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用蛋白印迹试验检测精神分裂症患者血清中博尔纳病病毒-p24抗体的研究 被引量:21
1
作者 杨爱英 张凤民 +4 位作者 李均辉 李桂梅 马培林 谷鸿喜 生田和良 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期85-87,共3页
目的 探讨博尔纳病病毒 (BDV)感染在我国的流行情况及其与精神分裂症的相关性。方法 在对优化表达的GST BDV p2 4融合蛋白进行特异性鉴定的基础上 ,通过确定融合蛋白与第一抗体、第二抗体间的最佳反应条件 ,建立可行的检测BDV p2 4特... 目的 探讨博尔纳病病毒 (BDV)感染在我国的流行情况及其与精神分裂症的相关性。方法 在对优化表达的GST BDV p2 4融合蛋白进行特异性鉴定的基础上 ,通过确定融合蛋白与第一抗体、第二抗体间的最佳反应条件 ,建立可行的检测BDV p2 4特异抗体的蛋白印迹 (Western blot)方法 ,进而对黑龙江地区精神分裂症患者和正常人对照血清中BDV p2 4特异性抗体进行了检测 ,并通过血清 GST蛋白吸收后Western blot实验对阳性血清进行了确认。结果  116例精神分裂症患者中检出BDV p2 4阳性血清 10例 ,阳性检出率为 8.6% ,而正常人血清标本中未检出阳性。结论 我国存在博尔纳病病毒的感染 ,博尔纳病病毒的感染可能与精神分裂症的发生有关。 展开更多
关键词 博尔纳病病毒 蛋白质印迹法 精神分裂症
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宁夏及其周边地区博尔纳病病毒感染的分子流行病学研究 被引量:20
2
作者 王振海 谢鹏 +1 位作者 韩玉霞 詹军 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期479-482,共4页
目的探讨博尔纳病病毒(BDV)在宁夏及其周边地区的流行状况。方法采用巢式逆转录酶聚合酶链反应结合荧光定量PCR检测了52例病毒性脑炎(VE)患者和32名健康人外周血液(PBMC)和脑脊液有核细胞(CSFMC)、53例抑郁症(DD)患者和360只绵羊PBMC中B... 目的探讨博尔纳病病毒(BDV)在宁夏及其周边地区的流行状况。方法采用巢式逆转录酶聚合酶链反应结合荧光定量PCR检测了52例病毒性脑炎(VE)患者和32名健康人外周血液(PBMC)和脑脊液有核细胞(CSFMC)、53例抑郁症(DD)患者和360只绵羊PBMC中BDV p24基因片段,对阳性产物进行基因序列测定、同源性和氨基酸顺序分析;并绘制系统发生树,分析BDV感染的分子流行病学特点。结果BDV p24基因片段阳性率在VE患者CSFMC为11.54%、DD患者PBMC 11.32%明显高于健康人0%(P<0.05);绵羊的PBMC为7.78%与健康人对比差异无统计学意义(P>0.05);系统发生树图形表明,绵羊PBMC目的基因片段与人类VE和DD核苷酸序列亲缘关系最近,来源于一个分支,并与德国H1766病毒株核苷酸序列亲缘关系最近,其变异性较小。结论宁夏及其周边地区部分VE、DD可能与BDV感染有关,健康绵羊存在BDV的自然感染,其流行可能具有一定的地域局限性;人类VE、DD的BDV感染可能存在潜在动物源性,有待于进一步研究。 展开更多
关键词 病毒性脑炎 博尔纳病病毒 巢式逆转录酶荧光定量PCR
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博尔纳病病毒荧光定量套式RT-PCR检测方法的建立 被引量:15
3
作者 徐平 谢鹏 +1 位作者 邹德智 左联 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2003年第6期688-691,696,共5页
目的 :建立博尔纳病病毒 (BDV)荧光定量套式RT -PCR检测方法 ,为快速、准确地定量检测BDV奠定基础。方法 :根据BDVP2 4基因序列 ,设计并合成引物和荧光标记探针。将PCR扩增的BDVP2 4基因片段克隆入载体 ,重组质粒经筛选、鉴定后 ,作为... 目的 :建立博尔纳病病毒 (BDV)荧光定量套式RT -PCR检测方法 ,为快速、准确地定量检测BDV奠定基础。方法 :根据BDVP2 4基因序列 ,设计并合成引物和荧光标记探针。将PCR扩增的BDVP2 4基因片段克隆入载体 ,重组质粒经筛选、鉴定后 ,作为阳性模板 ,用于标准曲线的制定和样品检测。结果 :应用量组质粒制作的定量曲线循环阈值与模板具有良好的线性关系 ,相关系数为 0 .998,建立了检测BDV的荧光定量套式RT -PCR方法。检测 5 8例神经精神病患者及 5 0例健康人外周血单核细胞 (PBMC)中BDVP2 4基因片段 ,3例精神分裂症及l例帕金森病患者呈阳性 ,其余均为阴性。结论 :荧光定量套式RT -PCR方法能够避免PCR后处理导致的假阳性污染 ,并实现准确定量 ,对于研究BDV感染与人类神经精神疾病的关系有很好的应用价值。 展开更多
