西格列汀对人胰淀素转基因小鼠血糖的干预研究

1

作者 张强 张曾 +1 位作者 杨宏杰 何燕铭 《海南医学》 CAS 2021年第11期1361-1364,共4页

目的探讨西格列汀是否有改善人胰淀素转基因小鼠(hIAPP-Tg)血糖及胰岛功能作用。方法(1)饲养繁殖hIAPP-Tg小鼠,通过剪尾PCR法鉴定获得阳性高表达雄性小鼠18只(8周龄、约20 g),随机将其分成模型组和西格列汀组各9只;8只同龄雄性C57BL/6... 目的探讨西格列汀是否有改善人胰淀素转基因小鼠(hIAPP-Tg)血糖及胰岛功能作用。方法(1)饲养繁殖hIAPP-Tg小鼠,通过剪尾PCR法鉴定获得阳性高表达雄性小鼠18只(8周龄、约20 g),随机将其分成模型组和西格列汀组各9只;8只同龄雄性C57BL/6小鼠作为阴性对照组。(2)采用隔天一次灌胃给药方式,连续给药10周:对照组及模型组给予磷酸盐缓冲液(PBS),西格列汀组给予西格列汀(20 mg/kg)。每两周测一次空腹血糖及称体质量,给药10周后空腹处死取血清及组织用于后续实验。(3)采用便携式血糖仪测定末梢血糖,ELISA法测定血清胰岛素及糖化血红蛋白水平,免疫荧光法检测胰腺胰岛素及C/EBP同源蛋白(CHOP)表达水平。结果(1)与对照组比较,模型组及西格列汀组小鼠空腹血糖明显升高,西格列汀给药10周后血糖及糖化血红蛋白较模型组下降,差异均有统计学意义(P<0.05);模型组及西格列汀组体质量较对照组下降,但各组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)与对照组比较,模型组及西格列汀组小鼠血清胰岛素水平降低、糖化血红蛋白升高,西格列汀给药10周后血清胰岛素水平较模型组升高而糖化血红蛋白下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)与对照组比较,模型组及西格列汀组小鼠胰腺胰岛素表达下降,西格列汀给药10周后胰腺胰岛素表达较模型组升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,模型组及西格列汀组的CHOP表达升高,西格列汀给药10周后表达下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论西格列汀可改善hIAPP-Tg小鼠血糖及胰岛功能,其机制可能与减少胰腺CHOP相关的内质网应激有关。 展开更多

关键词 2型糖尿病 西格列汀 人胰淀素 c/ebp同源蛋白 胰岛功能

下载PDF 职称材料

针刺对戊四唑诱发惊厥大鼠海马葡萄糖调节蛋白78和C/EBP同源蛋白表达的影响 被引量：9

2

作者 杨帆 马允 +5 位作者 昂文平 陈浩 杜卫东 吴生兵 吕磊 张道芹 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期267-271,共5页

目的:观察针刺对惊厥大鼠海马神经元内葡萄糖调节蛋白78(Grp 78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)蛋白表达的影响,探讨针刺抗惊厥的可能机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组(n=6)、模型组(n=18)、针刺组(n=18)。腹腔注射戊四唑(50mg/kg)复制惊厥... 目的:观察针刺对惊厥大鼠海马神经元内葡萄糖调节蛋白78(Grp 78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)蛋白表达的影响,探讨针刺抗惊厥的可能机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组(n=6)、模型组(n=18)、针刺组(n=18)。腹腔注射戊四唑(50mg/kg)复制惊厥大鼠模型。针刺组立即针刺"百会""大椎"30min。各组分别于造模后2、12、48h采用免疫组化法观察各组大鼠海马CA 1区Grp 78和CHOP蛋白表达情况。结果:模型组大鼠在惊厥发作2、12h海马CA 1区Grp 78蛋白表达与正常组比较明显增强(P<0.01);针刺组大鼠在惊厥发作12h和48h与模型组比较Grp 78蛋白表达显著增加(P<0.01,P<0.05)。在惊厥发作各个时段与正常组比较,模型组大鼠海马CA 1区CHOP蛋白表达明显上调(P<0.01);针刺组海马CA 1区CHOP蛋白阳性表达在惊厥发作各个时段与模型组比较明显减少(P<0.05,P<0.01)。结论:针刺能明显调节惊厥大鼠海马神经元Grp 78蛋白和CHOP蛋白的表达,从而起到保护惊厥性脑损伤作用。 展开更多

