胆固醇氧化酶高产菌株的复合诱变选育 被引量：17

1

作者 桑吉 王龙刚 +1 位作者 李忠琴 王武 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期87-89,共3页

为进一步提高产酶水平,本实验采用超声波联合亚硝基胍的复合诱变方法处理胆固醇氧化酶产生菌(甾短杆菌),通过1mg/mL亚硝基胍和超声(200W,50kHz,35min)同时处理细胞悬液,获得一株红色突变株,其产酶活力从0.5U/mL提高到1.21U/mL,酶活提高... 为进一步提高产酶水平,本实验采用超声波联合亚硝基胍的复合诱变方法处理胆固醇氧化酶产生菌(甾短杆菌),通过1mg/mL亚硝基胍和超声(200W,50kHz,35min)同时处理细胞悬液,获得一株红色突变株,其产酶活力从0.5U/mL提高到1.21U/mL,酶活提高了140%。证明该联合诱变手段对甾短杆菌产胆固醇氧化酶具有良好的诱变效果。 展开更多

关键词 胆固醇氧化酶 甾短杆菌 复合诱变 亚硝基胍 超声波

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几丁质降解酶产生菌的分离及其产酶条件的初步研究 被引量：11

2

作者 吴根福 杨志坚 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期641-645,共5页

从土壤中分离出两株几丁质降解能力较强的细菌,经初步鉴定,分别归于假单胞菌属和短杆菌属,命名为Pseudomonassp.ww和Brevibacteriumsp.yy.对这两菌株进行的液体摇瓶发酵试验表明,在肉汤培养基中,yy菌株16h进入稳定期,ww菌株20h进入稳定... 从土壤中分离出两株几丁质降解能力较强的细菌,经初步鉴定,分别归于假单胞菌属和短杆菌属,命名为Pseudomonassp.ww和Brevibacteriumsp.yy.对这两菌株进行的液体摇瓶发酵试验表明,在肉汤培养基中,yy菌株16h进入稳定期,ww菌株20h进入稳定期,而在几丁质培养基中两菌株要培养36h才进入稳定期;在几丁质培养基中对酶活力的测定结果表明:yy菌株培养35h酶活达最高,为8.3U/mL,ww菌株培养30h时酶活最高,达13.3U/mL.用半量肉汤培养基摇瓶培养10h后加入0.2%胶体几丁质的补料分批培养方式,可使酶活高峰时间提前5h,且酶活力也有所增加.yy菌株在30h酶活达最高,为8.4U/mL,ww菌株在25h酶活达最高,为15.6U/mL,若加入的是2%的胶体几丁质,则对菌体,特别是对yy菌株的生长有抑制作用.实验还发现两菌株的几丁质培养物对金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用,对大肠杆菌也有一定的抑制作用,而对黑曲霉和黑根霉几乎没有抑制作用. 展开更多

关键词 几丁质降解酶 产酶条件 短杆菌 假单胞菌 菌株分离 土壤生物化学

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三相分离甾短杆菌胆固醇氧化酶及其性质 被引量：7

3

作者 王龙刚 梁爽 王武 《华东理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第2期190-194,210,共6页

三相分离（TPP）是将硫酸铵与叔丁醇混合后形成有机相、中间沉淀相和水相。在20°C,调节发酵上清液的pH至6.0,加入硫酸铵使终浓度为400 g/L,溶解后加入与上清液等体积的叔丁醇,静置1 h分相,胆固醇氧化酶在有机相和水相之间形成蛋白... 三相分离（TPP）是将硫酸铵与叔丁醇混合后形成有机相、中间沉淀相和水相。在20°C,调节发酵上清液的pH至6.0,加入硫酸铵使终浓度为400 g/L,溶解后加入与上清液等体积的叔丁醇,静置1 h分相,胆固醇氧化酶在有机相和水相之间形成蛋白沉淀,12 000 r/min离心10 min收集中间蛋白相,用pH 7.5,10 mmol/L的磷酸缓冲液溶解。结果表明：利用三相分离技术从乳化体系中分离纯化胆固醇氧化酶,比酶活提高了3.49倍,收率达93%。回收的酶液进一步经过DEAE-Sepharose Fast Flow纯化,比酶活从3.56 U/mg提高到30.15 U/mg。该酶最适反应温度为60°C,最适反应pH为7.5,酶的等电点为8.5,该酶在37°C,pH 6.0~8.0较为稳定。Hg2＋和Ag＋离子完全抑制胆固醇氧化酶的活性。 展开更多

