毛萼乙素通过调节STAT3抑制宫颈癌C-33A细胞survivin的表达 被引量：13

1

作者 齐玉明 王春丽 冯社军 《西部医学》 2016年第5期625-627,631,共4页

目的观察毛萼乙素(Eriocalyxin B,ERB)对于宫颈癌C-33A细胞增殖的调节作用和对survivin表达的调控作用,及其相关的分子机制。方法使用不同浓度的毛萼乙素(0μM、1μM和20μM)对宫颈癌C-33A细胞进行干预。在不同时间点(0h、24h和48h)使用... 目的观察毛萼乙素(Eriocalyxin B,ERB)对于宫颈癌C-33A细胞增殖的调节作用和对survivin表达的调控作用,及其相关的分子机制。方法使用不同浓度的毛萼乙素(0μM、1μM和20μM)对宫颈癌C-33A细胞进行干预。在不同时间点(0h、24h和48h)使用MTT法对C-33A细胞活性进行测定。在干预48h后,采用qPCR对C-33A细胞survivin mRNA的表达水平进行检测。采用western blot对C-33A细胞survivin蛋白表达水平和STAT3磷酸化水平进行检测。结果与0μM干预组相比,给予毛萼乙素干预的宫颈癌C-33A细胞活性呈时间依赖性和浓度依赖性下降,差异均有显著统计学意义(P均<0.05)。在毛萼乙素干预48h后,宫颈癌C-33A细胞survivin mRNA和蛋白的表达水平及STAT3的活化水平呈浓度依赖性降低,差异均有显著统计学意义(P均<0.05)。结论毛萼乙素可能可以通过下调宫颈癌C-33A细胞survivin的表达对肿瘤细胞的增殖产生抑制作用,该机制与降低STAT3的活化密切相关,且为毛萼乙素应用于宫颈癌及其他恶性肿瘤的临床治疗奠定了一定的实验基础。 展开更多

关键词 宫颈癌 c-33A细胞 毛萼乙素 STAT3 SURVIVIN

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蛇葡萄素通过PI3K/AKT/mTOR通路诱导人宫颈癌细胞SiHa自噬 被引量：4

2

作者 邹雪 熊晓妹 +4 位作者 杨晓利 廖思雨 许诗怡 张秀桥 桂春 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2121-2128,共8页

目的研究蛇葡萄素(ampelopsin,AMP)诱导人宫颈癌细胞SiHa发生自噬及其可能的作用机制。方法单丹磺酰胺(monodansylcadaverine,MDC)染色法观察AMP对SiHa和C-33A细胞自噬的影响;透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)观察... 目的研究蛇葡萄素(ampelopsin,AMP)诱导人宫颈癌细胞SiHa发生自噬及其可能的作用机制。方法单丹磺酰胺(monodansylcadaverine,MDC)染色法观察AMP对SiHa和C-33A细胞自噬的影响;透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)观察经AMP干预的SiHa和C-33A细胞超微结构的变化;自噬双标腺病毒转染(mRFP-GFP-LC3)法检测SiHa细胞自噬流强度;Western blot法对SiHa细胞中自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、P62、Beclin-1、Atg13及PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白的表达情况进行检测。结果MDC染色结果显示,随着AMP浓度的升高,代表自噬小体的亮绿色逐渐增多;TEM实验结果表明,与空白对照组相比,AMP组细胞线粒体嵴溶解消失,同时可见自噬小体和自噬溶酶体;mRFP-GFP-LC3实验结果提示,随着AMP浓度的升高,细胞内自噬小体和自噬溶酶体增多,提示自噬流增强;同时发现LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、Atg13蛋白表达上调,P62、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达下调,表明AMP可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导SiHa细胞发生自噬;加入3-MA后,与AMP组相比,3-MA和AMP联合组的p-PI3K、p-AKT、p-mTOR的表达水平上升,提示自噬被抑制后,PI3K/AKT/mTOR信号通路被逆转。结论AMP可诱导SiHa细胞发生自噬,其机制可能与抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路的激活有关。 展开更多

关键词 蛇葡萄素 宫颈癌 SIHA细胞 c-33A细胞 自噬 PI3K/AKT/MTOR

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黄精多糖抑制宫颈癌C-33A细胞增殖作用的研究 被引量：2

