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盐胁迫下盐地碱蓬叶片液泡膜H^+-ATPase H亚基的克隆与表达分析 被引量：11
1
作者 李艳艳 李平华 王宝山 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期63-67,共5页
利用EST随机挑取克隆测序的方法从盐地碱蓬叶片cDNA文库中分离得到了盐地碱蓬V-H+-ATPase H亚基cDNA序列,并进行了H、c亚基基因表达及V-H+-ATPase活性分析.结果表明,H亚基基因全长1 969 bp,包括100 bp的5′-非编码区和471 bp的3′-非编... 利用EST随机挑取克隆测序的方法从盐地碱蓬叶片cDNA文库中分离得到了盐地碱蓬V-H+-ATPase H亚基cDNA序列,并进行了H、c亚基基因表达及V-H+-ATPase活性分析.结果表明,H亚基基因全长1 969 bp,包括100 bp的5′-非编码区和471 bp的3′-非编码区.开放阅读框为1 398 bp,编码465个氨基酸残基,分子量约52.8 kD.N orthern杂交分析表明盐胁迫明显诱导了H亚基表达,而且盐胁迫下H、c亚基及V-H+-ATPase活性存在协同作用.这些结果表明盐胁迫下H和c亚基基因上调及V-H+-ATPase活性的增加为N a+区隔化到液泡中提供了质子驱动力. 展开更多
关键词 H亚基 c亚基 V-H^+ -ATPase 盐地碱蓬 盐胁迫
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过量表达棉花液泡H^+-ATPase C亚基基因促进酵母细胞伸长和提高盐胁迫耐受性 被引量：7
2
作者 肖忠意 谭琨岭 +1 位作者 胡明瑜 罗明 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期495-500,共6页
棉花液泡H+-ATPase在纤维细胞的伸长过程中具有重要作用,能够通过对纤维细胞膨压的调节而介导细胞的极性膨大。拟南芥液泡H+-ATPase C亚基(DET3)具有调节液泡H+-ATPase活性,进而调控细胞伸长的作用。为了快速鉴定棉花液泡H+-ATPaseC亚... 棉花液泡H+-ATPase在纤维细胞的伸长过程中具有重要作用,能够通过对纤维细胞膨压的调节而介导细胞的极性膨大。拟南芥液泡H+-ATPase C亚基(DET3)具有调节液泡H+-ATPase活性,进而调控细胞伸长的作用。为了快速鉴定棉花液泡H+-ATPaseC亚基基因(GhDET3)的功能和推测其在棉花纤维生长中的作用,作者构建了GhDET3的酵母表达载体pREP5N(+)-GhDET3,并进行了裂殖酵母的遗传转化。结果表明,在酵母细胞中过量表达GhDET3基因,能够促进酵母细胞的伸长和提高酵母细胞对NaCl和高pH的耐受性,说明GhDET3对液泡H+-ATPase的活性有重要影响,由此推测GhDET3基因与棉花纤维细胞的伸长生长具有密切关系。 展开更多
关键词 棉花 液泡H^+-ATPase c亚基 裂殖酵母 GhDET3
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盐地碱蓬叶片液泡膜H^＋—ATPase B亚基的克隆及盐胁迫下表达分析 被引量：6
3
作者 李平华 王增兰 +1 位作者 张慧 王宝山 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2004年第1期93-99,共7页
植物液泡膜H^+-ATPase在建立跨液泡膜质子梯度、促进液泡Na^+区域化、提高植物耐盐性方面发挥着重要作用。本实验从盐生植物盐地碱蓬(Suaeda salsa L.)cDNA文库分离到碱蓬叶片液泡膜H^+-ATPase B亚基cDNA克隆。测序表明该基因长达1974b... 植物液泡膜H^+-ATPase在建立跨液泡膜质子梯度、促进液泡Na^+区域化、提高植物耐盐性方面发挥着重要作用。本实验从盐生植物盐地碱蓬(Suaeda salsa L.)cDNA文库分离到碱蓬叶片液泡膜H^+-ATPase B亚基cDNA克隆。测序表明该基因长达1974bp，开放阅读框有1470bp编码489个氨基酸，含有一个保守的ATP结合位点，其蛋白分子量约为54．29kD。Northern及Western印迹表明盐地碱蓬液泡膜H^+-ATPase B亚基表达明显受NaCl胁迫诱导，并且在NaCl胁迫下，B亚基在转录及翻译水平上与液泡膜H^+-ATPase c亚基存在协同作用。盐胁迫下，盐地碱蓬液泡H^+-ATPase B亚基与c亚基的协同表达增加了液泡H^+-ATPase的数量，从而提高了液泡H^+-ATPase活性，为碱蓬叶片液泡Na^+区域化提供了动力，最终提高了碱蓬植株的耐盐性。 展开更多
