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Get effective polyclonal antisera in one month 被引量:45
1
作者 YUAN XIN HU, Ju YUAN QUO, Lu SHEN, YAN CHEN, Zu CHUAN ZHANG, YONG LIAN ZHANGState Key Laboratory of Molecular Biology, Institute of Biochemistry and Cell Biology, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, 320 Yue Yang Road, 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2002年第2期157-160,共4页
According to the traditional immunization procedure, after the first injection of the sample A (emulsion of aimed antigen and Freund's complete adjuvant) to immunize rabbit, successive injections of the sample B (... According to the traditional immunization procedure, after the first injection of the sample A (emulsion of aimed antigen and Freund's complete adjuvant) to immunize rabbit, successive injections of the sample B (emulsion of aimed antigen and Freund's incomplete adjuvant) were followed every 2-4 weeks. In general,high titer of the corresponding polyclonal antisera will be observed after 4-5 injections of sample B in 3-4months. This report presents a simply modified procedure that was able to stimulate the antisera formation in one month and achieve enough avidity to satisfy either Western blot or immunohistochemistry analysis.It just applied an additional injection of the sample A to the rabbit at the 3rd day after the primary immunization injection. You could gain the high titer of the antisera right after the first sample B injection in one month. This method has produced the desired results in three different recombinant antigens with different molecular weight (5.9 KD-55 KD) expressed from prokaryotic or eukaryotic cells. 展开更多
关键词 Antibody Formation Immunologic Techniques Animals blotting Western Emulsions Freund's Adjuvant Immune Sera Immunohistochemistry MICE Mice Inbred BALB C Rabbits Rats Research Support Non-U.S. Gov't Serum Albumin Bovine Specific Pathogen-Free Organisms Time Factors
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急性暴露尼古丁对未成年大鼠脑内神经元Caspase-3表达及凋亡的影响 被引量:4
2
作者 李曼 翟秀岩 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期504-508,共5页
