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基于Caco-2细胞裂解液的DPP-4抑制剂筛选方法的建立
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作者 孙仲侃 王全胜 欧瑜 《药物生物技术》 CAS 2023年第5期459-463,共5页
使用结直肠腺癌Caco-2细胞裂解液对西格列汀的DPP-4抑制率和抑制类型进行测定,建立体外筛选DPP-4抑制剂的模型。将成熟分化的Caco-2细胞于Tris-HCl缓冲液内超声破碎制成细胞裂解液,以甘氨酰-脯氨酸-7-氨基-4-甲基香豆素(Gly-Pro-AMC)为... 使用结直肠腺癌Caco-2细胞裂解液对西格列汀的DPP-4抑制率和抑制类型进行测定,建立体外筛选DPP-4抑制剂的模型。将成熟分化的Caco-2细胞于Tris-HCl缓冲液内超声破碎制成细胞裂解液,以甘氨酰-脯氨酸-7-氨基-4-甲基香豆素(Gly-Pro-AMC)为底物对裂解液中DPP-4的比活力进行测定。以Gly-Pro-AMC为底物、稀释后的Caco-2细胞裂解液为DPP-4酶溶液,使用一系列底物浓度测得西格列汀对DPP-4抑制的IC50,使用双倒数作图法在一系列底物以及抑制剂浓度下测得西格列汀的抑制类型。在实验条件下测得西格列汀的IC50为18.68 nmol/L(95%CI,15.44~21.90 nmol/L)(拟合曲线R^(2)>0.99),抑制类型为竞争性抑制(拟合曲线R^(2)>0.99)。测得模型条件下的酶反应动力学参数Km为(75.11±2.15)μmol/L,Vmax为(1.00±0.03)μmol/(L·min),以及西格列汀的Ki为6.07 nmol/L(95%CI,5.61~6.58 nmol/L)(拟合曲线R2>0.99)。使用该模型测得西格列汀的DPP-4抑制率和抑制类型与文献报道相符,证明该模型可以用于DPP-4抑制剂的筛选。 展开更多
关键词 caco-2细胞 DPP-4抑制剂 西格列汀 抑制率 抑制类型 抑制剂筛选模型
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体外消化/Caco-2细胞方法评价富铁小麦生物利用率 被引量：7
2
作者 雷激 黄承钰 +2 位作者 张勇 张明秋 白琳 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期166-169,共4页
目的通过研究生物强化富铁小麦面粉的铁生物利用率,筛选出最具潜力的富铁小麦品种。方法采用体外消化/Caco-2方法对10种生物强化富铁面粉进行铁生物利用率比较,以人Caco-2细胞铁蛋白生成量来反映铁生物利用率。结果发现不同面粉间铁生... 目的通过研究生物强化富铁小麦面粉的铁生物利用率,筛选出最具潜力的富铁小麦品种。方法采用体外消化/Caco-2方法对10种生物强化富铁面粉进行铁生物利用率比较,以人Caco-2细胞铁蛋白生成量来反映铁生物利用率。结果发现不同面粉间铁生物利用率差异有显著性,出粉率78%的安阳中优9507和京冬8号面粉的铁生物利用率最高。结论生物强化富铁小麦安阳中优9507和京冬8号是最具潜力品种。 展开更多
关键词 富铁小麦 铁 生物利用率 体外消化/caco-2模型 强化铁
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