关键词 盐地碱蓬 植物液泡膜 耐盐性 盐生植物 cDNA文库 B亚基 c亚基 Nacl胁迫 克隆 表达
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拟南芥VHA-c基因在非生物胁迫响应中的作用 被引量：4
4
作者 徐萍 刘瑞香 +3 位作者 曾卫军 李国婧 王瑞刚 王水平 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2006年第1期19-22,共4页
利用RT-PCR技术检测VHA-c基因对高盐、水和ABA胁迫的响应,结果表明所有的VHA-c基因都参与了V-ATPase的抗盐胁迫反应;在响应水胁迫的反应中VHA-c2、VHA-c4和VHA-c5基因的表达量增加;在ABA胁迫反应中VHA-c1,VHA-c2,VHA-c3和VHA-c4基因的... 利用RT-PCR技术检测VHA-c基因对高盐、水和ABA胁迫的响应,结果表明所有的VHA-c基因都参与了V-ATPase的抗盐胁迫反应;在响应水胁迫的反应中VHA-c2、VHA-c4和VHA-c5基因的表达量增加;在ABA胁迫反应中VHA-c1,VHA-c2,VHA-c3和VHA-c4基因的表达水平均提高,但是VHA-c1和VHA-c3基因只在早期的ABA胁迫中增加其表达量。 展开更多
关键词 V-ATPASE c亚基 VHA-c基因 非生物胁迫
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拟南芥VHA-c3基因的特异性表达和调节 被引量：5
5
作者 徐萍 李小方 +1 位作者 曾卫军 王水平 《华东师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期98-104,111,共8页
利用RT-PCR技术检测VHA-c基因在拟南芥中的表达，结果表明VHA-c3基因在拟南芥的果荚、花、叶、茎和根中都有表达，但是，在叶中的表达量远远高于其它的组织．以GUS基因作为报告基因构建了不同长度的VHA-c3基因启动子缺失突变体，利用农... 利用RT-PCR技术检测VHA-c基因在拟南芥中的表达，结果表明VHA-c3基因在拟南芥的果荚、花、叶、茎和根中都有表达，但是，在叶中的表达量远远高于其它的组织．以GUS基因作为报告基因构建了不同长度的VHA-c3基因启动子缺失突变体，利用农杆菌介导的瞬时表达系统检测GUS基因的表达，研究发现在VHA-c3基因起始密码子上游2812～2234bp之间的区域内存在着控制VHA-c3基因高表达的转录调控元件． 展开更多
关键词 V-ATPASE c亚基 VHA-c3基因 启动子
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丝心蛋白基因分子克隆与表达的初步探讨 被引量：3
6
作者 李宏杰 蔡再生 +2 位作者 施华芳 于同隐 黄伟达 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1998年第4期564-567,共4页
通过聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增丝心蛋白Ｃ亚基结构基因，并将其克隆到融合蛋白表达载体ｐＲＩＴ２Ｔ质粒中得到ｐＲＩＴ２Ｔ－ＦＬ质粒，在大肠杆菌株Ｐ２３９２内进行表达．十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）和... 通过聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增丝心蛋白Ｃ亚基结构基因，并将其克隆到融合蛋白表达载体ｐＲＩＴ２Ｔ质粒中得到ｐＲＩＴ２Ｔ－ＦＬ质粒，在大肠杆菌株Ｐ２３９２内进行表达．十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）和免疫印迹反应证明融合蛋白在大肠杆菌中得到了表达． 展开更多
关键词 丝心蛋白 c亚基 基因 克隆 表达 大肠杆菌
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马蔺V-ATPase c亚基基因家族的克隆及序列分析 被引量：4
7
