雷奈酸锶通过骨形态发生蛋白-2/Smad通路促进骨髓间充质干细胞成骨分化 被引量：13

1

作者 吕辉珍 黄晓丹 +2 位作者 靳思思 郭润民 吴文 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期376-381,共6页

目的探讨骨形态发生蛋白-2（BMP-2）/Smad通路在雷奈酸锶（Sr）促进大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）分化为成骨细胞过程中的作用。方法体外分离培养大鼠BMSCs,根据实验目的加入不同浓度Sr、BMP-2的拮抗剂noggin及Smad1小干扰RNA（SiRNA... 目的探讨骨形态发生蛋白-2（BMP-2）/Smad通路在雷奈酸锶（Sr）促进大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）分化为成骨细胞过程中的作用。方法体外分离培养大鼠BMSCs,根据实验目的加入不同浓度Sr、BMP-2的拮抗剂noggin及Smad1小干扰RNA（SiRNA）。酶标法检测碱性磷酸酶（ALP）活性,茜素红染色检测钙结节,Western blotting法检测磷酸化Smad1/5/8及Runt相关转录因子-2（Runx2）蛋白的表达。结果应用0.1~10 mmol/L Sr处理BMSCs细胞1 h后,细胞内磷酸化Smad1/5/8表达增高,其中浓度为1 mmol/L时,表达达到高峰;在Sr处理BMSCs前,应用BMP-2拮抗剂noggin预处理细胞2 h能抑制Sr对磷酸化Smad1/5/8表达的上调作用;应用0.1~5 mmol/L Sr处理细胞6 h后,细胞内Runx2表达增高,其中浓度为1 mmol/L时,表达达到高峰;在Sr处理BMSCs前,应用Smad1 SiRNA转染细胞后能下调Smad1/5/8、磷酸化Smad1/5/8的表达,并抑制Sr对Runx2表达的上调作用,还拮抗Sr对ALP活性及钙化结节形成的促进作用。结论 BMP-2/Smad通路参与了Sr促进BMSCs成骨分化。 展开更多

关键词 雷奈酸锶 骨髓间充质干细胞 骨形态发生蛋白-2 小RNA干扰 SMAD1 5 8 Runx2 成骨细胞

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补肾健脾活血方对成骨细胞增殖分化及BMP-2、Smad5影响的研究 被引量：7

2

作者 朱根福 王吉利 +4 位作者 汪悦东 黄宏兴 万雷 柴爽 张志海 《新中医》 CAS 2021年第7期1-5,共5页

目的:研究中药复方补肾健脾活血方对大鼠成骨细胞增殖分化及骨形成蛋白-2 (BMP-2)、Smad5表达的影响。方法:将60只3月龄雌性SD大鼠随机分为空白组、补肾健脾活血方组、阿仑膦酸钠组,每组20只。制备对应的含药血清后分别干预成骨细胞,采... 目的:研究中药复方补肾健脾活血方对大鼠成骨细胞增殖分化及骨形成蛋白-2 (BMP-2)、Smad5表达的影响。方法:将60只3月龄雌性SD大鼠随机分为空白组、补肾健脾活血方组、阿仑膦酸钠组,每组20只。制备对应的含药血清后分别干预成骨细胞,采用细胞计数法(CCK-8)检测成骨细胞增殖活性,碱性磷酸酶染色(ALP)检测成骨细胞分化能力,实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测BMP-2、Smad5 m RNA表达,蛋白免疫印迹法检测BMP-2、Smad5蛋白表达。结果:干预12 h、24 h、48 h时,各组细胞活性逐渐增强,干预48 h后各组细胞活性均降低。干预48 h时,与空白组、阿伦磷酸钠组比较,补肾健脾活血方组细胞活性最强(P<0.05)。补肾健脾活血方组成骨细胞ALP染色最深,明显深于空白组和阿仑膦酸钠组。与空白组比较,补肾健脾活血方组BMP-2、Smad5蛋白及mRNA表达升高(P<0.05);阿仑膦酸钠组BMP-2 mRNA表达降低(P<0.05)。与阿仑膦酸钠组比较,补肾健脾活血方组BMP-2、Smad5蛋白及mRNA表达升高(P<0.05)。结论:中药复方补肾健脾活血方可以促进大鼠成骨细胞增殖分化,提高BMP-2、Smad5 mRNA和蛋白表达。 展开更多