关键词 博尔纳病病毒 基因 病毒 聚合酶链反应
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病毒性脑炎患者血液和脑脊液博尔纳病病毒p24的检测 被引量:15
4
作者 王振海 谢鹏 +1 位作者 杨平 孔繁元 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期105-108,共4页
目的探讨博尔纳病病毒(BDV)与病毒性脑炎(VE)的关系。方法采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)结合荧光定量(FQ)PCR检测了52例VE患者和32例外科手术患者外周血液(PBMC)和脑脊液有核细胞(CSFMC)中的BDV p24基因片段,对阳性产物进行了基... 目的探讨博尔纳病病毒(BDV)与病毒性脑炎(VE)的关系。方法采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)结合荧光定量(FQ)PCR检测了52例VE患者和32例外科手术患者外周血液(PBMC)和脑脊液有核细胞(CSFMC)中的BDV p24基因片段,对阳性产物进行了基因序列测定、同源性和氨基酸顺序分析。结果VE患者PBMC和CSFMC中BDV p24基因片段阳性率(分别为9.6%和11.5%)明显高于对照组(0,P<0.05);PBMC和CSFMC中BDV p24基因片段拷贝数的对数值呈显著正相关(r=0.653,P<0.05);CSFMC所含目的基因片段阳性产物测序后,与BDV标准病毒株V核苷酸序列比较同源性为96.5%,在3个位点出现突变(nt1649T→C,nt1670C→T,nt1673C→T),突变率为3.5%。从系统发生树图形可以看出,该目的基因片段与澳大利亚马脑组织分离的S88和德国绵羊血液分离的H544病毒株亲缘关系最近。结论宁夏及其周边地区部分VE患者中可能存在BDV感染。 展开更多
关键词 脑炎 病毒性 borna病病毒 病毒蛋白质类 逆转录聚合酶链反应
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中国慢性疲劳综合征患者血浆中BDV-p24抗体的检测 被引量:14
5
作者 李永杰 王得新 +3 位作者 张凤民 刘占东 杨爱英 生田和良 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期330-333,共4页
目的检测博尔纳病病毒(BDV)对中国慢性疲劳综合征(CFS)患者和健康对照者感染的情况,探讨CFS与BDV感染之间的相关性。方法按美国CDC 1994年标准,搜集来自全国十一省市的CFS患者61例和健康对照73例,使用蛋白印迹法(WB)对其血浆进行BDV-p2... 目的检测博尔纳病病毒(BDV)对中国慢性疲劳综合征(CFS)患者和健康对照者感染的情况,探讨CFS与BDV感染之间的相关性。方法按美国CDC 1994年标准,搜集来自全国十一省市的CFS患者61例和健康对照73例,使用蛋白印迹法(WB)对其血浆进行BDV-p24抗体检测。结果 病例组有7例为阳性结果(11.48%),对照组均为阴性(0%),统计学处理两组间差异有显著意义(P<0.010)。结论中国CFS患者存在BDV感染,病例组感染率明显高于对照组,CFS与BDV感染存在相关性。 展开更多
关键词 中国慢性疲劳综合征 博尔纳病病毒 BDV CFS 病因学 抗原 血清
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重庆市山羊博尔纳病病毒P24基因的检测 被引量:11
6
作者 赵立波 谢鹏 +4 位作者 牟君 李亚军 张小东 邹德智 刘庆军 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期460-463,共4页
为了解重庆市山羊博尔纳病隐性带毒情况,分析博尔纳病病毒(BDV)的种系来源。采用巢式逆转录酶PCR结合荧光定量PCR(FQ-nRT-PCR)技术对重庆市60只山羊外周血单核细胞 (PBMCs)及脑组织中的BDV P24基因片段进行了检测,将阳性产物测序,并与国... 为了解重庆市山羊博尔纳病隐性带毒情况,分析博尔纳病病毒(BDV)的种系来源。采用巢式逆转录酶PCR结合荧光定量PCR(FQ-nRT-PCR)技术对重庆市60只山羊外周血单核细胞 (PBMCs)及脑组织中的BDV P24基因片段进行了检测,将阳性产物测序,并与国外BDV毒株进行了比较。结果,山羊外周血检测阳性率为8.3%(5/60),脑组织检测阳性率为10%(6/60)。该 BDV P24片段核苷酸序列与马源BDV H1766株同源性最高,达96.51%,与标准株Strain V和 He/80同源性为95.35%,并且编码的氨基酸序列也相同。表明,重庆市山羊中存在动物源性博尔纳病隐性带毒。该BDV P24核苷酸序列与Strain V和He/80株具有高度同源性。 展开更多