目的研究急性暴露尼古丁(nicotine)对未成年大鼠脑内神经细胞凋亡的影响。方法用免疫组织化学法和Westernblotting法检测急性暴露尼古丁的未成年模型大鼠脑内Caspase-3的表达;用原位末端标记法(TUNEL法)检测凋亡细胞。结果免疫组织化学... 目的研究急性暴露尼古丁(nicotine)对未成年大鼠脑内神经细胞凋亡的影响。方法用免疫组织化学法和Westernblotting法检测急性暴露尼古丁的未成年模型大鼠脑内Caspase-3的表达;用原位末端标记法(TUNEL法)检测凋亡细胞。结果免疫组织化学法检测到大脑皮层、海马齿状回、CA2区和CA3区的Caspase-3表达在实验组明显增高。蛋白质免疫印迹法(Westernblotting)检测到大脑皮层和海马Caspase-3原型及活性片段的表达在实验组明显增高。TUNEL法检测到大脑皮层和海马齿状回的阳性细胞在实验组明显增多。结论急性暴露尼古丁激活未成年大鼠脑内大脑皮层和海马内神经细胞Caspase-3,促进大脑皮层和海马齿状回的神经元凋亡。 展开更多
关键词 Caspase-3 凋亡 尼古丁 海马 免疫组织化学 免疫印迹法 原位末端标记法 大鼠
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不同方法对海棠叶表皮的观察对比 被引量:5
3
作者 陈奕凝 谭文文 +4 位作者 彭冶 白玛玉珍 杨美钰 刘从敏 严袖 《安徽农业科学》 CAS 2020年第20期127-130,139,共5页
为了比较不同海棠叶表皮结构的差异并选择出最佳观察方法,选取西府海棠(Malus micromalus)、湖北海棠(Malus hupehensis)及垂丝海棠(Malus halliana),使用撕取法、指甲油印迹法、白胶印迹法、氢氧化钠离析法及水杨酸甲酯透明法,对不同... 为了比较不同海棠叶表皮结构的差异并选择出最佳观察方法,选取西府海棠(Malus micromalus)、湖北海棠(Malus hupehensis)及垂丝海棠(Malus halliana),使用撕取法、指甲油印迹法、白胶印迹法、氢氧化钠离析法及水杨酸甲酯透明法,对不同种海棠的叶表皮进行观察比较并以撕取法为对照对不同方法进行归纳总结。结果显示:3种海棠叶片上下表皮结构基本相似,上表皮均具有蜡质纹饰,气孔器均为不规则类型。湖北海棠的叶片结构和垂丝海棠较相似,其表皮细胞数据受方法影响不大。撕取法的清晰度最高;指甲油印迹法操作方便,但会使表皮细胞产生皱缩,不同类型的指甲油试验结果存在差异;白胶印迹法难以复刻叶表皮结构细节;氢氧化钠离析法对时间的要求很高,效果仅次于撕取法;水杨酸甲酯透明法在透明不同树种时效果差异较大。综上所述,撕取法适合西府海棠类较易撕取叶表皮的植物,氢氧化钠离析法适用于如垂丝海棠难以撕取叶表皮的植物,指甲油印迹法可以用于快速观察植物气孔形态,水杨酸甲酯透明法受材料限制严重,白胶印迹法不适用于叶表皮结构观察。 展开更多
关键词 叶表皮观察 撕取法 印迹法 离析法 海棠
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高迁移率族蛋白1在子宫肌瘤中的表达及临床意义 被引量:2
4
作者 谢日学 吴佳捷 +3 位作者 周翠香 刘洪波 萧梅芳 谢颖 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期608-611,共4页
目的探讨高迁移率族蛋白1(High mobility group box1,HMGB1)在子宫肌瘤中的表达及临床意义。方法应用实时荧光定量PCR技术、Western blotting法及免疫组织化学SP法检测子宫肌瘤和相应肌瘤旁组织HMGB1 mRNA及该蛋白的表达情况。结果 HMGB... 目的探讨高迁移率族蛋白1(High mobility group box1,HMGB1)在子宫肌瘤中的表达及临床意义。方法应用实时荧光定量PCR技术、Western blotting法及免疫组织化学SP法检测子宫肌瘤和相应肌瘤旁组织HMGB1 mRNA及该蛋白的表达情况。结果 HMGB1 mRNA在子宫肌瘤组中表达量高于相应肌瘤旁肌层组,差异有统计学意义(2-△△Ct=12.38>2);子宫肌瘤组HMGB1蛋白水平及阳性表达率均比对照组高,差异有统计学意义(P<0.05),且在肌瘤组中其阳性反应主要定位在细胞核,细胞质未见或仅见轻微的阳性表达。结论 HMGB1及HMGB1 mRNA在子宫肌瘤中表达上调,该蛋白可能与子宫肌瘤的发生、发展存在密切关系;HMGB1阳性反应主要定位在细胞核,HMGB1可能通过核内作用促进子宫肌瘤细胞增殖。 展开更多
关键词 子宫肌瘤 HMGB1 免疫组织化学法 实时荧光定量PCR WESTERN blotting
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大鼠脑组织中P-糖蛋白的免疫印迹检测方法 被引量:2
5
作者 王冰 潘彦舒 +2 位作者 华茜 侯金才 李澎涛 《现代生物医学进展》 CAS 2007年第3期329-331,共3页
目的:确定蛋白免疫印迹检测大鼠脑组织中P-糖蛋白的最佳实验条件。方法:将成年雄性Wistar大鼠随机分为正常组和模型组。模型组分八个时间点,采用反复夹闭颈总动脉辅以硝普钠降压的方法制备脑缺血再灌注模型。正常组直接断头取脑分别进... 目的:确定蛋白免疫印迹检测大鼠脑组织中P-糖蛋白的最佳实验条件。方法:将成年雄性Wistar大鼠随机分为正常组和模型组。模型组分八个时间点,采用反复夹闭颈总动脉辅以硝普钠降压的方法制备脑缺血再灌注模型。正常组直接断头取脑分别进行组织匀浆和提取微血管,而模型组断头取脑均提取微血管,利用蛋白免疫印迹检测大鼠脑内P-糖蛋白的表达水平。结果:最佳实验条件是:提取微血管,用裂解液C冰上裂解30min,然后40000g离心30min留上清,蛋白定量后在5*上样缓冲液中25℃处理30min。而模型组各时间点P-糖蛋白的表达量随时间的延长逐渐增多。结论:利用提取脑微血管的方法在上述实验条件下进行P-糖蛋白的检测方便、可行,明显优于脑组织匀浆;并且在脑缺血再灌注这种病理状态下脑组织内P-糖蛋白的表达呈现一定的时序特征。 展开更多
