C_3-Ar复合物分子间势能面的ab initio计算及振动能级的研究

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作者 孙传智 张桂秋 +1 位作者 陈德展 纪爱萍 《山东师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2007年第1期76-78,共3页

采用超分子耦合簇理论CCSD(T)方法和由键函数3s3p2d组成的大基组,计算得到了范德华体系C3-Ar在C3分子处于线性平衡构型时的全程分子间势能面.该势能面存在2个相等的极小值,分别为θ=75.5°,Rm=0.379nm,θ=104.5°,Rm=0.379nm,Vm... 采用超分子耦合簇理论CCSD(T)方法和由键函数3s3p2d组成的大基组,计算得到了范德华体系C3-Ar在C3分子处于线性平衡构型时的全程分子间势能面.该势能面存在2个相等的极小值,分别为θ=75.5°,Rm=0.379nm,θ=104.5°,Rm=0.379nm,Vm=156.234cm-1,整个势能面表现强的各向异性.采用离散变量表象和Lanczos方法计算得到了C3-Ar体系的振动能级,计算结果表明,C3-Ar的CCSD(T)势能面支持64个振动束缚态. 展开更多

关键词 c3-ar 势能面 超分子方法 振动能级

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高表达C3aR的肥大细胞在糖尿病肾病患者肾组织中的分布及病理意义分析 被引量：9

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作者 郑敬民 朱小东 +3 位作者 张明超 王建平 徐丽丽 刘志红 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2011年第3期262-268,共7页

选取糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)早期、中期、晚期以及正常移植供肾各15例,分别作为DN早期组、中期组、晚期组和正常对照组,利用各个病例的肾穿刺组织标本进行C3aR免疫组化染色,分析各组中高表达C3aR浸润细胞的数量和分布特点... 选取糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)早期、中期、晚期以及正常移植供肾各15例,分别作为DN早期组、中期组、晚期组和正常对照组,利用各个病例的肾穿刺组织标本进行C3aR免疫组化染色,分析各组中高表达C3aR浸润细胞的数量和分布特点,及其与DN发生、发展的关系,利用连续切片、免疫荧光双套色染色、免疫电镜、及甲苯胺蓝染色等方法对DN患者肾组织中高表达C3aR的浸润细胞进行细胞类型鉴定.结果表明:a.光镜和免疫电镜的形态学分析显示DN患者肾组织中高表达C3aR的浸润细胞在形态上具有肥大细胞的特点,免疫荧光双套色染色的分析显示,C3aR浸润细胞CD45阴性、CD68和类胰蛋白酶阳性,与肥大细胞的情况一致,甲苯胺蓝特殊染色进一步证实这是一种肥大细胞.b.正常移植供肾组织中虽有肥大细胞分布,但数量很少;从DN早期组到DN中期组,再到DN晚期组,肾组织中肥大细胞的数量有一种不断增加的趋势;DN患者肾组织肥大细胞的数量与24 h尿蛋白和血肌酐水平均具有很好的线性相关性.上述工作不仅揭示了在DN发生发展过程中肥大细胞在DN患者肾组织中的数量及分布情况,提示肥大细胞很可能参与了DN的发生发展过程,同时,DN患者肾组织肥大细胞高表达过敏毒素C3a受体C3aR的发现,提示C3a/C3aR通路很可能在DN患者肥大细胞的招募和激活过程中有重要作用. 展开更多

关键词 过敏毒素 糖尿病肾病 c3ar 肥大细胞

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血流剪切力对血管内皮细胞过敏毒素C3a受体表达影响的研究 被引量：8

3

作者 王雪蕊 刘燕 +2 位作者 王绿娅 张俊蒙 杜杰 《心肺血管病杂志》 CAS 2015年第4期310-313,318,共5页

目的:探讨血流剪切力对血管内皮细胞过敏毒素C3a受体(C3aR)、炎症因子及黏附分子表达的影响。方法:分离培养原代人脐静脉内皮细胞,利用振荡流(OS)刺激,分别于处理前、处理6小时、12小时、24小时收取细胞,用免疫印迹法检测C3a受体(C3aR)... 目的:探讨血流剪切力对血管内皮细胞过敏毒素C3a受体(C3aR)、炎症因子及黏附分子表达的影响。方法:分离培养原代人脐静脉内皮细胞,利用振荡流(OS)刺激,分别于处理前、处理6小时、12小时、24小时收取细胞,用免疫印迹法检测C3a受体(C3aR)及血管细胞黏附蛋白1(VCAM 1)表达变化;用实时荧光定量检测C3aR、白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、细胞间黏附分子1(ICAM 1)及VCAM 1表达。结果:与处理前相比,内皮细胞在振荡流刺激后,C3a受体mRNA水平和蛋白表达均升高,6小时升高最显著分别为:[(1.997±0.3109)vs.(1.000±0.005773),P=0.0423;(2.968±0.2333)vs.(1.007±0.01202),P=0.0009];IL-1β、MCP-1、ICAM1及VCAM 1的mRNA水平均显著高于处理前,6小时达到最高值;TNF-α在刺激24小时后升高最显著(均P<0.05);振荡流刺激内皮细胞后VCAM 1表达上调,在6小时升高最显著(均P<0.05)。结论:血流剪切力可能通过上调血管内皮细胞过敏毒素C3a受体,调节内皮细胞炎症因子及黏附分子表达。 展开更多

关键词 内皮细胞 剪切力 过敏毒素受体 动脉粥样硬化

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分析补体C3a、C5a及其受体与IgA肾病发病及临床指标的关系

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作者 张宏群 谢建玲 《中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生》 2024年第4期0117-0120,共4页