关键词 惊厥 针刺 海马cA1区 葡萄糖调节蛋白78 c ebp同源蛋白 脑损伤

原文传递

黄芪甲苷对急性肺损伤大鼠内质网应激介导影响 被引量：7

3

作者 张吉 臧东钰 《中国民族民间医药》 2014年第15期19-20,共2页

目的:探讨黄芪甲苷(ASIV)对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)的保护作用,并初步探讨其抑制内质网应激介导的细胞凋亡的作用。方法:随机将50只SD大鼠分成5组,每组10只。对照组(静注生理盐水1mg/kg),ALI组(静注LPS,5mg/kg),ASIV组(注射LPS... 目的:探讨黄芪甲苷(ASIV)对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)的保护作用,并初步探讨其抑制内质网应激介导的细胞凋亡的作用。方法:随机将50只SD大鼠分成5组,每组10只。对照组(静注生理盐水1mg/kg),ALI组(静注LPS,5mg/kg),ASIV组(注射LPS前,给药3、6、12mg/kg ASIV连续灌胃7天)。观察注射12h后肺组织湿干重(W/D)、western blotting检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)的蛋白表达。结果:ALI组W/D值较对照组上升(P<0.01),GRP78、ChOP蛋白表达较对照组升高(P<0.01);ASIV组W/D值较ALI组下降(P<0.01),GRP78、ChOP蛋白表达较ALI组降低(P<0.01),并呈一定的剂量依赖性。结论:黄芪甲苷对急性肺损伤大鼠有保护作用,其作用机制可能与内质网应激有关。 展开更多

关键词 黄芪甲苷 急性肺损伤 内质网应激 葡萄糖调节蛋白78(GRP78) c/ebp环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(chop)

下载PDF 职称材料

促红细胞生成素抑制心梗大鼠心肌核转录因子CHOP表达的研究 被引量：7

4

作者 马骥 郑鸣之 俞月萍 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期24-27,共4页

目的探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)抑制心梗大鼠心肌核转录因子CHOP(C/EBP homologous protein)表达的作用。方法将雄性SD大鼠30只随机分为假手术对照组、心肌梗死组和EPO治疗组。心肌梗死组及心肌梗死EPO治疗组采用结扎左冠... 目的探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)抑制心梗大鼠心肌核转录因子CHOP(C/EBP homologous protein)表达的作用。方法将雄性SD大鼠30只随机分为假手术对照组、心肌梗死组和EPO治疗组。心肌梗死组及心肌梗死EPO治疗组采用结扎左冠状动脉前降支建立心梗模型。其中EPO治疗组术后每天腹腔注射重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rh-EPO)(1 000 u.kg-1),其余2组注射等量生理盐水,30 d后,分别测定各组大鼠心功能,观察梗死区及其周围心肌病理改变,同时免疫组化和Western-blot方法测定并比较3组大鼠心梗区域心肌细胞核转录因子CHOP蛋白的表达改变。结果 EPO治疗组大鼠心功能较心肌梗死组大鼠明显改善,表现为左室发展压(left ventricular developed pressure,LVDP)值较梗死组大鼠升高,但比假手术对照组低(P<0.01),梗死组心肌纤维化严重,残存心肌排列紊乱,而EPO治疗组可见梗死心肌部位的间质纤维化明显改善。免疫组化和Western-blot显示实验组中核转录因子CHOP蛋白在EPO治疗组表达明显低于心肌梗死组(P<0.05)。结论 EPO可以明显改善心梗大鼠的心功能,其机制可能与抑制核转录因子CHOP的过表达从而抑制内质网应激引起的心肌细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 促红细胞生成素 慢性心梗 核转录因子chop

