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REGγ对LPS介导的腹膜炎调节作用 被引量：2
1
作者 孙锦霞 黎丽 +1 位作者 王瑞 黄钟 《深圳大学学报（理工版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第5期471-475,共5页
为研究蛋白酶体激活因子REGγ对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)介导的腹膜炎的调节作用,采用腹腔注射LPS的方法以建立小鼠腹膜炎模型.首先,通过骨髓细胞过继转移的方法构建骨髓嵌合体小鼠;利用存活率实验检测REGγ敲除对小鼠生存率的... 为研究蛋白酶体激活因子REGγ对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)介导的腹膜炎的调节作用,采用腹腔注射LPS的方法以建立小鼠腹膜炎模型.首先,通过骨髓细胞过继转移的方法构建骨髓嵌合体小鼠;利用存活率实验检测REGγ敲除对小鼠生存率的影响;然后,通过酶联免疫吸附测定实验检测促炎因子的表达.结果显示,与野生型(WT)小鼠相比,REGγ敲除(KO)小鼠表现为较低的存活率,且细胞因子TNFα(tumor necrosis factor-α)、IL-1β(interleukin-1β)和MCP-1(monocyte chemoattractant protein-1)的表达也较低.提取WT和KO小鼠来源的骨髓细胞,分别过继转移至X-射线辐照过的WT小鼠,获得WTchimera和KO^(chimera)骨髓嵌合体小鼠.腹腔注射LPS于WTchimera和KO^(chimera)嵌合体小鼠,结果发现,KO^(chimera)也表现为较低的存活率和TNFα、IL-1β和MCP-1表达.研究结果表明,REGγ在造血系统来源的炎症细胞中敲除,可以加速LPS介导的小鼠存活率下降,且抑制机体促炎因子TNFα、IL-1β和MCP-1的表达. 展开更多
关键词 腹膜炎 蛋白酶体 过继转移 骨髓嵌合体 造血系统 酶联免疫吸附测定法
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骨髓细胞来源的CD1d基因敲除拮抗DSS诱导的结肠炎 被引量：1
2
作者 李娇 陈永文 张庆镐 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期42-47,共6页
目的使用骨髓嵌合小鼠探究骨髓来源细胞的CD1d基因敲除在小鼠结肠炎进程中的调节作用及其可能的作用机制。方法取SPF级C57BL/6、CD1d^(-/-)小鼠全身一次性接受10 Gy剂量^(60)Co的放射源进行γ射线照射3 h后接受骨髓移植构建4组骨髓嵌合... 目的使用骨髓嵌合小鼠探究骨髓来源细胞的CD1d基因敲除在小鼠结肠炎进程中的调节作用及其可能的作用机制。方法取SPF级C57BL/6、CD1d^(-/-)小鼠全身一次性接受10 Gy剂量^(60)Co的放射源进行γ射线照射3 h后接受骨髓移植构建4组骨髓嵌合小鼠,饮用2.5%DSS连续7 d,每天记录各组小鼠的体质量变化、活动情况、粪便性状等并且评估小鼠的疾病活动指数(DAI)。第7天用FITC-dextran灌胃检测各组小鼠肠通透性、测量其结肠长度,并用H&E染色法观察结肠组织的病理学变化。免疫印迹检测各组小鼠肠组织炎性因子的表达。结果骨髓嵌合小鼠模型研究显示,与移植入WT骨髓细胞的小鼠相比,移植入CD1d^(-/-)骨髓细胞的小鼠质量下降缓慢、疾病活动指数(DAI)低(P<0.05),结肠长度长(P<0.01),肠通透性低(P<0.01),肠黏膜损伤轻、浸润的炎性细胞少。肠组织NLRP3蛋白及其底物IL-18表达高(P<0.05)。结论骨髓细胞来源的CD1d基因敲除能够拮抗DSS诱导的结肠炎,且可能是通过促进NLRP3炎性小体及其底物IL-18的表达发挥作用。 展开更多
关键词 CD1d基因 骨髓嵌合 结肠炎 NLRP3炎性小体 葡聚糖硫酸钠
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OX40/FcγR多基因人源化小鼠模型的构建及在激动型OX40抗体研究中应用的验证
3
作者 刘明东 刘小波 +3 位作者 赵英杰 张燕 张慧慧 李福彬 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期728-735,共8页
目的·建立一种能够快速获得可用于激动型抗体活性评估的OX40/FcγR[肿瘤坏死因子受体超家族成员4(tumor necrosis factor receptor superfamily member 4,OX40)/Fcγ受体(Fcγreceptor,FcγR)]多基因人源化小鼠模型的方法。方法... 目的·建立一种能够快速获得可用于激动型抗体活性评估的OX40/FcγR[肿瘤坏死因子受体超家族成员4(tumor necrosis factor receptor superfamily member 4,OX40)/Fcγ受体(Fcγreceptor,FcγR)]多基因人源化小鼠模型的方法。方法·将表达人源OX40分子的小鼠骨髓细胞与表达人源FcγR的小鼠骨髓细胞等比例混合后,通过尾静脉注射到经过辐照的野生型小鼠体内,构建骨髓嵌合小鼠。通过流式细胞术检测骨髓嵌合小鼠中OX40/FcγR人源分子的表达情况,确认免疫系统的重建效率。对构建成功的骨髓嵌合小鼠,使用流式细胞术评估人类抗人OX40单克隆抗体对CD4+、CD8+T细胞的免疫激活活性。2组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果·流式细胞术的结果显示,骨髓嵌合小鼠脾脏、外周血和淋巴结中的B淋巴细胞、髓系细胞均可以表达高水平的人源FcγR分子(均P<0.05);骨髓嵌合小鼠T淋巴细胞在体外激活后有明显的人源OX40分子的表达(P<0.05)。使用人类激动型抗人OX40抗体对骨髓嵌合小鼠进行处理显示,人类激动型抗人OX40抗体可以明显增强小鼠体内T细胞的γ-干扰素(interferonγ,IFN-γ)表达量,和CD4+T细胞上OX40分子的表达(均P<0.05)。结论·以表达人源OX40分子的小鼠与表达人源FcγR的小鼠的骨髓细胞为基础构建的骨髓嵌合小鼠模型能够同时表达人源OX40和FcγR分子,可用于评估人类激动型抗人OX40抗体的体内活性。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子受体超家族成员4 FCΓ受体 骨髓嵌合小鼠 多基因人源化小鼠
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