关键词 P-糖蛋白 蛋白免疫印迹 检测方法 脑缺血再灌注 微血管
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桦褐孔菌酸性蛋白酶的基因克隆及其在菌核中的表达 被引量:1
6
作者 李健 王鑫 +4 位作者 胡志强 亢学平 杜忠伟 王旭 陈艳秋 《食用菌学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期42-48,共7页
根据桦褐孔菌(Inonotus obliquus)酸性蛋白酶(Acid protease,AP)基因(IO-AP)序列密码子的偏好性优化选择酶切位点和载体,成功构建pGEX-4T1-IO-AP原核表达载体;用热激法将该载体转化到大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中,构建桦褐孔... 根据桦褐孔菌(Inonotus obliquus)酸性蛋白酶(Acid protease,AP)基因(IO-AP)序列密码子的偏好性优化选择酶切位点和载体,成功构建pGEX-4T1-IO-AP原核表达载体;用热激法将该载体转化到大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中,构建桦褐孔菌酸性蛋白酶(IO-AP)重组菌。以此重组菌表达的IO-AP以包涵体形式存在,重组蛋白分子质量约为60kDa。以获得的较高纯度的重组IO-AP作为免疫原,采用传统3-2-2-2免疫方式免疫4只Balb/c小鼠,通过间接ELISA法测定抗血清效价,4免之后,4只小鼠抗血清效价均大于121500,成功制备了IO-AP多克隆抗体。Western Blotting检测表明,IO-AP在桦褐孔菌菌核形成过程中的表达呈现先上升后下降的趋势,以第二个时期(栽培130d,菌核长至1.33g时)AP蛋白表达量最高。 展开更多
关键词 大肠杆菌重组蛋白 桦褐孔菌 ELISA法 WESTERN blotting检测
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丹参酮ⅡA对TGF-β1诱导的人皮肤成纤维细胞增殖的影响及作用机制 被引量:16
7
作者 许小琪 韩兵 +2 位作者 赖建辉 林宇建 时军 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第18期4685-4690,共6页
目的研究丹参酮ⅡA(TSA)对TGF-β1诱导的人皮肤成纤维细胞(HSF)的影响及作用机制。方法采用CCK-8法测定不同浓度TSA(2.5、5、10、20μmol/L)干预TGF-β1诱导HSF细胞增殖的影响;采用平板克隆形成实验分别分析不同浓度TSA处理48 h后HSF细... 目的研究丹参酮ⅡA(TSA)对TGF-β1诱导的人皮肤成纤维细胞(HSF)的影响及作用机制。方法采用CCK-8法测定不同浓度TSA(2.5、5、10、20μmol/L)干预TGF-β1诱导HSF细胞增殖的影响;采用平板克隆形成实验分别分析不同浓度TSA处理48 h后HSF细胞的克隆形成能力的变化;Western blotting检测HSF细胞中TGF-β1/Smad通路蛋白及α-SMA、VEGFA和COLI蛋白的表达水平。结果CCK-8和平板克隆形成实验结果表明,TSA显著抑制了HSF细胞的增殖和克隆形成能力(P<0.01);Western blotting结果显示,TSA各浓度组能够显著抑制p-Smad2和p-Smad3蛋白水平,下调p-Smad2/Smad2的比值(P<0.01)。5、10、20μmol/L TSA组明显下调p-Smad3/Smad3的比值;另外,HSF细胞中α-SMA、VEGFA和COLI蛋白表达水平随着TSA浓度的升高而显著降低(P<0.01)。结论TSA具有抑制HSF细胞增殖的能力,其作用机制可能与TGF-β1/Smad通路有关。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 人皮肤成纤维细胞 增生性瘢痕 增殖抑制 TGF-β1/Smad通路 CCK-8法 Western blotting α-SMA VEGFA COL I p-Smad2 p-Smad3
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红参中精氨酸双糖苷对小鼠的抗疲劳作用 被引量:13
8
作者 黄宝亮 丁传波 +4 位作者 王佳奇 郑毅男 刘文丛 张晶 徐晓华 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期897-902,共6页