关键词 甾短杆菌 胆固醇氧化酶 分离纯化 三相分离 酶学性质

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Breuilacterium sp.DGCDC—82发酵罐中生产胆固醇氧化酶 被引量：6

4

作者 王龙刚 吕陈峰 等 《无锡轻工大学学报（食品与生物技术）》 CSCD 北大核心 2003年第2期34-37,43,共5页

用Breuilacterium sp.DGCDC-82在7L发酵罐中分批培养。分别对添加剂吐温－80、培养温度、培养基的pH、通风量和搅拌速度 在胆固醇氧化酶的生产中的影响进行了研究。结果显示以上条件均对产酶有影响。在不同的发酵阶段改变发酵操作条件... 用Breuilacterium sp.DGCDC-82在7L发酵罐中分批培养。分别对添加剂吐温－80、培养温度、培养基的pH、通风量和搅拌速度 在胆固醇氧化酶的生产中的影响进行了研究。结果显示以上条件均对产酶有影响。在不同的发酵阶段改变发酵操作条件，发酵20h最高酶活可达1203U／L，生产强度可达60U／（L·h）。既有产地提高了胆固醇氧化酶的产量，又防止了发酵过程中的泡沫外溢。 展开更多

关键词 胆固醇氧化酶 短杆菌 发酵

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短杆菌属产胆固醇氧化酶的发酵条件优化 被引量：6

5

作者 张锐 许晓燕 +4 位作者 孟尧 卢戌 武翠玲 姚明明 孟延发 《中国酿造》 CAS 北大核心 2006年第6期23-28,共6页

短杆菌属(Brevibacterium sp.)是胆固醇氧化酶高产菌,对其进行底物诱导及发酵条件的优化,其最适培养基为蔗糖0.3%,酵母膏0.2%,蛋白胨0.3%,牛肉膏0.3%,K2HPO4 0.1%,MgSO4 0.05%,pH6.8。最适培养条件为接种量5%,24℃培养20h,通气量为50mL... 短杆菌属(Brevibacterium sp.)是胆固醇氧化酶高产菌,对其进行底物诱导及发酵条件的优化,其最适培养基为蔗糖0.3%,酵母膏0.2%,蛋白胨0.3%,牛肉膏0.3%,K2HPO4 0.1%,MgSO4 0.05%,pH6.8。最适培养条件为接种量5%,24℃培养20h,通气量为50mL培养基/250mL三角瓶,200r/min。结果表明,胆固醇氧化酶的酶活力可达到2439U/L,比未优化前195U/L提高了12倍。在pH6.5和温度54℃条件下测得酶米氏常数Km值为7.1×10-5 mol/L。 展开更多

关键词 胆固醇氧化酶 短杆菌属

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仿刺参共附生放线菌Brevibacterium sp.中的环二肽成分的分离和鉴定 被引量：7

6

作者 宫俊 汤华 +5 位作者 耿婉丽 刘宝姝 孙鹏 李玲 李志勇 张文 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1284-1287,共4页