作者 付慧娟 周爱民 +1 位作者 车代弟 王金刚 《作物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期60-64,共5页
植物V-ATPase在逆境条件下的应答功能对保证细胞的正常生命活动具有重要作用。本研究根据GenBank收录的外源V-ATPase c亚基,设计简并引物,以马蔺为材料,通过RT-PCR进行扩增,经测序该片段为471bp,包含V-ATPase基因家族的保守结构域,以该... 植物V-ATPase在逆境条件下的应答功能对保证细胞的正常生命活动具有重要作用。本研究根据GenBank收录的外源V-ATPase c亚基,设计简并引物,以马蔺为材料,通过RT-PCR进行扩增,经测序该片段为471bp,包含V-ATPase基因家族的保守结构域,以该片段为靶序列进行5′-RACE延伸,将产物测序得到186bp的序列,将靶序列与5′-RACE产物进行拼接,根据拼接结果设计特异引物,克隆基因全长读码框。结果表明,得到马蔺VHA-c亚基家族的5个成员,片段全长632bp,包括137bp5′-UTR,开放读码框全长495bp,编码164个氨基酸,分子量约为16kDa,包含4个跨膜结构域。将该基因命名为IrlVHA-c1～c5。 展开更多
关键词 马蔺 c亚基 V-ATPASE
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中国对虾V-ATPase c亚基基因的克隆及其在高pH胁迫下的表达分析 被引量：3
8
作者 胡硕 何玉英 +2 位作者 李健 张海恩 韩旭 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1064-1074,共11页
采用RACE技术克隆了中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)V-ATPase c亚基基因,命名为FcVHA-c基因,检测该基因在高pH胁迫下的基因应答,并采用RNAi技术验证其功能。基因分析表明, FcVHA-c基因cDNA全长为2128 bp,开放阅读框483 bp,编码160... 采用RACE技术克隆了中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)V-ATPase c亚基基因,命名为FcVHA-c基因,检测该基因在高pH胁迫下的基因应答,并采用RNAi技术验证其功能。基因分析表明, FcVHA-c基因cDNA全长为2128 bp,开放阅读框483 bp,编码160个氨基酸,预测蛋白分子量为16 kD,理论等电点7.82,具有4个跨膜结构域。同源性和系统进化分析表明, FcVHA-c具有较高的保守性,其中与南美白对虾(Penaeus vannamei)同源性最高,为99%,与南美白对虾首先聚为一支。组织表达分析显示, FcVHA-c基因在中国对虾各个组织中均有表达,在鳃中表达量显著高于其他组织(P<0.05)。pH 8.8胁迫下,该基因的表达量在12 h达到峰值,为对照组的1.206倍,在48 h达到最低值,为对照组的0.166倍;pH 9.2胁迫下,该基因表达量在1 h达到峰值,为对照组的1.577倍,在12 h达到最低值,为对照组的0.104倍。结果表明,高pH对该基因具有一定的抑制作用。干扰结果显示,高pH胁迫下干扰组较对照组的死亡率显著增高(P<0.05),表明该基因表达量越高,越有利于中国对虾的存活。本研究结果表明, FcVHA-c基因参与了高pH胁迫下中国对虾的离子调控,高pH胁迫抑制FcVHA-c基因的调控能力。 展开更多
关键词 中国对虾 V-ATP酶 c亚基 PH胁迫 RNAI
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穿山龙液泡H^+-ATPase c亚基基因片段的克隆 被引量：2
9
作者 何明雄 苟兴华 +5 位作者 张义正 李灵 吴洽庆 陈守春 元乔 刘忠荣 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期1258-1262,共5页