3

作者 林辰 徐文秀 +4 位作者 李欣 金红 王凤阁 王岐 徐吉雨 《中医临床研究》 2021年第31期56-58,共3页

目的:观察黄精多糖(Polygonatum Sibiricum Polysaccharide,PSP)抑制宫颈癌C-33A细胞增殖的情况并分析其机制。方法:将40只裸鼠随机分为模型组、黄精多糖低剂量组、黄精多糖中剂量组、黄精多糖高剂量组和环磷酰胺组;C-33A细胞分为对照... 目的:观察黄精多糖(Polygonatum Sibiricum Polysaccharide,PSP)抑制宫颈癌C-33A细胞增殖的情况并分析其机制。方法:将40只裸鼠随机分为模型组、黄精多糖低剂量组、黄精多糖中剂量组、黄精多糖高剂量组和环磷酰胺组;C-33A细胞分为对照组、黄精多糖低剂量组、黄精多糖中剂量组、黄精多糖高剂量组和环磷酰胺组。分析比较各组移植瘤重量、体积和抑瘤率变化;酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测裸鼠血清中基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9表达水平;八肽胆囊收缩素(CCK8)检测C-33A细胞增殖情况;流式细胞术检测C-33A细胞凋亡情况;蛋白质免疫印迹(Western-blot)技术检测半胱氨酸蛋白酶3(Caspase 3,CASP3)和半胱氨酸蛋白酶9(Caspase 9,CASP9)表达情况;实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative Real-time Polymerase Chain Reaction,qRT-PCR)检测细胞凋亡相关基因-2(Bcl-2)、凋亡蛋白(Bax)基因表达量变化。结果:与模型组相比较,黄精多糖低剂量组、黄精多糖中剂量组、黄精多糖高剂量组裸鼠血清中基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9含量显著降低,抑瘤率显著增加;CASP3和CASP9蛋白表达及Bax基因表达增加,而Bcl-2表达降低。细胞实验中,与对照组相比较,黄精多糖低剂量组、黄精多糖中剂量组、黄精多糖高剂量组C-33A细胞增殖速度显著降低,细胞凋亡水平显著增加。结论:黄精多糖可抑制C-33A细胞增殖并促进其凋亡。 展开更多

关键词 黄精多糖 c-33A细胞 凋亡蛋白 基质金属蛋白酶9

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人FOXC2真核表达载体的构建及稳定转染C-33A细胞系的建立

4

作者 成荣杰 付艳 《中国实验诊断学》 北大核心 2009年第10期1326-1329,共4页

目的构建人FOXC2真核表达载体,并转染人宫颈癌C-33A细胞,建立稳定转染的细胞系。方法应用PCR方法从人FOXC2克隆中扩增其cDNA编码区序列,并将其构建于pcDNA3.1(-)真核表达载体。经PCR和测序鉴定后,利用脂质体进行宫颈癌C-33A细胞的转染,... 目的构建人FOXC2真核表达载体,并转染人宫颈癌C-33A细胞,建立稳定转染的细胞系。方法应用PCR方法从人FOXC2克隆中扩增其cDNA编码区序列,并将其构建于pcDNA3.1(-)真核表达载体。经PCR和测序鉴定后,利用脂质体进行宫颈癌C-33A细胞的转染,应用G418筛选出稳定表达FOXC2的细胞系,通过RT-PCR及Westernblot法检测FOXC2的表达情况。结果成功构建pcDNA3.1(-)/FOXC2真核表达载体,建立稳定转染FOXC2的C-33A细胞系,并鉴定了FOXC2目的基因在C-33A细胞中的过表达。结论FOXC2真核表达载体的成功构建为进一步研究FOXC2基因在宫颈癌中的功能奠定了良好的实验基础。 展开更多

关键词 人叉头框-c2(hFOXc2) 真核表达载体 c-33A细胞 转染

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溶瘤病毒M1诱导宫颈癌细胞C-33A凋亡的作用及机制

5

作者 肖晓 周雅思 +3 位作者 彭楚茵 邓金清 王来友 朱文博 《中国药房》 CAS 北大核心 2021年第23期2827-2831,共5页

目的:研究溶瘤病毒M1(简称“M1病毒”)诱导宫颈癌细胞C-33A凋亡的作用及机制。方法:采用MTT法检测不同滴度(0、0.001、0.01、0.1、1、10 PFU/cell)M1病毒处理后C-33A细胞的存活率;将C-33A细胞分为对照组(0 PFU/cell)和M1病毒低、中、高... 目的:研究溶瘤病毒M1(简称“M1病毒”)诱导宫颈癌细胞C-33A凋亡的作用及机制。方法:采用MTT法检测不同滴度(0、0.001、0.01、0.1、1、10 PFU/cell)M1病毒处理后C-33A细胞的存活率;将C-33A细胞分为对照组(0 PFU/cell)和M1病毒低、中、高剂量组(0.001、0.01、0.1 PFU/cell),加入相应滴度病毒,培养48 h后,采用流式细胞仪检测细胞的凋亡率和感染率,采用Western blot法检测细胞中C/EBP同源蛋白(CHOP)、胱天蛋白酶12(caspase-12)、caspase-3、活化的caspase-3(cleaved-caspase-3)的表达水平。结果:经不同滴度M1病毒处理后,C-33A细胞存活率均显著降低(P<0.01),且呈剂量依赖趋势。与对照组比较,M1病毒各剂量组细胞的凋亡率和感染率以及中、高剂量组细胞中CHOP、caspase-12、cleaved-caspase-3(中剂量组除外)蛋白的表达水平均显著升高(P<0.01)。结论:M1病毒可诱导宫颈癌细胞C-33A的凋亡,其作用机制可能与激活内质网应激通路有关。 展开更多