分析IgA肾病病变中,补体C3a、C5a和相应受体(C5aR、C3aR)的参与作用。方法 分析89例IgA肾病患者(观察组)、肾肿瘤者健康肾组织(手术切除病变时同时获得健康肾组织进行检查)12例(对照组)进行对照分析,就诊时间界限:2020年1月至2022年12月... 分析IgA肾病病变中,补体C3a、C5a和相应受体(C5aR、C3aR)的参与作用。方法 分析89例IgA肾病患者(观察组)、肾肿瘤者健康肾组织(手术切除病变时同时获得健康肾组织进行检查)12例(对照组)进行对照分析,就诊时间界限:2020年1月至2022年12月,测得(免疫组化法)各肾组织标本中补体C3a、C5a和相应受体(C5aR、C3aR),并采集两组患者尿液、血清为标本,检测尿液、血清内C3a、C5a水平。结果 观察组肾脏组织内C3a、C3aR、C5a、C5aR阳性细胞百分高于对照组,IV级患者C3a、C3aR、C5a、C5aR阳性细胞百分高于III级、II级,III级高于II级(P<0.05);血液标本、尿液标本中,对照组C3a、C5a均低于IV级、III级、II级,血液标本中,IV级、III级C3a、C5a低于II级,尿液标本中,IV级C3a、C5a高于III级、II级,III级C3a、C5a高于II级(P<0.05);C3a、C3aR、C5a、C5aR与动脉压、24h尿蛋白定量、SCr、CRP呈正性关系,与C3、血清IgA无关。结论 补体C3a、C5a和相应受体在整个(包含发病、病变进展等)IgA肾病病变中均有参与作用,临床可经测得补体指标(C3a、C5a、C5aR、C3aR)协助诊断病情和评估病变程度,也对治疗方案的制定有积极意义。 展开更多

关键词 补体 c3A c5A 肾组织 c5ar IgA肾病 c3ar 检测

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C3aR——检测肾组织肥大细胞的敏感标志 被引量：6

5

作者 郑敬民 朱小东 +3 位作者 张明超 王建平 徐丽丽 刘志红 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期319-324,共6页

目的:探讨过敏毒素受体C3aR高表达细胞在正常个体和各种肾脏病患者肾组织中的分布情况,对其细胞类型进行鉴定,并对C3aR能否作为肥大细胞特异性标记分子进行评估。方法:利用免疫组化的方法分析C3aR高表达细胞在正常供肾组织和包括2型糖... 目的:探讨过敏毒素受体C3aR高表达细胞在正常个体和各种肾脏病患者肾组织中的分布情况,对其细胞类型进行鉴定,并对C3aR能否作为肥大细胞特异性标记分子进行评估。方法:利用免疫组化的方法分析C3aR高表达细胞在正常供肾组织和包括2型糖尿病肾病(T2DN)、IgA肾病、急性间质性肾炎、慢性间质性肾炎、ANCA相关性血管炎、微小病变性肾病、膜性肾病、局灶节段性肾小球硬化(FSGS)以及狼疮性肾炎在内的各种肾脏病患者肾组织中的分布情况;利用光镜、免疫电镜、免疫荧光双套色染色和甲苯胺蓝特殊染色等方法对肾组织中高表达C3aR的细胞类型进行鉴定;在此基础上,对C3aR作为肾组织肥大细胞特异性标记分子进行评估。结果:(1)C3aR高表达细胞在正常供肾组织和包括T2DN、IgA肾病、急性间质性肾炎、慢性间质性肾炎、ANCA相关性血管炎、微小病变性肾病、膜性肾病、FSGS以及狼疮性肾炎在内的各种肾脏病患者肾组织中均存在。(2)光镜和免疫电镜的形态学分析显示肾组织中高表达C3aR的浸润细胞在形态上具有肥大细胞的特点;免疫荧光双套色染色的分析显示,这种细胞CD45阴性、CD68和类胰蛋白阳性,与肥大细胞的情况一致;甲苯胺蓝特殊染色进一步证实其为肥大细胞。(3)虽然C3aR也同时表达于小管上皮细胞等其他细胞,但其在肥大细胞中的表达水平远远高于其他细胞,这种表达水平差异足以区分肥大细胞与其他细胞。(4)与目前最常用的肥大细胞标记分子——肥大细胞类胰蛋白酶相比,C3aR作为肥大细胞的标记分子具有相似的检测灵敏度和更好的特异度。结论:C3aR在肾组织肥大细胞特异性地高表达,是肾组织肥大细胞的一个敏感标记分子,完全可代替类胰蛋白酶,以免疫组化的方法检测肾组织中的肥大细胞。 展开更多

关键词 c3ar 肥大细胞 标记分子

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补体片段C3a及其受体在纳米二氧化硅致肺损伤中水平变化

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作者 周思凡 王周健 +4 位作者 高磊 段元晟 陈睦跃 张家祥 朱启星 《环境与职业医学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期877-883,共7页

