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题名BmNPV对家蚕抗氧化酶基因表达及其酶活性的影响
被引量：12
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作者
唐芬芬
杨伟克
朱峰
邵榆岚
张永红
白兴荣
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机构
云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所
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出处
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第10期2308-2313,共6页
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基金
国家自然科学基金项目（31560675）
云南省现代农业蚕桑产业技术体系建设专项（2013KJTX006）
云南省农业科学院应用基础研究专项（YJM201710）
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文摘
【目的】探究喂食家蚕核型多角体病毒(BmNPV)后家蚕血淋巴和中肠组织抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)]的活性及其基因表达变化规律,明确BmNPV侵染对家蚕抗氧化系统的影响,为解析BmNPV的致病机理提供理论依据。【方法】以五龄家蚕为研究对象,经口喂食BmNPV,分别于添食后6、12、18、24、30、36、42和48 h采集家蚕的血淋巴和中肠组织,采用实时荧光定量PCR检测两种抗氧化酶基因(Bmsod和Bmcat)的表达水平,同时以抗氧化酶活性测试盒测定SOD和CAT的活性变化情况。【结果】BmNPV侵染五龄家蚕能引起典型的血液型脓病,主要表现为蚕体环节肿胀,狂躁爬行,体壁易破,体液呈乳白色等。家蚕血淋巴和中肠组织中Bmsod和Bmcat基因均在感染BmNPV中期开始上调表达,在感染后期呈下调表达趋势,其相对表达量也呈先增加后急剧减少的变化趋势。添食BmNPV后,家蚕血淋巴和中肠组织的SOD活性在感染18和24 h时极显著高于对照组(添食等量灭菌水)家蚕(P<0.01,下同),但从感染30 h起SOD活性开始急剧下降,至感染48 h时降至最低值。家蚕血淋巴和中肠组织的CAT活性在感染早期(6 h)略有下降,从感染12 h起CAT活性开始呈上升趋势,血淋巴CAT活性在感染18~30 h极显著高于对照组,随后急剧下降且显著低于对照组家蚕(P<0.05,下同);中肠组织CAT活性仅在感染18和24 h时显著或极显著高于对照组家蚕,从感染30 h起开始持续下降,至感染48 h时降至最低值,约为对照组家蚕的18%。【结论】BmNPV侵染能影响家蚕机体相关保护酶活性及其基因转录水平,SOD和CAT活性及其基因表达量在感染中期增加,感染后期则急剧降低,提示抗氧化酶SOD和CAT在家蚕的抗病毒过程中发挥重要作用。
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关键词
家蚕
家蚕核型多角体病毒(bmnpv)
SOD
CAT
酶活性
基因表达
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Keywords
bombyx mori
bombyx mori nuclear polyhedrovirus(bmnpv)
SOD
CAT
enzyme activity
gene expression
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分类号
S884.51
[农业科学—特种经济动物饲养]
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题名家蚕热激蛋白Hsp25.4对BmNPV增殖的影响
被引量：1
- 2
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作者
唐芬芬
杨伟克
张祖芸
何超
沈登荣
张睿
谢昆
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机构
红河学院生物科学与农学学院
云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所
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出处
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第12期3757-3762,共6页
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基金
云南省基础研究计划面上项目(2022FB226)
云南省地方本科高校基础研究联合专项(2021BA070001-070)
+1 种基金
云南省农业科学院应用基础研究专项(YJM201710)
红河学院博士专项(BS2003)。
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文摘
【目的】探究家蚕热激蛋白(Hsp25.4)基因在家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nuclear polyhedrovirus,Bm NPV)侵染家蚕后的表达变化规律,明确敲低该基因表达后对BmNPV增殖复制的影响,为深入解析BmHsp25.4蛋白在BmNPV侵染家蚕过程中发挥的作用提供参考依据。【方法】以5龄家蚕幼虫为研究对象,经口添食10μL预先制备好的BmNPV-T3株病毒悬液(5×108个/mL),对照组添食等量灭菌水,采用实时荧光定量PCR检测BmHsp25.4基因在BmNPV侵染6 h各组织的表达情况,并选择相对表达量较高的3个组织,分析BmHsp25.4基因时空表达图谱;注射双链RNA(dsRNA)检测BmHsp25.4基因在体内的干涉效果,采用实时荧光定量PCR检测BmHsp25.4基因干涉后对BmNPV增殖复制的影响。【结果】BmNPV侵染家蚕6 h,BmHsp25.4基因在家蚕血液、中肠和脂肪体组织中的相对表达量升高;时空表达谱结果显示,BmHsp25.4基因在3个组织中的表达谱均呈先升高后降低的变化趋势,其中血液和中肠组织的相对表达量均在6h达峰值,而脂肪体则在BmNPV侵染12h时相对表达量达最高;注射dsRNA干涉后,试验组BmHsp25.4基因的相对表达量与对照组相比极显著降低61.81%(P<0.01,下同),说明BmHsp25.4基因的相对表达量被成功干涉;BmHsp25.4基因干涉后,感染24 h ds BmHsp25.4的gp41基因在各时期相对表达量极显著高于对照ds GFP处理,感染48 h二者差异显著(P<0.05)。【结论】BmNPV侵染能引起BmHsp25.4基因的表达,并且敲低BmHsp25.4基因的表达能提高BmNPV早期在虫体内的增殖,推测Hsp25.4蛋白在家蚕的抗病毒免疫中发挥关联功能。
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关键词
家蚕
家蚕核型多角体病毒(bmnpv)
热激蛋白
RNA干扰
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Keywords
bombyx mori
bombyx mori nuclear polyhedrovirus(bmnpv)
heat shock protein
RNA interference
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分类号
S884.51
[农业科学—特种经济动物饲养]
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