关键词 溶瘤病毒M1 宫颈癌 c-33A细胞 内质网应激 细胞凋亡

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CaSR在宫颈癌C-33A细胞增殖和迁移中的作用研究

6

作者 袁辉 张淑敏 +3 位作者 王得利 栾海蓉 石屹 徐吉雨 《中国医学创新》 CAS 2020年第35期21-26,共6页

目的:观察钙敏感受体(calcium sensing receptor,CaSR)在宫颈癌C-33A细胞中的表达情况并分析其参与细胞增殖和迁移的机制。方法:30只裸鼠随机分为Model(移植瘤模型)组、Model+R568(CaSR激动剂)组、Model+Calhex231(CaSR抑制剂)组,每组1... 目的:观察钙敏感受体(calcium sensing receptor,CaSR)在宫颈癌C-33A细胞中的表达情况并分析其参与细胞增殖和迁移的机制。方法:30只裸鼠随机分为Model(移植瘤模型)组、Model+R568(CaSR激动剂)组、Model+Calhex231(CaSR抑制剂)组,每组10只。C-33A细胞分为Control组、R568组和Calhex231组。分析各组移植瘤体积和抑瘤率变化;ELISA检测裸鼠血清和C-33A细胞培养基中MMP2和MMP9含量变化;Western blot测定瘤组织和细胞中CaSR、Bax、Bcl-2、E-cadherin、β-catenin和VEGFR3表达变化;CCK8检测C-33A细胞增殖情况;细胞划痕实验检测C-33A细胞迁移;qRT-PCR检测Bcl-2和Bax基因表达情况。结果:30 d后取各组裸鼠瘤组织称重,Model+R568组的移植瘤瘤重低于Model组(P<0.05)。饲养5、10、15、20、25、30 d,测量移植瘤体积,与Model组比较,Model+R568组显著抑制肿瘤生长而Model+Calhex231肿瘤体积显著增加(P<0.05)。与Model组比较,Model+R568组裸鼠血清中MMP2和MMP9含量均显著降低(P<0.05)。Western blot结果显示,与Model组比较,Model+R568组的CaSR和E-cadherin蛋白表达均显著增加而Bcl-2的表达量显著减少(P<0.05)。细胞实验中,与Control组比较,R568组C-33A细胞增殖和迁移速度均显著降低(P<0.05),CaSR、Bax、E-cadherin和β-catenin表达均显著上调,而Bcl-2和VEGFR3表达均下调(P<0.05),不同时间点细胞内Ca^2+荧光强度显著增强(P<0.05),培养基中MMP2和MMP9含量水平均显著下降(P<0.05),Bax基因表达明显上调而Bcl-2表达下调(P<0.05)。在Calhex231组上述结果均相反。结论:CaSR激活能够抑制C-33A细胞增殖和迁移,并促进其凋亡。 展开更多

关键词 cASR c-33A细胞 MMP2 MMP9 凋亡 迁移

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紫草素影响Let-7c的表达调控宫颈癌细胞C-33A生物学特性的研究 被引量：1

7

作者 文蓉 李树玺 《国际检验医学杂志》 CAS 2019年第23期2822-2826,2831,共6页

目的研究紫草素通过影响Let-7c的表达对宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法采用qPCR检测宫颈癌组织和正常宫颈组织,宫颈癌细胞C-33A和正常宫颈细胞Ect1/E6E7中Let-7c的表达水平。以不同浓度的紫草素干预C-33A细胞,采用MTT法检测细... 目的研究紫草素通过影响Let-7c的表达对宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法采用qPCR检测宫颈癌组织和正常宫颈组织,宫颈癌细胞C-33A和正常宫颈细胞Ect1/E6E7中Let-7c的表达水平。以不同浓度的紫草素干预C-33A细胞,采用MTT法检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力,qPCR检测细胞中Let-7c的表达水平。一组C-33A细胞通过细胞转染法上调Let-7c的表达,另一组C-33A细胞通过转染Let-7c inhibitor后施加紫草素干预,然后均以同样的方法检测C-33A细胞增殖、侵袭和迁移能力。构建宫颈癌C-33A细胞裸鼠移植瘤模型,并予瘤内注射Let-7c inhibitor及紫草素,处理28 d后处死,称取瘤重。结果Let-7c在宫颈癌组织和细胞中的表达显著低于正常宫颈组织和细胞(P<0.05)。紫草素可呈浓度依赖性地抑制C-33A细胞增殖、侵袭和迁移的能力(P<0.05);能够促进C-33A细胞中Let-7c的表达(P<0.05),具有一定的浓度依赖关系。上调Let-7c的表达可抑制C-33A细胞增殖、侵袭和迁移的能力(P<0.05)。紫草素能够回调由anti-Let-7c导致的细胞增殖、侵袭和迁移能力的升高(P<0.05)。紫草素可抑制anti-Let-7c对肿瘤生长的促进作用(P<0.05)。结论紫草素能够通过上调Let-7c的表达抑制宫颈癌细胞的增殖、侵袭和迁移。 展开更多

关键词 紫草素 Let-7c 宫颈癌c-33A细胞 生物学特性

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MTERF1基因真核表达载体的构建及其在C-33A细胞中的表达研究 被引量：1

