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鸦胆子苦醇抑制人前列腺癌DU145细胞生长及作用机制 被引量:16
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作者 谭亚芳 李娟 +1 位作者 胡树枝 江仁望 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期431-436,共6页
中药鸦胆子是一种常用的抗肿瘤中草药,鸦胆子苦醇是来源于鸦胆子的主要成分。该研究探讨了鸦胆子苦醇(brusatol)对人前列腺癌DU145细胞的生长抑制及其作用机制。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测鸦胆子苦醇对不同细胞株的生长抑制情况,以... 中药鸦胆子是一种常用的抗肿瘤中草药,鸦胆子苦醇是来源于鸦胆子的主要成分。该研究探讨了鸦胆子苦醇(brusatol)对人前列腺癌DU145细胞的生长抑制及其作用机制。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测鸦胆子苦醇对不同细胞株的生长抑制情况,以及不同浓度的鸦胆子苦醇对DU145细胞的增殖抑制率;应用Hoechst 33258染色法观察鸦胆子苦醇处理DU145细胞后所发生的形态学变化;分别采用PI单染及AnnexinV-FITC双染法流式细胞术分析细胞周期分布个凋亡率的变化;以Western blot测定鸦胆子苦醇对MAPK信号通路相关蛋白表达的影响。结果表明:鸦胆子苦醇对人前列腺癌DU145细胞的抑制作用更为显著,并且可以时间和剂量依赖性地抑制人前列腺癌DU145细胞的生长,其半数有效抑制浓度IC50为(0.27±0.04)μmol·L-1;鸦胆子处理DU145细胞后,Hoechst 33258染色可见到明显的凋亡特征;细胞周期图中可见明显的亚二倍体峰,且随着作用时间的延长凋亡比例增加,FCM检测鸦胆子苦醇作用24 h后凋亡图中,可见凋亡的发生;Western blot检测表明鸦胆子苦醇处理后可使磷酸化的p38和JNK表达增加,使磷酸化的ERK表达降低。鸦胆子苦醇能显著抑制DU145细胞增殖,诱导DU145细胞凋亡。磷酸化的P38和JNK的表达增加,但磷酸化的ERK表达下降,这表明MAPK途径的活化可能是鸦胆子苦醇对DU145细胞生长抑制的作用机制之一。因此,鸦胆子苦醇是潜在的抗前列腺癌药物,有必要进一步在动物水平阐明其抗前列腺癌活性。 展开更多
关键词 鸦胆子苦醇 人前列腺癌DU145细胞 凋亡 MAPK
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鸦胆子苦醇通过Nrf2/HO-1通路诱导细胞铁死亡抑制胃癌细胞HGC-27增殖 被引量:10
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作者 高薇 曾海荣 乐佳敏 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期81-87,共7页
目的:观察鸦胆子苦醇对人胃癌HGC-27细胞增殖的影响及其作用机制。方法:采用细胞增殖与活性检测法(CCK-8)检测不同浓度鸦胆子苦醇对HGC-27细胞增殖的影响;鸦胆子苦醇(7.5、15、30μmol·L^(-1))作用于HGC-27细胞24 h,分析细胞克隆... 目的:观察鸦胆子苦醇对人胃癌HGC-27细胞增殖的影响及其作用机制。方法:采用细胞增殖与活性检测法(CCK-8)检测不同浓度鸦胆子苦醇对HGC-27细胞增殖的影响;鸦胆子苦醇(7.5、15、30μmol·L^(-1))作用于HGC-27细胞24 h,分析细胞克隆形成情况;活性氧荧光探针(DCFH-DA)检测细胞内活性氧(ROS)水平,脂质过氧化荧光探针(C11-BODIPY)检测细胞内脂质过氧化水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测胱氨酸/谷氨酸逆向转运蛋白溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、胱氨酸/谷氨酸逆向转运蛋白溶质载体家族40成员1(SLC40A1)、转铁蛋白(TRF)、核因子E_(2)相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)mRNA水平和蛋白表达情况。结果:与空白组比较,随鸦胆子苦醇药物浓度增大,HGC-27细胞存活率逐渐降低,其半数抑制浓度(IC_(50))为15.34μmol·L^(-1);鸦胆子苦醇组(7.5、15、30μmol·L^(-1))细胞克隆形成明显减少(P<0.05,P<0.01),呈现浓度依赖性。与空白组比较,鸦胆子苦醇组(7.5、15、30μmol·L^(-1))细胞内ROS,脂质过氧化水平,细胞内铁离子浓度及细胞乳酸脱氢酶(LDH)泄漏均明显升高(P<0.05,P<0.01),呈现浓度依赖性。与空白组比较,鸦胆子苦醇组(15、30μmol·L^(-1))SLC7A11、GPX4、SLC40A1的mRNA水平和蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),TRF mRNA水平及蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),且呈浓度依赖性。与空白组比较,鸦胆子苦醇组(15、30μmol·L^(-1))Nrf2和HO-1 mRNA水平和蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),且呈浓度依赖性。结论:鸦胆子苦醇可能通过抑制Nrf2/HO-1通路诱导铁死亡抑制HGC-27细胞增殖。 展开更多
关键词 鸦胆子苦醇 胃癌 铁死亡 活性氧 脂质过氧化
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鸦胆子苦醇抑制结直肠癌细胞增殖与Nrf2通路相关性研究 被引量:13
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作者 刘思园 蔡萌 +1 位作者 李春建 石健 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2018年第4期243-249,257,共8页