目的:观察小鼠强迫性游泳诱发的疲劳现象,探讨红参中非皂苷类物质——精氨酸双糖苷(AFG)对小鼠的抗疲劳作用及其初步机制。方法:从红参中分离出AFG提取物,将80只ICR小鼠分为空白对照组,低、中和高剂量(100、200和400mg·kg^(-1))AFG... 目的:观察小鼠强迫性游泳诱发的疲劳现象,探讨红参中非皂苷类物质——精氨酸双糖苷(AFG)对小鼠的抗疲劳作用及其初步机制。方法:从红参中分离出AFG提取物,将80只ICR小鼠分为空白对照组,低、中和高剂量(100、200和400mg·kg^(-1))AFG组,每组20只,连续灌胃给药28d后对小鼠进行强迫性游泳实验,检测各组小鼠体质量,脏器指数,强迫性游泳时间,乳酸(LD)、尿素氮(BUN)、肝糖原(Gly)水平及腓肠肌中PGC-1α基因表达水平。结果:与空白对照组比较,低、中和高剂量AFG组小鼠的体质量和脏器指数差异无统计学意义(P>0.05);与空白对照组比较,低、中和高剂量AFG组小鼠强迫性游泳时间、Gly水平和PGC-1αmRNA基因表达水平均明显增加(P<0.05或P<0.01),且呈剂量依赖性;与空白对照组比较,低、中和高剂量AFG组小鼠血清中的LD和BUN水平明显降低(P<0.01)。结论:AFG对小鼠有抗疲劳作用,其机制可能与能量代谢有关。 展开更多
关键词 红参 精氨酸双糖苷 力竭性游泳 实时荧光定量聚合酶链反应 免疫印迹法
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昆明地区1674例过敏原特异性IgE分析 被引量:9
9
作者 付兰 杨雪松 +2 位作者 黎奇 普加宏 黄莓屏 《皮肤病与性病》 2018年第5期630-632,共3页
目的了解昆明地区患者吸入性过敏原和食物过敏原特异性IgE抗体分布特点,为过敏性疾病防治提供参考。方法以2015年3月~2017年12月在昆明市第一人民医院就诊的1 674例过敏性疾病患者为实验对象。用欧蒙免疫印迹法检测血清过敏原特异性Ig... 目的了解昆明地区患者吸入性过敏原和食物过敏原特异性IgE抗体分布特点,为过敏性疾病防治提供参考。方法以2015年3月~2017年12月在昆明市第一人民医院就诊的1 674例过敏性疾病患者为实验对象。用欧蒙免疫印迹法检测血清过敏原特异性IgE抗体。结果 1 674例过敏性疾病患者中,吸入性过敏原以屋尘螨/粉尘螨检出率最高,食物过敏原以海洋鱼类组合检出率最高。婴幼儿期以食物过敏原过敏为主,随着年龄增长吸入性过敏原逐渐增多,而食物过敏原逐步减少。结论本地区吸入性过敏原以屋尘螨/粉尘螨较常见,食物过敏原以海洋鱼类组合较常见。血清过敏原的检测可为过敏性疾病的病因学诊断、治疗和预防提供帮助。 展开更多
关键词 过敏原 免疫印迹法 特异性IGE 过敏性疾病
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电针对绝经后骨质疏松患者血清BGP、DKK-1、OPG和OPN水平的影响 被引量:7
10
作者 郑雪峰 聂焱 +1 位作者 何庆建 林燕萍 《江西中医药大学学报》 2020年第5期64-67,共4页
目的:观察电针脾俞、肾俞穴对绝经后骨质疏松(PMOP)患者血清骨钙素(BGP)、糖蛋白Dickkop(DKK-1)、骨保护素(OPG)和骨桥蛋白(OPN)表达水平的影响,探讨其作用机制。方法:选取30例符合纳入标准的PMOP患者,进行电针干预治疗,观察治疗前后患... 目的:观察电针脾俞、肾俞穴对绝经后骨质疏松(PMOP)患者血清骨钙素(BGP)、糖蛋白Dickkop(DKK-1)、骨保护素(OPG)和骨桥蛋白(OPN)表达水平的影响,探讨其作用机制。方法:选取30例符合纳入标准的PMOP患者,进行电针干预治疗,观察治疗前后患者骨密度和VAS临床骨痛评分变化。治疗前后采用蛋白质印迹法对患者血清BGP、DKK-1、OPG和OPN的表达水平进行测定。结果:治疗结束时,患者骨密度无明显变化(P>0.05),但VAS临床骨痛评分降低且有显著性差异(P<0.01)。与治疗前相比,患者血清中OPG的表达量增加,DKK-1的表达量降低,具有显著性差异(P<0.01);BGP和OPN的表达量降低,但无显著性差异(P>0.05)。结论:电针治疗能够显著缓解PMOP患者的骨痛症状,其作用机制可能与上调血清OPG、抑制DKK-1的表达有关。 展开更多
关键词 电针 绝经后骨质疏松 骨密度 蛋白质印迹法
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电针对非酒精性脂肪肝大鼠血清RBP4水平的影响及其脂质调节作用机制 被引量:7
11
作者 蒋娟 黄学宽 +4 位作者 曾志华 骆言 张超男 万磊 王玲 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期602-606,共5页
目的:探讨电针对高脂高胆固醇造模的非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠的脂质调节作用,阐明血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)水平以及肝 X受体α(LXR-α)和肝脏固醇调节元件结合蛋白-1 c (SREBP-1 c)表达的调节作用机制。方法:44只雌性 S... 目的:探讨电针对高脂高胆固醇造模的非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠的脂质调节作用,阐明血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)水平以及肝 X受体α(LXR-α)和肝脏固醇调节元件结合蛋白-1 c (SREBP-1 c)表达的调节作用机制。方法:44只雌性 SD大鼠适应性喂养7 d,随机分为正常组、模型组、东宝肝泰组和电针组,每组11只。正常组大鼠用标准饲料喂养,其余各组大鼠用高脂高胆固醇饲料喂养。