8

作者 梅雯 张成桂 +4 位作者 自加吉 孙美涛 杨泽芳 张晓娟 熊伟 《井冈山大学学报（自然科学版）》 2017年第5期29-34,共6页

采用PCR技术从pGEM-MTERF1重组克隆载体中扩增出人MTERF1基因cDNA的开放阅读框序列,经KpnⅠ和XhoⅠ双酶切后,以pcDNA3.1(+)为真核表达载体,构建重组质粒pcDNA3.1(+)-MTERF1;通过PCR、双酶切和DNA测序方法对重组子进行鉴定;将重组真核表... 采用PCR技术从pGEM-MTERF1重组克隆载体中扩增出人MTERF1基因cDNA的开放阅读框序列,经KpnⅠ和XhoⅠ双酶切后,以pcDNA3.1(+)为真核表达载体,构建重组质粒pcDNA3.1(+)-MTERF1;通过PCR、双酶切和DNA测序方法对重组子进行鉴定;将重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-MTERF1转染C-33A细胞,利用免疫印迹法检测MTERF1蛋白的表达。结果显示,重组质粒pcDNA3.1(+)-MTERF1经双酶切鉴定和菌落PCR鉴定均获得大小为1 200 bp的目的条带,DNA测序结果表明该序列与GenBank中人MTERF1基因序列完全相同,插入基因的大小和方向正确;免疫印迹结果表明,MTERF1蛋白的表达水平在转染pcDNA3.1(+)-MTERF1的C-33A细胞中表达高于转染pcDNA3.1(+)的C-33A细胞。通过对人MTERF1基因的真核表达载体的构建,为进一步研究人MTERF1基因的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 线粒体转录终止因子1 克隆 真核表达载体 人子宫颈癌c-33A细胞株

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高良姜素诱导人乳头瘤病毒阳性的宫颈癌细胞凋亡实验研究 被引量：15

9

作者 陈淑梅 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期941-945,共5页

目的研究高良姜素对人乳头瘤病毒(HPV)阳性人宫颈癌细胞的诱导凋亡作用及其机制。方法选择2株HPV阳性人宫颈癌细胞(Si Ha、He La)和1株HPV阴性人宫颈癌细胞(C-33-A),用不同浓度的高良姜素(20、40、80μmol/L)分别处理24、48、72 h后,采... 目的研究高良姜素对人乳头瘤病毒(HPV)阳性人宫颈癌细胞的诱导凋亡作用及其机制。方法选择2株HPV阳性人宫颈癌细胞(Si Ha、He La)和1株HPV阴性人宫颈癌细胞(C-33-A),用不同浓度的高良姜素(20、40、80μmol/L)分别处理24、48、72 h后,采用噻唑蓝(MTT)法测定高良姜素对3株宫颈癌细胞增殖的影响;不同浓度高良姜素处理宫颈癌细胞48 h后,分别采用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;Western blotting法检测Bcl-2家族蛋白表达情况。结果高良姜素可以剂量和时间依赖性地降低HPV阳性宫颈癌细胞Si Ha和He La的活力;而对于HPV阴性的宫颈癌细胞C-33-A活力无明显影响;细胞周期检测显示高良姜素可以使Si Ha和He La细胞的生长阻滞在G1或G2/M期;流式细胞仪分析发现40μmol/L高良姜素作用于Si Ha和He La细胞48 h后,细胞出现明显凋亡,而C-33-A细胞仅有少量凋亡;Western blotting检测发现40μmol/L高良姜素处理后,HPV阳性宫颈癌细胞中促凋亡蛋白Bad、Bid、Bax表达量升高,而抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-w表达量降低。结论高良姜素能抑制HPV阳性宫颈癌细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与下调Bcl-2、Bcl-w基因的表达及上调Bad、Bid、Bax基因的表达有关。 展开更多

关键词 高良姜素 宫颈癌 人乳头瘤病毒 BcL-2家族蛋白 Si Ha细胞 He La细胞 c-33-A细胞

原文传递

红景天苷通过JAK2/STAT3通路影响宫颈鳞癌C33A细胞的增殖、侵袭和凋亡 被引量：7

10

作者 黄进 刘福蓉 +3 位作者 温婷 唐倩 徐祥梅 廖大忠 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期522-527,共6页

目的:观察红景天苷对宫颈鳞癌C33A细胞增殖、侵袭及凋亡的影响并初步探讨其可能的机制。方法:将C33A细胞分为4组:对照组、低剂量组(红景天苷50μg/ml)、高剂量组(红景天苷150μg/ml)、抑制剂AG490组(JAK2/STAT3信号通路抑制剂AG49050μm... 目的:观察红景天苷对宫颈鳞癌C33A细胞增殖、侵袭及凋亡的影响并初步探讨其可能的机制。方法:将C33A细胞分为4组:对照组、低剂量组(红景天苷50μg/ml)、高剂量组(红景天苷150μg/ml)、抑制剂AG490组(JAK2/STAT3信号通路抑制剂AG49050μmol/L),采用MTT法、EdU标记实验、Transwell实验、Rh123染色和流式细胞术分别检测红景天苷和AG490对C33A细胞增殖、侵袭和凋亡的影响,Western blotting检测红景天苷和AG490对C33A细胞中JAK2/STAT3通路相关蛋白(pJAK2、p-STAT3)和凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、caspase-3)表达的影响。结果:与对照组相比,低剂量组C33A细胞的增殖和DNA的合成明显受到抑制(均P<0.05)、侵袭能力明显降低(均P<0.05)、Rh123荧光强度明显减弱(均P<0.05)、线粒体膜结构受到破坏、细胞凋亡率明显增加(均P<0.05);p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2水平显著下降(均P<0.05)、Bax、caspase-3的表达水平显著升高(P<0.05);与低剂量组相比,高剂量组、抑制剂组对C33A细胞增殖、侵袭、凋亡及相关蛋白表达的影响更为显著(P<0.05);而高剂量组、抑制剂组间无显著差异。结论:红景天苷可以抑制C33A细胞的增殖和侵袭、促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关。 展开更多