关键词 博尔纳病病毒 P24基因 荧光定量PCR 山羊
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病毒性脑炎患者Borna病病毒P24基因片段的检测 被引量:14
7
作者 徐平 谢鹏 邹德智 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期309-312,共4页
目的探讨Borna病病毒(BDV)感染与人类病毒性脑炎的关系。方法采用荧光定量套式逆转录酶聚合酶链反应(FQ nRT PCR)检测了59例临床诊断的原因未明的病毒性脑炎及112名健康人外周血单个核细胞(PBMC)中BDVP24基因片段。结果59例原因未明的... 目的探讨Borna病病毒(BDV)感染与人类病毒性脑炎的关系。方法采用荧光定量套式逆转录酶聚合酶链反应(FQ nRT PCR)检测了59例临床诊断的原因未明的病毒性脑炎及112名健康人外周血单个核细胞(PBMC)中BDVP24基因片段。结果59例原因未明的病毒性脑炎患者中有3例PBMC中检出BDVP24基因片段,而112名健康对照均未检出。病毒性脑炎患者BDV阳性率(5.08%)高于健康对照,差异有统计学意义(P<0.05),且BDVP24基因片段检测阳性病例的脑脊液中其他常见致脑炎病毒(单纯疱疹病毒、带状疱疹病毒、腮腺炎病毒、柯萨奇病毒和巨细胞病毒)检查均为阴性。结论中国的部分病毒性脑炎患者中存在BDV感染,BDV感染与病毒性脑炎的发病可能有关。 展开更多
关键词 病毒性脑炎 基因片段 borna病病毒 患者 检测 套式逆转录酶聚合酶链反应 P24 人外周血单个核细胞 Boma病病毒 单纯疱疹病毒 带状疱疹病毒 原因未明 腮腺炎病毒 巨细胞病毒 柯萨奇病毒 BDV 临床诊断 荧光定量 PBMC 脑炎病毒
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病毒性脑炎患者血液和脑脊液博尔纳病病毒p24核苷酸片段的检测 被引量:10
8
作者 郭振元 徐平 姚能云 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期193-197,共5页
目的探讨博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)与病毒性脑炎(Viral encephalitis,VE)的关系,以及贵州遵义地区是否存在BDV感染。方法采用巢式逆转录荧光定量PCR(FQ-nRT-PCR)检测了32例VE患者和34例对照组(非神经系统疾病外科手术患者... 目的探讨博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)与病毒性脑炎(Viral encephalitis,VE)的关系,以及贵州遵义地区是否存在BDV感染。方法采用巢式逆转录荧光定量PCR(FQ-nRT-PCR)检测了32例VE患者和34例对照组(非神经系统疾病外科手术患者)外周血单核细胞(peripheral blood monouclear cells,PBMC)和脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)中的BDV p24基因片段。结果VE患者PBMC和CSF中BDV p24基因片段阳性率均为12.5%。明显高于对照组(0%,Fisher精确概率检验:χ2=4.524,P<0.05);PCR扩增目的基因片段阳性产物测序后,与NCBI网站GenBank提供的BDV标准病毒株V和H1766病毒核苷酸序列比较同源性为95.35%和98.84%,在4个位点出现突变(nt1649T→C,nt1656G→A,nt1670C→T,nt1676C→T),突变率为4.65%;与H1766病毒株亲缘关系最近。结论遵义及其周边地区部分VE患者中存在BDV感染,并可能与病毒性脑炎发病有关。 展开更多
关键词 病毒性脑炎 borna病病毒 逆转录聚合酶链反应
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重庆地区精神疾病患者Borna病病毒感染的初步报道 被引量:10
9
作者 邹德智 谢鹏 +4 位作者 徐平 吴伟 蒙华庆 陈大伟 左联 《中华精神科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期228-230,共3页