8周后电针组针刺“肝俞”、“脾俞”和“膈俞”进行治疗,电压9 V,电流强度1~3 mA,频率为1.5~2.0 Hz,疏密波,留针15 min,每天1次,连续28 d。检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、血清游离脂肪酸(FFA)和肝组织匀浆甘油三酯(TC)、总胆固醇(TG)的变化,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清 RBP4水平,采用 Western blotting法检测大鼠肝组织中 LXR-α和SREBP-1 c蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠的 FBG、FFA、肝组织匀浆中 TC和 TG以及血清 RBP4水平升高(P<0.01), LXR-α和 SREBP-1 c蛋白表达水平也升高(P<0.01);与模型组比较,电针组和东宝肝泰组大鼠 FBG、FFA、肝组织匀浆TC和TG水平下降(P<0.05或P<0.01),血清 RBP4水平下降(P<0.01), LXR-α和 SREBP-1 c蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:电针“肝俞”、“脾俞”、“膈俞”能降低 NAFLD大鼠血清 RBP4水平,调节脂质代谢,改善脂质沉积,对 NAFLD有明显的治疗作用,其机制可能与抑制肝组织中 LXR-α和 SREBP-1 c蛋白表达上调有关。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪肝 电针 视黄醇结合蛋白4 蛋白免疫印迹法 肝X受体Α 固醇调节元件结合蛋白-1C
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不同程度间歇性低氧大鼠海马区磷酸化JNK的表达及其意义 被引量:7
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作者 赵雅宁 王红阳 +3 位作者 郭霞 李琳 韩晓庆 张盼盼 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1135-1140,I0013,共7页
目的:探讨不同程度间歇性低氧大鼠海马区磷酸化JNK表达水平变化,阐明低氧大鼠认知功能障碍的发生机制。方法:96只雄性SD大鼠随机分成对照组和轻、中、重度间歇低氧组,每组24只。对照组大鼠暴露于空气中,不同程度间歇低氧组大鼠分别暴露... 目的:探讨不同程度间歇性低氧大鼠海马区磷酸化JNK表达水平变化,阐明低氧大鼠认知功能障碍的发生机制。方法:96只雄性SD大鼠随机分成对照组和轻、中、重度间歇低氧组,每组24只。对照组大鼠暴露于空气中,不同程度间歇低氧组大鼠分别暴露于不同低氧条件(100、75和50mL.L-1,暴露时间每天8h,持续8周)。采用Western blotting和免疫组织化学法检测大鼠海马区磷酸化JNK蛋白表达水平;采用原位缺口末端标记(TUNEL)法检测各组大鼠凋亡细胞数量;采用Morris水迷宫法检测各组大鼠学习记忆功能。结果:与对照组比较,随低氧时间的延长,轻、中、重度间歇性低氧组大鼠海马区磷酸化JNK阳性细胞数和JNK蛋白表达水平均增加(P<0.05),TUNEL阳性细胞增多(P<0.05);水迷宫法检测,轻、中、重度间歇性低氧组大鼠逃避潜伏期时间延长和穿台次数减少(P<0.05)。与轻、中度间歇性低氧组比较,在重度间歇性低氧组TUNEL阳性细胞数增多,JNK蛋白表达水平和大鼠逃避潜伏期延长,穿台次数减少(P<0.05);轻、中度间歇性低氧组磷酸化JNK表达水平和TUNEL阳性细胞6周时达高峰,8周时降低,但组间各时间点比较差异无统计学意义(P>0.05);重度间歇性低氧组磷酸化JNK表达水平和TUNEL阳性细胞8周时达高峰,组间各时间点比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:不同程度间歇性低氧可导致大鼠认知功能损伤,其机制与激活大鼠海马区JNK、调控神经细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 有丝分裂原活化蛋白激酶 细胞凋亡 免疫组织化学 免疫印迹法 大鼠 SD 间歇性低氧
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益气活血中药对脑出血大鼠脑组织促血管生成素-1蛋白表达的影响 被引量:5
13
作者 阳鹤鹏 邢之华 +4 位作者 唐涛 刘宜峰 陈柏林 刘清娥 吴汉军 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期224-227,共4页