原文传递

平阳霉素诱导人脐静脉血管内皮细胞HUVEC凋亡的作用机制 被引量：3

5

作者 佟笑 夏思文 +3 位作者 康宗辉 胡献惠 薛向阳 黄益灯 《医学研究杂志》 2016年第5期86-90,共5页

目的检测不同浓度平阳霉素(pingyangmycin,PYM)作用24h对人脐静脉血管内皮细胞HUVEC细胞的生长抑制及凋亡的影响,探讨平阳霉素诱导HUVEC细胞凋亡最佳浓度及有关作用机制。方法用不同浓度的平阳霉素作用HUVEC细胞24h,以细胞增殖-毒性8检... 目的检测不同浓度平阳霉素(pingyangmycin,PYM)作用24h对人脐静脉血管内皮细胞HUVEC细胞的生长抑制及凋亡的影响,探讨平阳霉素诱导HUVEC细胞凋亡最佳浓度及有关作用机制。方法用不同浓度的平阳霉素作用HUVEC细胞24h,以细胞增殖-毒性8检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测比较0.1、10、100、1000μg/ml平阳霉素作用24h后对HUVEC细胞的抑制作用,用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶细胞凋亡检测试剂盒(Annexin-V FITC/PI apoptosis kit)检测不同浓度PYM对HUVEC细胞凋亡作用的影响,蛋白印迹法(Western blot)检测不同浓度平阳霉素作用HUVEC细胞后内质网应激蛋白GRP78和CHOP的表达。结果 CCK-8结果显示随平阳霉素浓度的升高,对HUVEC细胞的抑制作用越明显(P<0.05);然平阳霉素药物浓度100μg/ml和1000μg/ml组相比,差异无显著性统计学意义(P>0.05)。流式细胞检测显示0.1、1、10、100μg/ml平阳霉素作用24h后细胞凋亡率分别为5.37%±1.63%、12.70%±1.57%、24.70%±6.99%、23.60%±0.80%,坏死率分别为4.87%±2.09%、7.32%±3.88%、39.10%±6.18%、66.30%±0.40%,随药物浓度增加而增高,过高浓度细胞坏死占主导,和对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);Western blot法结果显示,平阳霉素各浓度作用24h后促进内质网应激蛋白GRP78和CHOP的表达。结论平阳霉素在体外能明显抑制HUVEC细胞生长并促进其凋亡,当平阳霉素浓度达到100μg/ml时,细胞以坏死为主;平阳霉素可能通过内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)途径诱导HUVEC细胞凋亡。 展开更多

关键词 血管瘤 平阳霉素 糖调节蛋白78 c/ebp同源蛋白 内质网应激

下载PDF 职称材料

CHOP在间歇低氧大鼠认知功能减退中的表达及意义 被引量：2

6

作者 王红阳 段丽君 +5 位作者 赵雅宁 韩广超 张敏 王亚囡 王玲 曹进丽 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期332-336,共5页

目的探讨C/EBP同源蛋白(CHOP)在间歇性低氧大鼠认知功能减退中的表达变化及其意义。方法将75只雄性Wistar大鼠随机分为正常组(NC组)、5%间歇低氧组(5%CIH组)、10%间歇低氧组(10%CIH组),每组25只;每组又各分为3、7、14、21、28d时间亚组... 目的探讨C/EBP同源蛋白(CHOP)在间歇性低氧大鼠认知功能减退中的表达变化及其意义。方法将75只雄性Wistar大鼠随机分为正常组(NC组)、5%间歇低氧组(5%CIH组)、10%间歇低氧组(10%CIH组),每组25只;每组又各分为3、7、14、21、28d时间亚组,每个时间亚组5只。正常组暴露于空气中,间歇低氧组分别暴露于间歇性低氧条件下(暴露时间每天8h,持续时间3、7、14、21、28d)。采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆功能,免疫组化检测海马CA1区CHOP表达,TUNEL法检测海马CA1区神经细胞凋亡。结果 1与NC组比较,2个CIH组动物逃避潜伏期随低氧时间的延长而延长(P<0.05),跨越目标象限的时间随低氧时间的延长而缩短(P<0.05),海马神经元凋亡指数随缺氧时间的延长均逐渐升高(P<0.05);与10%CIH组比较,5%CIH组上述变化有统计学意义(P<0.05)。2与NC组比较,2个CIH组CHOP蛋白的表达随缺氧时间的延长于各个时间点均增加(P<0.05),其中10%CIH组于28d达峰,5%CIH组于21d达峰后下降。3双变量相关分析显示,2个CIH组其CHOP表达与凋亡指数、动物逃避潜伏期时间均呈正相关,与跨越目标象限时间均呈负相关。结论间歇性低氧可以引起不同程度的认知功能减退,可能与其诱导CHOP高表达并激活CHOP介导的神经细胞凋亡密切相关。 展开更多

关键词 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征 间歇性低氧 细胞凋亡 c/ebp同源蛋白 MORRIS水迷宫