利用抑制消减杂交(SSH)和SMART技术,构建了3年生和1年生穿山龙(Dioscoreanipponica)根组织mRNA群体间正向差减cDNA文库.从34个随机测序的cDNA克隆中,发现了1个编码液泡H+-ATPase(V-H+-ATPase)c亚基的克隆,并命名为DnVHAc1(Acces-sion No... 利用抑制消减杂交(SSH)和SMART技术,构建了3年生和1年生穿山龙(Dioscoreanipponica)根组织mRNA群体间正向差减cDNA文库.从34个随机测序的cDNA克隆中,发现了1个编码液泡H+-ATPase(V-H+-ATPase)c亚基的克隆,并命名为DnVHAc1(Acces-sion No:DN792564).序列同源性分析表明,其cDNA序列长486bp,3’端具有PolyA结构,其编码的氨基酸序列(115个氨基酸残基)也与多种植物的液泡H+-ATPase c亚基(16kDa prote-olipids)具有较高同源性,具有3个跨膜疏水结构域,结构域Ⅲ为功能保守的区域,有dicyclo-hexylcarbodimide(DCCD)结合位点,Glu-92在调节液泡H+-ATPase具有重要作用.该研究结果为克隆其全长基因和进一步研究其在薯蓣皂甙次生代谢生物合成中的功能提供了重要的实验基础. 展开更多
关键词 穿山龙 抑制消减杂交 液泡H^+-ATPase c亚基 cDNA克隆 同源性分析
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马蔺(Iris lactea)液泡型H^+-ATP酶c亚基蛋白的原核表达与纯化 被引量：1
10
作者 周爱民 马婧林 +3 位作者 关佳琦 王金刚 车代弟 柳参奎 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1324-1328,共5页
液泡型H+-ATP酶(V-ATPase)是植物生长、发育及应对逆境胁迫的关键酶,全酶由13种不同亚基组成,而V-ATPase c亚基(VHA-c)是分子量为16 k D的高度保守的脂质蛋白,对V-ATPase全酶的组装和活性具有重要作用。本研究中,利用RT-PCR方法从马蔺(I... 液泡型H+-ATP酶(V-ATPase)是植物生长、发育及应对逆境胁迫的关键酶,全酶由13种不同亚基组成,而V-ATPase c亚基(VHA-c)是分子量为16 k D的高度保守的脂质蛋白,对V-ATPase全酶的组装和活性具有重要作用。本研究中,利用RT-PCR方法从马蔺(Iris lactea)中克隆出Irl VHA-c基因全长读码框,将其构建到原核表达载体pGEX上并在大肠杆菌BL21中诱导表达。结果发现在0.1 mmol/L的IPTG终浓度下诱导8hGST-IrlVHA-c融合蛋白高效表达,并利用层析方法纯化获得了GST-IrlVHA-c融合蛋白,进一步为研究IrlVHA-c蛋白的结构与功能提供帮助。 展开更多
关键词 马蔺(Iris lactea) V-ATP酶 c亚基 原核表达 GST融合蛋白
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过表达ThVHAc1对拟南芥V-ATPase各亚基表达的影响 被引量：1
11
作者 杨桂燕 郭宇聪 +2 位作者 赵玉琳 张凤娇 高彩球 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期692-695,共4页
V-ATPase是多亚基复合蛋白,其c亚基负责V-ATPase的组装及质子通道的形成。本研究拟分析盐胁迫下过表达Th VHAc1基因拟南芥V-ATPase各亚基的表达,探讨过表达外源c亚基对拟南芥V-ATPase全酶响应盐胁迫表达模式的影响。实时荧光定量PCR结... V-ATPase是多亚基复合蛋白,其c亚基负责V-ATPase的组装及质子通道的形成。本研究拟分析盐胁迫下过表达Th VHAc1基因拟南芥V-ATPase各亚基的表达,探讨过表达外源c亚基对拟南芥V-ATPase全酶响应盐胁迫表达模式的影响。实时荧光定量PCR结果显示,盐胁迫下,过表达外源Th VHAc1拟南芥V-ATPase 28个亚基的表达发生了明显改变,且拟南芥5个c亚基的表达均不同程度的被抑制。表明外源Th VHAc1基因能影响拟南芥V-ATPase各亚基的表达以调节V-ATPase全酶的活性,但各亚基的表达模式与V-ATPase活性非简单对应关系,各亚基互相协调决定V-ATPase活性。 展开更多
关键词 刚毛柽柳 表达分析 c亚基 V-ATPASE ThVHAc1
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基于线粒体COI基因部分序列的长江口虾虎鱼科鱼类系统分类 被引量：16
12
作者 于亚男 宋超 +2 位作者 侯俊利 王妤 庄平 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2014年第5期3-8,共6页
