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布鲁菌Ⅳ型分泌系统非依赖型效应蛋白BspI诱导巨噬细胞内质网应激
被引量：
2
1
作者
任晶晶
李晨
彭其胜
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第5期950-956,共7页
布鲁菌感染能引起巨噬细胞内质网应激反应,其Ⅳ型分泌系统依赖性效应蛋白在应激反应中起着重要调控作用,但是有关Ⅳ型分泌系统非依赖性效应蛋白调节应激反应的研究尚未见报道。本试验以Ⅳ型分泌系统非依赖性效应蛋白BspI为研究对象,通过...
布鲁菌感染能引起巨噬细胞内质网应激反应,其Ⅳ型分泌系统依赖性效应蛋白在应激反应中起着重要调控作用,但是有关Ⅳ型分泌系统非依赖性效应蛋白调节应激反应的研究尚未见报道。本试验以Ⅳ型分泌系统非依赖性效应蛋白BspI为研究对象,通过GST-Bip融合蛋白互作试验与质谱分析发现:BspI蛋白能与巨噬细胞RAW264.7内质网应激反应中的未折叠蛋白反应分子伴侣Bip结合。通过构建pET28a-BspI表达载体,表达且纯化BspI蛋白,用其刺激巨噬细胞RAW264.7,荧光定量PCR及Western blot结果表明BspI能激活未折叠蛋白反应3条通路中的IRE1通路;同时ELISA试验表明BspI刺激能导致细胞中与应激反应相关的炎症因子IL-6和TNF-α升高。上述结果证明布鲁菌可通过其分泌的Ⅳ型分泌系统非依赖性效应蛋白引起巨噬细胞内质网应激反应,这将为进一步深入研究布鲁菌感染引起的内质网应激提供新思路。
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关键词
布鲁菌Ⅳ型分泌系统
bspi
未折叠蛋白反应
内质网应激
原文传递
CBCFI与煤炭市场相关指标对比分析
被引量：
2
2
作者
李韩英
《煤炭经济研究》
2014年第6期24-26,共3页
介绍了中国沿海煤炭运价指数(CBCFI)的基本情况,通过对比分析沿海煤炭运价指数与北方七港锚地船舶数、环渤海动力煤价格指数和北方七港下水煤量的关系,以探讨沿海煤炭运价指数在反映煤炭市场关键信息时的特点。
关键词
沿海煤炭运价指数
北方七港锚地船舶数
环渤海动力煤价格指数
北方七港下水煤量
原文传递
布鲁氏菌分泌蛋白BspI生物信息学分析及多克隆抗体制备
被引量：
1
3
作者
肖洋洋
马忠臣
+4 位作者
李芮芮
陈创夫
郑炜
王勇
王鹏雁
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2022年第8期3112-3121,共10页
【目的】试验旨在对布鲁氏菌分泌蛋白BspI进行生物信息学分析,构建原核表达载体,获得BspI蛋白并制备其多克隆抗体,为后续研究该蛋白的生物学功能提供材料。【方法】使用在线软件对BspI蛋白的氨基酸序列进行生物信息学分析,参照布鲁氏菌...