[背景]纳米二氧化硅(SiNPs)通过呼吸道、消化道和皮肤等进入人体,引起机体损伤,肺脏是主要受损器官之一。[目的]观察经呼吸道暴露SiNPs小鼠肺脏中补体活化片段C3a及其受体C3aR的表达情况,探讨C3a/C3aR是否参与SiNPs暴露致小鼠肺损伤。[... [背景]纳米二氧化硅(SiNPs)通过呼吸道、消化道和皮肤等进入人体,引起机体损伤,肺脏是主要受损器官之一。[目的]观察经呼吸道暴露SiNPs小鼠肺脏中补体活化片段C3a及其受体C3aR的表达情况,探讨C3a/C3aR是否参与SiNPs暴露致小鼠肺损伤。[方法]透射电子显微镜检测SiNPs(粒径5~20 nm)超微结构,纳米粒度仪测定SiNPs流体动力学直径和表面Zeta电位。88只SPF级C57BL/6J小鼠进行随机化分组:空白对照组小鼠14只,不予以任何处理;溶剂对照组小鼠14只,气管滴注50μL生理盐水;低剂量组、中剂量组、高剂量组小鼠各20只,按体重分别滴注7、21、35 mg·kg^(−1)SiNPs悬液50μL,每3 d暴露一次,共5次。在暴露结束后第1天(模型1天组)和第15天(模型15天组)麻醉小鼠,抽取支气管肺泡灌洗液(BALF)后处死小鼠,留取肺脏组织。通过HE染色观察肺组织形态学改变,酶联免疫吸附试验检测BALF中C3a表达量,免疫组化法观察肺组织中C3a、C3aR沉积情况,蛋白免疫印迹法检测C3aR蛋白表达水平,通过免疫荧光法对肺组织中C3a与C3aR进行定位以及半定量检测。[结果]SiNPs在生理盐水中会发生团聚,流体动力学直径为(185.60±7.39)nm,Zeta电位绝对值为(43.33±0.76)mV。模型1天组和15天组小鼠状态良好,模型1天组中剂量组小鼠因操作原因导致死亡2只,解剖发现肺组织淤血,存在肺气肿,气管完整。其他剂量组小鼠无死亡。HE染色结果显示,SiNPs暴露小鼠肺部产生病理损伤,表现为肺泡壁增厚、炎性细胞浸润,随着剂量的升高病理损伤越严重,模型15天组较1天组稍有缓解,但仍存在病理改变。酶联免疫吸附试验结果显示:C3a在空白对照组和溶剂对照组表达量无差异(P>0.05);与溶剂对照组相比,中剂量组和高剂量组表达均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化法结果显示C3a的沉积情况与酶联免疫吸附试验结果一致。蛋白免疫印迹法与免� 展开更多

关键词 纳米二氧化硅 气管滴注 肺损伤 c3A c3ar

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种植体周围炎炎性组织差异表达基因的筛选及验证

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作者 韦雨杏 董皓 +4 位作者 韦惠平 谢诚 陀杨娟 覃浩 曹勇 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第30期4844-4849,共6页

背景:种植体周围炎严重影响着口腔种植修复的成功,目前仍然没有有效的治愈方法,其发病机制也尚未阐明。目的:寻找种植体周围炎发生相关的核心差异表达基因,并进行实验验证。方法:利用生物信息技术从GEO数据库中筛选种植体周围炎牙龈和... 背景:种植体周围炎严重影响着口腔种植修复的成功,目前仍然没有有效的治愈方法,其发病机制也尚未阐明。目的:寻找种植体周围炎发生相关的核心差异表达基因,并进行实验验证。方法:利用生物信息技术从GEO数据库中筛选种植体周围炎牙龈和健康牙龈的差异表达基因,并对差异基因进行富集分析。利用String数据库构建蛋白互作网络,并使用cytoscape软件筛选关键基因,采用RT-PCR和免疫组化检测对关键基因C3AR1表达进行验证。采用RT-PCR法检测RAW264.7细胞破骨向分化后C3AR1 mRNA的表达水平。结果与结论:①将GSE33774数据集中种植体周围炎牙龈和健康牙龈的基因数据行差异分析,得到有意义的上调基因33个,下调基因17个,共50个差异表达基因;GO和KEGG结果显示差异表达基因主要富集在免疫受体活性、C-C趋化因子受体活性功能,以及破骨细胞分化相关信号通路上;②共筛选出C3AR1、CD14、TLR4、CCR1、CYBB和FCGR2A 6个关键基因,RT-PCR、免疫组化实验结果证实,C3AR1在种植体周围炎组织中表达上调,且C3AR1在巨噬细胞破骨向分化后表达上调;③结果显示,C3AR1在种植体周围炎中高表达,可能是种植体周围炎骨质破坏的关键基因。 展开更多

关键词 种植体周围炎 c3ar1 生物信息学 差异表达基因 关键基因 单核巨噬细胞 破骨分化 骨质破坏

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糖尿病肾病患者肾脏组织中C3aR、C5aR的表达 被引量：2

8

作者 张朝甲 张颖 +4 位作者 刘璐 杜路 周雅丽 权松霞 邢国兰 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2014年第2期162-165,共4页

目的:探讨C3aR、C5aR在糖尿病肾病(DN)患者肾脏组织中的表达情况及其在DN发病中的作用。方法:选取DN患者的肾脏组织标本45例作为病例组,其中肾脏病理分级为Ⅰ+Ⅱ级13例、Ⅲ级21例、Ⅳ级11例;同时选取肾脏肿瘤患者手术切除的正常肾脏组... 目的:探讨C3aR、C5aR在糖尿病肾病(DN)患者肾脏组织中的表达情况及其在DN发病中的作用。方法:选取DN患者的肾脏组织标本45例作为病例组,其中肾脏病理分级为Ⅰ+Ⅱ级13例、Ⅲ级21例、Ⅳ级11例;同时选取肾脏肿瘤患者手术切除的正常肾脏组织标本10例作为对照组。常规方法检测24 h尿蛋白定量、红细胞沉降率(ESR)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、C-反应蛋白(CRP)等指标。采用免疫组化方法检测C3aR、C5aR在各组肾脏组织中的表达。分析DN患者肾脏病理损伤级别与临床指标、肾组织中C3aR和C5aR阳性细胞百分比与临床指标的相关性。结果:C3aR和C5aR在各级DN患者肾脏组织中的表达均高于对照组,且随着DN肾脏病理损伤的加重,其表达逐渐增强(F=45.987,40.426,P均<0.001)。DN患者肾脏病理损伤级别与24 h尿蛋白定量、Scr、BUN、CRP等呈正相关(rS分别为0.529、0.595、0.516和0.425,P均<0.05);C3aR在肾脏组织中的阳性细胞百分比与24 h尿蛋白定量、Scr、BUN、CRP及ESR呈正相关(rS分别为0.342、0.613、0.489、0.315和0.321,P均<0.05)。C5aR在肾脏组织中的阳性细胞百分比也与以上指标呈正相关(rS分别为0.403、0.441、0.315、0.456和0.389,P均<0.05)。结论:C3aR、C5aR参与DN的发生与发展,在DN的病理损伤过程中起重要作用。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 c3ar c5ar