目的:通过研究益气活血中药方剂对脑出血大鼠脑损伤区组织促血管生成素-1(Ang-1)表达的影响,探讨益气活血法治疗脑出血的作用机制。方法:155只SD大鼠被随机分为正常组5只,假手术组、模型组、益气活血组、益气组和活血组各30只。用Ⅶ型... 目的:通过研究益气活血中药方剂对脑出血大鼠脑损伤区组织促血管生成素-1(Ang-1)表达的影响,探讨益气活血法治疗脑出血的作用机制。方法:155只SD大鼠被随机分为正常组5只,假手术组、模型组、益气活血组、益气组和活血组各30只。用Ⅶ型胶原酶诱导脑出血大鼠模型。各组相应灌服益气活血法代表方补阳还五汤全方及其益气组分、活血组分药物。各组于术后1、4、7、14、21和28d各取5只大鼠,采用Western blotting方法检测Ang-1的表达,结果进行光密度扫描半定量分析。结果:正常组及假手术组不同时间点Ang-1表达未见明显阳性信号;模型组、益气组、活血组及益气活血组脑出血后1d即有Ang-1表达,模型组至21d达到高峰,随后开始下降,益气组、活血组及益气活血组表达高峰时间提前至14d,活血组及益气活血组至21d仍维持一定的表达水平;各个时间点益气活血组表达均高于其他组。结论:益气活血中药可能通过使脑出血血肿周围脑组织Ang-1的表达增强,而促进脑出血损伤区血管新生和成熟,并促进脑出血大鼠神经功能的恢复。 展开更多
关键词 脑出血 促血管生成素-1 Western blotting 补阳还五汤 益气活血法
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延安市752例过敏性疾病患者血清过敏原特异性IgE检测及结果分析 被引量:5
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作者 高永伟 宋建刚 +3 位作者 强跳 任亚亚 庞随军 李元霞 《延安大学学报(医学科学版)》 2022年第1期32-35,共4页
目的 了解延安市过敏性疾病患者过敏原特异性IgE抗体分布特点,为过敏性疾病防治提供参考。方法 以2015年8月至2019年6月在延安大学附属医院就诊的过敏性疾病患者为研究对象。采用欧蒙免疫印迹法检测血清过敏原特异性IgE抗体。结果 752... 目的 了解延安市过敏性疾病患者过敏原特异性IgE抗体分布特点,为过敏性疾病防治提供参考。方法 以2015年8月至2019年6月在延安大学附属医院就诊的过敏性疾病患者为研究对象。采用欧蒙免疫印迹法检测血清过敏原特异性IgE抗体。结果 752例过敏性疾病患者中检测出特异性IgE 204例(204/752,27.12%);检出率占前5位的过敏原分别是艾蒿、淡水鱼、螨虫组合、大豆、海洋鱼;吸入性过敏原检出率前3位的是艾蒿、螨虫组合、屋尘/普通肠草;食物过敏原检出率前3位的是淡水鱼、大豆、海洋鱼。不同季节过敏原分布存在差异,秋季的检出率最高,且秋季以艾蒿为主,夏季以淡水鱼检出率为主。13~18岁年龄段人群sIgE检出率最高,60~81岁检出率最低。结论延安市常见的过敏原是艾蒿和淡水鱼,不同季节、不同年龄段过敏原存在差异,这些研究结果可为延安市过敏性疾病的防治工作提供参考。 展开更多
关键词 过敏性疾病 过敏原 特异性IGE 免疫印迹法
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大鼠脑缺血再灌注后诱导型环氧合酶和丙二醛的表达及川芎嗪的干预作用 被引量:5
15
作者 杨迎春 任占川 梁勇刚 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期886-890,共5页
目的探讨脑缺血再灌注损伤后诱导型环氧合酶(COX-2)和丙二醛(MDA)的表达及其意义,为治疗缺血性脑病提供实验依据。方法以线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞的局灶性脑缺血再灌注模型,采用免疫印迹法和硫代巴比妥酸法以及与神经行为相结合的... 目的探讨脑缺血再灌注损伤后诱导型环氧合酶(COX-2)和丙二醛(MDA)的表达及其意义,为治疗缺血性脑病提供实验依据。方法以线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞的局灶性脑缺血再灌注模型,采用免疫印迹法和硫代巴比妥酸法以及与神经行为相结合的方法,观测缺血再灌注侧大脑皮质内COX-2和MDA的表达和神经功能的变化,2,3,5-氯化二苯四氮唑(TTC)染色观测脑梗死体积的变化。结果MDA与COX-2的表达呈正相关(r=0.910,P<0.01)。COX-2和MDA在假手术组含量均较低,I2h/R6h两者均有明显升高,并随再灌注时间延长逐渐升高,在I2h/R24h达高峰,I2h/R48h略有下降,但仍维持在较高水平;与I2h/R24h模型组比较,川芎嗪治疗组的脑梗死体积明显减小(P<0.01),MDA含量明显降低(P<0.01)。结论脑缺血再灌注后,COX-2和MDA的表达较正常组明显增多,是导致脑缺血再灌注损伤的因素之一。川芎嗪对大鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用。 展开更多
关键词 脑缺血 诱导型环氧合酶 丙二醛 川芎嗪 免疫印迹法 硫代巴比妥酸法 大鼠
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10772例患者抗核抗体谱检测结果的回顾性分析 被引量:4
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作者 秦妍妍 杨延敏 《临床医学研究与实践》 2021年第6期4-6,共3页