【目的】试验旨在对布鲁氏菌分泌蛋白BspI进行生物信息学分析,构建原核表达载体,获得BspI蛋白并制备其多克隆抗体,为后续研究该蛋白的生物学功能提供材料。【方法】使用在线软件对BspI蛋白的氨基酸序列进行生物信息学分析,参照布鲁氏菌16M株BspI基因序列(GenBank登录号:DK63_1233)设计引物,PCR扩增目的基因后连接至pMD19-T克隆载体并筛选阳性克隆,将目的基因连接到pET-28a表达载体上,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,加入IPTG诱导蛋白表达,并进行SDS-PAGE分析,用镍柱亲和层析方法纯化蛋白,纯化后的蛋白与弗氏佐剂混合免疫试验兔,采血分离血清,通过Western blotting、间接ELISA法进行多克隆抗体特异性及抗体效价分析。【结果】BspI蛋白为不稳定亲水性蛋白,存在跨膜结构,无信号肽区域,有13个磷酸化位点和7个抗原决定簇,二级结构主要由α-螺旋、延伸链和无规则卷曲组成。PCR成功扩增出675 bp的BspI基因,成功构建了pET-28a-BspI表达载体。SDS-PAGE和Western blotting分析结果表明,成功表达出25.3 ku的蛋白,纯化后无明显杂带,制备的多克隆抗体能够特异性地与BspI蛋白结合。间接ELISA结果显示,BspI蛋白多克隆抗体效价为1∶409600。【结论】制备的兔源BspI蛋白多克隆抗体可以特异性识别BspI蛋白,该蛋白具有较好的反应原性。试验结果为进一步研究BspI蛋白在布鲁氏菌的胞内寄生中发挥的作用提供了参考。
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关键词
布鲁氏菌
生物信息分析
分泌蛋白
bspi
多克隆抗体
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职称材料
环渤海动力煤价格指数编制及运行情况分析
被引量：
4
4
作者
王立锋
刘志鹏
安志远
《中国煤炭》
北大核心
2011年第5期10-14,18,共6页
介绍了环渤海动力煤价格指数的发布背景、编制意义、主要特性、编制原则、编制流程、运行情况,给出了指数试运行后煤炭企业的反响。
关键词
环渤海动力煤价格指数
煤炭市场
煤炭价格
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职称材料
题名
布鲁菌Ⅳ型分泌系统非依赖型效应蛋白BspI诱导巨噬细胞内质网应激
被引量：
2
1
作者
任晶晶
李晨
彭其胜
机构
吉林大学人兽共患病研究所/教育部人兽共患病研究重点实验室
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第5期950-956,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(3187010728)。
文摘
布鲁菌感染能引起巨噬细胞内质网应激反应,其Ⅳ型分泌系统依赖性效应蛋白在应激反应中起着重要调控作用,但是有关Ⅳ型分泌系统非依赖性效应蛋白调节应激反应的研究尚未见报道。本试验以Ⅳ型分泌系统非依赖性效应蛋白BspI为研究对象,通过GST-Bip融合蛋白互作试验与质谱分析发现:BspI蛋白能与巨噬细胞RAW264.7内质网应激反应中的未折叠蛋白反应分子伴侣Bip结合。通过构建pET28a-BspI表达载体,表达且纯化BspI蛋白,用其刺激巨噬细胞RAW264.7,荧光定量PCR及Western blot结果表明BspI能激活未折叠蛋白反应3条通路中的IRE1通路;同时ELISA试验表明BspI刺激能导致细胞中与应激反应相关的炎症因子IL-6和TNF-α升高。上述结果证明布鲁菌可通过其分泌的Ⅳ型分泌系统非依赖性效应蛋白引起巨噬细胞内质网应激反应,这将为进一步深入研究布鲁菌感染引起的内质网应激提供新思路。
关键词
布鲁菌Ⅳ型分泌系统
bspi
未折叠蛋白反应
内质网应激
Keywords
Brucella typeⅣsecretory system
bspi
the unfolded protein response(UPR)
endoplasmic reticulum stress(ER streess)
分类号
S852.614 [农业科学—基础兽医学]
R535 [农业科学—兽医学]
原文传递
题名
CBCFI与煤炭市场相关指标对比分析
被引量：
2
2
作者
李韩英
机构
神华集团有限责任公司
出处
《煤炭经济研究》
2014年第6期24-26,共3页
文摘
介绍了中国沿海煤炭运价指数(CBCFI)的基本情况,通过对比分析沿海煤炭运价指数与北方七港锚地船舶数、环渤海动力煤价格指数和北方七港下水煤量的关系,以探讨沿海煤炭运价指数在反映煤炭市场关键信息时的特点。
