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缺氧和营养缺乏对软骨终板干细胞凋亡的影响及相关机制 被引量:4
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作者 浦路桥 刘杰 +2 位作者 袁超 贾敏 王建 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期449-455,共7页
目的 :观察缺氧和营养缺乏对软骨终板干细胞(cartilage endplate-derived stem cells,CESCs)凋亡的影响,探讨B细胞淋巴瘤/白血病-2/腺病毒E1B 19-k Da结合蛋白3(Bcl-2/adenovirus E1B 19-k Da-interacting protein 3,BNIP3)信号通路在... 目的 :观察缺氧和营养缺乏对软骨终板干细胞(cartilage endplate-derived stem cells,CESCs)凋亡的影响,探讨B细胞淋巴瘤/白血病-2/腺病毒E1B 19-k Da结合蛋白3(Bcl-2/adenovirus E1B 19-k Da-interacting protein 3,BNIP3)信号通路在其中的作用。方法 :从临床获取退变椎间盘软骨终板标本,分离培养软骨终板细胞,使用琼脂糖筛选获得CESCs并进行干细胞标志物鉴定,将第三代细胞分别在常氧/完全培养基(对照组)与缺氧和营养缺乏(实验组)条件下培养48h,通过流式细胞术检测细胞凋亡率,CCK-8法检测细胞活性,Western Blot检测BNIP3、Bcl-2关联x蛋白(Bax)、Bcl-2关联k蛋白(Bak)和低氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白表达水平。使用BNIP3小干扰RNA(siRNA)干扰CESCs中BNIP3基因,同时设置阴性干扰对照组(Scramble siRNA),同前分组处理后再次检测细胞凋亡率、细胞活性及BNIP3、Bax、Bak蛋白的表达水平。结果:对5例标本获得的CESCs进行了干细胞标志物鉴定,其中细胞表面粘附分子44(CD44)、CD73、CD90和CD105为阳性,CD34、CD45、CD11b、CD19和HLA-DR为阴性,提示CESCs具有干细胞特性。实验组细胞凋亡率为(29.12±0.65)%显著高于对照组的(14.87±2.03)%(P<0.05);实验组的细胞增殖活性明显降低,为对照组的56.18%(P<0.05)。与对照组相比,实验组BNIP3、Bax、Bak蛋白的表达均显著上调(P<0.05)。使用BNIP3 siRNA干扰后,缺氧和营养缺乏引起的细胞凋亡增加和细胞增殖活力下降均被明显抑制;同时,缺氧和营养缺乏导致CESCs中BNIP3、Bax和Bak的蛋白表达升高也被显著逆转(P<0.05)。结论:缺氧和营养缺乏能够诱导CESCs发生凋亡,此过程可能是通过上调BNIP3、Bax和Bak蛋白表达而发挥作用的。 展开更多
关键词 软骨终板干细胞 缺氧和营养缺乏 凋亡 B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)腺病毒E1B 19-kDa结合蛋白 bcl-2关联x蛋白 bcl-2关联k蛋白
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壁虎多肽混合物对人非小细胞肺癌H1299细胞增殖和凋亡的影响
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作者 姚志新 刘嘉欣 +2 位作者 朱桂芬 黄慧贤 陈少娜 《中国药业》 CAS 2024年第17期61-65,共5页
目的探讨壁虎多肽混合物(GPM)对人非小细胞肺癌H1299细胞增殖和凋亡的影响。方法实验设正常对照组(等体积基础培养液)和GPM高、低剂量组(20,10 mg/mL),采用CCK-8法检测细胞增殖情况,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,采用实时荧光定量聚... 目的探讨壁虎多肽混合物(GPM)对人非小细胞肺癌H1299细胞增殖和凋亡的影响。方法实验设正常对照组(等体积基础培养液)和GPM高、低剂量组(20,10 mg/mL),采用CCK-8法检测细胞增殖情况,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法和免疫印迹(Western blot)法检测B-细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)mRNA及蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,GPM高、低剂量组H1299细胞存活率均显著降低(P<0.01),细胞凋亡率均显著升高(P<0.01),PI3K和Bax mRNA及蛋白表达水平均显著降低(P<0.01),Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。结论GPM能抑制H1299细胞的增殖,其作用机制可能与调控PI3K,Bax,Bcl-2 mRNA及蛋白的表达相关。 展开更多
关键词 壁虎多肽混合物 非小细胞肺癌 磷脂酰肌醇-3-激酶 B-细胞淋巴瘤因子2 bcl-2关联x蛋白