关键词 成骨细胞 补肾健脾活血方 骨形成蛋白-2 SMAD5 细胞实验 动物实验 大鼠

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骨形态发生蛋白5对肝癌细胞生物学行为的影响及机制

3

作者 马东玥 臧艳 +7 位作者 任俏慧 朱欣悦 王莲子 吕伟 姚骏骁 周心怡 余莉 李涛 《山东医药》 CAS 2024年第10期1-5,共5页

目的 探究骨形态发生蛋白5(BMP5)对人肝癌细胞生物学行为的影响及机制。方法 将正常人肝细胞系L02与人肝癌细胞系Hep3B、Huh7置于37℃、5%CO_(2)细胞培养箱中培养,采用RT-qPCR法检测正常人肝细胞系L02与人肝癌细胞系Hep3B、Huh7中BMP5 m... 目的 探究骨形态发生蛋白5(BMP5)对人肝癌细胞生物学行为的影响及机制。方法 将正常人肝细胞系L02与人肝癌细胞系Hep3B、Huh7置于37℃、5%CO_(2)细胞培养箱中培养,采用RT-qPCR法检测正常人肝细胞系L02与人肝癌细胞系Hep3B、Huh7中BMP5 mRNA表达。将肝癌细胞系Hep3B、Huh7分为对照(NC)组及低、中、高剂量组,低、中、高剂量组分别用1、10、100 ng/mL浓度的重组人骨形态发生蛋白5(rh-BMP5)处理细胞,通过CCK-8法检测细胞增殖,Annexin-V/PI流式细胞术检测细胞凋亡,划痕实验检测细胞迁移,Western blotting法检测增殖细胞核抗原PCNA和SMAD通路关键蛋白及其磷酸化(SMAD3、p-SMAD3)表达。结果 与正常肝细胞系L02相比,BMP5在肝癌细胞系Hep3B、Huh7中表达升高(P均<0.05)。与NC组相比,中、高剂量组rh-BMP5可促进Hep3B、Huh7细胞增殖和PCNA表达上调(P均<0.05),高剂量组100 ng/mL的rh-BMP5处理肝癌细胞24及48 h细胞凋亡率降低、迁移率增高(P均<0.05)。高剂量组与NC组相比,p-SMAD3表达升高(P<0.05)。结论 BMP5在肝癌细胞系中高表达,可能通过增强SMAD3活化促进肝癌细胞Hep3B、Huh7的增殖、迁移并抑制凋亡。 展开更多

关键词 肝癌 骨形态发生蛋白5 细胞增殖 SMAD同源物3

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BMP9通过ERK5信号通路调控根尖牙乳头干细胞成骨／成牙本质分化 被引量：6

4

作者 孔令姣 王金华 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期527-531,共5页

目的研究骨形成蛋白9(BMP9)是否通过激活ERK5信号通路调控永生化根尖牙乳头干细胞(i SCAP)成骨/成牙本质向分化。方法首先使用ERK5抑制剂BIX02189作用于BMP9的腺病毒转染i SCAP,采用Western blotting检测ERK5蛋白的磷酸化水平变化;然后... 目的研究骨形成蛋白9(BMP9)是否通过激活ERK5信号通路调控永生化根尖牙乳头干细胞(i SCAP)成骨/成牙本质向分化。方法首先使用ERK5抑制剂BIX02189作用于BMP9的腺病毒转染i SCAP,采用Western blotting检测ERK5蛋白的磷酸化水平变化;然后通过碱性磷酸酶(ALP)染色、RT-PCR及茜素红染色检测成骨/成牙本质相关基因Runx2、OCN、OPN和DMP1的表达,研究BMP9对i SCAP成骨/成牙本质分化的影响。结果 BMP9可以上调ERK5磷酸化水平,BIX02189干预后ERK5磷酸化下降;ALP染色,RT-PCR检测表达及茜素红染色均发现BMP9可以促进Runx2、OCN、OPN、DMP1阳性表达,而BIX02189则抑制成骨/成牙本质分化。结论 BMP9可以通过激活ERK5信号通路促进根尖牙乳头干细胞成骨/成牙本质分化。 展开更多

关键词 永生化根尖牙乳头干细胞 骨形成蛋白9 ERK5 成骨/成牙本质分化

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TGF-β、BMP-2及miR-672-5p与激素性股骨头坏死的关系分析 被引量：6

5

作者 徐丹 杨静华 +2 位作者 朱世华 徐绍勇 张萍 《分子诊断与治疗杂志》 2021年第12期2013-2016,共4页

目的探究转化生长因子-β(TGF-β)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)及miR-672-5p水平与激素性股骨头坏死(SANFH)的关系。方法分析2018年6月至2021年1月期间于南方医科大学南方医院行各项检查的77例疑似SANFH受检者临床资料,根据临床诊断结果... 目的探究转化生长因子-β(TGF-β)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)及miR-672-5p水平与激素性股骨头坏死(SANFH)的关系。方法分析2018年6月至2021年1月期间于南方医科大学南方医院行各项检查的77例疑似SANFH受检者临床资料,根据临床诊断结果分为确诊组52例与未确诊组25例,比较两组TGF-β、BMP-2、miR-672-5p表达水平,分析上述指标对SANFH的诊断效能。根据股骨头坏死程度分期将确诊组分为轻中度组32例与重度组20例,比较两组TGF-β、BMP-2、miR-672-5p水平,分析上述指标对股骨头坏死程度的评估效能。结果确诊组TGF-β、BMP-2水低于未确诊组,miR-672-5p水平高于未确诊组,差异有统计学意义(P<0.05)。TGF-β、BMP-2、miR-672-5p诊断SANFH的曲线AUC为0.858、0.918、0.904,诊断效能良好(P<0.05)。重度组TGF-β、BMP-2水平低于轻中度组,miR-672-5p水平高于轻中度组,差异有统计学意义(P<0.05)。TGF-β、BMP-2、miR-672-5p评估股骨头坏死程度的曲线AUC为0.769、0.826、0.775,诊断效能良好(P<0.05)。结论 TGF-β、BMP-2、miR-672-5p表达水平与SANFH患者股骨头坏死程度具有显著相关性,用于SANFH诊断、病情程度评估均可表现出良好效能。 展开更多