关键词
沿海煤炭运价指数
北方七港锚地船舶数
环渤海动力煤价格指数
北方七港下水煤量
Keywords
CBCFI
anchorage ship numbers of North China 7 harbors
bspi
coal quantity on sea water of North China 7harbors
分类号
F552 [经济管理—产业经济]
原文传递
题名
布鲁氏菌分泌蛋白BspI生物信息学分析及多克隆抗体制备
被引量：
1
3
作者
肖洋洋
马忠臣
李芮芮
陈创夫
郑炜
王勇
王鹏雁
机构
石河子大学动物科技学院
绵羊健康养殖与人兽共患病防控协同创新中心
动物疾病防控兵团重点实验室
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2022年第8期3112-3121,共10页
基金
国家自然科学基金项目(32060789)。
文摘
【目的】试验旨在对布鲁氏菌分泌蛋白BspI进行生物信息学分析,构建原核表达载体,获得BspI蛋白并制备其多克隆抗体,为后续研究该蛋白的生物学功能提供材料。【方法】使用在线软件对BspI蛋白的氨基酸序列进行生物信息学分析,参照布鲁氏菌16M株BspI基因序列(GenBank登录号:DK63_1233)设计引物,PCR扩增目的基因后连接至pMD19-T克隆载体并筛选阳性克隆,将目的基因连接到pET-28a表达载体上,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,加入IPTG诱导蛋白表达,并进行SDS-PAGE分析,用镍柱亲和层析方法纯化蛋白,纯化后的蛋白与弗氏佐剂混合免疫试验兔,采血分离血清,通过Western blotting、间接ELISA法进行多克隆抗体特异性及抗体效价分析。【结果】BspI蛋白为不稳定亲水性蛋白,存在跨膜结构,无信号肽区域,有13个磷酸化位点和7个抗原决定簇,二级结构主要由α-螺旋、延伸链和无规则卷曲组成。PCR成功扩增出675 bp的BspI基因,成功构建了pET-28a-BspI表达载体。SDS-PAGE和Western blotting分析结果表明,成功表达出25.3 ku的蛋白,纯化后无明显杂带,制备的多克隆抗体能够特异性地与BspI蛋白结合。间接ELISA结果显示,BspI蛋白多克隆抗体效价为1∶409600。【结论】制备的兔源BspI蛋白多克隆抗体可以特异性识别BspI蛋白,该蛋白具有较好的反应原性。试验结果为进一步研究BspI蛋白在布鲁氏菌的胞内寄生中发挥的作用提供了参考。
关键词
布鲁氏菌
生物信息分析
分泌蛋白
bspi
多克隆抗体
Keywords
Brucella
bioinformatic analysis
secreted protein
bspi
polyclonal antibody
分类号
S852.614 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
环渤海动力煤价格指数编制及运行情况分析
被引量：
4
4
作者
王立锋
刘志鹏
安志远
机构
秦皇岛海运煤炭交易市场
出处
《中国煤炭》
北大核心
2011年第5期10-14,18,共6页
文摘
介绍了环渤海动力煤价格指数的发布背景、编制意义、主要特性、编制原则、编制流程、运行情况,给出了指数试运行后煤炭企业的反响。
关键词
环渤海动力煤价格指数
煤炭市场
煤炭价格
Keywords
Bohai sea steam coal price index（
bspi
）
coal market
coal price
分类号
TD-9 [矿业工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
布鲁菌Ⅳ型分泌系统非依赖型效应蛋白BspI诱导巨噬细胞内质网应激
任晶晶
李晨
彭其胜
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
2
原文传递
2
CBCFI与煤炭市场相关指标对比分析
李韩英
《煤炭经济研究》
2014
2
原文传递
3
布鲁氏菌分泌蛋白BspI生物信息学分析及多克隆抗体制备
肖洋洋
马忠臣
李芮芮
陈创夫
郑炜
王勇
王鹏雁
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2022
1
下载PDF
职称材料
4
环渤海动力煤价格指数编制及运行情况分析
王立锋
刘志鹏
安志远
《中国煤炭》
北大核心
2011
4
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职称材料
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