目的鸦胆子苦醇(brusatol,BRU)系苦木科植物鸦胆子果实中提取的一种苦木内酯类化合物,近年来被发现能有效抑制肺癌细胞的Nrf2通路,在抗肿瘤治疗中的应用潜力受到关注。本研究着重探讨BRU对结直肠癌细胞增殖和Nrf2通路的影响。方法采用... 目的鸦胆子苦醇(brusatol,BRU)系苦木科植物鸦胆子果实中提取的一种苦木内酯类化合物,近年来被发现能有效抑制肺癌细胞的Nrf2通路,在抗肿瘤治疗中的应用潜力受到关注。本研究着重探讨BRU对结直肠癌细胞增殖和Nrf2通路的影响。方法采用不同浓度BRU处理HCT116和HT29细胞,MTT法检测细胞活力,台盼蓝染色观察细胞增殖,Hoechst 33342单染和AnnexinⅤ/PI双染检测凋亡,PI单染检测细胞周期,BrdU免疫荧光法研究DNA的合成,试剂盒法检测细胞内还原性辅酶Ⅱ(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)和GSH水平。蛋白质印迹法检测BRU对HCT116细胞Nrf2蛋白表达的影响,QRT-PCR法检测BRU对Nrf2靶基因6-磷酸葡萄糖脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-phospho gluconat dehydrogenase,6GPD)、异柠檬酸脱氢酶同工酶1(isocitrate dehydrogenase 1,IDH1)和苹果酸酶1(malic enzyme 1,ME1)转录水平的影响。结果MTT结果显示,15~240nmol/L的BRU处理可降低HCT116细胞和HT29细胞的活力。用60和240nmol/L的BRU分别处理HCT116和HT29细胞48h,能显著抑制细胞增殖。BrdU免疫荧光结果显示,BRU处理24h能显著抑制2种细胞的DNA合成,抑制率分别达到(76.64±6.78)%和(62.87±8.62)%,t值分别为8.615和5.852,P值分别为0.002和0.005。凋亡检测结果显示,BRU在60nmol/L条件下未明显诱导HCT116细胞凋亡。用60nmol/L的BRU处理HCT116细胞,能使Nrf2蛋白水平在2和4h分别减少(48.67±3.21)%和(43.67±11.85)%,t值分别为10.382和2.133,P值分别为0.001和0.025。另外,60nmol/L的BRU处理8h还能显著降低结肠癌细胞NADPH和GSH的水平。QRT-PCR法检测结果显示,BRU能在8h内时间依赖性的抑制HCT116细胞Nrf2靶基因G6PD、6GPD、IDH1和ME1的转录。结论 BRU可以快速而短暂的抑制结肠癌细胞Nrf2信号通路,在不明显诱导细胞凋亡的条件下有效抑制细胞增殖。BRU对结肠癌细胞增殖的抑制作用可能与Nrf2信号通路 展开更多
关键词 鸦胆子苦醇 人结直肠癌细胞 增殖 凋亡
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鸦胆子苦醇对非小细胞肺癌Nrf2-Notch1信号轴的影响机制研究 被引量:12
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作者 王敏 刘其礼 +2 位作者 许帅 李品玉 李俊涛 《中国医药导报》 CAS 2018年第19期16-19,共4页
目的探讨鸦胆子苦醇在非小细胞肺癌A549、H460细胞增殖中的作用。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测鸦胆子苦醇对A549、H460细胞的半数抑制浓度(IC_(50));Hoechst33258染色,倒置荧光显微镜下观察细胞凋亡的形态学变化;通过CCK-8法检测... 目的探讨鸦胆子苦醇在非小细胞肺癌A549、H460细胞增殖中的作用。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测鸦胆子苦醇对A549、H460细胞的半数抑制浓度(IC_(50));Hoechst33258染色,倒置荧光显微镜下观察细胞凋亡的形态学变化;通过CCK-8法检测细胞活力;Annexin-V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;Western blot免疫印迹法检测A549、H460细胞Nrf2-Notch1蛋白表达。结果鸦胆子苦醇处理A549、H460细胞的IC_(50)分别为(0.70±0.03)、(0.47±0.05)μmol/L;流式细胞试验结果显示,鸦胆子苦醇处理后A549、H460细胞凋亡率显著升高,与对照组比较差异均有高度统计学意义(均P<0.01);Western blot检测结果显示,鸦胆子苦醇可降低细胞内Nrf2-Notch1的蛋白表达。结论鸦胆子苦醇可以抑制A549、H460细胞的生长,其机制可能与抑制Nrf2-Notch1信号轴有关。 展开更多
关键词 鸦胆子苦醇 非小细胞肺癌 NRF2 NOTCH1 细胞生长
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基于网络药理学和分子对接探讨鸦胆子治疗结直肠癌的作用机制 被引量:7
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作者 赵韦欣 王晴 +3 位作者 王梦齐 季安璇 郑晶莹 赵淑华 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1850-1859,共10页
目的采用网络药理学结合分子对接及体内验证,探究鸦胆子Brucea javanica治疗结直肠癌的活性成分、关键作用靶点及潜在的分子机制。方法从公共数据库中检索并收集鸦胆子的活性成分和对应的靶点以及结直肠癌相关的靶点,通过网络药理学分... 目的采用网络药理学结合分子对接及体内验证,探究鸦胆子Brucea javanica治疗结直肠癌的活性成分、关键作用靶点及潜在的分子机制。方法从公共数据库中检索并收集鸦胆子的活性成分和对应的靶点以及结直肠癌相关的靶点,通过网络药理学分析出鸦胆子治疗结直肠癌的活性成分、成分-疾病的交集靶点以及可能的信号通路。通过分子对接预测活性成分与靶点蛋白的结合能力。通过体内实验进一步验证鸦胆子活性成分治疗结直肠癌的作用和作用机制。结果在满足筛选条件的15个成分中共筛出鸦胆子苦醇、木犀草素、鸦胆子苷B、β-谷甾醇4个鸦胆子生物活性成分及32个鸦胆子治疗结直肠癌的作用靶点,表皮因子生长受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cysteinasparate protease-3,Caspase-3)及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)是鸦胆子治疗结直肠癌的关键靶点,EGFR/磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路可能在鸦胆子治疗结直肠癌中发挥重要作用。分子对接结果表示4个生物活性成分均可较好结合,其中鸦胆子苦醇与3个关键靶点的平均结合能负值最大,结合最稳定,可能是鸦胆子抗结直肠癌最有效的活性成分。动物实验结果表明,与对照组比较,鸦胆子苦醇明显抑制裸鼠体内移植瘤的体积和质量(P<0.01),下调肿瘤组织中EGFR、PI3K和Akt的蛋白表达水平(P<0.01),下调与G1/G0期细胞阻滞相关的cyclin D1和细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)的表达(P<0.01),上调与肿瘤细胞凋亡相关的cleaved Caspase-3表达及B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(B-cell lymphoma-2 associated X protein,Bax)/B淋巴细胞瘤-2(Bcell lymphoma-2,Bcl-2)值(P<0.01),下调与迁移和侵袭相关的蛋白基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)、MMP7表达(P<0.01);鸦胆子苦醇组裸鼠肝� 展开更多