关键词 激素性股骨头坏死 转化生长因子-Β 骨形态发生蛋白-2 miR-672-5p 股骨头坏死分期

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BMP-2蛋白通过Smad途径对牙髓干细胞成牙本质分化的作用机制研究

6

作者 王晔 于淼 +2 位作者 张丞 张婉君 马永平 《中国美容医学》 CAS 2023年第2期1-5,共5页

目的:探讨骨形成蛋白2(Bone morphogenetic protein-2,BMP-2)对牙髓干细胞成牙本质分化的影响及对Smad1/5通路的调节作用。方法:取对数生长期的人牙髓干细胞,配制成密度为3×10^(4)个/毫升的细胞悬液,接种于24孔板,置于培养箱中培... 目的:探讨骨形成蛋白2(Bone morphogenetic protein-2,BMP-2)对牙髓干细胞成牙本质分化的影响及对Smad1/5通路的调节作用。方法:取对数生长期的人牙髓干细胞,配制成密度为3×10^(4)个/毫升的细胞悬液,接种于24孔板,置于培养箱中培养至细胞密度约为80%时,将细胞随机分为对照组、单纯诱导组和抑制剂组。对照组细胞不做任何处理,单纯诱导组细胞用浓度为100 ng/ml的BMP-2诱导液(BMP-2溶于DMEM培养基)培养,抑制剂组细胞先用200 nmol/L的Smad1/5抑制剂LDN-193189处理24 h后,更换为BMP-2诱导液,培养14 d后,CCK-8检测人牙髓干细胞活性、qRT-PCR检测牙本质基质蛋白1(DMP-1)和牙本质涎磷蛋白(DSPP)mRNA相对表达量、检测碱性磷酸酶(ALP)活性、茜素红染色观察矿化结节情况、蛋白印迹法检测BMP-2和p-Smad1/5蛋白相对表达量。结果:单纯诱导组矿化结节明显,抑制剂组矿化结节减少;与对照组比较,单纯诱导组牙髓干细胞活性、ALP活性增强,DMP-1和DSPP mRNA相对表达量、BMP-2和p-Smad1/5蛋白相对表达量升高(P<0.05);与单纯诱导组比较,抑制剂组牙髓干细胞活性、ALP活性减弱,DMP-1和DSPP mRNA相对表达量、BMP-2和p-Smad1/5蛋白相对表达量降低(P<0.05)。结论:BMP-2可诱导人牙髓干细胞成牙本质分化,可能是通过调节Smad1/5信号通路发挥作用。 展开更多

关键词 牙髓干细胞成牙本质分化 骨形成蛋白2 Smad1/5 调节作用 信号通路

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骨形成蛋白mRNA的表达与腭裂形成之间的关系 被引量：3

7

作者 吕红兵 金岩 李鑫 《第四军医大学学报》 1999年第2期124-126,共3页

目的：检测正常胎鼠和腭裂胎鼠的腭突中骨形成蛋白5mRNA表达的变化，探讨骨形成蛋白5（BMPS）在腭裂形成中的作用．方法:采用原位杂交技术观察在不同发育时期，正常胎鼠和腭裂胎鼠腭突中BMP5mRNA的表达情况．结果：正常组和腭裂组比较... 目的：检测正常胎鼠和腭裂胎鼠的腭突中骨形成蛋白5mRNA表达的变化，探讨骨形成蛋白5（BMPS）在腭裂形成中的作用．方法:采用原位杂交技术观察在不同发育时期，正常胎鼠和腭裂胎鼠腭突中BMP5mRNA的表达情况．结果：正常组和腭裂组比较结果表明，妊娠期第14日和第15日，正常组腭突的未分化间充质细胞和上皮细胞中BMP5mRNA的表达呈强阳性，而腭裂组为弱阳性．妊娠第16日，两组腭突中BMR5mRNA的表达都较弱．结论：BMP5mR－NA在未分化间充质细胞中的弱表达与腭裂的形成密切相关． 展开更多

关键词 骨形成蛋白 腭裂形成 组织化学 原位杂交 MRNA

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miR-155在炎症微环境下对牙周膜干细胞成骨分化的调控作用 被引量：1