下载PDF 职称材料

新麦纤散对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织ATF-4/CHOP表达的影响 被引量：1

7

作者 付敏军 张君 +1 位作者 潘珍珍 郑红斌 《新中医》 CAS 2018年第5期1-5,共5页

目的:观察新麦纤散对溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)大鼠结肠组织活化转录因子-4(Activating transcription factor-4,ATF-4)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)表达的影响,探究其治疗UC的作用机制。方法:将60只SD... 目的:观察新麦纤散对溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)大鼠结肠组织活化转录因子-4(Activating transcription factor-4,ATF-4)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)表达的影响,探究其治疗UC的作用机制。方法:将60只SD大鼠随机分成正常组、模型组、美沙拉嗪组、新麦纤散低、中、高剂量组,每组10只,5%DSS用以诱导UC模型。美沙拉嗪组灌胃美沙拉嗪缓释颗粒混悬液0.42 g/(kg·d),新麦纤散低、中、高剂量组分别灌胃新麦纤散混悬液1.5、3、6 g/(kg·d),其余组大鼠予等体积生理盐水灌胃,连续治疗2周。观察大鼠一般情况,评估病理组织学损伤,采用Western Blot和RT-PCR法分别检测结肠组织ATF-4、CHOP蛋白和mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠结肠病理损伤评分显著升高,结肠组织ATF-4、CHOP蛋白和mRNA表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,美沙拉嗪组、新麦纤散低、中、高剂量组大鼠结肠病理损伤评分显著降低,结肠组织ATF-4、CHOP mRNA表达减少;美沙拉嗪组和新麦纤散中、高剂量组ATF-4、CHOP蛋白表达减少;差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:新麦纤散对UC大鼠有较好的疗效,抑制结肠组织ATF-4、CHOP蛋白和mRNA的表达,减少细胞凋亡可能是其作用机制之一。 展开更多

关键词 新麦纤散 溃疡性结肠炎(Uc) 活化转录因子-4(ATF-4) c/ebp同源蛋白(chop) 动物实验 大鼠

原文传递

脾气虚证模型大鼠股四头肌线粒体未折叠蛋白反应及CHOP蛋白表达的研究 被引量：1

8

作者 刘文俊 赵秋宇 +3 位作者 马天驰 谢鑫 张立德 单德红 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期2299-2303,共5页

目的:通过观察脾气虚证模型大鼠股四头肌线粒体应激反应元件(CHOP)及线粒体未折叠蛋白反应(UPRmt)的变化,从UPRmt方面研究"脾气虚四肢不用"的机制。方法:运用饮食失节+劳倦法复制脾气虚证大鼠模型,随机分为对照组和脾气虚模型... 目的:通过观察脾气虚证模型大鼠股四头肌线粒体应激反应元件(CHOP)及线粒体未折叠蛋白反应(UPRmt)的变化,从UPRmt方面研究"脾气虚四肢不用"的机制。方法:运用饮食失节+劳倦法复制脾气虚证大鼠模型,随机分为对照组和脾气虚模型组(模型组),造模成功后取股四头肌,比色法检测三磷酸腺苷(ATP)、过氧化氢(H2O2)水平及呼吸链复合体(CⅠ~CⅣ)酶活性;免疫印迹(Western blot)法检测CⅠ~CⅣ、热休克蛋白70/60(HSP70/60)、Lon蛋白酶(LonP)/Clp蛋白酶(ClpP)及CHOP蛋白表达。结果:比色结果显示,与对照组比较,模型组股四头肌ATP含量下降(P<0.05)、H2O2含量升高(P<0.05);CⅡ、CⅣ酶活性下降(P<0.05,P<0.01)。Westernblot结果显示,与对照组比较,模型组股四头肌CⅠ蛋白表达升高(P<0.01),CⅡ蛋白表达下降(P<0.01),HSP60蛋白表达下降(P<0.01),ClpP蛋白表达升高(P<0.01);CHOP蛋白表达下降(P<0.05)。结论:"脾气虚四肢不用"可能与CHOP抑制所致UPRmt紊乱有关。 展开更多

关键词 脾气虚证 股四头肌 线粒体未折叠蛋白反应 热休克蛋白 Lon蛋白酶 clp蛋白酶 线粒体应激反应元件

原文传递

地黄饮子抑制能量障碍诱导的APP/PS1小鼠内质网应激及神经元凋亡的作用机制 被引量：22

9

作者 温彬宇 张志辰 +3 位作者 高俊峰 闫妍 黄倩倩 马涛 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第21期111-117,共7页