关键词 鸦胆子 鸦胆子苦醇 结直肠癌 网络药理学 分子对接 木犀草素 鸦胆子苷B Β-谷甾醇 表皮因子生长受体 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 细胞周期蛋白D1
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积雪草苷对肾缺血再灌注损伤模型大鼠的保护作用 被引量:10
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作者 朱时玉 胡彦 +4 位作者 王锁刚 卢鹏 王帝 翟琼瑶 王光策 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第23期3609-3614,共6页
背景:预防或减少肾缺血再灌注损伤可提高肾移植手术移植物的存活率,因此需要寻找更为安全、有效、廉价的科学药物来预防或治疗肾缺血再灌注损伤。目的:探讨积雪草苷对肾缺血再灌注损伤模型大鼠的保护作用及相关机制。方法:将40只SD大鼠... 背景:预防或减少肾缺血再灌注损伤可提高肾移植手术移植物的存活率,因此需要寻找更为安全、有效、廉价的科学药物来预防或治疗肾缺血再灌注损伤。目的:探讨积雪草苷对肾缺血再灌注损伤模型大鼠的保护作用及相关机制。方法:将40只SD大鼠随机分为4组,分别为假手术组、模型组、积雪草苷组及积雪草苷+鸦胆子苦醇组,每组10只,后3组夹闭肾蒂45 min建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型。积雪草苷组、积雪草苷+鸦胆子苦醇组预先给予大鼠积雪草苷混悬液灌胃4周,积雪草苷+鸦胆子苦醇组于造模前5 d连续腹腔注射核因子E2相关因子2特异性抑制剂鸦胆子苦醇。检测各组大鼠血清中肌酐和尿素氮水平,酶联免疫吸附实验法检测尿液中肾损伤分子1的表达,测定肾组织中超氧化物歧化酶和丙二醛表达水平,苏木精-伊红染色观察肝组织病理改变,免疫组化检测肾组织内核因子E2相关因子2蛋白的表达,蛋白质印迹法检测肾组织细胞内核因子E2相关因子2和血红素加氧酶1蛋白的表达。结果与结论:①与模型组比较,积雪草苷组血清肌酐和尿素氮水平明显降低(P<0.05),尿液中肾损伤分子1表达明显降低(P<0.05),肾组织中超氧化物歧化酶表达明显升高(P<0.05),而丙二醛表达明显降低(P<0.05),肾组织病理改变也明显改善;②与积雪草苷组比较,积雪草苷+鸦胆子苦醇组血清肌酐和尿素氮水平增加(P<0.05),尿液中肾损伤分子1表达增加(P<0.05),肾组织超氧化物歧化酶降低(P<0.05),而丙二醛增加(P<0.05);③同时积雪草苷能显著诱导核因子E2相关因子2的表达水平和核内移位,增加血红素加氧酶1的表达水平;④提示积雪草苷对肾缺血再灌注损伤有保护作用,其机制与激活核因子E2相关因子2/血红素加氧酶1通路有关。 展开更多
关键词 积雪草苷 缺血再灌注损伤 鸦胆子苦醇 Nrf2/HO-1通路
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鸦胆子苦醇调节Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路对皮肤鳞癌细胞铁死亡的影响 被引量:5
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作者 谌程程 何平 +1 位作者 黄宇婧 陈爱军 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期369-374,共6页
目的:探讨鸦胆子苦醇调节核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)/溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)信号通路对皮... 目的:探讨鸦胆子苦醇调节核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)/溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)信号通路对皮肤鳞癌(cutaneous squamous cell carcinoma,cSCC)细胞铁死亡的影响。方法:CCK-8法检测0、100、250、500、700、900 nmol/L鸦胆子苦醇处理后人cSCC细胞系A431细胞增殖率,筛选出合适的鸦胆子苦醇作用浓度。体外培养的A431细胞随机分为对照组、鸦胆子苦醇低剂量组、鸦胆子苦醇高剂量组、特丁基对苯二酚(tert-butylhydroquinone,TBHQ;Nrf2激活剂)组、鸦胆子苦醇高剂量+TBHQ组,以鸦胆子苦醇和TBHQ分组处理后,采用CCK-8法、Hoechst 33342染色法检测各组A431细胞增殖与凋亡;采用试剂盒检测各组A431细胞抗氧化因子[谷胱甘肽(glutathione,GSH)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)]水平及铁死亡指标[铁含量、活性氧(reactive oxygen species,ROS)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)]水平;采用免疫印迹实验检测各组A431细胞增殖、凋亡及Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路相关蛋白表达。结果:与对照组相比,鸦胆子苦醇低、高剂量组细胞增殖率、GSH及CAT、SOD水平,以及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及Bcl-2、Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白表达均降低(P<0.05),凋亡率、铁含量、ROS及MDA水平和Bax蛋白表达均升高(P<0.05);鸦胆子苦醇高剂量组细胞增殖率、GSH及CAT、SOD水平,以及PCNA及Bcl-2、Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白表达相比鸦胆子苦醇低剂量组进一步降低(P<0.05),凋亡率、铁含量、ROS及MDA水平和Bax蛋白表达进一步升高(P<0.05);TBHQ组细胞增殖率、GSH及CAT、SOD水平,以及PCNA及Bcl-2、Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白表达升高(P<0.05),凋亡率、铁含量、ROS及MDA水平和Bax蛋白表达降低(P<0.05)。与鸦胆子苦醇高剂量组相比,鸦胆子苦醇高剂量+TBHQ组� 展开更多