对采自长江口的7种虾虎鱼(Gobiidae)19个个体的线粒体COI基因进行测序,其他6种虾虎鱼的相应序列从Genbank中获得。序列分析结果显示7种虾虎鱼的COI基因部分序列密码子的第一位碱基的GC碱基含量最恒定,第三位碱基的GC含量最高,平均A+T的... 对采自长江口的7种虾虎鱼(Gobiidae)19个个体的线粒体COI基因进行测序,其他6种虾虎鱼的相应序列从Genbank中获得。序列分析结果显示7种虾虎鱼的COI基因部分序列密码子的第一位碱基的GC碱基含量最恒定,第三位碱基的GC含量最高,平均A+T的含量要高于G+C的含量,与多种鱼类的COI基因的碱基特点相似。运用MEGA5.0计算13种虾虎鱼的种间遗传距离,表明拉氏狼牙虾虎鱼(Oxyurichthy tentacularis)与孔虾虎鱼(Chaeturichthys stigmatias)归属于近盲虾虎鱼亚科,根据种间遗传距离与系统发育树的结构特征推测,触角沟虾虎鱼和矛尾虾虎鱼可能具有共同的起源。 展开更多
关键词 虾虎鱼科 线粒体细胞c亚基(cOI) 分子系统分类
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珍稀绢丝昆虫柳蚕的DNA条形编码与系统进化初步分析 被引量：10
13
作者 濮佳明 武松 +6 位作者 霍锡敏 王欢 夏润玺 李喜升 王振东 罗朝斌 刘彦群 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期154-159,共6页
利用DNA测序技术获得柳蚕(Actias selene)线粒体细胞色素酶C亚基Ⅰ基因(COI)5′端574 bp的片段,作为用于柳蚕种质资源分子鉴定的DNA条形编码(GenBank:FJ358505)。测定的柳蚕COI基因序列与其它大蚕蛾科绢丝昆虫的COI序列一样,均表现出偏... 利用DNA测序技术获得柳蚕(Actias selene)线粒体细胞色素酶C亚基Ⅰ基因(COI)5′端574 bp的片段,作为用于柳蚕种质资源分子鉴定的DNA条形编码(GenBank:FJ358505)。测定的柳蚕COI基因序列与其它大蚕蛾科绢丝昆虫的COI序列一样,均表现出偏好于碱基T的倾向(AT skew=-0.179)。在所分析的蚕类昆虫中,柳蚕与合目大蚕蛾的遗传距离最小(0.120),而与蓖麻蚕之间的遗传距离最大(0.138)。构建的NJ和UPGMA分子树中,大蚕蛾科的柳蚕属、柞蚕属、蓖麻蚕属、大乌桕蚕属、栗蚕属均各自形成一个支系,并且明显形成两个分支:大蚕蛾族(saturni-ini),包括柳蚕、柞蚕和栗蚕;眉纹大蚕蛾族(attacini),包括蓖麻蚕和大乌桕蚕。这一结果与传统分类一致。 展开更多
关键词 柳蚕 线粒体细胞色素酶c亚基Ⅰ基因 DNA条形编码 系统进化
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白芍提取物对PMS肝气郁证大鼠下丘脑Cav1.2介导的CaM/CaMK Ⅱ/BDNF信号通路的影响 被引量：9
14
作者 宋春红 王杰琼 +5 位作者 李芳 李自发 魏盛 王美艳 薛玲 姜运良 《世界科学技术-中医药现代化》 2016年第10期1794-1800,共7页
目的:本文主要探讨白芍提取物对PMS肝气郁证大鼠下丘脑Cav1.2钙通道关键蛋白CACNA1C及其下游信号通路中CaM、BDNF蛋白表达和对CaMKⅡ磷酸化的影响,从而明确白芍提取物治疗肝气郁结证的分子作用靶点。方法:利用慢性束缚应激法制备PMS肝... 目的:本文主要探讨白芍提取物对PMS肝气郁证大鼠下丘脑Cav1.2钙通道关键蛋白CACNA1C及其下游信号通路中CaM、BDNF蛋白表达和对CaMKⅡ磷酸化的影响,从而明确白芍提取物治疗肝气郁结证的分子作用靶点。方法:利用慢性束缚应激法制备PMS肝气郁证大鼠模型,使用白芍提取物进行药物干预。模型制备成功后检测下丘脑CACNA1C蛋白表达,以及下游信号通路中CaM、BDNF蛋白表达和CaMKⅡ的磷酸化水平。离体培养海马原代神经元,通过KCl激活L型钙通道,检测白芍提取物中的有效成分单体芍药苷对细胞内钙超载的影响。结果:PMS肝气郁证大鼠下丘脑CACNA1C蛋白表达增加,CaMKⅡ磷酸化水平提高,BDNF表达减少,说明白芍提取物可显著改善上述蛋白表达异常的现象,抑制KCl激活的L型钙通道引起的细胞内钙离子浓度的增加。结论:白芍提取物可能是通过调控细胞内Cav1.2,抑制其下游CaM/CaMKⅡ信号通路的活化发挥治疗PMS肝气郁证的作用。 展开更多
关键词 PMS肝气郁证 白芍提取物 L型钙通道α1c亚基基因 钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ 脑源性神经营养因子