目的对仿刺参共附生放线菌Brevibacterium sp.的次生代谢产物进行研究。方法运用硅胶柱色谱、Seph-adex LH-20凝胶柱色谱、高效液相色谱(HPLC)等现代色谱技术对放线菌的乙酸乙酯提取物进行分离纯化,在核磁共振(NMR)、质谱(MS)等现代波... 目的对仿刺参共附生放线菌Brevibacterium sp.的次生代谢产物进行研究。方法运用硅胶柱色谱、Seph-adex LH-20凝胶柱色谱、高效液相色谱(HPLC)等现代色谱技术对放线菌的乙酸乙酯提取物进行分离纯化,在核磁共振(NMR)、质谱(MS)等现代波谱技术及与文献比对的基础上对其结构进行鉴定。结果共分离得到7个环二肽类化合物,分别鉴定为:环-(L-脯氨酸-L-苯丙氨酸)(1)、环-(L-脯氨酸-L-甲硫氨酸)(2)、环-(L-脯氨酸-L-酪氨酸)(3)、环-(L-脯氨酸-L-缬氨酸)(4)、环-(L-脯氨酸-L-脯氨酸)(5)、环(L-缬氨酸-甘氨酸)(6)、环-(L-脯氨酸-L-亮氨酸)(7)。结论本研究是对仿刺参共附生微生物次生代谢产物研究的首次报道,这7个化合物均为首次从放线菌Brevi-bacterium sp.中分离得到。 展开更多

关键词 海参 仿刺参 放线菌 环二肽

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咪唑乙烟酸降解菌的分离鉴定及降解条件优化 被引量：6

7

作者 吕翻洋 许泽华 +1 位作者 毛晓洁 孙建光 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期163-168,共6页

分离、鉴定除草剂咪唑乙烟酸降解菌IM9603并优化其降解条件。通过形态学,生理生化反应,16S r DNA初步鉴定该菌株分类地位,利用Box-Behnken优化该菌株对咪唑乙烟酸的降解条件。结果显示,初步鉴定该菌株属于表短杆菌属,在条件(p H5.5,温度... 分离、鉴定除草剂咪唑乙烟酸降解菌IM9603并优化其降解条件。通过形态学,生理生化反应,16S r DNA初步鉴定该菌株分类地位,利用Box-Behnken优化该菌株对咪唑乙烟酸的降解条件。结果显示,初步鉴定该菌株属于表短杆菌属,在条件(p H5.5,温度26.2℃,接菌量1 m L(OD600=1))下降解能力最强,菌株IM9603在咪唑乙烟酸初始浓度为50 mg/L的条件下在7d内降解率可达93.08%。分离出的咪唑乙烟酸降解菌属于Brevibacterium epidermidis菌株,该菌株对咪唑乙烟酸具有较高的降解能力,在环境修复方面存在潜在的应用前景。 展开更多

关键词 咪唑乙烟酸 生物降解 短杆菌属 响应面分析

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微生物短杆菌(Brevibacterium sp.)选择性降解制备(R)-扁桃酸 被引量：2

8

作者 张辉 徐岩 《过程工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第5期818-821,共4页

以外消旋扁桃酸为底物,筛选出一株短杆菌Brevibacteriumsp.CCSYU10011,该菌能转化外消旋扁桃酸为(R)-扁桃酸.用全细胞转化法研究发现,其转化过程是不对称降解过程,即选择性降解了(S)-扁桃酸,进而获得(R)-扁桃酸.考察了温度、pH、底物浓... 以外消旋扁桃酸为底物,筛选出一株短杆菌Brevibacteriumsp.CCSYU10011,该菌能转化外消旋扁桃酸为(R)-扁桃酸.用全细胞转化法研究发现,其转化过程是不对称降解过程,即选择性降解了(S)-扁桃酸,进而获得(R)-扁桃酸.考察了温度、pH、底物浓度及细胞量等因素对(S)-扁桃酸降解的影响,转化结束后,收率为48.7%,对映体过量值(e.e.)可达99%. 展开更多

关键词 (R)-扁桃酸 不对称降解 全细胞转化 brevibacterium sp.