目的 研究中国人中是否存在Borna病病毒 (BDV)感染 ,以及探讨BDV感染是否与人类精神疾病有关。方法 收集精神疾病患者 80例 (精神分裂症 5 0例 ,情感性精神障碍 30例 )和健康献血者标本 6 0名。每例采血 10ml,分离外周血单个核细胞 ,... 目的 研究中国人中是否存在Borna病病毒 (BDV)感染 ,以及探讨BDV感染是否与人类精神疾病有关。方法 收集精神疾病患者 80例 (精神分裂症 5 0例 ,情感性精神障碍 30例 )和健康献血者标本 6 0名。每例采血 10ml,分离外周血单个核细胞 ,提取RNA ;用BDV P2 4基因特异性内外引物进行套式逆转录聚合酶链反应 ,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳和特异性探针的Southern印迹杂交检测。结果  5 0例精神分裂症患者中检出BDV P2 4基因片段 5例 ( 10 % ) ,6 0名健康对照者均未检出 ,两者间的差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;30例情感性精神障碍患者中检出 1例 ( 3% ) ,与健康对照者的差异无显著性。结论 重庆地区精神疾病患者中存在BDV感染 ; 展开更多
关键词 精神疾病 精神分裂症 情感性精神障碍 Boma病病毒 感染
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用巢式RT-PCR检测精神分裂症患者血液标本中博尔纳病病毒p24基因 被引量:7
10
作者 李桂梅 马培林 +3 位作者 张凤民 林玉奇 谷鸿喜 生田和良 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2003年第2期71-72,75,共3页
目的 :检测精神分裂症患者外周血单个核细胞 ( peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)标本中博尔纳病病毒 ( Borna Disease Virus,BDV) p2 4基因 ,探讨 BDV感染与精神分裂症的关系。方法 :用巢式 RT- PCR方法检测黑龙江省精神分裂... 目的 :检测精神分裂症患者外周血单个核细胞 ( peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)标本中博尔纳病病毒 ( Borna Disease Virus,BDV) p2 4基因 ,探讨 BDV感染与精神分裂症的关系。方法 :用巢式 RT- PCR方法检测黑龙江省精神分裂症患者及正常人 PBMCs中 BDV- p2 4基因片段 ,同时扩增 β-肌动蛋白 ( β- actin)作为内参照。结果 :6 6例精神分裂症患者中 ,BDV- p2 4基因的阳性检出率为 2 8.8% ( 19/6 6 ) ;4 7例正常人中 ,BDV- p2 4基因的阳性检出率为 6 .3% ( 3/47) ,经比较两者间阳性率差异有显著性 ( P<0 .0 5 )结论 :证实中国存在 BDV感染 ,黑龙江省精神分裂症的发生可能与 展开更多
关键词 巢式RT-PCR 精神分裂症 血液标本 博尔纳病病毒 p24基因 单个核细胞 检测
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中国精神病人外周血博尔纳病病毒P24基因片段检测 被引量:7
11
作者 徐平 谢鹏 +1 位作者 邹德智 左联 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第6期471-473,476,共4页
目的 探讨博尔纳病病毒与人类精神疾病的关系。方法 采用套式逆转录酶聚合酶链反应(nested RT-PCR)结合荧光定量(FQ)PCR检测了31例精神分裂症病人,16例情感障碍病人以及50例健康人外周血单个核细胞(PBMC)中BDV P24基因片段。结果精神分... 目的 探讨博尔纳病病毒与人类精神疾病的关系。方法 采用套式逆转录酶聚合酶链反应(nested RT-PCR)结合荧光定量(FQ)PCR检测了31例精神分裂症病人,16例情感障碍病人以及50例健康人外周血单个核细胞(PBMC)中BDV P24基因片段。结果精神分裂症组BDV P24基因片段阳性率为9.7%(3/31);情感障碍组(0/16)和健康组(0/50)均为阴性。精神分裂症组阳性率高于健康组,但差异无显著性意义(P>0.05)。结论 中国的精神病人中存在BDV感染,但BDV感染是否与精神分裂症发病相关有待进一步研究。 展开更多
关键词 精神分裂症 情感障碍 博尔纳病病毒 套式逆转录酶聚合酶链反应 荧光定量 检测
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贵州遵义地区山羊Borna病毒P24基因片段的检测 被引量:7
12
作者 王长明 徐平 +1 位作者 葛均江 郭振元 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期149-151,共3页