关键词 鸦胆子苦醇 核因子E2相关因子2/溶质载体家族7成员11/谷胱甘肽过氧化物酶4 皮肤鳞癌 铁死亡
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鸦胆子苦醇抑制人非小细胞肺癌A549细胞转移的机制 被引量:9
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作者 陈果 李蔚 李小惠 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第16期3897-3899,共3页
目的探讨鸦胆子苦醇对人非小细胞肺癌A549细胞转移能力的抑制作用及其机制。方法采用Reed-Muench法计算鸦胆子苦醇对A549细胞的半数致死浓度(LC50);通过CCK-8测定细胞活力绘制增殖曲线和流式细胞周期测定鸦胆子苦醇对A549细胞增殖能力... 目的探讨鸦胆子苦醇对人非小细胞肺癌A549细胞转移能力的抑制作用及其机制。方法采用Reed-Muench法计算鸦胆子苦醇对A549细胞的半数致死浓度(LC50);通过CCK-8测定细胞活力绘制增殖曲线和流式细胞周期测定鸦胆子苦醇对A549细胞增殖能力的影响;采用Transwell法检测鸦胆子苦醇对A549细胞株转移的抑制情况,以及在半数致死浓度的鸦胆子苦醇浓度下不同时间对细胞转移的抑制率;应用Western印迹法检测细胞转移相关蛋白的表达情况。结果非小细胞肺癌A549细胞的增殖能力在鸦胆子苦醇处理后基本没有变化;鸦胆子苦醇处理后A549细胞的转移能力与对照组相比明显下降,且在一定作用时间范围内有时间依赖性;肿瘤转移相关蛋白(BRF)2、胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)、CD151的表达水平在鸦胆子苦醇处理后的细胞中明显下调。结论鸦胆子苦醇是潜在的抗非小细胞肺癌的药物,有必要进一步阐明其抗非小细胞肺癌的分子机制,为临床治疗提供一定的指导意义。 展开更多
关键词 鸦胆子苦醇 非小细胞肺癌 A549细胞 转移
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鸦胆子苦醇通过RhoA/ROCK1信号通路抑制人结直肠癌细胞HCT-116的侵袭和迁移 被引量:9
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作者 卢睿瑾 杜玉梅 +7 位作者 黄世莹 唐加峰 张滔 何爽 徐航 陈地龙 冉建华 李静 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1360-1365,共6页
目的探讨鸦胆子苦醇(brusatol,BRU)对结直肠癌细胞HCT-116侵袭和迁移的影响和可能的作用机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度的BRU对HCT-116细胞增殖能力的影响;划痕和Transwell实验检测BRU对HCT-116细胞迁移能力和侵袭能力的影响;Wester... 目的探讨鸦胆子苦醇(brusatol,BRU)对结直肠癌细胞HCT-116侵袭和迁移的影响和可能的作用机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度的BRU对HCT-116细胞增殖能力的影响;划痕和Transwell实验检测BRU对HCT-116细胞迁移能力和侵袭能力的影响;Western blot检测BRU和ROCK抑制剂(Y27632)对HCT-116细胞中迁移侵袭相关蛋白MMP2、MMP9和RhoA、ROCK1表达的影响。结果CCK-8结果显示,经过BRU(0、2.5、5、10、20、40、80、160、320 nmol·L^(-1))处理HCT-116细胞24、48、72 h后,BRU对HCT-116细胞的抑制率明显升高,并且呈浓度和时间依赖性;划痕和Transwell实验结果显示,BRU能明显抑制HCT-116细胞的迁移和侵袭能力;Western blot结果表明,BRU和Y27632都能够明显减少HCT-116细胞中的MMP2、MMP9、RhoA和ROCK1蛋白的表达。结论BRU可能通过RhoA/ROCK1通路抑制结直肠癌细胞HCT-116的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 鸦胆子苦醇 结肠癌 HCT-116 迁移 侵袭 RhoA/ROCK1
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鸦胆子苦醇抑制H1299非小细胞肺癌细胞增殖和促进其凋亡的机制 被引量:7
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作者 何爽 杜玉梅 +6 位作者 唐加峰 黄世莹 张滔 卢睿瑾 李静 徐航 陈地龙 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期360-366,共7页
目的研究鸦胆子苦醇(brusatol,BRU)对H1299非小细胞肺癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法使用CCK-8法与EdU实验检测BRU对细胞增殖的影响;克隆形成实验检测BRU对细胞克隆形成的影响;Hoechst33258染色实验与流式细胞仪观察细胞凋亡情况... 目的研究鸦胆子苦醇(brusatol,BRU)对H1299非小细胞肺癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法使用CCK-8法与EdU实验检测BRU对细胞增殖的影响;克隆形成实验检测BRU对细胞克隆形成的影响;Hoechst33258染色实验与流式细胞仪观察细胞凋亡情况;Western blot检测Bax、Bcl-2、Bcl-xL、cleaved-caspase-3、caspase-3、Gadd45α、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、细胞核与胞质中NF-κB-p65的蛋白质水平。结果CCK-8实验发现,随着BRU浓度与作用时间的增加,H1299细胞受到的抑制作用逐渐增强;EdU实验显示,BRU处理组的EdU掺入率明显下降;克隆形成实验结果显示,BRU能抑制H1299细胞的克隆形成能力;Hoechst33258实验与流式细胞仪检测发现,BRU能使H1299细胞胞核呈现凋亡状态并增加其凋亡率;Western blot显示BRU可上调Bax、cleaved-caspase-3、Gadd45α,下调Bcl-xL、Bcl-2、caspase-3、p-PI3K、p-Akt与胞核中p65的蛋白质水平。结论BRU以浓度和时间依赖抑制H1299细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路的激活并抑制NF-κB-p65的核转运有关。 展开更多
关键词 鸦胆子苦醇 非小细胞肺癌 增殖 凋亡 PI3K/AKT通路 NF-κB-p65