目的：研究地黄饮子对能量代谢障碍诱导的APP/PS1转基因小鼠内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）活性转录因子4（activating transcription factor4,ATF4）/C/EBP同源蛋白（C/EBP homologous protein,CHOP）信号通路激活及... 目的：研究地黄饮子对能量代谢障碍诱导的APP/PS1转基因小鼠内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）活性转录因子4（activating transcription factor4,ATF4）/C/EBP同源蛋白（C/EBP homologous protein,CHOP）信号通路激活及其引发的神经元凋亡的作用机制。方法：4月龄APP/PS1转基因小鼠120只,随机分为正常组、模型组、阳性药（安理申,1 mg·kg-1）组、地黄饮子低、中、高剂量组（1.25,2.5,5 g·kg-1）。除正常组外,其余各组均腹腔注射100 mg·kg-1剂量的3-硝基丙酸（3-NP）,正常组小鼠腹腔注射等体积的无菌生理盐水。经灌胃给予地黄饮子和安理申1周。实时荧光定量聚合酶链式方应（Real-time PCR）检测小鼠脑组织ATF4,CHOP mRNA水平。蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠脑组织内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白78（GRP78）,ATF4,CHOP,B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2-associated X protein,Bax）蛋白表达水平。末端标记法（TUNEL）染色观察小鼠脑组织神经元凋亡,并计算凋亡率。结果：与正常组比较,3-NP诱导的能量代谢障碍可以显著增加ERS标记性蛋白GRP78表达量（P〈0.01）,提高ATF4,CHOP mRNA水平（P〈0.01）和蛋白表达水平（P〈0.01）,下调抗凋亡蛋白Bcl-2（P〈0.01）和上调促凋亡蛋白Bax（P〈0.01）,增加模型小鼠脑组织神经元凋亡率。与模型组比较,地黄饮子各剂量组能显著降低模型小鼠脑组织GRP78表达水平（P〈0.05,P〈0.01）,ATF4,CHOP基因mRNA（P〈0.05,P〈0.01）及蛋白（P〈0.05,P〈0.01）水平;能够上调抗凋亡蛋白Bcl-2（P〈0.05,P〈0.01）,下调促凋亡蛋白Bax（P〈0.05,P〈0.01）,减少脑组织神经元凋亡。TUNEL结果显示地黄饮子可以显著减少小鼠脑组织神经元凋亡率。结论：地黄饮子可以抑制能量代谢障碍导致的ERS,抑制ATF4/CHOP信号通路激活,调节凋亡相关蛋白,显著减少神经元凋亡。 展开更多

关键词 地黄饮子 阿尔茨海默病 内质网应激 能量代谢障碍 活性转录因子4 (activating transcription factor4 ATF4)/c/ebp同源蛋白(c/ebp homologous protein chop) 凋亡

原文传递

基于PERK/ATF4/CHOP的益肾通络方抑制内质网应激改善肾小管上皮细胞凋亡的作用机制 被引量：2

10

作者 苏烜 赵靓 +5 位作者 王萌萌 丁婧 张振强 张效威 徐江雁 谢治深 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期26-36,共11页