关键词 红景天苷 宫颈鳞癌 c33A细胞 JAK2/STAT3通路 增殖 凋亡 侵袭

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miR-137通过靶向Wnt5a调控宫颈癌细胞的增殖、迁移及侵袭 被引量：6

11

作者 卢柳媚 周倩珺 +1 位作者 李子琳 李栩萍 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期762-767,共6页

目的:探讨miR-137在宫颈癌组织和细胞中的表达及其对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的作用及其机制。方法:选用2017年1月至2018年3月东莞市人民医院妇产科32例手术切除的宫颈癌组织及对应的癌旁组织标本,以及宫颈癌细胞系C33A、HeLa、SiHa... 目的:探讨miR-137在宫颈癌组织和细胞中的表达及其对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的作用及其机制。方法:选用2017年1月至2018年3月东莞市人民医院妇产科32例手术切除的宫颈癌组织及对应的癌旁组织标本,以及宫颈癌细胞系C33A、HeLa、SiHa及宫颈上皮永生化细胞株H8,用RT-PCR法检测宫颈癌组织和细胞系中miR-137的表达水平。将miR-137mimics、miR-137 NC质粒转染到C33A和HeLa细胞,用CCK-8法、Transwell迁移及侵袭实验观察上调miR-137表达对C33A和HeLa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。用荧光素酶报告基因及WB实验检测miR-137和Wnt5a在宫颈癌中的靶向调控关系。构建Wnt5a过表达载体,观察同时过表达Wnt5a和miR-137对宫颈癌细胞系C33A和HeLa增殖、迁移和侵袭的影响。结果:在宫颈癌组织和细胞系中miR-137表达水平明显低于癌旁组织和H8细胞(均P<0.05)。上调miR-137表达能够显著抑制C33A和HeLa细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.05)。萤光素酶报告基因实验确定Wnt5a与miR-137的靶向关系。过表达Wnt5a后,可以在一定程度上逆转miR-137对宫颈癌细胞系C33A和HeLa的增殖、迁移和侵袭能力。结论:miR-137通过靶向Wnt5a抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移、侵袭,其可能是宫颈癌治疗的潜在靶点。 展开更多

关键词 宫颈癌 c33A细胞 HELA细胞 微小RNA-137 WNT5A 增殖 迁移 侵袭

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沉默E6相关蛋白对人乳头瘤病毒阴性宫颈癌细胞中p53蛋白表达水平的影响

12

作者 解亦航 郭宇微 +3 位作者 孙渤轩 辛杨 于嘉敏 赵春艳 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期163-165,171,共4页

目的探讨沉默E6相关蛋白(E6-associated protein,E6AP)对人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)阴性宫颈癌细胞(C33A)中p53蛋白表达水平的影响。方法在LipofectamineTM2000转染试剂的介导下,将特异性沉默E6AP的siRNA序列(siE6AP)及... 目的探讨沉默E6相关蛋白(E6-associated protein,E6AP)对人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)阴性宫颈癌细胞(C33A)中p53蛋白表达水平的影响。方法在LipofectamineTM2000转染试剂的介导下,将特异性沉默E6AP的siRNA序列(siE6AP)及沉默对照无序siRNA序列(siControl)分别转染C33A细胞。Western blot法检测siRNA对E6AP的沉默效果及细胞中p53和cleaved-caspase-3蛋白的表达水平。结果siE6AP组C33A细胞中E6AP蛋白表达水平显著低于siControl组(t=-4.597,P<0.05)。siE6AP组C33A细胞中p53和cleaved-caspase-3蛋白表达水平均显著高于siControl组(t分别为4.533和7.099,P均<0.05)。结论沉默E6AP可显著提高C33A细胞中p53蛋白的表达水平,表明沉默E6AP可能恢复C33A细胞中p53的活性和功能。 展开更多

关键词 E6相关蛋白 人乳头瘤病毒 宫颈癌 c33A细胞 P53蛋白

原文传递

蟾蜍灵诱导人宫颈癌C33A细胞自噬作用的机理研究 被引量：4

13

作者 孔翠翠 李艳兰 +1 位作者 宫鹏超 田昕 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第24期4350-4354,共5页