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胆固醇氧化酶的发酵条件及酶学性质研究 被引量：1

9

作者 许晓燕 张锐 +4 位作者 谭晓晶 余彩霞 辛渝 杨波 孟延发 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期41-45,共5页

Brevibacterium sp．可以发酵生产胆固醇氧化酶,实验中对该菌种进行了底物诱导及发酵条件的优化, 确定其最适培养基为(%)：蔗糖0．3,酵母膏0．2,蛋白胨0．3,牛内膏0．3,K_2PO_4 0．1,MgSO_4 0．05,pH6．8。最适培养条件为：接种量5%,24... Brevibacterium sp．可以发酵生产胆固醇氧化酶,实验中对该菌种进行了底物诱导及发酵条件的优化, 确定其最适培养基为(%)：蔗糖0．3,酵母膏0．2,蛋白胨0．3,牛内膏0．3,K_2PO_4 0．1,MgSO_4 0．05,pH6．8。最适培养条件为：接种量5%,24℃培养20h,通气量为50mL 培养基/250mL 三角瓶,200r/min。在最适培养基及最适条件下,胆固醇氧化酶的酶活力可达到24．01U/mg,比未优化前1．71U/mg 提高了14倍。该酶具有较强的酸碱稳定性和热稳定性,最适 pH 为6．5,最适温度为54℃。在最适 pH 和温度条件下测得该酶 km 值为7．1 ×10^(-5)mol/L。 展开更多

关键词 胆固醇氧化酶(COD) brevibacterium sp. 发酵 正交实验

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胆固醇氧化酶分批发酵动力学模型的建立 被引量：3

10

作者 王龙刚 王武 《河南工业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2006年第3期66-69,共4页

基于7 L的发酵罐分批发酵实验数据,建立了发酵过程菌体生长、产物生成及基质消耗随时间变化的数学模型.Logistic方程、Luedeking-Piret方程能够很好地分别描述甾短杆菌菌体生长和发酵产酶过程.此外,还建立了基质消耗动力学模型,并将3个... 基于7 L的发酵罐分批发酵实验数据,建立了发酵过程菌体生长、产物生成及基质消耗随时间变化的数学模型.Logistic方程、Luedeking-Piret方程能够很好地分别描述甾短杆菌菌体生长和发酵产酶过程.此外,还建立了基质消耗动力学模型,并将3个动力学模型的预测值和实验值进行了比较.所建立的分批发酵动力学模型能较好地反映胆固醇氧化酶分批发酵过程. 展开更多

关键词 胆固醇氧化酶 分批发酵 动力学模型 短杆菌

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响应面分析应用于短杆菌产酶工艺的优化 被引量：2

11

作者 杨胜利 张慧 +2 位作者 石轩峰 李亚琴 王武 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第6期60-62,共3页

本文研究了用响应面分析法(RSM)优化短杆菌产胆固醇氧化酶的工艺,发现胆固醇添加量及超声处理时间是影响短杆菌产酶最重要的因素。在模拟优化的条件下:胆固醇为4.076g／L,吐温-80为0.2932％(v／v),照射时间为22.361min,COD最大产量1.483... 本文研究了用响应面分析法(RSM)优化短杆菌产胆固醇氧化酶的工艺,发现胆固醇添加量及超声处理时间是影响短杆菌产酶最重要的因素。在模拟优化的条件下:胆固醇为4.076g／L,吐温-80为0.2932％(v／v),照射时间为22.361min,COD最大产量1.483U／mL。 展开更多

关键词 胆固醇 吐温-80 照射时间 超声处理 影响 因素 发现 短杆菌 响应面分析 添加量

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南海珊瑚montipora sp.内生细菌Brevibacterium sp.中的环二肽成分研究Ⅱ 被引量：2

12

作者 郭琼 彭光天 +5 位作者 刘炳新 雷玲芳 陈小洁 邓芸 苏贤君 张翠仙 《中国海洋药物》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期13-19,共7页