目的:验证益肾通络方(YSTLP)对肾小管上皮细胞凋亡的影响,并基于内质网应激通路蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/活化转录因子4(ATF4)/转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)探讨其作用机制。方法:将db/db小鼠随机分为模型组、缬沙坦组(10 mg·k... 目的:验证益肾通络方(YSTLP)对肾小管上皮细胞凋亡的影响,并基于内质网应激通路蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/活化转录因子4(ATF4)/转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)探讨其作用机制。方法:将db/db小鼠随机分为模型组、缬沙坦组(10 mg·kg^(-1)·d^(-1))、YSTLP低、中、高剂量组(1、2.5、5 g·kg^(-1)·d^(-1))给予药物干预8周后取材。同窝的db/m小鼠作为正常组。体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),分为正常组、糖基化终产物(AGEs)组、AGEs+益肾通络方低、中、高质量浓度组(100、200、400 mg·L^(-1));原位末端标记(TUNEL)染色检测HK-2细胞的凋亡情况;细胞活力测定实验检测HK-2细胞存活率;钙离子荧光探针染色,以及荧光素酶报告基因法检测为折叠蛋白反应元件(UPRE)荧光素酶活力,检测内质网应激情况;免疫组化法(IHC)检测小鼠肾脏中磷酸化(p)-PERK蛋白的表达(p-PERK)、CHOP、ATF4的蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠肾脏、HK-2细胞中CHOP、X盒结合蛋白1(XBP1)的mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠肾脏、HK-2细胞中p-PERK、PERK、CHOP、ATF4、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、切割型胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)的蛋白表达水平。结果:细胞实验中,与正常组比较,AGEs组HK-2细胞活力显著降低,凋亡率显著升高(P<0.01),凋亡相关因子Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01),Bax的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01),cleaved Caspase-3的蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与AGEs组比较,YSTLP给药处理后,细胞活力提升,凋亡率降低(P<0.01),Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平呈时间、剂量依赖性显著升高(P<0.01),Bax的mRNA和蛋白表达水平呈时间、剂量依赖性显著降低,cleaved Caspase-3的蛋白表达水平呈时间、剂量依赖性显著降低(P<0.01)。与正常组比较,AGEs组细胞内Ca2+失衡,UPRE荧光素酶荧光强度增加(P<0. 展开更多

关键词 益肾通络方 内质网应激 凋亡 机制 蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/活化转录因子4(ATF4)/转录因子c/ebp同源蛋白(chop)信号通路

原文传递

基于内质网应激PERK-eIF2α-CHOP通路探讨健脾消渴方对小鼠胰岛min6细胞的保护作用

11

作者 王小芳 魏代浩 +3 位作者 邓欢 边文飞 洪甜影 黄延芹 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第12期2911-2917,共7页

目的探讨健脾消渴方对高糖诱导min6细胞内质网应激(ERS)信号通路蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)-真核启动因子(eIF)2α-C/EBP同源蛋白(CHOP)和细胞凋亡的影响。方法将min6细胞随机分为正常对照组(Con组,5.5 mmol/L葡萄糖)、模型组(Model组... 目的探讨健脾消渴方对高糖诱导min6细胞内质网应激(ERS)信号通路蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)-真核启动因子(eIF)2α-C/EBP同源蛋白(CHOP)和细胞凋亡的影响。方法将min6细胞随机分为正常对照组(Con组,5.5 mmol/L葡萄糖)、模型组(Model组,25.0 mmol/L葡萄糖)、健脾消渴方组(Jpxk组,25.0 mmol/L葡萄糖+最佳干预浓度的健脾消渴方)和阳性对照药利拉鲁肽组(Li组,25.0 mmol/L葡萄糖+最佳干预浓度的利拉鲁肽),用CCK8法检测细胞活力,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测胰岛素分泌;Hoechst33258染色和膜联蛋白Ⅴ-异硫氰酸荧光素(AnnexinⅤ-FITC)/碘化丙啶(PI)双染法流式检测细胞凋亡;Western印迹检测PERK、eIF2α、活化转运酶(ATF)4、CHOP、葡萄糖调节蛋白(GRP)78、胱天蛋白酶(Caspase)12蛋白表达水平;实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测PERK、eIF2α、ATF4、CHOP mRNA表达。结果与Con组相比,Model组min6细胞活力显著减弱,胰岛素水平明显降低,细胞凋亡率明显升高(P<0.01),且凋亡小体增多,染色质和细胞核固缩;明显上调PERK、eIF2α、ATF4、CHOP mRNA及蛋白表达、GRP78、Caspase12蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。与Model组相比,Jpxk组min6细胞活力明显提高,胰岛素水平明显升高,凋亡细胞比例明显降低(P<0.05,P<0.01),min6细胞内凋亡小体减少;且明显下调PERK、eIF2α、CHOP蛋白及mRNA、GRP78、Caspase12蛋白及ATF4 mRNA表达(P<0.05,P<0.01)。与Li组相比,健脾消渴方能显著降低PERK及CHOP蛋白表达(P<0.05)。结论健脾消渴方可能通过抑制PERK、eIF2α、CHOP活性,改善内质网应激以保护min6细胞,PERK-eIF2α-CHOP信号通路可能是健脾消渴方发挥作用的主要机制之一。 展开更多

关键词 健脾消渴方 糖尿病 内质网应激 蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)-真核启动因子(eIF)2α-c/ebp同源蛋白(chop)通路 细胞凋亡

原文传递