目的探讨抗核抗体(ANA)谱检测结果及筛查的意义。方法用免疫印迹法对10772例患者进行ANA谱检测,并对结果进行回顾性分析。结果10772例患者中,ANA谱阳性2671例,阳性率为24.8%。女性患者阳性率为27.7%,高于男性患者的21.0%(P<0.05)。总... 目的探讨抗核抗体(ANA)谱检测结果及筛查的意义。方法用免疫印迹法对10772例患者进行ANA谱检测,并对结果进行回顾性分析。结果10772例患者中,ANA谱阳性2671例,阳性率为24.8%。女性患者阳性率为27.7%,高于男性患者的21.0%(P<0.05)。总体ANA谱检测阳性率最高的前5项依次是抗Ro-52抗体(6.9%)、抗SSA抗体(4.6%)、抗AMA-M2抗体(3.6%)、抗组蛋白抗体(2.6%)、抗dsDNA抗体(2.2%);男性患者检测阳性率最高的前5项依次是抗Ro-52抗体(5.0%)、抗AMA-M2抗体(3.2%)、抗SSA抗体(2.7%)、抗组蛋白抗体(2.2%)、抗PM-Scl抗体(2.0%);女性患者检测阳性率最高的前5项依次是抗Ro-52抗体(8.4%)、抗SSA抗体(6.1%)、抗AMA-M2抗体(4.0%)、抗组蛋白抗体(3.0%)、抗CENP-B抗体(2.9%)。结论ANA谱存在一定的阳性率,在检测人群的性别上存在差异,临床诊疗过程中应进行ANA谱地筛查,以预防自身免疫性疾病(AID)漏诊情况的发生。 展开更多
关键词 抗核抗体谱 免疫印迹法 自身免疫性疾病
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乙酰肝素酶和整合素α5β1蛋白在葡萄胎组织中的表达及其临床意义 被引量:3
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作者 王闯 于淑莉 +2 位作者 李桃 呂蓉蓉 齐洁敏 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1361-1366,I0020,共7页
目的:观察乙酰肝素酶(HPA)蛋白和整合素α5β1蛋白在人良、恶性葡萄胎组织中的表达情况,阐明其在良、恶性葡萄胎发生发展中的作用。方法:选择人正常胎盘绒毛组织50例(正常胎盘绒毛组)、良性葡萄胎组织40例(良性葡萄胎组)和恶性葡萄胎组... 目的:观察乙酰肝素酶(HPA)蛋白和整合素α5β1蛋白在人良、恶性葡萄胎组织中的表达情况,阐明其在良、恶性葡萄胎发生发展中的作用。方法:选择人正常胎盘绒毛组织50例(正常胎盘绒毛组)、良性葡萄胎组织40例(良性葡萄胎组)和恶性葡萄胎组织17例(恶性葡萄胎组)。采用免疫组织化学SP法检测各组组织中HPA和整合素α5β1蛋白的阳性表达率和阳性表达强度,Western blotting法分别检测各组组织中HPA和整合素α5β1蛋白表达水平,Spearman等级相关分析法分析良、恶性葡萄胎组织中HPA蛋白和整合素α5β1蛋白表达的相关性。结果:良性葡萄胎组和恶性葡萄胎组组织中HPA和整合素α5β1蛋白阳性表达率、阳性表达强度和表达水平高于正常胎盘绒毛组(P<0.05);恶性葡萄胎组组织中HPA和整合素α5β1蛋白阳性表达率、阳性表达强度和表达水平高于良性葡萄胎组(P<0.05)。在良、恶性葡萄胎组织中HPA蛋白与整合素α5β1蛋白的表达均呈正相关关系(r=0.506,P<0.05;r=0.555,P<0.05)。结论:联合检测HPA和整合素α5β1蛋白的表达可成为良性葡萄胎和恶性葡萄胎鉴别诊断的预测指标。 展开更多
关键词 葡萄胎 免疫组织化学 Western blotting 乙酰肝素酶 整合素Α5Β1
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四氯化碳对大鼠海马CA1区神经元低亲和力神经生长因子受体p75表达的影响 被引量:4
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作者 张立英 杨立元 +7 位作者 王晓红 孙玥 王伟 王茜婷 田珑 陈胜国 张书永 张卫光 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期23-26,共4页
目的研究四氯化碳(CCl4)对大鼠脑海马CA1区神经元低亲和力神经生长因子受体p75的表达和凋亡的影响。方法将24只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组和CCl4组。对照组每周一、四背部皮下注射橄榄油(0.12ml/100g),CCl4组分别在每周一或/和... 目的研究四氯化碳(CCl4)对大鼠脑海马CA1区神经元低亲和力神经生长因子受体p75的表达和凋亡的影响。方法将24只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组和CCl4组。对照组每周一、四背部皮下注射橄榄油(0.12ml/100g),CCl4组分别在每周一或/和周四背部皮下注射60%CCl4-橄榄油溶液(0.3ml/100g)1次(1d组)2、次(1周组)和4次(2周组),实验结束时处死大鼠。取脑后沿正中矢状面切开,右侧半脑石蜡切片,行Nissl染色,观察海马CA1区神经元的形态学改变;行p75、Bax免疫组织化学染色和Western blotting分析,检测海马CA1区神经元p75、Bax的表达,行原位缺口末端标记法(TUNEL)观察海马CA1区神经元的凋亡。结果Nissl染色显示对照组CA1区神经元染色较深,细胞数目较多,排列整齐,神经元内可见大量尼氏体;CCl4组CA1区神经元排列较对照组紊乱,部分锥体细胞体积缩小,核固缩,呈三角形,胞浆内尼氏体数目减少或消失。对照组海马CA1区可见少量表达p75和Bax的阳性细胞;CCl4组海马CA1区表达p75和Bax的阳性细胞数较对照组明显增多,以1周CCl4组增多最为明显;Western blotting结果与免疫组织化学染色结果一致。对照组海马CA1区未见TUNEL阳性细胞;CCl4组海马CA1区可见大量细胞核呈棕黄色着色的TUNEL阳性细胞,以1周CCl4组的阳性细胞数最多。结论注射CCl4后,大鼠脑海马CA1区p75的表达明显增强,Bax的表达也相应增强,凋亡的神经元明显增多。 展开更多
