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shRNA干扰BAMBI对非小细胞肺癌生长、侵袭和迁移的调控作用 被引量：6
1
作者 王学中 刘志广 刘平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第16期1970-1975,共6页
目的:探究shRNA干扰骨形成蛋白和激活素的穿膜抑制剂(BAMBI)对非小细胞肺癌A549细胞生长、侵袭和迁移的影响及其潜在的分子机制。方法:构建shRNA BAMBI质粒和shRNA scramble载体。将构建好的质粒转染A549细胞后,实时定量PCR(qRT-PCR)和... 目的:探究shRNA干扰骨形成蛋白和激活素的穿膜抑制剂(BAMBI)对非小细胞肺癌A549细胞生长、侵袭和迁移的影响及其潜在的分子机制。方法:构建shRNA BAMBI质粒和shRNA scramble载体。将构建好的质粒转染A549细胞后,实时定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹检测转染效果;细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡情况;划痕实验检测细胞迁移能力;体外侵袭实验检测细胞侵袭能力;蛋白质印迹检测Ki67、Bax、cl-caspase-3、血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达;蛋白质印迹检测TGF-β、Smad2和磷酸化Smad2的表达。构建移植瘤裸鼠,检测肿瘤体积、细胞凋亡和VEGF的表达水平。结果:转染后shRNA BAMBI组细胞中BAMBI的mRNA和蛋白水平均明显低于Scramble组。与Scramble组相比,shRNA BAMBI组细胞增殖倍数显著降低;凋亡细胞比率显著增加;划痕愈合率显著降低;侵袭细胞数目显著减少;Ki67、VEGF、MMP-9的蛋白表达水平显著降低,Bax的表达水平显著增加;TGF-β的表达水平和p-Smad2/Smad2的比值均显著升高。动物实验结果显示,与Scramble组相比,shRNA BAMBI组肿瘤体积明显减少,细胞凋亡比率显著增加,VEGF的表达水平显著降低。结论: shRNA干扰BAMBI抑制非小细胞肺癌增殖、侵袭和迁移并诱导细胞凋亡,其作用机制可能与TGF-β/Smad2信号通路的激活相关。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 短发夹RNA 骨形成蛋白和激活素的穿膜抑制剂 增殖 侵袭 迁移
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