目的对南海珊瑚montiporasp.内生细菌Brevibacteriumsp.化学成分进行研究。方法采用硅胶柱色谱,Sephadex LH-20凝胶柱色谱,高效液相柱层析等分离手段对珊瑚内生细菌Brevibacteriumsp.发酵液的乙酸乙酯提取物进行分离纯化,采用NMR、质谱(... 目的对南海珊瑚montiporasp.内生细菌Brevibacteriumsp.化学成分进行研究。方法采用硅胶柱色谱,Sephadex LH-20凝胶柱色谱,高效液相柱层析等分离手段对珊瑚内生细菌Brevibacteriumsp.发酵液的乙酸乙酯提取物进行分离纯化,采用NMR、质谱(MS)等现代波谱解析手段,并与文献对照,鉴定化合物结构。结果分离得到12个已知的环二肽类化合物,其结构分别为环(色-苏)二肽(1)、环(4-羟基-脯-酪)二肽(2)、环(亮-酪)二肽(3)、环(苯丙-丙)二肽(4)、环(异亮-甘)二肽(5)、环(亮-甘)二肽(6)、环(亮-脯)二肽(7)、环(亮-丙)二肽(8)、环(异亮-丙)二肽(9)、环(亮-苏)二肽(10)、环(异亮-缬)二肽(11)、环(异亮-异亮)二肽(12)。结论所有化合物均首次从Brevibacterium属中分离得到。 展开更多

关键词 珊瑚内生细菌 brevibacteriumsp 环二肽 结构解析

原文传递

超声波促进胆固醇的分散对短杆菌产酶的影响 被引量：2

13

作者 杨胜利 张慧 王武 《工业微生物》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期33-35,共3页

通过超声波分散胆固醇过程,研究了各工艺参数超声波剂量、处理时间、胆固醇添加量和乳化剂量等对胆固醇氧化酶产量和残留胆固醇量的影响.结果表明,当超声波剂量为2.5W/mL,胆固醇3.5%o～4.0%o,吐温-80 0.3%,20min作用培养基时酶活达到最高.

关键词 超声波 发酵 胆固醇 短杆菌

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一种胆固醇氧化酶高产菌株筛选方法的建立 被引量：1

14

作者 霍惠芝 张玲 +2 位作者 孙艳 杨海麟 王武 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期643-647,共5页

用亚硝基胍(1mg/mL)与超声波(200W,50kHz)复合诱变的方法,对产胆固醇氧化酶短杆菌Brevibacterium sp.DGCDC-82进行诱变处理,得到一株桔红色突变株其产胆固醇氧化酶能力提高140%,酶活达到1.24U/mL,又用同样的方法对桔红色突变株进行回复... 用亚硝基胍(1mg/mL)与超声波(200W,50kHz)复合诱变的方法,对产胆固醇氧化酶短杆菌Brevibacterium sp.DGCDC-82进行诱变处理,得到一株桔红色突变株其产胆固醇氧化酶能力提高140%,酶活达到1.24U/mL,又用同样的方法对桔红色突变株进行回复突变处理,得到一株白色回复突变株和一株淡粉色回复突变株,两株回复突变株产胆固醇氧化酶的能力又明显下降,酶活分别为0.17U/mL和0.69U/mL。说明短杆菌Brevibacterium sp.产胆固醇氧化酶能力与其产红色素成正相关偶联关系,这种相关性模型的建立可以作为以后诱变或定向进化研究的筛子。 展开更多