目的探讨贵州遵义及周边地区山羊博尔纳病病毒(BDV)感染状况。方法采用荧光定量套式逆转录酶聚合酶链反应(FQ-nRT-PCR)检测了300只山羊外周血单个核细胞(PBMC)中BDVP24基因片段。对阳性产物进行基因序列测定,氨基酸顺序,及同源性分析。... 目的探讨贵州遵义及周边地区山羊博尔纳病病毒(BDV)感染状况。方法采用荧光定量套式逆转录酶聚合酶链反应(FQ-nRT-PCR)检测了300只山羊外周血单个核细胞(PBMC)中BDVP24基因片段。对阳性产物进行基因序列测定,氨基酸顺序,及同源性分析。结果300只山羊PBMC中2只检出BDVP24基因阳性片段。山羊BDVP24基因片段阳性率为0.67(。BDVP24基因片段测序结果与GenBank提供的strainV毒株比较同源性为96.51%,有3个位点出现一致性沉寂突变,与BDV/MDCK毒株比较同源性为96.51%,有3个位点出现一致性沉寂突变,与C6BV毒株比较同源性为96.51%,有3个位点出现一致性沉寂突变,但所编码的氨基酸没有改变。结论贵州遵义及周边部分地区山羊存在BDV自然感染。 展开更多
关键词 博尔纳病病毒 巢式逆转录荧光定量PCR BDV P24基因 山羊
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博尔纳病毒核蛋白的原核表达、纯化及鉴定 被引量:8
13
作者 霍康 谢鹏 +4 位作者 徐鸣明 张晓东 展群岭 杨德雨 胡永波 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期385-388,共4页
目的构建、表达、并纯化重组博尔纳病毒核蛋白(Borna disease virus,BDV),并鉴定该蛋白。方法通过PCR反应从博尔纳病毒cDNA中扩增博尔纳病毒核蛋白P40基因,构建博尔纳病毒核蛋白P40基因重组质粒pET-14b-BD-VP40,转化大肠杆菌,IPTG诱导... 目的构建、表达、并纯化重组博尔纳病毒核蛋白(Borna disease virus,BDV),并鉴定该蛋白。方法通过PCR反应从博尔纳病毒cDNA中扩增博尔纳病毒核蛋白P40基因,构建博尔纳病毒核蛋白P40基因重组质粒pET-14b-BD-VP40,转化大肠杆菌,IPTG诱导融合蛋白的表达,His-tag亲和层析纯化该蛋白,SDS-PAGE分析其表达量、表达形式和纯度;Western-blot法鉴定该蛋白。结果成功构建重组质粒pET-14b-BDVP40,酶切鉴定、核酸序列分析正确,亲和层析纯化后纯度可达90%,Western-blot表明重组蛋白能与博尔纳病毒核蛋白单克隆抗体特异性结合。结论在大肠杆菌中成功表达了可溶性的pET-14b-BDVP40融合蛋白,为进一步研究博尔纳病毒核蛋白作用机制及开发相应血清学检测试剂盒提供基础。 展开更多
关键词 博尔纳病毒 核蛋白 原核表达
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遵义市及周边地区博尔纳病毒感染分子流行病学研究 被引量:6
14
作者 王长明 徐平 +1 位作者 葛均江 郭振元 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1213-1216,共4页
目的探讨博尔纳病毒(BDV)在遵义市及周边地区流行状况。方法采用荧光定量巢式反转录酶聚合酶链反应(FQ-nRT-PCR)检测43例病毒性脑炎(VE)患者、9例多发性硬化(MS)患者、7例急性吉兰-巴雷综合征(GBS)患者、5例帕金森病(PD)患... 目的探讨博尔纳病毒(BDV)在遵义市及周边地区流行状况。方法采用荧光定量巢式反转录酶聚合酶链反应(FQ-nRT-PCR)检测43例病毒性脑炎(VE)患者、9例多发性硬化(MS)患者、7例急性吉兰-巴雷综合征(GBS)患者、5例帕金森病(PD)患者、98名健康人外周血液单个核细胞(PBMC)、300只山羊PBMC中BDVp24基因片段。对阳性产物进行基因序列测定,氨基酸顺序及同源性分析,并分析BDV分子流行病学特点。结果BDVp24基因片段阳性率VE患者为13.95%,MS患者为22.22%,而GBS和PD患者及健康人中未检出。VE和MS患者检出率明显高于健康人(0%,P〈0.05),山羊BDVp24基因片段阳性率为0.67%,与健康人对比差异无统计学意义(P〉0.05);VE和MS患者测序结果相同与GenBank提供的strainV毒株比较同源性为96.51%,有3个位点出现一致性沉寂突变,BDV/MDCK毒株比较同源性为97.67%,有2个位点出现一致性沉寂突变,与C6BV毒株比较有2个位点出现一致性沉寂突变,其山羊中BDVp24基因片段测序结果与GenBank提供的strainV毒株比较同源性为96.51%,有3个位点出现一致性沉寂突变,与BDV/MDCK毒株比较同源性为96.51%,有3个位点出现一致性沉寂突变,与C6BV毒株比较同源性为96.51%,有3个位点出现一致性沉寂突变,但所编码的氨基酸没有改变。结论遵义市及周边部分地区VE、MS可能与BDV感染有关,人类感染BDV可能存在动物源性。 展开更多