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补体C3a及其受体在马兜铃酸Ⅰ肾损伤大鼠体内表达分析 被引量：3

9

作者 钱知知 顾亚琴 +2 位作者 杨召聪 叶晶 张良 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期278-282,共5页

目的分析补体C3a(complement 3a)及其受体C3aR(complement 3a receptor)在马兜铃酸Ⅰ(Aristolochic acid I,AAI)肾损伤大鼠体内的表达情况,初步探究其在马兜铃酸肾病中的作用。方法 SD大鼠按体质量完全随机分为溶媒对照组,AAI低、高剂量... 目的分析补体C3a(complement 3a)及其受体C3aR(complement 3a receptor)在马兜铃酸Ⅰ(Aristolochic acid I,AAI)肾损伤大鼠体内的表达情况,初步探究其在马兜铃酸肾病中的作用。方法 SD大鼠按体质量完全随机分为溶媒对照组,AAI低、高剂量(2.25,9.00 mg·kg^(-1))组,连续腹腔注射给药14 d,取血清,检测肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、补体C3、C3a;用HE法染色观察肾脏病理组织学变化;用蛋白免疫印迹(Western Blot)法分析肾脏组织C3aR蛋白的表达;用免疫组织化学方法分析肾脏组织C3aR的表达变化。结果与溶媒对照组比较,AAI低、高剂量组Cr、BUN水平显著升高(P<0.05,P<0.01);补体C3水平显著降低(P<0.01),而C3a水平显著升高(P<0.05,P<0.01);肾脏病理学检查显示AAI低、高剂量组肾脏有明显病变;Western Blot结果显示,与溶媒对照组比较,AAI低、高剂量组大鼠肾脏中C3aR蛋白表达水平明显升高,且呈剂量依赖关系,差异有统计学意义(P<0.01);免疫组化分析显示,溶媒对照组肾组织中可在肾小管上皮细胞见C3aR少量表达,AAI低、高剂量组的大鼠肾组织中C3aR主要表达在肾小管上皮细胞和间质细胞等,且C3aR表达显著高于溶媒对照组(P<0.01),随病理损伤程度增加而增多。结论C3aR在AAI致肾损伤大鼠肾脏组织中有表达,通过与其配体结合可能引起肾组织的损伤。补体C3a及其受体在马兜铃酸肾病中发挥一定的作用。 展开更多

关键词 马兜铃酸Ⅰ 肾损伤 补体c3a 受体c3ar 马兜铃酸肾病

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丹酚酸A调控C3aR的表达治疗缺血性疾病作用机制研究 被引量：3

10

作者 马璐璐 陈璐 +6 位作者 张璐莎 方乐玉 李春晓 张丽媛 杨文杰 王倩怡 王虹 《中医学报》 CAS 2021年第6期1261-1266,共6页

目的:探讨丹酚酸A(salvianolic acid A,SAA)通过调控过敏毒素C3a受体(anaphylatoxin C3a receptor,C3aR)的表达治疗缺血性疾病的作用机制。方法:构建体外血小板活化模型和中性粒细胞活化模型,采用比浊法检测血小板聚集率;流式细胞术检... 目的:探讨丹酚酸A(salvianolic acid A,SAA)通过调控过敏毒素C3a受体(anaphylatoxin C3a receptor,C3aR)的表达治疗缺血性疾病的作用机制。方法:构建体外血小板活化模型和中性粒细胞活化模型,采用比浊法检测血小板聚集率;流式细胞术检测血小板P选择素(P-selectin,CD62p)的表达;免疫荧光检测血小板在纤维蛋白原上的黏附;酶联免疫吸附测定法检测弹性蛋白酶(elastase,NE)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)和乳铁蛋白(lactoferrin,LF)的水平。结果:与模型组对比,不同浓度的SAA能抑制二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)诱导的血小板聚集、黏附、释放(P<0.05),显著抑制ADP诱导的C3aR的表达(P<0.05);与模型组对比,SAA能抑制中性粒细胞中NE、MPO、MMP9、LF的水平(P<0.05);C3aR抑制剂可抑制缺氧诱导的中性粒细胞脱颗粒(P<0.05)。结论:SAA可能通过调控C3aR的表达抑制血小板活化、聚集、黏附及中性粒细胞脱颗粒治疗临床缺血性疾病。 展开更多

关键词 丹参 丹酚酸A 血小板 中性粒细胞 c3ar 缺血性疾病 作用机制

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C3aR拮抗剂治疗PR8/MRSA共感染小鼠肺炎损伤的研究 被引量：1

11

作者 董灏 李利忠 +4 位作者 贾雷立 宋宏彬 李劲松 赵江云 姜永强 《军事医学》 CAS 2021年第9期692-695,共4页

目的补体异常激活可大量产生过敏毒素C3a分子,通过利用C3aR受体拮抗剂(C3aRa)可抑制C3a功能,达到治疗流感病毒和金黄色葡萄球菌(PR8/MRSA)共感染小鼠肺炎损伤的目的,探究一种治疗共感染重症肺炎损伤的新策略。方法PR8/MRSA共感染小鼠尾... 目的补体异常激活可大量产生过敏毒素C3a分子,通过利用C3aR受体拮抗剂(C3aRa)可抑制C3a功能,达到治疗流感病毒和金黄色葡萄球菌(PR8/MRSA)共感染小鼠肺炎损伤的目的,探究一种治疗共感染重症肺炎损伤的新策略。方法PR8/MRSA共感染小鼠尾静脉注射C3aR受体拮抗剂C3aRa,剂量1 mg/kg,1次/2 d,观察记录小鼠死亡率变化;测量共感染小鼠体质量,取新鲜肺组织称重,计算肺指数;制备小鼠肺组织石蜡切片并行HE染色,观察肺部病理改变。结果经过敏毒素受体拮抗剂C3aRa干预后的共感染小鼠较对照组生存率提高了30%,肺组织充血、水肿和出血程度减轻,肺指数明显下降(P<0.001)。结论C3aRa在流感/细菌共感染重症肺炎的治疗中具有一定疗效,为临床利用补体干预治疗共感染重症肺炎提供了一种新策略。 展开更多