关键词 胆固醇氧化酶(COD) 短杆菌 红色素 复合诱变 回复突变

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超声波转化方法将外源性质粒导入甾短杆菌的研究

15

作者 张慧 杨胜利 《天津化工》 CAS 2016年第1期19-22,共4页

目的:建立甾短杆菌的高效超声波转化方法,为利用甾短杆菌重组表达功能基因提供方法基础。方法:采用超声波诱导的方法把外源DNA转化进甾短杆菌基因组中。通过对甾短杆菌生长状态,超声波作用条件等影响因素进行探索。结果:当采用OD600为0.... 目的:建立甾短杆菌的高效超声波转化方法,为利用甾短杆菌重组表达功能基因提供方法基础。方法:采用超声波诱导的方法把外源DNA转化进甾短杆菌基因组中。通过对甾短杆菌生长状态,超声波作用条件等影响因素进行探索。结果:当采用OD600为0.7的菌体制备感受态细胞、超声波强度为400W、作用时间为40min和质粒浓度为0.2 g/L时,转化效率达到最大值,为384个转化子/μg DNA。经抽样PCR鉴定所得到的转化子均为阳性克隆。结论通过优化超声波转化条件,从而获得了高效电转化技术方法。 展开更多

关键词 甾短杆菌 超声波 转化率

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甾短杆菌胆固醇氧化酶基因在大肠杆菌中的表达 被引量：13

16

作者 张玲 霍惠芝 +3 位作者 沈微 杨海麟 邬敏辰 王武 《生物加工过程》 CAS CSCD 2008年第1期21-26,共6页

为了实现胆固醇氧化酶在大肠杆菌中的表达,将甾短杆菌Brevibacteriumsp.DGCDC-82胆固醇氧化酶基因用PCR的方法去掉信号肽序列,连接到质粒pTrc99a,通过筛选得到了表达胆固醇氧化酶的重组菌JM109/pTrc99a-COD。经IPTG诱导后表达出相对分... 为了实现胆固醇氧化酶在大肠杆菌中的表达,将甾短杆菌Brevibacteriumsp.DGCDC-82胆固醇氧化酶基因用PCR的方法去掉信号肽序列,连接到质粒pTrc99a,通过筛选得到了表达胆固醇氧化酶的重组菌JM109/pTrc99a-COD。经IPTG诱导后表达出相对分子质量约为5.5×104的蛋白质。分别考察了诱导温度、时间、IPTG浓度等因素对重组菌表达的胆固醇氧化酶的影响。在优化条件下,该胆固醇氧化酶的酶活可以达到700 U/L。酶学特性分析表明其反应的最适pH为7.5,最适温度为40℃。 展开更多

关键词 brevibacterium sp.DGCDC-82 胆固醇 氧化酶 原核表达 信号肽

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胆固醇氧化酶基因的克隆及在E.coli中的表达 被引量：11

17

作者 王龙刚 邬敏辰 王武 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期39-42,共4页

根据NCBI中报道的BrevibacteriumsterolicumATCC21387胆固醇氧化酶基因序列,采用PCR方法以Brevibacteriumsp.DGCDC-82的基因组为模板,扩增得到了编码胆固醇氧化酶的基因,该基因与来源于BrevibacteriumsterolicumATCC21387的胆固醇氧化... 根据NCBI中报道的BrevibacteriumsterolicumATCC21387胆固醇氧化酶基因序列,采用PCR方法以Brevibacteriumsp.DGCDC-82的基因组为模板,扩增得到了编码胆固醇氧化酶的基因,该基因与来源于BrevibacteriumsterolicumATCC21387的胆固醇氧化酶基因(choB)同源性为98%。将得到的基因定向克隆到pET28a载体中,转化至含有编码argU和proL基因的大肠杆菌BL21-CodonPlus(DE3)-RP中表达。经过IPTG诱导后,经SDS-PAGE检测在约55kD处有一蛋白表达条带,目的蛋白表达量约占总蛋白的16%,经测定酶活为340U/L。 展开更多

关键词 brevibacterium sp.DGCDC-82 胆固醇氧化酶 克隆 原核表达

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信号肽对短杆菌胆固醇氧化酶基因在大肠杆菌中表达的影响 被引量：2