目的:探讨蟾蜍灵诱导人宫颈癌C33A细胞自噬的作用。方法:不同浓度梯度的蟾蜍灵处理人宫颈癌C33A细胞,选用CCK-8法检测蟾蜍灵对人宫颈癌C33A细胞的杀伤作用。透射电镜观察给药后C33A细胞的自噬现象。流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平... 目的:探讨蟾蜍灵诱导人宫颈癌C33A细胞自噬的作用。方法:不同浓度梯度的蟾蜍灵处理人宫颈癌C33A细胞,选用CCK-8法检测蟾蜍灵对人宫颈癌C33A细胞的杀伤作用。透射电镜观察给药后C33A细胞的自噬现象。流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平,蛋白免疫印迹法检测自噬LC3蛋白表达及相关信号通路JNK、p-JNK蛋白表达。结果:蟾蜍灵对人宫颈癌C33A细胞的生长抑制作用呈时间-剂量依赖性。蟾蜍灵给药后可诱导C33A细胞发生自噬,蛋白印迹实验结果表明LC3蛋白表达随药物浓度升高而增加。蟾蜍灵诱导C33A细胞自噬发生与其促ROS水平升高激活了JNK信号通路有关。结论:蟾蜍灵诱导C33A细胞自噬的机制可能与通过ROS/JNK通路促进细胞自噬有关,以此发挥其抗肿瘤的作用。 展开更多

关键词 宫颈癌 c33A细胞 蟾蜍灵 自噬 活性氧 JNK

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miR-26b对宫颈癌细胞系迁移及上皮间质转化的影响 被引量：3

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作者 凌燕 彭诗维 +1 位作者 冯紫雯 龚剑红 《基础医学与临床》 CSCD 2018年第8期1094-1098,共5页

目的探讨miR-26b对宫颈癌细胞迁移及上皮间质转化的影响及其作用机制。方法通过脂质体介导将miR-26b mimic转染C33A宫颈癌细胞系,细胞分为阴性对照组、无义对照组和miR-26b mimic组。用实时荧光定量PCR检测miR-26b及其靶基因的mRNA表达... 目的探讨miR-26b对宫颈癌细胞迁移及上皮间质转化的影响及其作用机制。方法通过脂质体介导将miR-26b mimic转染C33A宫颈癌细胞系,细胞分为阴性对照组、无义对照组和miR-26b mimic组。用实时荧光定量PCR检测miR-26b及其靶基因的mRNA表达,细胞划痕实验检测细胞的迁移能力,Western blot检测E-cadherin和N-cadherin蛋白表达,用双荧光素酶基因报告载体检测miR-26b靶基因的表达。结果与正常宫颈上皮细胞相比,miR-26b mRNA在He La、Si Ha、Caski和C33A 4种宫颈癌细胞系中均低表达,其中以C33A细胞系最为明显;转染miR-26b mimic后,C33A细胞中miR-26b mRNA表达水平明显上升;过表达miR-26b可明显抑制C33A细胞的迁移能力,上调E-cadherin蛋白的表达,下调N-cadherin蛋白的表达,抑制上皮间质转化过程的发生;通过Target Scan、Pic Tar和miRDB软件预测显示,CXCL14、Smad4、TRAF5和Eph A2可能为miR-26b潜在的靶基因。双荧光素酶实验证实miR-26b可直接调控Smad4的表达。结论 miR-26b可能通过作用于Smad4的表达调节宫颈癌细胞的迁移和上皮间质转化过程的发生。 展开更多

关键词 miR-26b 宫颈癌 c33A细胞系 细胞迁移 上皮间质转化

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(E)-(2’)-脱氧-氟亚甲基胞苷的体外放射增敏作用 被引量：1

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作者 李晔雄 Philippe A.Coucke 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2001年第2期131-134,共4页

目的　观察一种新的核苷酸类似物 (E) (2’) 脱氧 氟亚甲基胞苷 (FMdC)在体外的放射增敏作用。方法　在结肠癌 (WiDr)和宫颈癌 (C33 A和C4 I)细胞系进行克隆形成试验。常规照射剂量 2Gy时的放射增敏比 (SERSF2 )定义为 2Gy时对照组存... 目的　观察一种新的核苷酸类似物 (E) (2’) 脱氧 氟亚甲基胞苷 (FMdC)在体外的放射增敏作用。方法　在结肠癌 (WiDr)和宫颈癌 (C33 A和C4 I)细胞系进行克隆形成试验。常规照射剂量 2Gy时的放射增敏比 (SERSF2 )定义为 2Gy时对照组存活份数 (SF)和药物处理组SF之比。结果　FMdC增加WiDr细胞的放射敏感性 ,并呈时间依赖关系。照射前用 30nmol/LFMdC处理WiDr细胞 6～ 72h ,在 6、12和 2 4h未能观察到放射增敏作用。放射增敏作用仅在 48和 72h出现 ,其SERSF2 分别为 1.33和 1.79。当高剂量FMdC(30 0nmol/L)处理WiDr细胞 6、12和 2 4h ,各时间点均可见放射增敏效应。相应的放射增敏比SERSF2 分别为 1.19、1.73和 3.5 0。FMdC的放射增敏作用和药物剂量相关 ,2 0～ 5 0nmol/LFMdC处理细胞 48h ,SERSF2 从 1.15增加至 2 .2 8。用 30nmol/LFMdC处理C33 A和C4 I细胞 48h同样可观察到放射增敏作用 ,SERSF2 分别为 1.32和 2 .0 8。结论　FMdC对结肠癌和宫颈癌细胞有明显的放射增敏作用 。 展开更多