关键词 补体系统蛋白质类 过敏毒素类 肺炎 补体c3a c3ar c3ara 流感/细菌共感染 过敏毒素受体拮抗剂

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丹酚酸A抑制血小板及中性粒细胞活化作用 被引量：2

12

作者 杨文杰 王洪颖 +11 位作者 马璐璐 方乐玉 李春晓 张璐莎 张丽媛 王倩怡 孙伟 冷雨泽 薛岳进 李梦瑶 陈璐 王虹 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期740-748,共9页

目的探究丹酚酸A(Salvianolic acid A,SAA)对心肌梗死(myocardial infarction,MI)小鼠心脏的血小板募集、活化及中性粒细胞的影响。方法将C57BL/6小鼠随机分为:假手术组、MI模型组、SAA(5、10 mg·kg^(-1))组、替罗非班(tirofiban,0... 目的探究丹酚酸A(Salvianolic acid A,SAA)对心肌梗死(myocardial infarction,MI)小鼠心脏的血小板募集、活化及中性粒细胞的影响。方法将C57BL/6小鼠随机分为:假手术组、MI模型组、SAA(5、10 mg·kg^(-1))组、替罗非班(tirofiban,0.87 mg·kg^(-1))组,尾静脉注射给药3 d。超声心动、HE染色检测小鼠心功能及梗死面积;采用IHC、FCS、ELISA、Western blot等方法探讨了SAA抑制血小板及中性粒细胞活化作用。结果与MI组相比,SAA可以改善MI小鼠的心功能及心脏病理变化;减少心肌组织中CD42c及外周血中CD62p的表达,同时不影响尾出血时间;降低ADP诱导的血小板活化,上调p-VASP/VASP比值,降低p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值;减少心肌组织中CD45、Ly6G以及CXCL1和CXCL2表达;减少心肌组织中补体成分C3aR的表达,降低C3a诱导的NE、MPO、MMP9、LF的水平。结论SAA具有通过抑制PI3K/AKT、VASP通路发挥抗血小板活化的作用,以及通过抑制C3aR及C3a的表达发挥抗中性粒细胞活化的作用。 展开更多

关键词 丹酚酸A 心肌梗死 中性粒细胞 血小板募集 血小板活化 补体c3ar

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补体C3a受体拮抗剂对三氯乙烯致敏小鼠肾脏免疫性损伤的影响 被引量：3

13

作者 杨鹏 臧丹丹 +4 位作者 杨小东 李博栋 王贤 张家祥 朱启星 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 2017年第3期161-165,共5页

目的 通过使用C3a受体特异性拮抗剂（C3aRA）研究补体C3a-C3aR在三氯乙烯（TCE）致敏小鼠肾脏免疫性损伤中的作用,探讨职业性三氯乙烯药疹样皮炎（ODMLT）肾脏损伤机制.方法 将42只无特定病原体（SPF）级雌性BALB/c小鼠（6～8周）随机... 目的 通过使用C3a受体特异性拮抗剂（C3aRA）研究补体C3a-C3aR在三氯乙烯（TCE）致敏小鼠肾脏免疫性损伤中的作用,探讨职业性三氯乙烯药疹样皮炎（ODMLT）肾脏损伤机制.方法 将42只无特定病原体（SPF）级雌性BALB/c小鼠（6～8周）随机分为空白对照组（5只）、溶剂对照组（5只）、TCE处理组（16只）和TCE＋C3aRA处理组（16只）,其中TCE处理组与TCE＋C3aRA处理组根据皮肤致敏试验评分进一步区分为致敏组和非致敏组.取小鼠血清样品采用生化试剂盒检测小鼠肾功能变化;采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应（qPCR）法检测小鼠肾脏组织中C3aR基因表达水平变化;采用免疫组化法检测小鼠肾脏组织中白细胞介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）蛋白表达水平变化.结果 与溶剂对照组和相应非致敏组比较,TCE致敏组和TCE＋C3aRA致敏组小鼠肌酐（CRE）和尿素氮（BUN）水平明显升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）;与TCE致敏组比较,TCE＋C3aRA致敏组CRE和BUN水平明显降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）.与溶剂对照组和TCE非致敏组比较,TCE致敏组小鼠肾脏组织中C3aR基因表达水平均明显升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）.TCE致敏组和TCE＋C3aRA致敏组小鼠肾脏组织中IL-1β和TNF-α蛋白有大量表达,与TCE致敏组比较,TCE＋C3aRA致敏组肾脏组织中IL-1β和TNF-α蛋白表达水平明显降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 补体C3a-C3aR可能参与TCE致敏小鼠肾脏免疫性损伤,C3aRA对TCE致敏小鼠肾脏免疫性损伤有一定的保护作用. 展开更多

关键词 三氯乙烯 肾 c3a受体 白细胞介素类 肿瘤坏死因子

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白蛋白过载对阿霉素肾病小鼠肾脏C3a-C3aR信号通路及IL-17的影响 被引量：2

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作者 魏心怡 肖蕾 +2 位作者 杨宝辉 阳海平 李秋 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期369-374,共6页