18

作者 张玲 杨海麟 +3 位作者 王龙刚 沈微 邬敏辰 王武 《工业微生物》 CAS CSCD 2009年第5期25-29,共5页

从Brevibacterium sp.DGCDC-82染色体DNA中扩增出含信号肽序列的胆固醇氧化酶结构基因,插入大肠杆菌表达载体pET28a(+)中,构建重组质粒pET28a-COD(s+)。以pET28a-COD(s+)为底物,扩增出不合信号肽的胆固醇氧化酶结构基因,构建成重组质粒p... 从Brevibacterium sp.DGCDC-82染色体DNA中扩增出含信号肽序列的胆固醇氧化酶结构基因,插入大肠杆菌表达载体pET28a(+)中,构建重组质粒pET28a-COD(s+)。以pET28a-COD(s+)为底物,扩增出不合信号肽的胆固醇氧化酶结构基因,构建成重组质粒pET28a-COD(s-)。两种重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3)通过IPTG诱导均获得活性表达,SDS-PAGE分析,目的产物表达量都占到了细胞总蛋白的50%以上,Brevibacterium sp.DGCDC-82胆固醇氧化酶的信号肽对重组酶的空间构象和表达量并没有太大的影响。 展开更多

关键词 信号肽 brevibacterium sp.DGCDC-82 胆固醇氧化酶 原核表达

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谷氨酸产生菌──短杆菌（Brevibacterium　sp．）的液氮保藏 被引量：2

19

作者 方呈祥 张珞珍 +5 位作者 岳莹玉 陶天申 段乃先 徐春华 徐文 郑静 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 1996年第6期18-21,共4页

以甘油作保护剂，用程序控制降温仪控制降温速率，对谷氨酸产生菌短杆菌（Ｂｒｅ－ｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｓｐ．）Ｆ９１１４衍生菌株进行液氮保藏。分别取保藏３～５个月的菌种进行形态观察，未见明显改变。经液氮保藏的菌种和按常规... 以甘油作保护剂，用程序控制降温仪控制降温速率，对谷氨酸产生菌短杆菌（Ｂｒｅ－ｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｓｐ．）Ｆ９１１４衍生菌株进行液氮保藏。分别取保藏３～５个月的菌种进行形态观察，未见明显改变。经液氮保藏的菌种和按常规分纯的菌种进行发酵生产的比较，结果表明液氮保藏的菌种较常规的菌种发酵周期短１．４７％，产酸水平和转化率分别高２％和３．９％。由于液氮保藏能使菌种的主要特性稳定，不需再次分纯，保证随时提供优良菌种用于发酵生产。同时，这种方法避免了因传代过多菌种退化之弊病。 展开更多

关键词 谷氨酸生产菌 短杆菌 程控降温 液氮保藏 谷氨酸

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海藻糖高产株Brevibacterium sp SY361海藻糖磷酸化酶(EC2.4.1.64)的纯化

20

作者 王蕾 黄瑞 +1 位作者 顾冠彬 万海燕 《苏州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第1期69-71,共3页

目的研究分离纯化海藻糖高产株Brevibacterium sp SY361中海藻糖磷酸化酶的工艺,获得高纯度的海藻糖磷酸化酶。方法大量培养细菌Brevibacterium sp SY361,超声粉碎细胞,通过硫酸铵分级沉淀、DEAE-SephadexA-25柱层析和Sephadex G-200凝... 目的研究分离纯化海藻糖高产株Brevibacterium sp SY361中海藻糖磷酸化酶的工艺,获得高纯度的海藻糖磷酸化酶。方法大量培养细菌Brevibacterium sp SY361,超声粉碎细胞,通过硫酸铵分级沉淀、DEAE-SephadexA-25柱层析和Sephadex G-200凝胶过滤等步骤纯化其海藻糖磷酸化酶,并通过SDS-PAGE检测纯化效果。结果经纯化后的海藻糖磷酸化酶纯度提高了35.6倍,比活力达到7.48U/mg,SDS-PAGE呈1条带。结论纯化后的海藻糖磷酸化酶已达到纯度要求,可用于酶性质的研究。 展开更多

关键词 海藻糖磷酸化酶 brevibacterium sp SY361 纯化

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