡 侵袭

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miR-137通过靶向Wnt5a调控宫颈癌细胞的增殖、迁移及侵袭 被引量：6

2

作者 卢柳媚 周倩珺 +1 位作者 李子琳 李栩萍 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期762-767,共6页

目的:探讨miR-137在宫颈癌组织和细胞中的表达及其对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的作用及其机制。方法:选用2017年1月至2018年3月东莞市人民医院妇产科32例手术切除的宫颈癌组织及对应的癌旁组织标本,以及宫颈癌细胞系C33A、HeLa、SiHa... 目的:探讨miR-137在宫颈癌组织和细胞中的表达及其对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的作用及其机制。方法:选用2017年1月至2018年3月东莞市人民医院妇产科32例手术切除的宫颈癌组织及对应的癌旁组织标本,以及宫颈癌细胞系C33A、HeLa、SiHa及宫颈上皮永生化细胞株H8,用RT-PCR法检测宫颈癌组织和细胞系中miR-137的表达水平。将miR-137mimics、miR-137 NC质粒转染到C33A和HeLa细胞,用CCK-8法、Transwell迁移及侵袭实验观察上调miR-137表达对C33A和HeLa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。用荧光素酶报告基因及WB实验检测miR-137和Wnt5a在宫颈癌中的靶向调控关系。构建Wnt5a过表达载体,观察同时过表达Wnt5a和miR-137对宫颈癌细胞系C33A和HeLa增殖、迁移和侵袭的影响。结果:在宫颈癌组织和细胞系中miR-137表达水平明显低于癌旁组织和H8细胞(均P<0.05)。上调miR-137表达能够显著抑制C33A和HeLa细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.05)。萤光素酶报告基因实验确定Wnt5a与miR-137的靶向关系。过表达Wnt5a后,可以在一定程度上逆转miR-137对宫颈癌细胞系C33A和HeLa的增殖、迁移和侵袭能力。结论:miR-137通过靶向Wnt5a抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移、侵袭,其可能是宫颈癌治疗的潜在靶点。 展开更多

关键词 宫颈癌 c33A细胞 HELA细胞 微小RNA-137 WNT5A 增殖 迁移 侵袭

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宫颈癌细胞系Siha和C33a中RRM2表达水平与细胞对吉西他滨敏感性的相关分析 被引量：6

3

作者 李梦熊 邓柳枝 梁琼 《中国药房》 CAS 北大核心 2015年第34期4792-4794,共3页

目的：研究宫颈癌细胞系C33a和Siha中核糖核苷酸还原酶小亚基M2（RRM2）表达与细胞对吉西他滨（Gem）敏感性的相关性。方法：以0.1-3.2μmol/L Gem处理C33a细胞,以0.5-512μmol/L Gem处理Siha细胞,72 h后用MTT法测定细胞活力,计算半数... 目的：研究宫颈癌细胞系C33a和Siha中核糖核苷酸还原酶小亚基M2（RRM2）表达与细胞对吉西他滨（Gem）敏感性的相关性。方法：以0.1-3.2μmol/L Gem处理C33a细胞,以0.5-512μmol/L Gem处理Siha细胞,72 h后用MTT法测定细胞活力,计算半数抑制浓度（IC50）;使用Western blot法和逆转录-聚合酶链反应检测各细胞中RRM2表达;采用浓度梯度倍增和大剂量冲击相结合的方法对Siha细胞进行Gem耐药诱导培养,构建Siha/Gem耐药细胞株;在Siha/Gem细胞中,使用RNA干扰技术敲低RRM2表达并检测敲低前后Gem对细胞的IC50。结果：Gem对C33a、Siha细胞的IC50分别为0.63、16.8μmol/L。与C33a细胞比较,Siha细胞中RRM2的表达较高。与Siha细胞相比,Siha/Gem耐药细胞（耐药指数为16.26）中RRM2表达增强。Gem对敲低RRM2表达的Siha/Gem耐药细胞的IC50降低,其逆转耐药倍数为4.24。结论：宫颈癌细胞系中RRM2表达可能与细胞对Gem的敏感性呈负相关,敲低RRM2表达可增加细胞对Gem的敏感性。 展开更多

关键词 宫颈癌细胞 c33a SIHA 吉西他滨 核糖核苷酸还原酶小亚基M2 RNA干扰

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实时荧光定量PCR法测定has-miR-429、has-miR-127-3p及has-miR127-5p在不同HPV感染的宫颈癌细胞中的表达