目的研究白蛋白过载对阿霉素肾病小鼠肾脏局部补体C3a-C3a受体(C3a R)信号通路及白细胞介素17(IL-17)的影响,初探白蛋白过载致肾脏损害的免疫学机制。方法 SPF级雄性Balb/c健康小鼠随机分为对照组、阿霉素肾病组(ADR组)、白蛋白过载组(A... 目的研究白蛋白过载对阿霉素肾病小鼠肾脏局部补体C3a-C3a受体(C3a R)信号通路及白细胞介素17(IL-17)的影响,初探白蛋白过载致肾脏损害的免疫学机制。方法 SPF级雄性Balb/c健康小鼠随机分为对照组、阿霉素肾病组(ADR组)、白蛋白过载组(ADR+BSA组)。所有小鼠行左肾切除术,第2周末构建阿霉素肾病模型,第6周末白蛋白过载组腹腔注射牛血清白蛋白(10 mg/g,5次/周,共4周)。第6、10周末检测24小时尿蛋白、血清生化指标、肾脏组织病理、Real-time PCR及免疫组化法检测肾脏C3a、C3a R、TGF-β1表达,ELISA及免疫组化法检测肾脏IL-17表达。结果第10周末ADR组肾脏C3a、C3a R、TGF-β1、IL-17表达均较对照组增高(P均<0.05)。第10周末ADR+BSA组尿蛋白、血清尿素氮水平较对照组及ADR组升高(P均<0.05);肾脏组织病理发现肾小球呈局灶节段性硬化及肾小管损害加重;肾脏C3a、C3a R、TGF-β1、IL-17表达较对照组及ADR组增高(P均<0.05)。结论阿霉素肾病小鼠肾脏局部C3a-C3a R信号通路活化,白蛋白过载致持续大量蛋白尿可进一步活化C3a-C3a R信号通路,同时上调TGF-β1、IL-17表达进而加重肾脏损害。 展开更多

关键词 蛋白尿 c3A c3a受体 阿霉素肾病 白细胞介素17

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IgA肾病患者肾组织肥大细胞的分布及意义 被引量：2

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作者 郑敬民 尹广 +2 位作者 王建平 李丽娟 刘志红 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期114-119,共6页

目的:了解不同亚型IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)患者肾组织中肥大细胞的分布及其与各种疾病指标的相关性,全面探讨肥大细胞在IgAN中的可能病理意义。方法:选取包括大量蛋白尿型、反复发作肉眼血尿型、高血压型、无症状尿检异常型、血... 目的:了解不同亚型IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)患者肾组织中肥大细胞的分布及其与各种疾病指标的相关性,全面探讨肥大细胞在IgAN中的可能病理意义。方法:选取包括大量蛋白尿型、反复发作肉眼血尿型、高血压型、无症状尿检异常型、血管炎型在内的IgAN患者共110例,根据肾组织肥大细胞特异性高表达C3aR的特点,利用免疫组化的方法对所有患者的肾穿刺活检标本切片进行C3aR免疫组化染色,计数各切片C3aR强阳性细胞数,同时测量切片面积,计算各患者肾组织肥大细胞分布密度(同时选取正常供肾15例作为对照);在此基础上,利用统计学方法,进行肾组织肥大细胞密度与包括血、尿生化指标,肾小管间质相对面积和肾组织炎症细胞密度在内的各种病理指标进行相关性分析,探讨肥大细胞在IgAN中的病理意义。结果:(1)肥大细胞广泛存在于各亚型IgAN患者肾组织中;与正常对照相比,各亚型IgAN患者肾组织中的肥大细胞数均有明显的增加。(2)总的来看,肾组织中肥大细胞数与血肌酐和血CystatinC水平、尿视黄醇结合蛋白(RBP)和尿溶菌酶水平及间质炎症细胞数量,肾小管间质相对面积具显著相关性,而与尿C3、尿α2巨球蛋白(α2-MG)和24h尿蛋白水平及尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)水平则无明显相关性。(3)不同亚型IgAN肾组织肥大细胞与各种病理指标的相关性有明显差异,其中,反复发作肉眼血尿型与其他亚型的差异性最明显。结论:肥大细胞很可能参与了包括大量蛋白尿型、反复发作肉眼血尿型、无症状尿检异常型、高血压型和血管炎型在内的各种亚型IgAN的病理过程。肥大细胞在不同亚型IgAN中的地位和作用机制也可能存在差异。 展开更多

关键词 IGA肾病 c3ar 肥大细胞

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C3aR慢病毒表达载体的构建及在肾小管上皮细胞中的转染实验 被引量：2

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作者 郑敬民 尹广 +1 位作者 赵文紧 刘志红 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第4期355-359,共5页

目的前期研究发现C3aR在糖尿病肾病肾小管上皮细胞中表达上调,但其在糖尿病肾病中的病理意义未知,且有关肾组织C3aR的确切生理和病理意义亦仍不清楚。文中通过构建C3aR慢病毒表达载体和过表达C3aR的肾小管上皮细胞株,为探讨C3aR在肾组... 目的前期研究发现C3aR在糖尿病肾病肾小管上皮细胞中表达上调,但其在糖尿病肾病中的病理意义未知,且有关肾组织C3aR的确切生理和病理意义亦仍不清楚。文中通过构建C3aR慢病毒表达载体和过表达C3aR的肾小管上皮细胞株,为探讨C3aR在肾组织小管上皮细胞中的确切生理和病理意义提供细胞模型。方法根据人C3aR mRNA序列合成人C3aR基因,将其克隆到慢病毒表达载体p Lenti6.3-MCS-IRES2-EGFP的多克隆位点,构建成C3aR慢病毒表达载体p Lenti6.3-C3aR-IRES2-EGFP;经测序验证正确后,用构建的慢病毒表达载体p Lenti6.3-C3aR-IRES2-EGFP和包装质粒共转染293T细胞,包装成C3aR表达重组慢病毒;以C3aR表达重组慢病毒感染人肾小管上皮细胞系HK2,经药物筛选得到杀稻瘟菌素抗性细胞克隆;经荧光定量PCR分析和细胞免疫化学分析,鉴定出稳定过表达C3aR的人肾小管上皮细胞株。结果 1对构建成的C3aR慢病毒表达载体p Lenti6.3-C3aR-IRES2-EGFP进行全序列测序验证显示序列完全正确。2以构建的C3aR慢病毒表达载体和包装质粒(p LP1、p LP2和p LP/VSVG)共转染293T细胞,48 h后收集细胞培养上清,得到了滴度约为5×108个/m L的慢病毒液。3成功进行了C3aR重组慢病毒对HK2细胞的转染,得到了稳定转染了C3aR重组慢病毒的HK2细胞株HK2-C3aR;基于荧光定量PCR和细胞免疫化学染色的分析证实HK2-C3aR细胞株中C3aR表达水平较HK2非转染对照细胞高(2.33±0.45 vs 1.00±0.09,P<0.05)。结论成功构建了C3aR慢病毒表达载体和过表达C3aR的人肾小管上皮细胞株,为进一步研究C3aR过表达在人肾小管上皮细胞中的病理意义提供了很好的细胞模型,也为进一步开展C3aR在其他细胞中的生理、病理意义创造了条件。 展开更多