8

作者 刘煜清 龚瑶 +1 位作者 赵苏峰 戴丽 《口腔医学》 CAS 2022年第9期790-795,共6页

目的 研究miR-155在炎症微环境下对牙周膜干细胞(periodontal ligment stem cells, PDLSCs)成骨分化的调控作用。方法 将PDLSCs按照不同处理方法分为对照组、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)组、miR-阴性对照(NC)组、... 目的 研究miR-155在炎症微环境下对牙周膜干细胞(periodontal ligment stem cells, PDLSCs)成骨分化的调控作用。方法 将PDLSCs按照不同处理方法分为对照组、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)组、miR-阴性对照(NC)组、TNF-α+miR-NC组、TNF-α+miR-155抑制物组、miR-155组,采用荧光定量PCR检测miR-155、Runt相关转录因子2(recombinant runt related transcription factor 2,Runx2)、骨钙素(osteocalcin, OCN)、Ⅰ型胶原(collagenⅠ,Col-Ⅰ)、骨形态发生蛋白5(bone morphogenetic protein 5,BMP5)、骨形态发生蛋白10(bone morphogenetic protein 10,BMP10) mRNA表达水平;Western blot检测Runx2、OCN、Col-Ⅰ、BMP5、BMP10蛋白表达;茜素红染色检测细胞钙结节形成;双荧光素酶报告基因验证miR-155靶向BMP5、BMP10。结果 与对照组比较,TNF-α组PDLSCs中miR-155的表达水平明显升高,Runx2、OCN、Col-Ⅰ的mRNA和蛋白表达水平以及钙结节形成量降低(P<0.05);与miR-NC组比较,TNF-α+miR-NC组PDLSCs中Runx2、OCN、Col-Ⅰ的mRNA和蛋白表达水平及钙结节形成量降低,差异有统计学意义(P<0.05);与TNF-α+miR-NC组比较,TNF-α+miR-155抑制物组PDLSCs中Runx2、OCN、Col-Ⅰ的mRNA和蛋白表达水平及钙结节形成量明显升高(P<0.05);miR-155靶向负调控BMP5、BMP10表达。结论 炎症微环境下PDLSCs中miR-155表达增加,敲低miR-155可促进炎症微环境下PDLSCs成骨分化,靶向调控BMP5及BMP10是相关分子机制。 展开更多

关键词 牙周炎 MIR-155 牙周膜干细胞 成骨分化 骨形态发生蛋白5 骨形态发生蛋白10

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BMP6和SMAD5在藏绵羊睾丸组织中的表达和定位 被引量：2

9

作者 陈娜娜 安雪姣 +4 位作者 李讨讨 王慧慧 徐尚荣 满永恒 马友记 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期2434-2441,共8页

骨形态发生蛋白6(BMP6)能够促进睾丸支持细胞的DNA合成和细胞增殖,SMAD蛋白5(SMAD5)是其下游信号介质,抑制细胞凋亡,两者在雄性动物生殖过程中起着关键作用。以不同发育阶段(3月龄、1岁龄和3岁龄)藏绵羊(Ovis aries)为研究对象,运用实... 骨形态发生蛋白6(BMP6)能够促进睾丸支持细胞的DNA合成和细胞增殖,SMAD蛋白5(SMAD5)是其下游信号介质,抑制细胞凋亡,两者在雄性动物生殖过程中起着关键作用。以不同发育阶段(3月龄、1岁龄和3岁龄)藏绵羊(Ovis aries)为研究对象,运用实时荧光定量PCR、Western blot和免疫组织化学染色法从转录和翻译水平检测了BMP6和SMAD5在藏绵羊睾丸不同发育阶段的表达和分布模式,研究BMP6/SMAD5在藏绵羊睾丸发育和精子发生过程中的作用。结果显示:1岁龄(性成熟期)和3岁龄(成年)藏绵羊睾丸中BMP6 mRNA相对表达量和蛋白表达量均极显著高于3月龄(性成熟前)(P<0.01),且两者在性成熟后趋于稳定;随年龄增长,藏绵羊睾丸中SMAD5 mRNA相对表达量极显著降低(P<0.01),但SMAD5蛋白表达量极显著升高(P<0.01)。BMP6和SMAD5蛋白在藏绵羊睾丸不同发育阶段的支持细胞和间质细胞中均有表达,推测BMP6/SMAD5在精子发生过程中发挥作用。 展开更多

关键词 骨形态发生蛋白6 SMAD蛋白5 藏绵羊 睾丸

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BMP5在乙型肝炎中的表达及其作用 被引量：2

10

作者 米俊杰 许翠萍 +3 位作者 温彪 侯桃华 郭晓红 白春爱 《山西医科大学学报》 CAS 2010年第5期447-449,共3页

目的探讨骨形态发生蛋白5在乙型病毒性肝炎中的表达及其作用。方法分别选择正常对照9例,乙型病毒性肝炎20例,肝硬化22例,原发性肝细胞肝癌28例作为研究对象。应用酶联免疫吸附法测定4组血清中BMP5的浓度。结果与正常对照组比较,乙型病... 目的探讨骨形态发生蛋白5在乙型病毒性肝炎中的表达及其作用。方法分别选择正常对照9例,乙型病毒性肝炎20例,肝硬化22例,原发性肝细胞肝癌28例作为研究对象。应用酶联免疫吸附法测定4组血清中BMP5的浓度。结果与正常对照组比较,乙型病毒性肝炎组的BMP5浓度升高(195.350pg/mlvs137.011pg/ml,P<0.05);肝硬化组的BMP5浓度升高(138.830pg/mlvs137.011pg/ml),但差异没有统计学意义(P>0.05);原发性肝细胞肝癌的BMP5的浓度降低(107.097pg/mlvs137.011pg/ml,P<0.05)。结论在乙型病毒性肝炎中BMP5表达增加可能是促进肝细胞凋亡的一个因素。 展开更多