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拟南芥复制因子C亚基1在胚胎发生中起重要作用(英文) 被引量：8
15
作者 夏石头 萧浪涛 +1 位作者 毕冬玲 朱兆海 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期179-187,共9页
复制因子C包含1个大亚基和4个小亚基,在DNA复制、损伤修复和细胞增殖中起重要作用,拟南芥复制因子C亚基1(AtRFC1)是人类复制因子C大亚基p140的同源蛋白。在对3个复制因子C亚基1的T-DNA插入突变株系rfc1-1、rfc1-2和rfc1-3的检验中,证实... 复制因子C包含1个大亚基和4个小亚基,在DNA复制、损伤修复和细胞增殖中起重要作用,拟南芥复制因子C亚基1(AtRFC1)是人类复制因子C大亚基p140的同源蛋白。在对3个复制因子C亚基1的T-DNA插入突变株系rfc1-1、rfc1-2和rfc1-3的检验中,证实插入位点分别位于第16、19号外显子和启动子区域。T-DNA在外显子中的插入突变引起胚胎发育异常并导致胚胎和种子败育。将野生型拟南芥复制因子C亚基1基因转化到突变株系rfc1-1和rfc1-2后恢复了突变株的野生型表型,证明胚胎发生异常表型是由拟南芥复制因子C亚基1基因突变所引起的,AtRFC1在拟南芥胚胎发生中起重要作用。 展开更多
关键词 拟南芥复制因子c亚基1基因(AtRFc1) p140 胚胎发生 拟南芥
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血清线粒体ATP合酶C亚基水平在脓毒症患者心功能状态及预后评估中的价值 被引量：7
16
作者 孙莹莹 张瑶璐 +6 位作者 张璐瑶 赵光举 洪广亮 李萌芳 吴斌 支绍册 卢中秋 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第27期2140-2146,共7页
目的探讨血清线粒体ATP合酶C亚基水平在脓毒症患者心功能状态及预后评估中的价值。方法前瞻性纳入2017年1月1日至2018年12月31日在温州医科大学附属第一医院急诊重症监护室(EICU)收住的165例脓毒症患者,男103例(62.4%),女62例(37.6%),年... 目的探讨血清线粒体ATP合酶C亚基水平在脓毒症患者心功能状态及预后评估中的价值。方法前瞻性纳入2017年1月1日至2018年12月31日在温州医科大学附属第一医院急诊重症监护室(EICU)收住的165例脓毒症患者,男103例(62.4%),女62例(37.6%),年龄(63±14)岁。使用人ATP合成酶脂质结合蛋白(ATP5G1)ELISA试剂盒检测患者入EICU后24 h内的血清ATP合酶C亚基水平。对照组为健康体检者,共45例。收集患者临床资料,根据左室射血分数(LVEF)及临床结局不同进行分组,比较各组之间临床指标的差异,评价血清ATP合酶C亚基水平对脓毒症患者心功能状态及预后评估的价值,分析脓毒症患者心功能状态及预后的独立危险因素。结果脓毒症组血清ATP合酶C亚基水平高于对照组[(116±62)μg/L比(77±34)μg/L,P<0.001]。脓毒症心功能障碍组血清ATP合酶C亚基水平高于心功能正常组(P<0.001),死亡组血清ATP合酶C亚基水平高于存活组(P<0.05)。绘制ATP合酶C亚基、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、B型钠尿肽(BNP)、肌钙蛋白I(cTnI)、左房舒张末期内径、左室收缩末期内径、左室舒张末期容量、左室收缩末期容量受试者工作曲线(ROC)来评估脓毒症患者心功能障碍,曲线下面积(AUC)分别为0.928、0.661、0.837、0.814、0.703、0.831、0.794、0.765,其中ATP合酶C亚基截断值、灵敏度、特异度分别为139.44 ng/L、100%、75.2%。logistic回归分析得出ATP合酶C亚基、BNP、左房舒张末期内径是脓毒症患者心功能障碍的独立危险因素(均P<0.05)。绘制年龄、尿素氮(BUN)、ATP合酶C亚基、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ评分(APACHEⅡ)、简化急性生理评分(SAPSⅡ)ROC曲线来评估脓毒症患者预后,其AUC分别为0.719、0.772、0.656、0.868、0.884,其中ATP合酶C亚基的截断值、灵敏度、特异度分别为131.24 ng/L、61.9%、68.7%。logistic回归分析得出年龄、BUN、ATP合酶C亚基、发生心功能障� 展开更多