关键词 四氯化碳 低亲和力神经生长因子受体 BAX 海马CA1区 免疫组织化学 免疫印迹法 原位缺口末端标记法 大鼠
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不同酶免检测试剂及胶体硒法在HIV初筛中的应用效果 被引量:1
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作者 李姝霖 陈利红 +5 位作者 李玖平 韩一非 张久丁 张枫 全俊静 邓彤 《临床医学研究与实践》 2022年第36期144-147,共4页
目的探讨不同酶免检测试剂及胶体硒法在人类免疫缺陷病毒(HIV)初筛中的应用效果。方法选取2016年1月至2020年1月150例具有HIV高危感染风险而接受HIV抗体筛查的疑似HIV感染患者作为研究对象,分别采用第三代酶免检测试剂、第四代酶免检测... 目的探讨不同酶免检测试剂及胶体硒法在人类免疫缺陷病毒(HIV)初筛中的应用效果。方法选取2016年1月至2020年1月150例具有HIV高危感染风险而接受HIV抗体筛查的疑似HIV感染患者作为研究对象,分别采用第三代酶免检测试剂、第四代酶免检测试剂、胶体硒法进行HIV抗体检测。以免疫印迹法结果为金标准,比较胶体硒法、第三代酶免检测试剂、第四代酶免检测试剂对HIV抗体的诊断灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值;分析胶体硒法、第三代酶免检测试剂、第四代酶免检测试剂诊断结果与免疫印迹法诊断结果的一致性。结果150例疑似HIV感染患者中,经免疫印迹法检测,有96例证实为HIV抗体阳性,54例证实为HIV抗体阴性。第四代酶免检测试剂的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值高于胶体硒法和第三代酶免检测试剂(P<0.05);第三代酶免检测试剂与胶体硒法的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。胶体硒法诊断结果与免疫印迹法诊断结果之间具有中度一致性(Kappa值=0.539);第三代酶免检测试剂诊断结果与免疫印迹法诊断结果之间具有中度一致性(Kappa值=0.621);第四代酶免检测试剂诊断结果与免疫印迹法诊断结果之间具有高度一致性(Kappa值=0.872)。结论在HIV初筛中,酶联免疫吸附法对HIV抗体阳性的筛查准确性好,尤其是第四代酶免检测试剂,可进一步提高HIV抗体阳性的检出率。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒 酶联免疫吸附法 胶体硒法 免疫印迹法
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RNAi介导的Bip表达下调促进基于蛋白质剪接的双链共转基因细胞分泌FⅤⅢ凝血活性 被引量:2
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作者 朱甫祥 刘泽隆 +2 位作者 缪静 屈慧鸽 迟晓艳 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期624-628,共5页
目的探讨用RNA干扰技术下调内质网蛋白伴侣免疫球蛋白重链结合蛋白(Bip)的表达,对基于蛋白质剪接的双链共转凝血因子ⅤⅢ(FⅤⅢ)基因HEK293细胞分泌剪接FⅤⅢ蛋白的量和活性的影响。方法以培养的HEK293细胞,用含蛋白内含子的B区缺失型F... 目的探讨用RNA干扰技术下调内质网蛋白伴侣免疫球蛋白重链结合蛋白(Bip)的表达,对基于蛋白质剪接的双链共转凝血因子ⅤⅢ(FⅤⅢ)基因HEK293细胞分泌剪接FⅤⅢ蛋白的量和活性的影响。方法以培养的HEK293细胞,用含蛋白内含子的B区缺失型FⅤⅢ(BDD-FⅤⅢ)的重链和轻链基因表达载体共转染经Bip-siRNA处理的细胞,免疫印迹法检测Bip的表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞生长,用酶联免疫吸附(ELISA)和发色分析法分析转基因细胞分泌的剪接BDD-FⅤⅢ蛋白量和活性。结果 RNA干扰下调Bip表达作用明显,细胞生长不受影响;Bip下调的共转基因细胞分泌的剪接BDD-FⅤⅢ和重链量分别为(142±33)μg/L和(197±43)μg/L,明显高于对照细胞[分别为(89±23)μg/L和(120±27)μg/L];Bip下调的共转基因细胞分泌的FⅤⅢ凝血活性为(1 050±160)IU/L,明显高于对照细胞[640±170(IU/L)]。结论 Bip表达下调通过促进剪接BDD-FⅤⅢ的分泌可有效提高基于蛋白质剪接的双载体转BDD-FⅤⅢ基因功效,为进一步动物体内实验提供了依据。 展开更多
关键词 凝血因子VⅢ 免疫球蛋白重链结合蛋白 蛋白质剪接 双链转基因 免疫印迹法 酶联免疫吸附测定 发色分析法
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