关键词 c3ar 慢病毒 肾小管上皮细胞 过表达

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C3aR过度活化与糖尿病肾病肾组织损伤的关系 被引量：1

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作者 郑敬民 陈德君 +3 位作者 尹广 赵文紧 李丽娟 王建平 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2018年第7期752-762,共11页

C3aR是补体C3裂解产物C3a的受体.最近的一些研究提示C3aR通路可能参与了糖尿病肾病(DN)的病理过程,但有关C3aR通路在DN中的确切病理作用及有关机制远未清楚.需要特别指出的是,现有的有关C3aR参与DN肾组织损伤的证据主要来自一些动物模... C3aR是补体C3裂解产物C3a的受体.最近的一些研究提示C3aR通路可能参与了糖尿病肾病(DN)的病理过程,但有关C3aR通路在DN中的确切病理作用及有关机制远未清楚.需要特别指出的是,现有的有关C3aR参与DN肾组织损伤的证据主要来自一些动物模型的研究,临床上尚缺乏较为系统全面的对DN患者肾组织C3aR通路与肾组织损伤关系的观察分析.为此,本文首次以较大的样本量分析了不同病理时期DN患者肾组织C3aR和C3a的表达变化情况及其与DN患者肾组织损伤的相关性.在此基础上,进而利用体外细胞模型,对高糖环境下C3aR活化致肾小球足细胞损伤的作用及机制进行了探讨.结果显示:a.与正常对照组相比,DN患者肾组织C3a和C3aR的表达水平随DN的进展而升高,C3aR在DN患者肾组织中的表达上调主要见于肾小管上皮细胞和肾小球足细胞;b.DN患者肾组织C3aR和C3a水平与患者肾组织损伤程度,特别是小管和小管间质损伤程度、肾小球足细胞损伤程度具有显著相关性;c.外加C3a激活C3aR可使高糖环境中的足细胞的细胞骨架发生明显改变、足细胞标记分子表达下调、足细胞通透性增加.这些结果说明:a.DN患者肾组织中确实存在C3a/C3aR轴过度活化的现象;b.C3a/C3aR轴的过度活化很可能在DN患者肾组织损伤,特别是小管和小管间质损伤、肾小球足细胞损伤中具有重要作用;c.可能通过破坏成熟足细胞特有的细胞骨架,改变足细胞标记分子表达,增加足细胞的通透性,C3a/C3aR轴过度活化参与DN足细胞损伤过程.本文不仅为C3a/C3aR通路参与DN病理过程提供了新的必不可少的临床证据,也增加了对C3a/C3aR通路过度活化致DN患者肾组织损伤机制,特别是肾小球足细胞损伤机制的了解,这对于拓展对DN病理机制的认识,发展DN防治新思路,无疑都是有益的. 展开更多

关键词 c3A c3ar 糖尿病肾病 足细胞 表达 病理意义

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C3a分泌性表达载体及过表达C3a肾小管上皮细胞株的构建 被引量：1

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作者 郑敬民 尹广 +1 位作者 恽时锋 赵文紧 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第6期584-589,共6页

目的已有的研究表明包括糖尿病肾病在内的多种肾病患者肾小管上皮细胞存在C3a/C3aR轴过度活化现象,但有关C3a/C3aR轴过度活化在肾小管上皮细胞中的病理意义未知。文中构建分泌性过表达C3a的肾小肾小管上皮细胞株,为探讨各种病理情况下C3... 目的已有的研究表明包括糖尿病肾病在内的多种肾病患者肾小管上皮细胞存在C3a/C3aR轴过度活化现象,但有关C3a/C3aR轴过度活化在肾小管上皮细胞中的病理意义未知。文中构建分泌性过表达C3a的肾小肾小管上皮细胞株,为探讨各种病理情况下C3a/C3aR轴过度活化的病理意义提供细胞模型。方法设计合成人C3a分泌性表达单元,将其克隆到慢病毒表达载体p Lenti6.3-MCS-IRES2-EGFP的多克隆位点,构建成C3a分泌性表达载体p Lenti6.3-C3a-IRES2-EGFP;将p Lenti6.3-C3a-IRES2-EGFP和包装质粒共转染293 T细胞,包装成C3a表达重组慢病毒LV-C3a;以LV-C3a感染人肾小管上皮细胞系HK2,根据LV-C3a上带有杀稻瘟菌素抗性基因的特点,以杀稻瘟菌素筛选稳定转染细胞克隆;利用荧光定量PCR和ELISA方法对稳定转染细胞克隆的C3a表达水平和分泌情况进行分析,从中鉴定出稳定分泌性过表达C3a的人肾小管上皮细胞株。结果 1成功构建了序列完全正确的C3a分泌性表达载体p Lenti6.3-C3a-IRES2-EGFP;2成功进行了重组慢病毒包装,得到了高滴度(5×108个/m L)的C3a表达重组慢病毒LV-C3a;3成功进行了LV-C3a对HK2细胞的转染,得到了稳定转染LV-C3a的HK2细胞株;基于荧光定量PCR和ELISA的分析证实,与HK2细胞比较,HK2-C3a细胞株中C3a mRNA表达水平显著升高[(1.0±0.5)vs(1 321.0±18.0),P<0.01],分泌的C3a水平显著升高[(0.3±0.2)ng/m L vs(249.0±37.0)ng/m L,P<0.01]。结论成功构建的C3a分泌性慢病毒表达载体和分泌性过表达C3a的人肾小管上皮细胞株为进一步研究各种病理情景中C3a/C3aR过度活化在人肾小管上皮细胞中的病理意义提供了很好的细胞模型,也为进一步开展C3a/C3aR过度活化在其他细胞中的病理意义创造了条件。 展开更多