关键词 乙型肝炎 骨形态发生蛋白5 凋亡

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5-氮胞苷联合骨形态发生蛋白2诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化 被引量：1

11

作者 王文华 刘洋 +3 位作者 王巧敏 吕洋 赵亚如 王海萍 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第19期2958-2963,共6页

背景:干细胞已成为组织工程中理想的种子细胞,为细胞移植治疗心肌梗死提供了研究方向。目的:探讨骨形态发生蛋白2联合5-氮胞苷体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的可行性。方法:采用全骨髓贴壁法培养骨髓间充质干细胞,将第3代... 背景:干细胞已成为组织工程中理想的种子细胞,为细胞移植治疗心肌梗死提供了研究方向。目的:探讨骨形态发生蛋白2联合5-氮胞苷体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的可行性。方法:采用全骨髓贴壁法培养骨髓间充质干细胞,将第3代骨髓间充质干细胞进行分组诱导,分别为对照组(普通IMDM培养基)、骨形态发生蛋白2组(200 ng/L)、5-氮胞苷组(10μmol/L)、5-氮胞苷+骨形态发生蛋白2组。诱导3 d后更换正常培养基继续培养4周,免疫细胞化学法检测cTnI的表达,免疫荧光化学法检测Desmin、cTnT的表达,Western blot检测cTnT和cTnI的表达;诱导3 d后更换正常培养基继续培养1,2,4周,采用RT-qPCR检测心肌早期转录因子GATA-4、Nkx2.5 mRNA的表达。结果与结论:(1)Western blot检测诱导组均表达cTnT、cTnI,联合诱导组cTnT、cTnI的表达高于单独诱导组(P<0.01);(2)免疫细胞化学法检测诱导组cTnI均呈阳性表达,联合诱导组高于单独诱导组(P<0.05);免疫荧光细胞化学法检测诱导组Desmin、cTnT均呈阳性表达,联合诱导组高于单独诱导组(P<0.05);(3)RT-qPCR检测诱导组均有GATA-4、Nkx2.5 mRNA的表达,联合诱导组高于单独诱导组(P<0.05);(4)结果表明,骨髓间充质干细胞经5-氮胞苷和骨形态发生蛋白2联合诱导后可以提高心肌样细胞的分化效率。 展开更多

关键词 干细胞 骨髓间充质干细胞 心肌样细胞 骨形态发生蛋白2 5-氮胞苷 SD大鼠

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骨形态发生蛋白5在肿瘤中的研究进展 被引量：1

12

作者 张泽亚 蒋海越 《医学综述》 CAS 2022年第1期69-73,共5页

骨形态发生蛋白(BMP)5是BMP家族的重要成员,在机体细胞增殖、凋亡过程中发挥重要作用。BMP5基因广泛表达于人体的脑、肾、眼等器官组织,参与多种生理和病理过程,如骨骼和软骨的形成、人类干细胞的分化诱导、肿瘤的发生和预后。BMP5参与... 骨形态发生蛋白(BMP)5是BMP家族的重要成员,在机体细胞增殖、凋亡过程中发挥重要作用。BMP5基因广泛表达于人体的脑、肾、眼等器官组织,参与多种生理和病理过程,如骨骼和软骨的形成、人类干细胞的分化诱导、肿瘤的发生和预后。BMP5参与人体胚胎发育过程以及成熟生物个体组织损伤的修复,作用机制复杂。肿瘤威胁着人类健康与生命,了解BMP5在肿瘤发生发展过程中的可能作用及其可能涉及的分子生物学机制,对疾病的治疗具有重要意义。 展开更多

关键词 肿瘤 骨形态发生蛋白5 基因 生物标志物

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MiR-432-5p通过靶向结合BMP5促进胃癌增殖、迁移和侵袭

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作者 程旭敏 王燕 +1 位作者 胡小敏 罗寰 《广东药科大学学报》 CAS 2022年第3期106-113,共8页