4

作者 姚婷婷 刘秀婷 +2 位作者 张定梅 禹夜 林仲秋 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2013年第12期2635-2638,共4页

目的探讨has-miR-429、has-miR-127-3 p及has-miR127-5 p在不同宫颈癌细胞中的表达水平。方法用SiHa、Hela和C33A三种宫颈癌细胞株,提取和纯化mRNA,逆转录成cDNA,在测定最佳反应条件后,采用实时荧光定量PCR技术测定has-miR-429、has-miR... 目的探讨has-miR-429、has-miR-127-3 p及has-miR127-5 p在不同宫颈癌细胞中的表达水平。方法用SiHa、Hela和C33A三种宫颈癌细胞株,提取和纯化mRNA,逆转录成cDNA,在测定最佳反应条件后,采用实时荧光定量PCR技术测定has-miR-429、has-miR-127-3p及has-miR127-5p的表达情况,结合内参U6进行相对定量分析。结果 miR-429、miR-127-3p及miR127-5p在SiHa细胞相对于Hela细胞表达为(0.0031±0.0002),(59.3786±3.7024)和(0.0524±0.0148),相对于C33A细胞表达为(0.0059±0.0005),(15.5625±1.2780)和(0.0334±0.0103)。结论 has-miR-429、has-miR-127-3p及has-miR127-5p可能与宫颈癌的HPV感染相关。 展开更多

关键词 微小RNA SIHA细胞 HELA细胞 c33A细胞 实时荧光定量PcR

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宫颈癌细胞C33a下调Raptor表达后对增殖及化疗敏感性的研究

5

作者 秦宇 赵雪娇 +1 位作者 王婷 朱涛 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2014年第9期1411-1413,共3页

目的:探讨通过反义RNA技术下调Raptor基因的表达,研究宫颈癌细胞株C33a中Raptor下调后宫颈癌细胞增殖及对化疗药物的敏感性。方法:C33a细胞分3组,实验组和阴性对照组分别转染Raptor siRNA和阴性对照siRNA,空白对照组不做任何处理。通过... 目的:探讨通过反义RNA技术下调Raptor基因的表达,研究宫颈癌细胞株C33a中Raptor下调后宫颈癌细胞增殖及对化疗药物的敏感性。方法:C33a细胞分3组,实验组和阴性对照组分别转染Raptor siRNA和阴性对照siRNA,空白对照组不做任何处理。通过荧光实时定量PCR和蛋白印记法分别检测C33a转染siRNA后Raptor在mRNA和蛋白水平的表达,CCK-8法检测各组细胞的增殖和对顺铂敏感性的变化,流式细胞仪检测各组及加入顺铂后的凋亡情况。结果:转染siRNA 72 h后,Raptor分别在mRNA水平及蛋白水平较阴性对照下调为82%及78%(P<0.05),转染72 h后CCK-8法测细胞增殖,A值由空白对照组1.828±0.059、阴性对照组1.723±0.044明显降低为Raptor siRNA组的1.349±0.040(P<0.05),各组加入8μM顺铂后,Raptor siRNA组凋亡率为(40.14±1.57)%较空白对照组(21.76±1.23)%和阴性对照组(20.81±1.45)%明显增加(P<0.05)。结论:Raptor siRNA能显著下调C33a细胞中Raptor在mRNA和蛋白水平的表达,抑制C33a细胞的增殖,增加对化疗药物顺铂的敏感性和促凋亡作用。 展开更多

