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白桦E-box元件的载体构建及与BplMYB46转录因子的互作分析
被引量：
2
1
作者
王博
王莲萍
+2 位作者
杨春雨
国会艳
魏继承
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第12期110-115,共6页
MYB转录因子是植物中最大的转录因子家族成员之一,主要参与植物次生代谢调控、激素和环境因子的应答,在植物的生长发育中起着至关重要的作用。已有研究发现,E-box的核心序列为CANNTG(N:A/G/C/T),是一类与光响应和苯丙氨酸生物合成途径...
MYB转录因子是植物中最大的转录因子家族成员之一,主要参与植物次生代谢调控、激素和环境因子的应答,在植物的生长发育中起着至关重要的作用。已有研究发现,E-box的核心序列为CANNTG(N:A/G/C/T),是一类与光响应和苯丙氨酸生物合成途径相关的元件。在前期研究中,先构建顺式作用元件库,然后以转录因子为中心的酵母单杂交技术筛选发现,白桦的BplMYB46转录因子能够与核心序列为CAAATG的E-box顺式作用元件结合。但是,是否能与E-box的其他核心序列结合还不清楚。本研究将每一种E-box顺式作用元件的核心序列分别进行双链DNA的复性并连接到pHIS2载体上,然后通过酵母单杂交技术筛选与BplMYB46转录因子能够特异结合的E-box顺式作用元件。结果显示,当E-box的核心序列第3个碱基为A/T/C、第四个碱基为A/G/C时,酵母单菌落能在三缺培养基TDO/3AT上生长,表明与BplMYB46转录因子结合的E-box顺式作用元件的特异性序列为CA(A/T/C)(A/G/C)TG。为后续通过BplMYB46转录因子与E-box顺式作用元件的结合来分析BplMYB46转录因子对下游基因的调控,以及为筛选优良下游基因改良白桦的遗传性状奠定数据基础。
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关键词
bplmyb
46
转录因子
E-box顺式作用元件
酵母单杂交技术
下载PDF
职称材料
白桦BplMYB46转录因子的原核表达和重组蛋白的纯化
2
作者
国会艳
刘志华
+4 位作者
胡萍
贾园园
张春蕊
杨传平
王玉成
《东北林业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第10期1-5,共5页
从白桦的转录组中发现一个MYB类转录因子Bpl MYB46,将其与拟南芥的MYB类转录因子进行氨基酸序列比对分析,并将其构建到原核表达载体p GEX-4T-2上,获得重组表达载体p GEX-4T-2-Bpl MYB46,然后导入原核表达菌株BL21中,利用异丙基-β-D-硫...
从白桦的转录组中发现一个MYB类转录因子Bpl MYB46,将其与拟南芥的MYB类转录因子进行氨基酸序列比对分析,并将其构建到原核表达载体p GEX-4T-2上,获得重组表达载体p GEX-4T-2-Bpl MYB46,然后导入原核表达菌株BL21中,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖(IPTG)诱导重组蛋白的表达。结果显示:Bpl MYB46属于R2R3-MYB类转录因子;在IPTG终浓度为0.4 mmol/L,30℃条件下诱导4 h后p GEX-4T-2-Bpl MYB46原核蛋白表达量最高,主要为包涵体形式;利用尿素梯度透析法和电洗脱法纯化蛋白,发现电洗脱法成功获得浓度和纯度较高的重组蛋白。
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关键词
白桦
bplmyb
46
转录因子
原核蛋白
蛋白纯化
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职称材料
题名
白桦E-box元件的载体构建及与BplMYB46转录因子的互作分析
被引量：
2
1
作者
王博
王莲萍
杨春雨
国会艳
魏继承
机构
牡丹江师范学院生命科学与技术学院
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第12期110-115,共6页
基金
国家自然科学基金项目(31700587)
黑龙江省教育厅备案项目(1352MSYYB002)
研究生科技创新项目(kjcx 2018-06mdjnu)
文摘
MYB转录因子是植物中最大的转录因子家族成员之一,主要参与植物次生代谢调控、激素和环境因子的应答,在植物的生长发育中起着至关重要的作用。已有研究发现,E-box的核心序列为CANNTG(N:A/G/C/T),是一类与光响应和苯丙氨酸生物合成途径相关的元件。在前期研究中,先构建顺式作用元件库,然后以转录因子为中心的酵母单杂交技术筛选发现,白桦的BplMYB46转录因子能够与核心序列为CAAATG的E-box顺式作用元件结合。但是,是否能与E-box的其他核心序列结合还不清楚。本研究将每一种E-box顺式作用元件的核心序列分别进行双链DNA的复性并连接到pHIS2载体上,然后通过酵母单杂交技术筛选与BplMYB46转录因子能够特异结合的E-box顺式作用元件。结果显示,当E-box的核心序列第3个碱基为A/T/C、第四个碱基为A/G/C时,酵母单菌落能在三缺培养基TDO/3AT上生长,表明与BplMYB46转录因子结合的E-box顺式作用元件的特异性序列为CA(A/T/C)(A/G/C)TG。为后续通过BplMYB46转录因子与E-box顺式作用元件的结合来分析BplMYB46转录因子对下游基因的调控,以及为筛选优良下游基因改良白桦的遗传性状奠定数据基础。
关键词
bplmyb
46
转录因子
E-box顺式作用元件
酵母单杂交技术
Keywords
bplmyb
46
transcription
factor
E-box
cis-acting
element
yeast
one-hybrid
分类号
S792.153 [农业科学—林木遗传育种]
Q943.2 [农业科学—林学]
下载PDF
职称材料
题名
白桦BplMYB46转录因子的原核表达和重组蛋白的纯化
2
作者
国会艳
刘志华
胡萍
贾园园
张春蕊
杨传平
王玉成
机构
牡丹江师范学院
林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学)
出处
《东北林业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第10期1-5,共5页
基金
国家高技术研究发展计划(863)项目(2011AA100202)
文摘
从白桦的转录组中发现一个MYB类转录因子Bpl MYB46,将其与拟南芥的MYB类转录因子进行氨基酸序列比对分析,并将其构建到原核表达载体p GEX-4T-2上,获得重组表达载体p GEX-4T-2-Bpl MYB46,然后导入原核表达菌株BL21中,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖(IPTG)诱导重组蛋白的表达。结果显示:Bpl MYB46属于R2R3-MYB类转录因子;在IPTG终浓度为0.4 mmol/L,30℃条件下诱导4 h后p GEX-4T-2-Bpl MYB46原核蛋白表达量最高,主要为包涵体形式;利用尿素梯度透析法和电洗脱法纯化蛋白,发现电洗脱法成功获得浓度和纯度较高的重组蛋白。
关键词
白桦
bplmyb
46
转录因子
原核蛋白
蛋白纯化
Keywords
Betula
platyphylla
Suk
bplmyb
46
transcription
factor
Prokaryotic
protein
Protein
purification
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
白桦E-box元件的载体构建及与BplMYB46转录因子的互作分析
王博
王莲萍
杨春雨
国会艳
魏继承
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
2
下载PDF
职称材料
2
白桦BplMYB46转录因子的原核表达和重组蛋白的纯化
国会艳
刘志华
胡萍
贾园园
张春蕊
杨传平
王玉成
《东北林业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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引证文献
统计分析
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