关键词 博尔纳病毒 病毒性脑炎 分子流行病学
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检测BDV抗原的双抗夹心ELISA法的建立 被引量:6
15
作者 黄艺婧 刘赛 +3 位作者 徐平 刘海军 李薇 邓旎 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期430-433,共4页
目的建立检测博尔纳病病毒(BDV)抗原的双抗体夹心ELISA法,为简单、快速的临床应用奠定基础。方法根据双抗夹心ELISA法基本步骤,分别对BDV p24小鼠单克隆抗体、BDV p24兔多克隆抗体和酶标抗体作多梯度稀释,以确定最佳实验条件,并对其精... 目的建立检测博尔纳病病毒(BDV)抗原的双抗体夹心ELISA法,为简单、快速的临床应用奠定基础。方法根据双抗夹心ELISA法基本步骤,分别对BDV p24小鼠单克隆抗体、BDV p24兔多克隆抗体和酶标抗体作多梯度稀释,以确定最佳实验条件,并对其精密度、灵敏度、稳定性、准确性进行初步评价,同期收集病毒性脑炎(VE)患者脑脊液(CSF)44例和神经系统非炎性疾病患者CSF 44例,通过建立的双抗夹心ELISA法检测临床样本中是否存在BDV抗原。结果 BDV p24小鼠单克隆抗体的最佳稀释度为1∶160,BDV p24兔多克隆抗体的最佳稀释度为1∶2 500,酶标抗体的最佳稀释度为1∶5 000,该法的检测灵敏度为170 ng/ml,精密度批内变异<10%,批间变异<15%,同时具有良好的稳定性与准确性。另外用该法检测临床标本其中实验组有3例患者检出BDV抗原阳性,阴性对照组均未检出阳性病例。结论成功建立检测BDV抗原的双抗体夹心ELISA法。 展开更多
关键词 双抗夹心ELISA 博尔纳病病毒 抗原
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新疆伊犁地区马群中博尔纳病病毒自然感染调查 被引量:6
16
作者 朱丹 曾志磊 +7 位作者 彭丹 陈晓 赵立波 张英英 徐明呜 展群岭 余建平 谢鹏 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1106-1109,共4页
目的了解新疆伊犁地区马群中博尔纳病病毒(BDV)的流行状况,分析该病毒的种系来源。方法采用改进的巢式反转录PCR(nRT-PCR)方法对新疆伊犁地区120匹马的外周血单个核细胞(PBMC)及脑组织中的BDV p24基因片段进行检测,对阳性产物... 目的了解新疆伊犁地区马群中博尔纳病病毒(BDV)的流行状况,分析该病毒的种系来源。方法采用改进的巢式反转录PCR(nRT-PCR)方法对新疆伊犁地区120匹马的外周血单个核细胞(PBMC)及脑组织中的BDV p24基因片段进行检测,对阳性产物进行基因序列测定和同源性分析。结果有3匹马外周血和脑组织中同时检测到BDV,阳性率为2.5%(3/120)。扩增产物序列与其他国外马源BDV分离株同源性〉93%,与标准株He/80同源性达到98%以上。结论新疆伊犁地区马群中存在BDV的自然感染。该地区BDV流行株与标准株He/80存在高度的同源性。 展开更多
关键词 博尔纳病病毒 巢式RT-PCR TAQMAN探针
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牧羊犬外周血和脑组织博尔纳病病毒检测结果的比较 被引量:5
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作者 何丰 冯裕星 +2 位作者 孙后超 展群岭 谢鹏 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期337-340,共4页
目的检测同一牧羊犬外周血和脑组织博尔纳病病毒(BDV)p24片段,比较两者阳性率的差异。方法采用改进的荧光定量套式RT-PCR,对新疆伊犁地区圈养的100只牧羊犬外周血单核细胞(PBMC)和脑组织(BT)同时进行BDV p24基因片段的检测,并对阳性标... 目的检测同一牧羊犬外周血和脑组织博尔纳病病毒(BDV)p24片段,比较两者阳性率的差异。方法采用改进的荧光定量套式RT-PCR,对新疆伊犁地区圈养的100只牧羊犬外周血单核细胞(PBMC)和脑组织(BT)同时进行BDV p24基因片段的检测,并对阳性标本采用GFP-p24、pMD-19扩增后电泳验证,排除质粒污染,并克隆测序,用Fisher精确检验和χ2检验分析两者阳性率的差异。结果牧羊犬外周血单核细胞和脑组织BDV p24检测的阳性率分别为5%和9%;PBMC组和BT组BDV p24检测阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论BDV在脑内持续感染,但以RT-PCR对外周血单核细胞BDV p24片段的检测有可能替代脑组织BDV检测,作为大规模流行病学调查的手段。 展开更多