关键词 宫颈癌 c33a细胞 RAPTOR RNA干扰 凋亡

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槲皮素对宫颈癌细胞C33A增殖和凋亡的影响 被引量：4

6

作者 张欣 董春力 +4 位作者 付丽丽 杜鹃 陈嘉彦 高小翠 李少闻 《安徽医学》 2018年第4期400-403,共4页

目的观察槲皮素对人宫颈癌细胞C33A增殖和凋亡的影响,初步探讨其相关作用机制。方法用不同浓度槲皮素(空白对照、20、40、80μmol/L),顺铂(空白对照、5、10、15、20μg/mL)以及两者联合(槲皮素40μmol/L+顺铂10μg/mL)分别作用于C33A细... 目的观察槲皮素对人宫颈癌细胞C33A增殖和凋亡的影响,初步探讨其相关作用机制。方法用不同浓度槲皮素(空白对照、20、40、80μmol/L),顺铂(空白对照、5、10、15、20μg/mL)以及两者联合(槲皮素40μmol/L+顺铂10μg/mL)分别作用于C33A细胞24 h和48 h后,噻唑蓝(MTT法)检测细胞活力的变化;流式细胞术检测槲皮素对C33A细胞周期的影响;Western blot检测槲皮素对C33A细胞Cyclin D1、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达的影响。结果 MTT结果显示,经过槲皮素处理24 h后,各组细胞活力分别为86.92±3.953)%(20μmol/L组)、(66.54±3.932)%(40μmol/L组)和(52.21±2.970)%(80μmol/L组),均低于空白对照组的(98.35±1.230)%;经过槲皮素处理48 h后,各组细胞活力分别为(65.19±7.071)%(20μmol/L组)、(47.04±8.881)%(40μmol/L组)和(29.71±6.505)%(80μmol/L组),均低于空白对照组的(96.97±1.788)%。;此外,槲皮素40μmol/L+顺铂10μg/mL联合作用于C33A细胞24h后,细胞活力下降为(31.12±2.835)%;48 h后,细胞活力下降为(17.86±3.182)%,同空白对照组相比均出现了明显的下降,(31.12±2.835)%;48 h后,细胞活力下降为(17.86±3.182)%(P<0.05)。细胞周期检测结果显示,槲皮素可增加C33A细胞G0/G1期数量,减少S期数量。Western blot结果显示,槲皮素可下调C33A细胞Cyclin D1蛋白的表达,还可上调Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达。结论槲皮素通过下调Cyclin D1蛋白的表达可以抑制C33A细胞的活力和增殖,槲皮素通过上调Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达,可以诱导C33A细胞的凋亡。 展开更多

关键词 槲皮素 宫颈癌c33A细胞 细胞增殖 细胞凋亡

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HPV16 E6-G350基因表达促进宫颈癌C33A细胞增殖且抑制凋亡 被引量：4

7

作者 潘贞贞 宋宇宁 +8 位作者 者湘漪 吴文礼 许静 徐航 辛皖潮 张斌 辛慧珍 曹冬冬 潘泽民 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2018年第5期569-574,共6页

目的分析HPV16 E6基因致病多态性位点的功能及其与宫颈癌发展的关系。方法在宫颈癌C33A细胞中分别稳定转染HPV16 E6原型T295/T350-GV230和HPV16 E6突变型T295/G350-GV230表达质粒,通过间接免疫荧光实验、CCK8增殖实验、细胞平板克隆实... 目的分析HPV16 E6基因致病多态性位点的功能及其与宫颈癌发展的关系。方法在宫颈癌C33A细胞中分别稳定转染HPV16 E6原型T295/T350-GV230和HPV16 E6突变型T295/G350-GV230表达质粒,通过间接免疫荧光实验、CCK8增殖实验、细胞平板克隆实验、流式细胞仪检测HPV16 E6 T295/T350和T295/G350不同多态性位点对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响。结果采用SPSS17.0统计软件进行数据的统计学处理,以P<0.05为差异有统计学意义。HPV16 E6 T295/T350和HPV16 E6 T295/G350突变促进宫颈癌C33A细胞的增殖,抑制凋亡,并且T295/G350突变型作用强于T295/T350原型,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 HPV16 E6 T295/T350欧洲原型和HPV16 E6 T295/G350欧洲突变型均可以促进宫颈癌细胞的增殖,抑制凋亡,HPV16 E6 T295/G350欧洲突变型的促癌作用比HPV16 E6 T295/T350欧洲原型强。 展开更多

关键词 HPV16 E6 多态性 宫颈癌c33A细胞 细胞增殖 细胞凋亡

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稳定表达人乳头瘤病毒58型(HPV58)E6E7融合基因的人宫颈癌细胞株C33A的构建及验证 被引量：4

8

作者 贾超颖 马伟红 王鹤 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第4期578-584,共7页