目的 探讨microRNA-432-5p(miR-432-5p)在胃癌(GC)中的表达及其对GC增殖、迁移、侵袭等生物学行为的调控作用及机制。方法 在肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库筛选GC病例数据集,分析miR-432-5p及骨形成蛋白5(BMP5)在GC中的表达差异。构建BMP... 目的 探讨microRNA-432-5p(miR-432-5p)在胃癌(GC)中的表达及其对GC增殖、迁移、侵袭等生物学行为的调控作用及机制。方法 在肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库筛选GC病例数据集,分析miR-432-5p及骨形成蛋白5(BMP5)在GC中的表达差异。构建BMP5过表达质粒并转染人GC细胞系SGC-7901和BGC-823;采用CCK-8实验、克隆形成实验及异种移植实验检测对胃癌细胞增殖的影响;采用Transwell实验和划痕实验检测对胃癌细胞侵袭和迁移的影响;采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-432-5p与BMP5靶向关系。结果 TCGA数据库的临床数据表明,BMP5在GC癌组织中的表达较正常组织表达下调(P<0.05),且其低表达与临床T分期晚及肿瘤复发密切相关(P<0.05);miR-432-5p在GC癌组织中的表达较正常组织表达上调(P<0.05),且其高表达与临床分期晚、合并淋巴结转移及肿瘤复发密切相关(P<0.05)。过表达BMP5显著抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并能显著抑制裸鼠胃癌移植瘤的生长(P<0.05);使用miR-432-5p inhibitor竞争性结合miR-432-5p显著上调胃癌细胞中BMP5蛋白表达(P<0.05),并明显抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.05),而同时使用BMP5特异性小干扰RNA(siRNA)沉默BMP5则明显逆转这一作用(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实miR-432-5p能靶向结合BMP5mRNA的3′UTR区。结论 在GC组织中miR-432-5p表达上调,而BMP5表达下调,并与GC的恶性临床表型密切相关;miR-432-5p可通过靶向抑制BMP5表达促进GC增殖、迁移和侵袭,发挥致癌基因作用。 展开更多

关键词 胃癌 miR-432-5p 骨形成蛋白5 增殖 迁移 侵袭

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骨形态发生蛋白2表达载体的构建及生物学功能鉴定

14

作者 姥伟 代建宁 +2 位作者 景调平 邓彩霞 杨海旭 《生物技术通讯》 CAS 2017年第4期506-509,共4页

目的:从真核细胞中获得骨形态发生蛋白2(BMP2)编码基因,构建其真核表达载体并进行鉴定。方法:提取人HeLa细胞总RNA,经反转录后用特异性引物扩增BMP2编码区,连接至pcDNA3.1载体,筛选阳性克隆并进行功能学鉴定。结果:反转录PCR获得1100 b... 目的:从真核细胞中获得骨形态发生蛋白2(BMP2)编码基因,构建其真核表达载体并进行鉴定。方法:提取人HeLa细胞总RNA,经反转录后用特异性引物扩增BMP2编码区,连接至pcDNA3.1载体,筛选阳性克隆并进行功能学鉴定。结果:反转录PCR获得1100 bp的片段,经分子克隆后鉴定序列与BMP2一致,并且在真核细胞中能够诱导Smad1/5/8的磷酸化。结论:构建了真核表达载体pcDNA3.1-BMP2并验证了其体内功能,为后续探讨BMP2在骨发育中的作用机制打下基础。 展开更多

关键词 骨形态发生蛋白2 真核表达载体 Smad1/5/8

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BMPs-ERK5信号通路调控人牙周膜干细胞成骨分化的研究 被引量：8

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作者 蒋琳 周鹏飞 +1 位作者 王佳 张燕 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期718-725,共8页

目的比较骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMP)2、7、9对人牙周膜干细胞﹙human periodontal ligament stem cells,h PDLSCs﹚成骨分化的诱导作用,探讨BMPs-ERK5信号通路在成骨分化中的作用。方法首先采用组织块酶消化法分... 目的比较骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMP)2、7、9对人牙周膜干细胞﹙human periodontal ligament stem cells,h PDLSCs﹚成骨分化的诱导作用,探讨BMPs-ERK5信号通路在成骨分化中的作用。方法首先采用组织块酶消化法分离培养原代h PDLSCs并鉴定,利用腺病毒载体介导的GFP、BMP2、BMP7和BMP9(Ad-GFP、Ad-BMP2、Ad-BMP7、Ad-BMP9)分别感染h PDLSCs,通过早期成骨分化指标碱性磷酸酶活性定性和定量检测、茜素红染色检测晚期成骨分化指标钙盐结节沉积情况、qRT-PCR检测细胞成骨分化相关基因骨钙蛋白和骨桥蛋白mRNA表达,比较发现BMP9对细胞成骨分化的作用最强;采用Ad-BMP9感染h PDLSCs 24 h后,检测BMP9作用PDLSCs后对ERK5磷酸化水平的影响和ERK5信号通路特异性抑制剂BIX02189预处理后BMP9-ERK5通路对h PDLSCs成骨分化的影响。结果 1分离培养的h PDLSCs为成纤维细胞样,呈漩涡状生长,抗波形蛋白表达阳性,抗角蛋白表达阴性,具有间充质属性和克隆形成能力。2BMP2、BMP7和BMP9均有促进细胞成骨分化作用,其中3组的碱性磷酸酶定量结果和成骨分化相关基因相对表达量与GFP组比较,差异具有统计学意义(P<0.05),且BMP9效力最强。3Western blot检测显示BMP9增强p-ERK5的表达。而抑制剂BIX02189呈剂量依赖性地抑制p-ERK5的表达。BIX02189预处理细胞后、感染Ad-BMP9的结果显示,BMP9对细胞的促成骨作用较未处理组明显降低,其中BMP9组的碱性磷酸酶定量分析结果与成骨分化相关基因相对表达量与BIX02189处理组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 BMP9具有较强的促h PDLSCs成骨分化作用,ERK5信号转导途径在BMP9诱导h PDLSCs成骨分化过程中发挥了正向调节作用。 展开更多