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鸦胆子苦醇对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响 被引量:8
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作者 崔玲娣 刘凯 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2019年第5期44-48,共5页
目的观察鸦胆子苦醇(BRU)对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响,探讨其作用机制。方法用BRU处理MCF-7细胞。采用CCK-8法和流式细胞术检测MCF-7细胞抑制率和凋亡率,Western blot检测线粒体凋亡通路和内质网应激(ERS)相关蛋白的表达,利用免疫荧... 目的观察鸦胆子苦醇(BRU)对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响,探讨其作用机制。方法用BRU处理MCF-7细胞。采用CCK-8法和流式细胞术检测MCF-7细胞抑制率和凋亡率,Western blot检测线粒体凋亡通路和内质网应激(ERS)相关蛋白的表达,利用免疫荧光技术实现Nrf2和p53蛋白定位。结果与对照组比较,BRU显著抑制MCF-7细胞增殖,110 nmol/L BRU诱导MCF-7细胞凋亡有时间依赖性。110 nmol/L BRU显著降低Nrf2及下游蛋白表达,显著增加GRP78、p-PERK/PERK、p-e IF2α/e IF2α、ATF4、CHOP、Apaf-1、Bax/Bcl-2、CytochromeC、Cleaved-caspase3、p53和p21蛋白的表达(P<0.05,P<0.01,P<0.001),细胞核Nrf2蛋白含量减少、p53蛋白含量增加。结论 BRU通过诱发ERS,抑制Nrf2蛋白表达和核转移,破坏抗氧化作用,诱导MCF-7细胞凋亡。 展开更多
关键词 鸦胆子苦醇 人乳腺癌MCF-7细胞 内质网应激 细胞凋亡
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鸦胆子苦醇增强子宫内膜癌类器官对孕激素敏感性的研究 被引量:4
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作者 孙翟 张秋菊 张箴波 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2021年第8期561-566,共6页
目的:探索建立子宫内膜癌类器官的培养体系,利用类器官模型进行子宫内膜癌药物敏感性的初步检测。方法:宫腔镜或腹腔镜手术获取子宫内膜癌患者新鲜肿瘤组织,经剪切、消化,用Matrigel基质胶重悬并铺板,添加含多种细胞因子的类器官专用培... 目的:探索建立子宫内膜癌类器官的培养体系,利用类器官模型进行子宫内膜癌药物敏感性的初步检测。方法:宫腔镜或腹腔镜手术获取子宫内膜癌患者新鲜肿瘤组织,经剪切、消化,用Matrigel基质胶重悬并铺板,添加含多种细胞因子的类器官专用培养基3D培养。加醋酸甲羟孕酮(MPA)、鸦胆子苦醇(Brusatol)单独或联合处理后,镜下观察统计类器官数目及大小。收集正常子宫内膜和子宫内膜癌类器官制成石蜡切片,HE染色后进行形态学对比和病理学分析,子宫内膜癌类器官经免疫组化染色,研究AKR1C1的表达。结果:患者来源肿瘤组织经基质胶3D培养可见子宫内膜癌类器官生长,其形态学与正常子宫内膜类器官呈现明显差异,形态不规则呈团块状,细胞排列紊乱,腺腔组织结构基本消失,细胞核有异型性。对MPA耐药的内膜癌类器官,经Brusatol或Brusatol+MPA联合处理后,增殖受到抑制,且联合用药组抑制作用更显著。经HE染色和免疫组化分析,联合用药组部分内膜癌类器官组织形态上有向正常内膜转化的趋势,孕激素耐药相关分子AKR1C1的表达水平显著降低。结论:成功建立了子宫内膜癌类器官培养体系,并利用类器官模型初步验证了Brusatol增强子宫内膜癌对孕激素的敏感性。 展开更多
关键词 类器官 子宫内膜癌 孕激素治疗 brusatol AKR1C1
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Brusatol:A potential anti-tumor quassinoid from Brucea javanica 被引量:6
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作者 Xiao-qi Yu Xin-yue Shang +2 位作者 Xiao-xiao Huang Guo-dong Yao Shao-jiang Song 《Chinese Herbal Medicines》 CAS 2020年第4期359-366,共8页
Brusatol,a triterpene lactone compound mainly from Brucea javanica,sensitizes a broad spectrum of cancer cells.It is known as a specific inhibitor of nuclear factor-erythroid 2-related factor 2(Nrf2)pathway.In this re... Brusatol,a triterpene lactone compound mainly from Brucea javanica,sensitizes a broad spectrum of cancer cells.It is known as a specific inhibitor of nuclear factor-erythroid 2-related factor 2(Nrf2)pathway.In this review,we provide a comprehensive overview on the antitumor effect and molecular mechanisms of brusatol in vitro and in vivo.This review also covers pharmacokinetics studies,modification of dosages forms of brusatol.Increasing evidences have validated the value of brusatol as a chemotherapeutic agent in cancers,which may contribute to drug development and clinical application. 展开更多
关键词 ANTITUMOR Brucea javanica(L.)Merr. brusatol triterpene lactone
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鸦胆子苷B与肠道菌群相互作用及对人肺癌A549细胞的抑制作用