为构建稳定表达人乳头瘤病毒(HPV)58型E6E7融合基因的人宫颈癌C33A细胞系,将实验前期构建好并实现真核表达的重组慢病毒颗粒LV-HPV58E6E7转染入HPV(–)的人宫颈癌C33A细胞,经流式细胞仪分选出稳定转染的阳性克隆,利用四唑盐比色(MTT)法... 为构建稳定表达人乳头瘤病毒(HPV)58型E6E7融合基因的人宫颈癌C33A细胞系,将实验前期构建好并实现真核表达的重组慢病毒颗粒LV-HPV58E6E7转染入HPV(–)的人宫颈癌C33A细胞,经流式细胞仪分选出稳定转染的阳性克隆,利用四唑盐比色(MTT)法检测转染后细胞的生长情况以及流式细胞术检测细胞周期,并将稳定表达HPV58E6E7融合基因的C33A细胞LV-HPV58E6E7/C33A接种于裸鼠左腋下成瘤,用荧光定量PCR(q RT-PCR)、Western blot检测瘤组织中HPV58型E6E7融合基因的转录和表达。结果显示HPV58E6E7融合基因可促进C33A细胞的增殖;LV-HPV58E6E7/C33A细胞株能在裸鼠体内稳定转录及表达HPV58型E6E7融合基因。这表明我们成功建立了能稳定表达HPV58E6E7融合基因的人宫颈癌C33A细胞系LV-HPV58E6E7/C33A,为HPV58型治疗性疫苗的免疫效果检测提供了抗原细胞来源。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒58型 E6E7基因 稳定转染 人宫颈癌c33A细胞

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miR-26b对宫颈癌细胞系迁移及上皮间质转化的影响 被引量：3

9

作者 凌燕 彭诗维 +1 位作者 冯紫雯 龚剑红 《基础医学与临床》 CSCD 2018年第8期1094-1098,共5页

目的探讨miR-26b对宫颈癌细胞迁移及上皮间质转化的影响及其作用机制。方法通过脂质体介导将miR-26b mimic转染C33A宫颈癌细胞系,细胞分为阴性对照组、无义对照组和miR-26b mimic组。用实时荧光定量PCR检测miR-26b及其靶基因的mRNA表达... 目的探讨miR-26b对宫颈癌细胞迁移及上皮间质转化的影响及其作用机制。方法通过脂质体介导将miR-26b mimic转染C33A宫颈癌细胞系,细胞分为阴性对照组、无义对照组和miR-26b mimic组。用实时荧光定量PCR检测miR-26b及其靶基因的mRNA表达,细胞划痕实验检测细胞的迁移能力,Western blot检测E-cadherin和N-cadherin蛋白表达,用双荧光素酶基因报告载体检测miR-26b靶基因的表达。结果与正常宫颈上皮细胞相比,miR-26b mRNA在He La、Si Ha、Caski和C33A 4种宫颈癌细胞系中均低表达,其中以C33A细胞系最为明显;转染miR-26b mimic后,C33A细胞中miR-26b mRNA表达水平明显上升;过表达miR-26b可明显抑制C33A细胞的迁移能力,上调E-cadherin蛋白的表达,下调N-cadherin蛋白的表达,抑制上皮间质转化过程的发生;通过Target Scan、Pic Tar和miRDB软件预测显示,CXCL14、Smad4、TRAF5和Eph A2可能为miR-26b潜在的靶基因。双荧光素酶实验证实miR-26b可直接调控Smad4的表达。结论 miR-26b可能通过作用于Smad4的表达调节宫颈癌细胞的迁移和上皮间质转化过程的发生。 展开更多

关键词 miR-26b 宫颈癌 c33A细胞系 细胞迁移 上皮间质转化

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(E)-(2’)-脱氧-氟亚甲基胞苷的体外放射增敏作用 被引量：1

10

作者 李晔雄 Philippe A.Coucke 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2001年第2期131-134,共4页