关键词 脓毒症 心功能障碍 ATP合酶c亚基 预后
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过量表达星星草(Puccinellia tenuiflora)液泡型H^+-ATP酶c亚基基因提高转基因酵母的耐盐性 被引量：5
17
作者 周爱民 卜媛媛 +2 位作者 张欣欣 高野哲夫 柳参奎 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期409-414,共6页
植物液泡型H+-ATP酶(V-ATPase)在次级转运与应对多种逆境胁迫中具有重要作用。本研究克隆并解析了能够生长在盐碱地上的野生星星草V-ATPase c亚基基因(Put VHA-c)的功能。本研究利用荧光蛋白(GFP)标记结合内涵体染色的方法研究了Put VH... 植物液泡型H+-ATP酶(V-ATPase)在次级转运与应对多种逆境胁迫中具有重要作用。本研究克隆并解析了能够生长在盐碱地上的野生星星草V-ATPase c亚基基因(Put VHA-c)的功能。本研究利用荧光蛋白(GFP)标记结合内涵体染色的方法研究了Put VHA-c蛋白在酵母细胞中的定位,并利用转基因酵母分析了Put VHA-c基因在盐胁迫中的作用。共定位实验显示Put VHA-c-GFP融合蛋白主要定位在酵母细胞的内涵体上。Northern杂交和实时定量PCR显示在星星草悬浮细胞中Put VHA-c基因的表达能够被盐胁迫所诱导。研究结果结合过表达Put VHA-c的转基因酵母具有更高的耐盐性的发现,说明Put VHA-c基因参与着盐胁迫的应答。 展开更多
关键词 星星草 V-ATPASE c亚基基因 过表达 酵母 耐盐性
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ATP合酶C亚基在缺血性心脏病患者血清中的表达及临床意义 被引量：4
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作者 黄大伟 高子弟 +5 位作者 林国 郭燕峰 林俊亮 陈时强 张孝兵 黄锡通 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1322-1326,共5页
目的探讨ATP合酶C亚基(Csub)在缺血性心脏病(IHD)患者血清中的表达及临床意义。方法选择2019年5月至2020年12月玉环市人民医院急诊科收治的101例胸痛患者,其中急性心肌梗死(AMI)59例,不稳定型心绞痛(UAP)42例;同时选择体检中心年龄匹配... 目的探讨ATP合酶C亚基(Csub)在缺血性心脏病(IHD)患者血清中的表达及临床意义。方法选择2019年5月至2020年12月玉环市人民医院急诊科收治的101例胸痛患者,其中急性心肌梗死(AMI)59例,不稳定型心绞痛(UAP)42例;同时选择体检中心年龄匹配的50例健康体检者作为健康对照(HC)。所有患者均于急诊抢救室药物及介入措施干预前完成抽血,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清Csub含量,分析Csub与临床特征之间的关系,同时用电化学发光法检测血中超敏心肌肌钙蛋白T(hs-cTnT)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量。绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),评估Csub、hs-cTnT及CK-MB对IHD的早期诊断价值。结果3组受试者年龄、性别、既往史等基线资料均衡,低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、CK-MB、hs-cTnT及B型钠尿肽(BNP)差异具有统计学意义,其余生化指标差异均无统计学意义。AMI组及UAP组Csub含量均明显高于HC组〔8.96%(6.37%,11.53%)、4.27%(3.23%,6.49%)比1.56%(1.07%,2.33%),均P<0.01〕,且心肌缺血更为严重的AMI组Csub含量较UAP组进一步升高〔8.96%(6.37%,11.53%)比4.27%(3.23%,6.49%),P<0.01〕。59例AMI患者均接受了经皮冠状动脉介入治疗(PCI),根据Csub中位数将AMI患者分为高于中位数组(29例)和低于中位数组(30例),结果显示,两组冠状动脉病变支数、支架植入数量及术后用药情况差异均无统计学意义。ROC曲线分析显示,Csub对IHD的诊断效能〔曲线下面积(AUC)=0.98,95%可信区间(95%CI)为0.95~1.00〕略低于hs-cTnT(AUC=0.99,95%CI为0.99~1.00),却高于CK-MB(AUC=0.94,95%CI为0.89~0.99)。Csub最佳截断值为4.74%时,诊断IHD的敏感度为100%,特异度为87.0%。结论Csub在IHD患者血清中显著升高,且随着缺血程度的加剧进一步升高,其可作为诊断以及评估心肌缺血发展的新型诊断标志物。 展开更多