关键词 骨形态发生蛋白 牙周膜干细胞 成骨分化 细胞外信号调节激酶5

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MicroRNA-195-5p调节Bmpr1α表达对骨髓间充质干细胞成脂分化的影响 被引量：8

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作者 潘欣 曾思良 +3 位作者 梁兴伦 嵇承栋 刘晓东 廖万清 《同济大学学报（医学版）》 CAS 2017年第3期1-7,13,共8页

目的探讨miR-195-5p在补肾方含药血清干预大鼠原代骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BM SC)中的表达及其对成脂分化的影响。方法体外贴壁法原代培养的大鼠BM SC细胞经流式细胞术、CD44和CD34免疫荧光染色鉴定后,与椎间盘软... 目的探讨miR-195-5p在补肾方含药血清干预大鼠原代骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BM SC)中的表达及其对成脂分化的影响。方法体外贴壁法原代培养的大鼠BM SC细胞经流式细胞术、CD44和CD34免疫荧光染色鉴定后,与椎间盘软骨细胞和成骨细胞一起采用荧光定量RT-PCR方法检测细胞中rno-miR-195-5p的表达情况;采用荧光素酶报告基因实验验证骨形态发生蛋白受体-1α(Bmpr1α)是否为rno-miR-195-5p的靶基因,采用Western印迹法和油红O染色检测rno-miR-195-5p对Bmpr1α表达和BMSC成脂分化的影响。结果流式细胞术与免疫荧光分析显示所培养细胞具备BMSC特征。rno-miR-195-5p在补肾方含药血清干预的原代BM SC中表达明显升高(P<0.01),且在分化完成的软骨细胞和成骨细胞中高表达。双荧光素酶报告实验与Western印迹法证实Bmpr1α是rno-miR-195-5p的靶基因。转染rno-miR-195-5p mimics上调BM SC中rno-miR-195-5p可抑制Bmpr1α的表达(P<0.05),降低成脂分化能力;而转染rno-miR-195-5p inhibitor可显著增加BM SC中Bmpr1α的表达(P<0.01),增强成脂分化能力。结论补肾方含药血清干预BMSC上调rno-miR-195-5p,通过降低其靶基因Bmpr1α的表达而降低BMSC的成脂分化,改善骨质疏松症状。 展开更多

关键词 骨形态发生蛋白受体-1α rno-miR-195-5p 骨髓间充质干细胞 骨质疏松

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基于AMH/AMHRⅡ信号通路探讨消囊调经汤治疗PCOS-IR模型大鼠的作用机制 被引量：3

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作者 周艳艳 袁俊俊 +3 位作者 黄旭博 刘沛沛 吴梦瑶 董亚娜 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期137-145,共9页

目的:基于抗苗勒氏管激素(AMH)/抗苗勒氏管激素Ⅱ型受体(AMHRⅡ)信号通路,探讨消囊调经汤改善多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗(PCOS-IR)模型大鼠的作用机制。方法:48只成年雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、消囊调经汤组(11.4 g·kg^(... 目的:基于抗苗勒氏管激素(AMH)/抗苗勒氏管激素Ⅱ型受体(AMHRⅡ)信号通路,探讨消囊调经汤改善多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗(PCOS-IR)模型大鼠的作用机制。方法:48只成年雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、消囊调经汤组(11.4 g·kg^(-1)·d^(-1))、达英-35组(0.21 g·kg^(-1)·d^(-1)),除空白组外各组大鼠通过高脂高糖饮食联合来曲唑构建PCOS-IR模型,给药组灌胃给予相应剂量药物15 d,每给药4 d间隔1 d,空白组及模型组灌胃给予等体积生理盐水。治疗期间每天记录大鼠动情周期,治疗结束后记录体质量、Lee’s指数,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定AMH、促黄体生成素(LH)、LH/卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)、雌二醇(E2)水平,血糖仪检测空腹血糖(FPG),放射免疫分析法(RIA)检测空腹胰岛素(FINS)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素敏感性指数(QUICKI),全自动生化检测仪测定甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢组织形态学变化,免疫组织化学法(IHC)检测卵巢组织内AMHRⅡ、骨形态发生蛋白-15(BMP-15)、Smad5蛋白水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)分析AMHRⅡ、BMP-15、Smad5蛋白表达水平。结果:与空白组大鼠比较,模型组大鼠阴道脱落细胞可见大量白细胞,以动情间期为主;体质量、Lee’s指数、糖脂代谢指标(FPG、FINS、HOMA-IR、TG、TC)、AMH及性激素(LH、LH/FSH、T)水平显著上升(P<0.01),QUICKI及E2水平显著下降(P<0.01);卵巢表面囊性突起较多、湿重较大,卵巢组织有较多闭锁状、囊性扩张性卵泡,颗粒细胞层厚度减少,不见卵母细胞;卵巢组织中AMHRⅡ蛋白表达水平显著上升(P<0.01),BMP-15、Smad5蛋白表达水平显著下降(P<0.01)。与模型组大鼠比较,消囊调经汤组大鼠阴道脱落细胞于治疗第5~6天起见角化细胞,逐渐出现稳定的动情周期;体质量、Lee’s指数、糖脂代谢指标(FPG、FINS、HOMA-IR、TG、TC)� 展开更多