目的　观察一种新的核苷酸类似物 (E) (2’) 脱氧 氟亚甲基胞苷 (FMdC)在体外的放射增敏作用。方法　在结肠癌 (WiDr)和宫颈癌 (C33 A和C4 I)细胞系进行克隆形成试验。常规照射剂量 2Gy时的放射增敏比 (SERSF2 )定义为 2Gy时对照组存... 目的　观察一种新的核苷酸类似物 (E) (2’) 脱氧 氟亚甲基胞苷 (FMdC)在体外的放射增敏作用。方法　在结肠癌 (WiDr)和宫颈癌 (C33 A和C4 I)细胞系进行克隆形成试验。常规照射剂量 2Gy时的放射增敏比 (SERSF2 )定义为 2Gy时对照组存活份数 (SF)和药物处理组SF之比。结果　FMdC增加WiDr细胞的放射敏感性 ,并呈时间依赖关系。照射前用 30nmol/LFMdC处理WiDr细胞 6～ 72h ,在 6、12和 2 4h未能观察到放射增敏作用。放射增敏作用仅在 48和 72h出现 ,其SERSF2 分别为 1.33和 1.79。当高剂量FMdC(30 0nmol/L)处理WiDr细胞 6、12和 2 4h ,各时间点均可见放射增敏效应。相应的放射增敏比SERSF2 分别为 1.19、1.73和 3.5 0。FMdC的放射增敏作用和药物剂量相关 ,2 0～ 5 0nmol/LFMdC处理细胞 48h ,SERSF2 从 1.15增加至 2 .2 8。用 30nmol/LFMdC处理C33 A和C4 I细胞 48h同样可观察到放射增敏作用 ,SERSF2 分别为 1.32和 2 .0 8。结论　FMdC对结肠癌和宫颈癌细胞有明显的放射增敏作用 。 展开更多

关键词 (E)-(2')-脱氧-氟亚甲基胞苷 WiDr细胞系 c33-A细胞系 c4-I细胞系 放射增敏 肿瘤

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高良姜素诱导人乳头瘤病毒阳性的宫颈癌细胞凋亡实验研究 被引量：15

11

作者 陈淑梅 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期941-945,共5页

目的研究高良姜素对人乳头瘤病毒(HPV)阳性人宫颈癌细胞的诱导凋亡作用及其机制。方法选择2株HPV阳性人宫颈癌细胞(Si Ha、He La)和1株HPV阴性人宫颈癌细胞(C-33-A),用不同浓度的高良姜素(20、40、80μmol/L)分别处理24、48、72 h后,采... 目的研究高良姜素对人乳头瘤病毒(HPV)阳性人宫颈癌细胞的诱导凋亡作用及其机制。方法选择2株HPV阳性人宫颈癌细胞(Si Ha、He La)和1株HPV阴性人宫颈癌细胞(C-33-A),用不同浓度的高良姜素(20、40、80μmol/L)分别处理24、48、72 h后,采用噻唑蓝(MTT)法测定高良姜素对3株宫颈癌细胞增殖的影响;不同浓度高良姜素处理宫颈癌细胞48 h后,分别采用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;Western blotting法检测Bcl-2家族蛋白表达情况。结果高良姜素可以剂量和时间依赖性地降低HPV阳性宫颈癌细胞Si Ha和He La的活力;而对于HPV阴性的宫颈癌细胞C-33-A活力无明显影响;细胞周期检测显示高良姜素可以使Si Ha和He La细胞的生长阻滞在G1或G2/M期;流式细胞仪分析发现40μmol/L高良姜素作用于Si Ha和He La细胞48 h后,细胞出现明显凋亡,而C-33-A细胞仅有少量凋亡;Western blotting检测发现40μmol/L高良姜素处理后,HPV阳性宫颈癌细胞中促凋亡蛋白Bad、Bid、Bax表达量升高,而抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-w表达量降低。结论高良姜素能抑制HPV阳性宫颈癌细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与下调Bcl-2、Bcl-w基因的表达及上调Bad、Bid、Bax基因的表达有关。 展开更多