关键词 c3A c3ar 慢病毒 肾小管上皮细胞 过表达

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C3aR和晚期糖基化终产物受体对APP/PS1阿尔兹海默病小鼠模型骨代谢的影响

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作者 李芳瑜 崔舜 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1081-1089,共9页

目的研究补体C3a受体(complement C3a receptor,C3aR)和晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end product,RAGE)对APP/PS1阿尔兹海默病小鼠模型骨代谢的影响。方法将APP/PS1(APPswe/PS1dE9)阿尔兹海默病小鼠分别与C3a... 目的研究补体C3a受体(complement C3a receptor,C3aR)和晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end product,RAGE)对APP/PS1阿尔兹海默病小鼠模型骨代谢的影响。方法将APP/PS1(APPswe/PS1dE9)阿尔兹海默病小鼠分别与C3aR基因敲除鼠(C3aR^(-/-))、RAGE基因敲除鼠(RAGE^(-/-))杂交产生APP/PS1-C3aR^(-/-)和APP/PS1-RAGE^(-/-)。在体内,通过微计算机断层扫描(Micro-CT)、骨组织骨钙素免疫组织化学染色、抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色和Goldner三色法染色,了解不同基因型鼠之间骨代谢的差异性;在体外,通过骨髓源成骨细胞和破骨细胞诱导培养了解C3aR和RAGE对成骨细胞和破骨细胞分化的影响。结果在体内实验中,与APP/PS1小鼠相比,APP/PS1-C3aR^(-/-)和APP/PS1-RAGE^(-/-)小鼠骨量增多,骨形成增加,骨吸收减弱,类骨质增多(P<0.05)。在体外实验中,APP/PS1-C3aR^(-/-)和APP/PS1-RAGE^(-/-)小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化能力增强,碱性磷酸酶(ALP)、成骨转录因子2(RUNX2)表达增加,破骨细胞分化能力减弱,TRAP染色阳性减少(P<0.05)。结论C3aR和RAGE都参与调节APP/PS1小鼠骨代谢过程,敲除C3aR和RAGE可以改善APP/PS1小鼠的骨质疏松,为临床上阿尔兹海默病合并骨质疏松的治疗提供了新的靶点。 展开更多

关键词 阿尔兹海默病 骨质疏松 c3ar 晚期糖基化终产物受体

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补体C3aR在大鼠脊髓缺血再灌注损伤中的表达 被引量：1

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作者 董全 僧志远 巩守平 《西部医学》 2019年第10期1493-1497,共5页

目的观察脊髓缺血再灌注损伤(SCIR)过程中大鼠脊髓C3aR的表达水平及细胞定位,探讨C3a-C3aR信号通路在SCIR病理过程中的作用。方法使用体重为250g^300g的雄性成年SD大鼠,参照Zivin法构建大鼠SCIR模型。将54只大鼠随机分为假手术组(Sham组... 目的观察脊髓缺血再灌注损伤(SCIR)过程中大鼠脊髓C3aR的表达水平及细胞定位,探讨C3a-C3aR信号通路在SCIR病理过程中的作用。方法使用体重为250g^300g的雄性成年SD大鼠,参照Zivin法构建大鼠SCIR模型。将54只大鼠随机分为假手术组(Sham组,n=9),单纯缺血组(I组,n=9)和缺血再灌注组(IR组,n=36),缺血再灌注组又依据再灌注时间不同分为再灌注12h组(IR12h组,n=9)、再灌注24h组(IR24h组,n=9)、再灌注48h组(IR48h组,n=9)和再灌注3d组(IR3d组,n=9)。观察动物行为学改变并进行运动功能评分,评估模型是否制备成功;采用ELISA法检测SCIR过程中大鼠血浆C3a分子的表达水平;制备大鼠脊髓组织冰冻切片,采用双重标记的免疫组织荧光染色法检测SCIR过程中大鼠脊髓组织C3aR的表达变化及细胞定位。结果大鼠脊髓缺血1h及再灌注1h、6h、12h、24h和48h后出现明显的运动功能障碍;IR组大鼠血浆C3a含量较Sham组显著升高(P<0.05),其中,IR24h组大鼠血浆C3a含量最高;IR组大鼠脊髓组织C3aR表达上调,主要在神经元和小胶质细胞上表达。SCIR过程中脊髓组织小胶质细胞大量激活,小胶质细胞上高表达C3aR是C3aR表达上调的主要原因。结论 SCIR过程中C3a-C3aR信号通路激活,C3a在血浆中表达升高,C3aR在脊髓组织中表达上调,C3a-C3aR信号通路可能在SCIR病理进程中发挥着诱导炎症反应加重脊髓损伤等作用。 展开更多

关键词 脊髓 缺血再灌注损伤 补体 c3a受体

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