关键词 博尔纳病病毒 改进的RT-PCR 外周血 脑组织
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抗博尔纳病病毒核蛋白单克隆抗体的制备和鉴定 被引量:5
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作者 徐晓艳 金戈 +6 位作者 张亮 李文娟 邓婧 马丽华 黄荣忠 房亮 谢鹏 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期247-250,共4页
目的制备并鉴定鼠抗博尔纳病病毒核蛋白单克隆抗体。方法重组核蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行常规融合,用间接ELISA法筛选阳性杂交瘤并进行有限稀释法克隆和亚克隆,建立分泌抗核蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,纯... 目的制备并鉴定鼠抗博尔纳病病毒核蛋白单克隆抗体。方法重组核蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行常规融合,用间接ELISA法筛选阳性杂交瘤并进行有限稀释法克隆和亚克隆,建立分泌抗核蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,纯化单克隆抗体并进行效价测定和特异性鉴定。结果建立了1株能稳定分泌抗核蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为2F6E8,重链为IgG2a,轻链为κ。ELISA法测得腹水的效价高达1∶32 000以上。Western-blot和间接免疫荧光实验证实该单克隆抗体能特异性结合重组核蛋白及天然核蛋白。结论成功制备了效价高、特异性好的抗核蛋白单克隆抗体,为建立博尔纳病病毒血清免疫学检测方法奠定了基础。 展开更多
关键词 博尔纳病病毒 核蛋白 单克隆抗体 鉴定
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博尔纳病病毒感染对神经元可塑性影响的研究进展 被引量:4
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作者 赵立波 李亚军 +1 位作者 张小东 谢鹏 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期676-679,共4页
博尔纳病病毒(Borna Disease Virus,BDV)是一种具有高度嗜神经性的病毒。近年,有大量研究证实该病毒感染与人神经精神疾病的发生有关。但其确切机制仍未明了。一些研究认为BDV感染对中枢神经系统神经元可塑性的影响可能是其致病的重要... 博尔纳病病毒(Borna Disease Virus,BDV)是一种具有高度嗜神经性的病毒。近年,有大量研究证实该病毒感染与人神经精神疾病的发生有关。但其确切机制仍未明了。一些研究认为BDV感染对中枢神经系统神经元可塑性的影响可能是其致病的重要基础。近年许多学者通过对沙鼠、小鼠、大鼠及转基因鼠等各种BDV感染模型的研究,进一步揭示了BDV感染对神经元可塑性影响的分子机制。结果发现BDV感染主要通过对星形胶质细胞功能的影响、干预HMGB 1蛋白以及神经营养因子信号转导等途径干预神经元的可塑性,影响脑内神经元的功能及其存活和发育,从而引起脑功能损害,导致宿主精神、行为异常。今后随着新的BDV转基因模型的成功建立将进一步揭示BDV感染对神经元可塑性影响的分子机制,给临床预防和治疗博尔纳病提供理论基础。 展开更多
关键词 博尔纳病病毒 神经元可塑性 分子机制 感染模型
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Genome-wide profiling of long noncoding RNA expression patterns and CeRNA analysis in mouse cortical neurons infected with different strains of borna disease virus 被引量:5
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作者 Lin Sun Yujie Guo +7 位作者 Peng He Xiaoyan Xu Xiong Zhang Haiyang Wang Tian Tang Wei Zhou Ping Xu Peng Xie 《Genes & Diseases》 SCIE 2019年第2期147-158,共12页