关键词 缺血性心脏病 ATP合酶c亚基 超敏肌钙蛋白
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掌叶木V-ATP酶C亚基基因克隆及表达模式分析
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作者 徐健 李雪萍 《廊坊师范学院学报（自然科学版）》 2024年第2期66-71,共6页
从珍稀濒危植物掌叶木中克隆了一个V-ATP酶C亚基(HbVATP_C)基因,对其生物信息学特征进行了分析,利用荧光定量技术检测了该基因在不同组织和干旱及盐胁迫下的表达模式。结果显示,该基因开放阅读框全长1128bp,编码375个氨基酸,蛋白分子量... 从珍稀濒危植物掌叶木中克隆了一个V-ATP酶C亚基(HbVATP_C)基因,对其生物信息学特征进行了分析,利用荧光定量技术检测了该基因在不同组织和干旱及盐胁迫下的表达模式。结果显示,该基因开放阅读框全长1128bp,编码375个氨基酸,蛋白分子量是42.57 kD,等电点为5.44,为亲水性蛋白。HbVATP_C具有典型的V-ATP_C结构域,与其他植物同源性较高。HbVATP_C在掌叶木根、茎和叶等不同组织中均有表达,在幼叶中表达水平显著高于其他部位。干旱胁迫下,该基因表达水平均高于对照,盐胁迫下变化不明显,说明该基因能响应干旱胁迫。为进一步研究该基因在掌叶木中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 掌叶木 V-ATP酶c亚基 基因克隆 表达模式
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细胞周期相关基因的胶质母细胞瘤预后模型构建及RFC2的细胞增殖效应研究
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作者 王二静 吴伟 +4 位作者 周浩宇 王乙錩 项健阳 王佳 王茂德 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期748-756,共9页
目的研究复制因子C亚基2(RFC2)与胶质母细胞瘤(GBM)患者预后和肿瘤细胞增殖之间的关系,并探索其在GBM发展中的潜在分子通路。方法利用生物信息学方法,筛选出可作为GBM独立预后因素的细胞周期基因,结合临床指标,构建GBM患者风险评分模型... 目的研究复制因子C亚基2(RFC2)与胶质母细胞瘤(GBM)患者预后和肿瘤细胞增殖之间的关系,并探索其在GBM发展中的潜在分子通路。方法利用生物信息学方法,筛选出可作为GBM独立预后因素的细胞周期基因,结合临床指标,构建GBM患者风险评分模型并验证其预测能力,对目标基因RFC2进行GO、KEGG和GSEA分析。取对数生长期的U87 GBM细胞进行慢病毒转染后分组(空白对照组、shRFC2#1、shRFC2#2),通过qRT-PCR、Western blotting、Edu染色、克隆形成实验检测mRNA表达、蛋白表达和细胞增殖。结果RFC2在GBM中表达上调,并随着胶质瘤病理级别升高,呈明显上升趋势。基因功能与通路分析结果提示,RFC2在姐妹染色体分离、染色体分离、细胞器裂变、核分裂、核有丝分裂等进程中,促进细胞周期过程中G1向S期转变。qRT-PCR和Western blotting结果显示,相较空白对照组,慢病毒敲低组中转录mRNA减少(P<0.0001)、翻译蛋白量减少;同样,与空白对照组相比,慢病毒敲低组Edu染色阳性率降低(P<0.0001),集落形成能力相应降低(P<0.001)。结论RFC2在GBM中高表达,且与胶质瘤分级和患者不良预后相关,促进GBM细胞增殖;RFC2有可能成为GBM潜在的生物标志物和治疗靶标。 展开更多
关键词 胶质母细胞瘤(GBM) 复制因子c亚基2(RFc2) 预后 增殖
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