关键词 (E)-(2')-脱氧-氟亚甲基胞苷 WiDr细胞系 c33-A细胞系 c4-I细胞系 放射增敏 肿瘤

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实时荧光定量PCR法测定has-miR-429、has-miR-127-3p及has-miR127-5p在不同HPV感染的宫颈癌细胞中的表达

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作者 姚婷婷 刘秀婷 +2 位作者 张定梅 禹夜 林仲秋 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2013年第12期2635-2638,共4页

目的探讨has-miR-429、has-miR-127-3 p及has-miR127-5 p在不同宫颈癌细胞中的表达水平。方法用SiHa、Hela和C33A三种宫颈癌细胞株,提取和纯化mRNA,逆转录成cDNA,在测定最佳反应条件后,采用实时荧光定量PCR技术测定has-miR-429、has-miR... 目的探讨has-miR-429、has-miR-127-3 p及has-miR127-5 p在不同宫颈癌细胞中的表达水平。方法用SiHa、Hela和C33A三种宫颈癌细胞株,提取和纯化mRNA,逆转录成cDNA,在测定最佳反应条件后,采用实时荧光定量PCR技术测定has-miR-429、has-miR-127-3p及has-miR127-5p的表达情况,结合内参U6进行相对定量分析。结果 miR-429、miR-127-3p及miR127-5p在SiHa细胞相对于Hela细胞表达为(0.0031±0.0002),(59.3786±3.7024)和(0.0524±0.0148),相对于C33A细胞表达为(0.0059±0.0005),(15.5625±1.2780)和(0.0334±0.0103)。结论 has-miR-429、has-miR-127-3p及has-miR127-5p可能与宫颈癌的HPV感染相关。 展开更多

关键词 微小RNA SIHA细胞 HELA细胞 c33A细胞 实时荧光定量PcR

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羟喜树碱对HeLa和C33A细胞增殖、侵袭及迁移的影响

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作者 赵行宇 刘勃 +3 位作者 张漠 朱志华 侯建成 张巍 《毒理学杂志》 CAS CSCD 2020年第6期477-480,共4页

目的以不同浓度的羟喜树碱作用于宫颈癌HeLa和C33A细胞,观察羟喜树碱对两种细胞侵袭力及迁移能力的变化,比较两种细胞抑制作用的差异,并探讨其作用差异的可能途径。方法对数生长期HeLa细胞及C33A细胞,分别加入0、0.25、0.5、1.0和2.0μm... 目的以不同浓度的羟喜树碱作用于宫颈癌HeLa和C33A细胞,观察羟喜树碱对两种细胞侵袭力及迁移能力的变化,比较两种细胞抑制作用的差异,并探讨其作用差异的可能途径。方法对数生长期HeLa细胞及C33A细胞,分别加入0、0.25、0.5、1.0和2.0μmol/L浓度的羟喜树碱,培养24 h。以MTS法检测细胞的增殖率,细胞划痕实验检测细胞的迁移能力,用Transwell小室法检测细胞的侵袭能力,Western blott检测MMP-2、MMP-9、E-cadherin和N-cadherin蛋白的表达。结果 MTS检测显示,羟喜树碱对HeLa及C33A细胞的增殖率均有抑制作用,且抑制作用随羟喜树碱浓度的增加而增强,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);划痕实验结果显示,羟喜树碱可降低HeLa及C33A细胞的平面运动能力;Transwell侵袭小室实验结果显示,羟喜树碱对HeLa及C33A细胞的体外侵袭力具有很强的抑制作用;Western blott结果表明,羟喜树碱能够抑制HeLa及C33A细胞MMP-2、MMP-9和N-cadherin蛋白的表达,而增加E-cadherin蛋白的表达;上述抑制及增强作用,HeLa细胞均明显高于C33A细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。结论羟喜树碱可靶向性抑制HeLa细胞的增殖,降低体外的细胞侵袭能力,其作用可能通过调控EMT相关蛋白的表达来实现。 展开更多

关键词 羟喜树碱 HELA细胞 c33A细胞 侵袭 迁移

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宫颈癌细胞C33a下调Raptor表达后对增殖及化疗敏感性的研究

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作者 秦宇 赵雪娇 +1 位作者 王婷 朱涛 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2014年第9期1411-1413,共3页

目的:探讨通过反义RNA技术下调Raptor基因的表达,研究宫颈癌细胞株C33a中Raptor下调后宫颈癌细胞增殖及对化疗药物的敏感性。方法:C33a细胞分3组,实验组和阴性对照组分别转染Raptor siRNA和阴性对照siRNA,空白对照组不做任何处理。通过... 目的:探讨通过反义RNA技术下调Raptor基因的表达,研究宫颈癌细胞株C33a中Raptor下调后宫颈癌细胞增殖及对化疗药物的敏感性。方法:C33a细胞分3组,实验组和阴性对照组分别转染Raptor siRNA和阴性对照siRNA,空白对照组不做任何处理。通过荧光实时定量PCR和蛋白印记法分别检测C33a转染siRNA后Raptor在mRNA和蛋白水平的表达,CCK-8法检测各组细胞的增殖和对顺铂敏感性的变化,流式细胞仪检测各组及加入顺铂后的凋亡情况。结果:转染siRNA 72 h后,Raptor分别在mRNA水平及蛋白水平较阴性对照下调为82%及78%(P<0.05),转染72 h后CCK-8法测细胞增殖,A值由空白对照组1.828±0.059、阴性对照组1.723±0.044明显降低为Raptor siRNA组的1.349±0.040(P<0.05),各组加入8μM顺铂后,Raptor siRNA组凋亡率为(40.14±1.57)%较空白对照组(21.76±1.23)%和阴性对照组(20.81±1.45)%明显增加(P<0.05)。结论:Raptor siRNA能显著下调C33a细胞中Raptor在mRNA和蛋白水平的表达,抑制C33a细胞的增殖,增加对化疗药物顺铂的敏感性和促凋亡作用。 展开更多