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川楝子醇提物抑制急性淋巴细胞白血病细胞增殖的作用机制研究 被引量:3
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作者 苗玉迪 胡星星 +1 位作者 王九菊 李艳春 《世界中医药》 CAS 2022年第24期3467-3471,共5页
目的:探究川楝子醇提物抑制急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞增殖的作用机制。方法:选取人急性淋巴白血病细胞T淋巴细胞(CCRF-CEM)细胞株及无特定病原体(SPF)级6周SD品种的雌性大鼠12只,以不同浓度梯度川楝子醇提物作用24 h、48 h、72 h,观... 目的:探究川楝子醇提物抑制急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞增殖的作用机制。方法:选取人急性淋巴白血病细胞T淋巴细胞(CCRF-CEM)细胞株及无特定病原体(SPF)级6周SD品种的雌性大鼠12只,以不同浓度梯度川楝子醇提物作用24 h、48 h、72 h,观察其对CCRF-CEM细胞的抑制及凋亡的影响。结果:16 mg/L、80 mg/L、400 mg/L川楝子醇提物作用ALL细胞的不同时间具有明显的抗增殖作用。相较于对照组,于同一时间点,不同质量川楝子醇提物的吸光度值明显不同,且随着质量的增加吸光度值逐渐降低(P<0.05)。与对照组比较,16 mg/L、80 mg/L、400 mg/L川楝子醇提物作用外周血淋巴细胞同一时间段的给药吸光度值比较差异无统计学意义(P>0.05)。提示不同质量浓度对外周血淋巴细胞无明显的不良反应。于同一时间点,与对照组比较,不同质量浓度川楝子提取物的B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)基因、Bcl-2相关X蛋白(Bax)基因、P53基因表达明显不同(P<0.05);Bax基因随质量浓度的增加而增加,Bcl-2基因表达随质量浓度的增加而降低,24 h 400 mg/L川楝子醇提物的P53基因表达达到最高,而作用于ALL细胞48 h后,基因表达呈上升趋势(P<0.05)。结论:川楝子醇提物可通过线粒体介导抑制白血病CCRF-CEM细胞增殖,并且呈浓度及时间的依赖性。 展开更多
关键词 川楝子醇提物 急性淋巴细胞白血病 增殖 凋亡 bcl-2关联x蛋白 P53基因 B细胞淋巴瘤-2 线粒体
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麦粒灸对环磷酰胺小鼠骨髓细胞Bcl-2/Bax表达的影响 被引量:2
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作者 赵帅 程艳婷 +3 位作者 朱涛 丁彦泽 侯玉铎 孟立强 《环球中医药》 CAS 2022年第10期1749-1754,共6页
目的 观察麦粒灸对于环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)小鼠骨髓造血功能的影响,从凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)/Bcl-2关联X蛋白(Bel-2 associated X,BAX)探讨麦粒灸对缓解骨髓抑制、减少细胞凋亡的保护机制。方法... 目的 观察麦粒灸对于环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)小鼠骨髓造血功能的影响,从凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)/Bcl-2关联X蛋白(Bel-2 associated X,BAX)探讨麦粒灸对缓解骨髓抑制、减少细胞凋亡的保护机制。方法 选45只SPF级CD1(ICR)小鼠,随机分为空白组、模型组、麦粒灸组,每组15只。模型组、麦粒灸组腹腔注射CTX 80mg/kg,每日一次,连续三天,建立小鼠白细胞减少症模型;空白组腹腔注射0.2 mL生理盐水。在造模前和治疗期间进行4次外周血白细胞计数,治疗结束后取小鼠股骨和骨髓,制备骨髓病理切片观察,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫组化法检测Bcl-2/Bax蛋白表达量。结果 (1)治疗结束后,麦粒灸组小鼠外周血白细胞水平明显高于空白组和模型组(P <0.01),模型组仍低于空白组(P <0.05);(2)骨髓病理切片苏木精—伊红染色可见麦粒灸组骨髓组织损害程度较模型组有所减轻,骨髓有核细胞增加;(3)麦粒灸组细胞凋亡率较模型组明显下降(P <0.01),但仍高于空白组(P <0.01)。(4)麦粒灸组Bcl-2蛋白含量较模型组升高(P <0.01),Bax蛋白含量较模型组降低(P <0.01)。结论 麦粒灸可升高CTX小鼠外周血白细胞数,缓解骨髓组织的损害程度,通过提高凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax值,降低骨髓细胞凋亡率,保护骨髓造血功能,缓解骨髓抑制。 展开更多
关键词 麦粒灸 环磷酰胺 凋亡 白细胞减少症 B淋巴细胞瘤-2蛋白 bcl-2关联x蛋白
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