关键词 高良姜素 宫颈癌 人乳头瘤病毒 BcL-2家族蛋白 Si Ha细胞 He La细胞 c-33-A细胞

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溶瘤病毒M1诱导宫颈癌细胞C-33A凋亡的作用及机制

12

作者 肖晓 周雅思 +3 位作者 彭楚茵 邓金清 王来友 朱文博 《中国药房》 CAS 北大核心 2021年第23期2827-2831,共5页

目的:研究溶瘤病毒M1(简称“M1病毒”)诱导宫颈癌细胞C-33A凋亡的作用及机制。方法:采用MTT法检测不同滴度(0、0.001、0.01、0.1、1、10 PFU/cell)M1病毒处理后C-33A细胞的存活率;将C-33A细胞分为对照组(0 PFU/cell)和M1病毒低、中、高... 目的:研究溶瘤病毒M1(简称“M1病毒”)诱导宫颈癌细胞C-33A凋亡的作用及机制。方法:采用MTT法检测不同滴度(0、0.001、0.01、0.1、1、10 PFU/cell)M1病毒处理后C-33A细胞的存活率;将C-33A细胞分为对照组(0 PFU/cell)和M1病毒低、中、高剂量组(0.001、0.01、0.1 PFU/cell),加入相应滴度病毒,培养48 h后,采用流式细胞仪检测细胞的凋亡率和感染率,采用Western blot法检测细胞中C/EBP同源蛋白(CHOP)、胱天蛋白酶12(caspase-12)、caspase-3、活化的caspase-3(cleaved-caspase-3)的表达水平。结果:经不同滴度M1病毒处理后,C-33A细胞存活率均显著降低(P<0.01),且呈剂量依赖趋势。与对照组比较,M1病毒各剂量组细胞的凋亡率和感染率以及中、高剂量组细胞中CHOP、caspase-12、cleaved-caspase-3(中剂量组除外)蛋白的表达水平均显著升高(P<0.01)。结论:M1病毒可诱导宫颈癌细胞C-33A的凋亡,其作用机制可能与激活内质网应激通路有关。 展开更多

关键词 溶瘤病毒M1 宫颈癌 c-33A细胞 内质网应激 细胞凋亡

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MTERF1基因真核表达载体的构建及其在C-33A细胞中的表达研究 被引量：1

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作者 梅雯 张成桂 +4 位作者 自加吉 孙美涛 杨泽芳 张晓娟 熊伟 《井冈山大学学报（自然科学版）》 2017年第5期29-34,共6页

采用PCR技术从pGEM-MTERF1重组克隆载体中扩增出人MTERF1基因cDNA的开放阅读框序列,经KpnⅠ和XhoⅠ双酶切后,以pcDNA3.1(+)为真核表达载体,构建重组质粒pcDNA3.1(+)-MTERF1;通过PCR、双酶切和DNA测序方法对重组子进行鉴定;将重组真核表... 采用PCR技术从pGEM-MTERF1重组克隆载体中扩增出人MTERF1基因cDNA的开放阅读框序列,经KpnⅠ和XhoⅠ双酶切后,以pcDNA3.1(+)为真核表达载体,构建重组质粒pcDNA3.1(+)-MTERF1;通过PCR、双酶切和DNA测序方法对重组子进行鉴定;将重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-MTERF1转染C-33A细胞,利用免疫印迹法检测MTERF1蛋白的表达。结果显示,重组质粒pcDNA3.1(+)-MTERF1经双酶切鉴定和菌落PCR鉴定均获得大小为1 200 bp的目的条带,DNA测序结果表明该序列与GenBank中人MTERF1基因序列完全相同,插入基因的大小和方向正确;免疫印迹结果表明,MTERF1蛋白的表达水平在转染pcDNA3.1(+)-MTERF1的C-33A细胞中表达高于转染pcDNA3.1(+)的C-33A细胞。通过对人MTERF1基因的真核表达载体的构建,为进一步研究人MTERF1基因的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 线粒体转录终止因子1 克隆 真核表达载体 人子宫颈癌c-33A细胞株

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人FOXC2真核表达载体的构建及稳定转染C-33A细胞系的建立

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作者 成荣杰 付艳 《中国实验诊断学》 北大核心 2009年第10期1326-1329,共4页

目的构建人FOXC2真核表达载体,并转染人宫颈癌C-33A细胞,建立稳定转染的细胞系。方法应用PCR方法从人FOXC2克隆中扩增其cDNA编码区序列,并将其构建于pcDNA3.1(-)真核表达载体。经PCR和测序鉴定后,利用脂质体进行宫颈癌C-33A细胞的转染,... 目的构建人FOXC2真核表达载体,并转染人宫颈癌C-33A细胞,建立稳定转染的细胞系。方法应用PCR方法从人FOXC2克隆中扩增其cDNA编码区序列,并将其构建于pcDNA3.1(-)真核表达载体。经PCR和测序鉴定后,利用脂质体进行宫颈癌C-33A细胞的转染,应用G418筛选出稳定表达FOXC2的细胞系,通过RT-PCR及Westernblot法检测FOXC2的表达情况。结果成功构建pcDNA3.1(-)/FOXC2真核表达载体,建立稳定转染FOXC2的C-33A细胞系,并鉴定了FOXC2目的基因在C-33A细胞中的过表达。结论FOXC2真核表达载体的成功构建为进一步研究FOXC2基因在宫颈癌中的功能奠定了良好的实验基础。 展开更多

关键词 人叉头框-c2(hFOXc2) 真核表达载体 c-33A细胞 转染

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