Borna disease virus 1(BoDV-1)is neurotropic prototype of Bornaviruses causing neurological diseases and maintaining persistent infection in brain cells of mammalian species.Long non-coding RNA(lncRNA)is transcript of ... Borna disease virus 1(BoDV-1)is neurotropic prototype of Bornaviruses causing neurological diseases and maintaining persistent infection in brain cells of mammalian species.Long non-coding RNA(lncRNA)is transcript of more than 200 nucleotides without proteincoding function regulating various biological processes as proliferation,apoptosis,cell migration and viral infection.However,regulatory of lncRNAs in BoDV-1 infection remains unknown.To identify differential expression profiles and predict functions of lncRNA in BoDV-1 infection,microarray data showed that 3528 lncRNAs and 2661 lncRNAs were differentially expressed in Strain V and Hu-H1 BoDV-infected groups compared with control groups,respectively.Gene Ontology(GO)and pathway analysis suggested that differential lncRNAs may be involved in regulation of metabolic,biological regulation,cellular process,endocytosis,viral infections and cell adhesion processes,cancer in both BoDV-infected strains.ENSMUST00000128469 was found down-regulated in both BoDV-infected groups compared with control groups consistent with microarray(p<0.05).ceRNA analysis indicated possible interaction networks as ENSMUST00000128469/miR-22-5p,miR-206-3p,miR-302b-5p,miR-302c-3p,miR-1a-3p/Igf1.Igf1 was found up-regulated in both BoDV-infected groups compared with control groups(p<0.05).Possible functions of predicted target mRNAs and miRNAs of ENSMUST00000128469 were involved in cell proliferation,transcriptional misregulation and proteoglycan pathways enriched in cancer.lncRNA may be involved in regulation of Hu-H1 inhibited cell proliferation and promoted apoptosis through NF-kB,JNK/MAPK signaling,BCL2 and CDK6/E2F1 pathways different from Strain V.Possible interaction networks as ENSMUST00000128469/miR-22-5p,miR-206-3p,miR-302b-5p,miR-302c-3p,miR-1a-3p/Igf1 may involve in regulation of cell proliferation,apoptosis,and cancer. 展开更多
关键词 borna disease virus ceRNA INFECTION lncRNA Mouse cortical neurons
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