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作者 石凌钰 王文敏 +4 位作者 冯育林 杨世林 万阳 陈道峰 温泉 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第13期160-166,共7页
目的:分析鸦胆子苷B和肠道菌群相互作用,以及其代谢产物对人肺癌A549细胞的抑制活性,探讨鸦胆子苷B对非小细胞肺癌(NSCLC)治疗的价值。方法:采用肠道菌群体外温孵培养法,将鸦胆子苷B与人肠道菌群体外共孵育,通过超高效液相色谱-四极杆-... 目的:分析鸦胆子苷B和肠道菌群相互作用,以及其代谢产物对人肺癌A549细胞的抑制活性,探讨鸦胆子苷B对非小细胞肺癌(NSCLC)治疗的价值。方法:采用肠道菌群体外温孵培养法,将鸦胆子苷B与人肠道菌群体外共孵育,通过超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)分析代谢转化产物。采用细胞增殖与活性检测法(CCK-8法)检测原型物鸦胆子苷B及其代谢产物对人肺癌A549细胞增殖的影响并计算半数抑制浓度(IC_(50))。取健康雄性大鼠5只,经灌胃给药鸦胆子苷B药液(2 mg·kg^(-1)),连续7 d,分别采集大鼠给药前和给药后的粪便,基于16S rRNA高通量测序分析鸦胆子苷B给药前后肠道菌群变化。结果:鸦胆子苷B可被人肠道菌群经脱糖基水解代谢为鸦胆子苦醇,原型物和转化产物对A549细胞的IC50分别为1755.50、19.57μmol·L^(-1),代谢产物对A549细胞增殖的抑制活性显著优于鸦胆子苷B。肠道菌群分析结果显示,与给药前比较,给药后大鼠肠道菌群α多样性和β多样性未发生明显变化。物种丰度方面,门水平上,鸦胆子苷B降低了放线菌门、变形菌门的物种相对丰度,增加了厚壁菌门、髌骨菌门、蓝细菌门的物种相对丰度;属水平上,鸦胆子苷B降低了葡萄球菌属、气球菌属、嗜冷菌属的物种相对丰度,增加了罗姆布茨菌属、乳杆菌属、狭义梭菌属1、Norank-f-norank-o-Clostridia-UCG-014、苏黎世杆菌属、异杆菌属、糖杆菌念珠菌属的物种相对丰度。功能预测结果显示,与给药前比较,给药后大鼠肠道功能均未发生显著变化。结论:鸦胆子苷B可在肠道菌群作用下脱糖基,转化为苷元鸦胆子苦醇,抗肿瘤活性显著提高。服用鸦胆子苷B不会使肠道菌群结构和功能发生显著变化,造成肠道微生态平衡失调,且给药鸦胆子苷B后出现对NSCLC患者有益的肠道菌群变化。 展开更多
关键词 鸦胆子 鸦胆子苷B 鸦胆子苦醇 肠道菌群 代谢转化 人肺癌A549细胞 非小细胞肺癌(NSCLC) 16S rRNA高通量测序
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不同浓度鸦胆子苦醇对小鼠矽肺纤维化的影响
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作者 康慧敏 李柔 +2 位作者 王汉钦 郑云帆 陈适 《环境与职业医学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期539-545,共7页
[背景]矽肺是一种肺部弥漫性纤维化疾病,由长期暴露于游离二氧化硅(SiO_(2))粉尘引起,发病机制复杂,缺乏有效的治疗。鸦胆子苦醇(Bru)具有多种生物活性,其在矽肺纤维化中的作用尚不明确。[目的]探究不同浓度Bru对SiO_(2)诱导小鼠矽肺纤... [背景]矽肺是一种肺部弥漫性纤维化疾病,由长期暴露于游离二氧化硅(SiO_(2))粉尘引起,发病机制复杂,缺乏有效的治疗。鸦胆子苦醇(Bru)具有多种生物活性,其在矽肺纤维化中的作用尚不明确。[目的]探究不同浓度Bru对SiO_(2)诱导小鼠矽肺纤维化的影响。[方法]将30只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、矽尘组、Bru低剂量(1 mg·kg^(-1))组、Bru中剂量(2 mg·kg^(-1))组、Bru高剂量(4 mg·kg^(-1))组,每组6只;除对照组外,其余各组均采用一次性非气管暴露法滴注50μL、60 mg·mL^(-1)SiO_(2)悬浊液建立矽肺小鼠模型,对照组滴注等量生理盐水;Bru组于染尘的同时腹腔注射Bru,连续注射5d,随后隔天注射,染尘28 d后处死小鼠,收集肺组织。测定小鼠肺系数;采用苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察小鼠肺组织的病理变化;Western blot法检测小鼠肺组织中凋亡蛋白Cleaved-caspase 3、纤维化相关蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(Col-I)、自噬相关蛋白Beclin1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Sequestosome 1(p62/SQSTM1)蛋白、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1),核因子E2相关因子2(Nrf2)的表达水平;实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测小鼠肺组织中Caspase 3、α-SMA和Col-lmRNA水平。[结果]与对照组相比,矽尘组小鼠的肺系数明显升高(P<0.01);肺组织中肺泡壁受损,出现炎性细胞浸润、纤维结节和胶原纤维沉积;Cleaved-caspase 3、α-SMA和Col-I的蛋白表达及转录水平均明显上调(P<0.01);Beclin1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、p62、Nrf2表达水平增加(P<0.05,P<0.01),而Keap1表达水平下降(P<0.05)。与矽尘组相比,Bru低、中剂量组小鼠肺系数降低(P<0.05);肺组织的病理损伤及胶原沉积明显改善;Cleaved-caspase 3、α-SMA和Col-I的蛋白表达及转录水平下降(P<0.05,P<0.01),Beclin1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、p62、Nrf2表达水平也均明显下降(P<0.05,P<0.01),中剂量组Keap1水平上升(P<0.05)。与矽尘组相比,Bru 展开更多
关键词 矽肺 鸦胆子苦醇 肺纤维化 自噬 凋亡
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鸦胆子饮片及药渣的抗肿瘤活性比较及其鸦胆子苦醇和鸦胆子苦素A的含量测定 被引量:6
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作者 严国俊 韩露 +5 位作者 谢辉 苏联麟 马晓斐 张倩 陆兔林 毛春芹 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期714-718,共5页