关键词 多囊卵巢综合征(PCOS) 胰岛素抵抗(IR) 消囊调经汤 抗苗勒氏管激素(AMH)/抗苗勒氏管激素Ⅱ型受体(AMHRⅡ)信号通路 糖脂代谢 骨形态发生蛋白-15(BMP-15) SMAD5

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先天性小耳畸形患者骨形态发生蛋白-5成熟肽基因突变研究 被引量：7

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作者 张娇 沈浩 章庆国 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2007年第2期116-119,共4页

目的:探讨骨形态发生蛋白-5(BMP5)成熟肽基因突变与先天性小耳畸形发病的关系。方法:收集临床确诊的散发先天性小耳畸形患者35例,用Trizol提取外周血白细胞总RNA,利用反转录-聚合酶链反应-单链构象多态性分析(RT-PCR-SSCP)技术进行BMP5... 目的:探讨骨形态发生蛋白-5(BMP5)成熟肽基因突变与先天性小耳畸形发病的关系。方法:收集临床确诊的散发先天性小耳畸形患者35例,用Trizol提取外周血白细胞总RNA,利用反转录-聚合酶链反应-单链构象多态性分析(RT-PCR-SSCP)技术进行BMP5成熟肽基因的突变分析,对异常电泳条带的RT-PCR产物进行核苷酸序列测定,明确突变位点和方式。结果:从35例先天性小耳畸形患者中检测到1种错义突变:第213位点发生TTTT→ACAC突变,编码氨基酸改变为苯丙氨酸→组氨酸。结论:检测到的BMP5成熟肽基因突变可能为致病突变,其与先天性小耳畸形发病的关系有待于进一步研究。 展开更多

关键词 先天性小耳畸形 骨形态发生蛋白-5成熟肽基因 突变

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骨关节炎关节软骨细胞外基质降解靶点的研究进展 被引量：4

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作者 刘艺 沈龙海 《世界临床药物》 CAS 2015年第5期353-357,共5页

骨关节炎潜在的发病机制和软骨不可逆转的损伤机制尚不明确,目前尚无有效改善骨关节炎病情的药物。本文简要概述细胞外基质降解相关作用靶点,为新药开发提供参考。

关键词 骨关节炎(OA) 基质金属蛋白酶(MMP) 聚蛋白聚糖酶 成纤维细胞生长因子(FGF) 骨形态发生蛋白(BMP) 生长分化因子-5(GDF-5) 脂肪因子

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炎症微环境作用下BMP9通过ERK5/KLF4信号通路促进牙周膜干细胞成骨分化

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作者 李莉 连文伟 《上海口腔医学》 CAS 北大核心 2023年第6期583-589,共7页

目的:探讨骨形态蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)在炎症环境中是否通过ERK5/KLF4信号通路促进牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)成骨分化。方法:利用重组腺病毒技术,在TNF-α刺激的PDLSCs中过表达BMP9,通... 目的:探讨骨形态蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)在炎症环境中是否通过ERK5/KLF4信号通路促进牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)成骨分化。方法:利用重组腺病毒技术,在TNF-α刺激的PDLSCs中过表达BMP9,通过RT-PCR和Western印迹法检测成骨相关基因及蛋白的表达变化。随后,通过转染技术使KLF4在PDLSCs中过表达,在炎症条件下观察其对成骨分化及相关基因表达的效应。在KLF4敲低的背景下过表达BMP9,观察其对成骨分化的影响。添加ERK5抑制剂BIX02189,揭示ERK5在BMP9诱导的成骨分化中的关键作用。采用SPSS 20.0软件包对数据进行统计学分析。结果:BMP9在炎症环境下显著促进PDLSCs成骨分化,并增强KLF4表达。KLF4过表达进一步加强了PDLSCs成骨分化。然而,当KLF4被敲低时,BMP9对PDLSCs成骨促进效应受到明显抑制。BMP9处理显著增加ERK5磷酸化水平,但在ERK5被抑制后,BMP9对成骨分化的促进效应大幅减弱。结论:BMP9可在炎症环境中通过ERK5/KLF4信号通路显著促进PDLSCs成骨分化。 展开更多

关键词 骨形态蛋白9 KLF4 牙周膜干细胞 成骨分化 炎症环境 ERK5/KLF4信号通路

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