关键词 宫颈癌 c33a细胞 RAPTOR RNA干扰 凋亡

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槲皮素对宫颈癌细胞C33A增殖和凋亡的影响 被引量：4

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作者 张欣 董春力 +4 位作者 付丽丽 杜鹃 陈嘉彦 高小翠 李少闻 《安徽医学》 2018年第4期400-403,共4页

目的观察槲皮素对人宫颈癌细胞C33A增殖和凋亡的影响,初步探讨其相关作用机制。方法用不同浓度槲皮素(空白对照、20、40、80μmol/L),顺铂(空白对照、5、10、15、20μg/mL)以及两者联合(槲皮素40μmol/L+顺铂10μg/mL)分别作用于C33A细... 目的观察槲皮素对人宫颈癌细胞C33A增殖和凋亡的影响,初步探讨其相关作用机制。方法用不同浓度槲皮素(空白对照、20、40、80μmol/L),顺铂(空白对照、5、10、15、20μg/mL)以及两者联合(槲皮素40μmol/L+顺铂10μg/mL)分别作用于C33A细胞24 h和48 h后,噻唑蓝(MTT法)检测细胞活力的变化;流式细胞术检测槲皮素对C33A细胞周期的影响;Western blot检测槲皮素对C33A细胞Cyclin D1、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达的影响。结果 MTT结果显示,经过槲皮素处理24 h后,各组细胞活力分别为86.92±3.953)%(20μmol/L组)、(66.54±3.932)%(40μmol/L组)和(52.21±2.970)%(80μmol/L组),均低于空白对照组的(98.35±1.230)%;经过槲皮素处理48 h后,各组细胞活力分别为(65.19±7.071)%(20μmol/L组)、(47.04±8.881)%(40μmol/L组)和(29.71±6.505)%(80μmol/L组),均低于空白对照组的(96.97±1.788)%。;此外,槲皮素40μmol/L+顺铂10μg/mL联合作用于C33A细胞24h后,细胞活力下降为(31.12±2.835)%;48 h后,细胞活力下降为(17.86±3.182)%,同空白对照组相比均出现了明显的下降,(31.12±2.835)%;48 h后,细胞活力下降为(17.86±3.182)%(P<0.05)。细胞周期检测结果显示,槲皮素可增加C33A细胞G0/G1期数量,减少S期数量。Western blot结果显示,槲皮素可下调C33A细胞Cyclin D1蛋白的表达,还可上调Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达。结论槲皮素通过下调Cyclin D1蛋白的表达可以抑制C33A细胞的活力和增殖,槲皮素通过上调Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达,可以诱导C33A细胞的凋亡。 展开更多

关键词 槲皮素 宫颈癌c33A细胞 细胞增殖 细胞凋亡

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HPV16 E6-G350基因表达促进宫颈癌C33A细胞增殖且抑制凋亡 被引量：4

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作者 潘贞贞 宋宇宁 +8 位作者 者湘漪 吴文礼 许静 徐航 辛皖潮 张斌 辛慧珍 曹冬冬 潘泽民 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2018年第5期569-574,共6页

目的分析HPV16 E6基因致病多态性位点的功能及其与宫颈癌发展的关系。方法在宫颈癌C33A细胞中分别稳定转染HPV16 E6原型T295/T350-GV230和HPV16 E6突变型T295/G350-GV230表达质粒,通过间接免疫荧光实验、CCK8增殖实验、细胞平板克隆实... 目的分析HPV16 E6基因致病多态性位点的功能及其与宫颈癌发展的关系。方法在宫颈癌C33A细胞中分别稳定转染HPV16 E6原型T295/T350-GV230和HPV16 E6突变型T295/G350-GV230表达质粒,通过间接免疫荧光实验、CCK8增殖实验、细胞平板克隆实验、流式细胞仪检测HPV16 E6 T295/T350和T295/G350不同多态性位点对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响。结果采用SPSS17.0统计软件进行数据的统计学处理,以P<0.05为差异有统计学意义。HPV16 E6 T295/T350和HPV16 E6 T295/G350突变促进宫颈癌C33A细胞的增殖,抑制凋亡,并且T295/G350突变型作用强于T295/T350原型,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 HPV16 E6 T295/T350欧洲原型和HPV16 E6 T295/G350欧洲突变型均可以促进宫颈癌细胞的增殖,抑制凋亡,HPV16 E6 T295/G350欧洲突变型的促癌作用比HPV16 E6 T295/T350欧洲原型强。 展开更多

关键词 HPV16 E6 多态性 宫颈癌c33A细胞 细胞增殖 细胞凋亡

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