目的比较鸦胆子饮片及提油后药渣的抗肿瘤活性,并比较两者的苦木内酯类成分鸦胆子苦醇及鸦胆子苦素A的含量。方法采用实时电子细胞分析技术(RTCA)考察鸦胆子饮片及药渣对A549细胞的抑制效应,并采用高效液相色谱法同时测定两者的鸦胆子... 目的比较鸦胆子饮片及提油后药渣的抗肿瘤活性,并比较两者的苦木内酯类成分鸦胆子苦醇及鸦胆子苦素A的含量。方法采用实时电子细胞分析技术(RTCA)考察鸦胆子饮片及药渣对A549细胞的抑制效应,并采用高效液相色谱法同时测定两者的鸦胆子苦醇及鸦胆子苦素A的含量。结果鸦胆子饮片及药渣对A549细胞都具有一定的抑制效应,饮片和药渣的IC50值分别为4.576~7.256 mg/mL和4.115~9.766 mg/mL,鸦胆子饮片和鸦胆子药渣中鸦胆子苦醇及鸦胆子苦素A的总含量分别为0.113 9%~0.143 5%和0.110 0%~0.135 9%。结论鸦胆子饮片及药渣都具有一定的抗肿瘤活性,药渣中的抗肿瘤活性成分鸦胆子苦醇及鸦胆子苦素A的含量与饮片比较,没有显著差异,鸦胆子提油后的药渣可针对苦木内酯类成分进行深入研究开发和资源综合利用。 展开更多
关键词 鸦胆子 实时电子细胞分析技术 鸦胆子苦醇 鸦胆子苦素A 含量测定
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鸦胆子苦醇调节cGAS-STING信号通路对肝癌荷瘤小鼠肿瘤生长及免疫功能的影响 被引量:2
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作者 李赟 孙燕玲 +2 位作者 李涛岚 吴喆 廖文莉 《药物评价研究》 CAS 2023年第9期1949-1954,共6页
目的 探讨鸦胆子苦醇调节环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激因子(STING)信号通路对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长及免疫功能的影响。方法 通过左前肢腋窝sc接种H22细胞建立荷瘤小鼠模型,随机分为模型组,鸦胆子苦醇低、中、高剂量... 目的 探讨鸦胆子苦醇调节环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激因子(STING)信号通路对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长及免疫功能的影响。方法 通过左前肢腋窝sc接种H22细胞建立荷瘤小鼠模型,随机分为模型组,鸦胆子苦醇低、中、高剂量(0.916、1.832、3.664 mg·kg^(-1),ig给药)组,鸦胆子苦醇(3.664 mg·kg^(-1),ig给药)+RU.521(5 mg·kg^(-1),ip给药)组。干预结束后,取胸腺、脾脏、肿瘤称质量,测定小鼠胸腺和脾脏指数、抑瘤率;T淋巴细胞转化实验检测T淋巴细胞增殖指数;检测巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力;收集血清,试剂盒法检测白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;Western blotting法检测肿瘤组织中cGAS、STING蛋白表达水平。结果 与对照组相比,模型组小鼠胸腺和脾脏指数、吞噬指数、吞噬百分率、T淋巴细胞增殖指数、IL-2和TNF-α水平显著下降(P<0.05);与模型组相比,鸦胆子苦醇低、中、高剂量组小鼠胸腺和脾脏指数、吞噬指数、吞噬百分率、T淋巴细胞增殖指数、IL-2和TNF-α水平、cGAS和STING蛋白表达显著增加(P<0.05),瘤质量显著降低(P<0.05),且作用均呈现剂量相关性;与鸦胆子苦醇高剂量组相比,鸦胆子苦醇+RU.521组胸腺和脾脏指数、吞噬指数、吞噬百分率、T淋巴细胞增殖指数、IL-2和TNF-α水平、cGAS和STING蛋白表达显著下降(P<0.05),瘤质量显著增加(P<0.05)。结论 鸦胆子苦醇通过激活cGAS-STING信号通路抑制肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长,增强其免疫功能。 展开更多
关键词 鸦胆子苦醇 cGAS-STING信号通路 肝癌H22 荷瘤小鼠 免疫功能
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鸦胆子苦醇调节SPHK1/S1P/S1PR3信号通路对卵巢癌细胞恶性生物学行为的影响
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作者 钟明艳 杨帆 +2 位作者 李海珍 占琪 张伟 《中国药房》 CAS 北大核心 2024年第16期1991-1997,共7页
目的探讨鸦胆子苦醇调节鞘氨醇激酶1(SPHK1)/鞘氨醇-1-磷酸(S1P)/鞘氨醇-1-磷酸酯受体3(S1PR3)信号通路对卵巢癌细胞恶性生物学行为的影响。方法将体外培养的人卵巢癌细胞株SKOV-3随机分为对照组、鸦胆子苦醇组、SPHK1过表达组、鸦胆子... 目的探讨鸦胆子苦醇调节鞘氨醇激酶1(SPHK1)/鞘氨醇-1-磷酸(S1P)/鞘氨醇-1-磷酸酯受体3(S1PR3)信号通路对卵巢癌细胞恶性生物学行为的影响。方法将体外培养的人卵巢癌细胞株SKOV-3随机分为对照组、鸦胆子苦醇组、SPHK1过表达组、鸦胆子苦醇+空载组、鸦胆子苦醇+SPHK1过表达组,检测各组细胞活力、克隆形成率、迁移数、侵袭数、凋亡率以及增殖相关蛋白[骨髓细胞瘤病毒癌基因同源物(C-myc)]、凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]、上皮间质转化(EMT)相关蛋白[上皮钙黏素(E-cadherin)、神经钙黏素(N-cadherin)]及SPHK1、S1P、S1PR3蛋白表达量。采用SKOV-3细胞构建裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组、鸦胆子苦醇低剂量组、鸦胆子苦醇中剂量组、鸦胆子苦醇高剂量组、SPHK1过表达组、鸦胆子苦醇高剂量+空载组、鸦胆子苦醇高剂量+SPHK1过表达组,检测各组移植瘤生长情况;随机分为对照组、鸦胆子苦醇组、SPHK1过表达组、鸦胆子苦醇+空载组、鸦胆子苦醇+SPHK1过表达组,检测各组移植瘤组织中增殖、凋亡、EMT及SPHK1/S1P/S1PR3信号通路相关蛋白表达量。结果体外实验显示,与对照组相比,鸦胆子苦醇组细胞活力、克隆形成率、迁移数、侵袭数和C-myc、Bcl-2、Ncadherin、SPHK1、S1P、S1PR3蛋白表达量均显著降低(P<0.05),凋亡率和Bax、E-cadherin蛋白表达量均显著升高(P<0.05);过表达SPHK1可减弱鸦胆子苦醇对SKOV-3细胞上述指标的影响。体内实验显示,与对照组相比,鸦胆子苦醇低、中、高剂量组裸鼠干预21 d后的移植瘤体积均显著降低并呈剂量依赖性(P<0.05);高剂量鸦胆子苦醇还可显著降低移植瘤组织中C-myc、Bcl-2、Ncadherin、SPHK1、S1P、S1PR3蛋白表达量(P<0.05),显著升高Bax、E-cadherin蛋白表达量(P<0.05);过表达SPHK1可减弱鸦胆子苦醇对移植瘤组织上述指标的影响。结论鸦胆子苦醇可通过下� 展开更多
关键词 鸦胆子苦醇 SPHK1/S1P/S1PR3信号通路 卵巢癌 恶性生物学行为
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鸦胆子苦醇通过Toll样受体4介导对尖锐湿疣角质形成细胞免疫调节的研究 被引量:2
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作者 吴伟棋 杨娟 +4 位作者 卢秀仪 温柳演 袁绍萍 白艳 吴启文 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1436-1440,共5页
目的探究鸦胆子苦醇(BRU)对尖锐湿疣(CA)角质形成细胞免疫调节的机制。方法收集本院尖锐湿疣组织,并分离CA角质形成细胞。用0、5.0、10.0和20.0 nmol·L^(-1)的BRU处理CA角质形成细胞,分别标记为空白组和低、中、高剂量实验组。将... 目的探究鸦胆子苦醇(BRU)对尖锐湿疣(CA)角质形成细胞免疫调节的机制。方法收集本院尖锐湿疣组织,并分离CA角质形成细胞。用0、5.0、10.0和20.0 nmol·L^(-1)的BRU处理CA角质形成细胞,分别标记为空白组和低、中、高剂量实验组。将本院分离的CA角质形成细胞分为对照组(正常培养的CA角质形成细胞)、高剂量实验组(用20.0 nmol·L^(-1)的BRU处理细胞)、BRU+pcDNA-NC组(转染pcDNA-NC+20.0 nmol·L^(-1)的BRU)、BRU+pcDNA-TLR4组(转染pcDNA-TLR4+20.0 nmol·L^(-1)的BRU)。用CCK-8法和EdU法检测细胞的增殖情况,用实时荧光定量聚合酶链反应法检测Toll样受体4(TLR4)mRNA表达量,用蛋白质印迹法检测各组细胞TLR4和细胞核相关抗原Ki67(Ki67)的表达水平,用酶联免疫吸附试验法检测各组细胞γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-8(IL-8)含量。结果高剂量实验组和空白组的TLR4 mRNA表达量分别为0.32±0.03和1.00±0.08,TLR4蛋白相对表达水平分别为0.36±0.04和1.07±0.11,差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组、高剂量实验组、BRU+pcDNA-NC组和BRU+pcDNA-TLR4组的EdU阳性细胞率分别为(42.36±3.92)%、(21.70±2.42)%、(20.89±1.85)%和(40.43±4.07)%,TLR4蛋白相对表达水平分别为1.02±0.09、0.34±0.03、0.38±0.04和0.79±0.09,Ki67蛋白相对表达水平分别为0.99±0.11、0.44±0.05、0.46±0.04和0.88±0.06,IFN-γ分别为(98.79±7.68)、(165.53±11.57)、(168.01±12.73)和(119.93±8.03)pg·mL^(-1),IL-8分别为(116.41±11.89)、(243.72±19.60)、(248.42±28.17)和(128.11±13.19)pg·mL^(-1)。对照组的上述指标与高剂量实验组比较,BRU+pcDNA-NC组的上述指标与BRU+pcDNA-TLR4组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论BRU可通过调控TLR4的表达,进而抑制CA角质形成细胞增殖,从而参与调控CA的进展。 展开更多
关键词 鸦胆子苦醇 尖锐湿疣 角质形成细胞 TOLL样受体4 细胞增殖
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鸦胆子苦醇通过CC趋化因子配体2-C-C趋化因子受体2信号通路对骨肉瘤细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响 被引量:1
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作者 李浩 戎帅 +1 位作者 刘连涛 李克伟 《中国中医骨伤科杂志》 2023年第12期1-6,14,共7页
目的:探讨鸦胆子苦醇(BRU)调节CC趋化因子配体2(CCL2)-C-C趋化因子受体2(CCR2)信号通路对骨肉瘤(OS)细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响。方法:将骨肉瘤细胞系MG-63分为MG-63组(未处理的MG-63细胞)、L-BRU组(25 nmol/L鸦胆子苦醇处理MG-63... 目的:探讨鸦胆子苦醇(BRU)调节CC趋化因子配体2(CCL2)-C-C趋化因子受体2(CCR2)信号通路对骨肉瘤(OS)细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响。方法:将骨肉瘤细胞系MG-63分为MG-63组(未处理的MG-63细胞)、L-BRU组(25 nmol/L鸦胆子苦醇处理MG-63细胞)、M-BRU组(50 nmol/L鸦胆子苦醇处理MG-63细胞)、H-BRU组(75 nmol/L鸦胆子苦醇处理MG-63细胞)、GW0742组(1μmol/L CCL2-CCR2信号通路激活剂GW0742处理MG-63细胞)、H-BRU+GW0742组(1μmol/L GW0742和75 nmol/L鸦胆子苦醇处理MG-63细胞),MTT法检测鸦胆子苦醇对正常人成骨细胞系hFOB1.19细胞的毒性,CCK8法检测MG-63细胞增殖,流式细胞仪检测MG-63细胞、CD8+T细胞凋亡,ELISA法检测外周血单个核细胞(PBMC)上清液IFN-γ、TNF-α水平,Western Blot法检测CCL2-CCR2通路蛋白以及凋亡相关蛋白水平。结果:0~500 nmol/L鸦胆子苦醇对hFOB1.19细胞无明显毒性影响;与MG-63组相比,L-BRU组、M-BRU组、H-BRU组光密度(OD)值,Bcl-2、CCL2、CCR2、PD-L1蛋白水平及CD8+T细胞的凋亡率均显著降低(P<0.05),凋亡率,IFN-γ、TNF-α水平及Bax、Cleaved-Caspase-3蛋白水平均显著升高(P<0.05),而GW0742组以上指标趋势相反;与H-BRU组相比,H-BRU+GW0742组光密度值,Bcl-2、CCL2、CCR2、PD-L1蛋白水平及CD8+T细胞的凋亡率均显著增加(P<0.05),凋亡率,IFN-γ、TNF-α水平及Bax、Cleaved-Caspase-3蛋白水平均显著降低(P<0.05)。结论:鸦胆子苦醇可能通过抑制CCL2-CCR2信号通路对骨肉瘤细胞增殖、凋亡和免疫逃逸产生影响。 展开更多
关键词 鸦胆子苦醇 骨肉瘤 增殖 凋亡 免疫逃逸 CC趋化因子配体2-C-C趋化因子受体2信号通路
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