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低剂量5-氨基酮戊酸光动力疗法对HaCaT细胞皮肤屏障相关蛋白表达的影响 被引量：1
1
作者 王倩 彭露 +4 位作者 兰晓玲 江雪梅 张丽霞 刘刚 刘伟 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期509-515,共7页
目的通过研究低剂量5-氨基酮戊酸(5-aminolevulinic acid,ALA)光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)对HaCaT细胞中皮肤屏障相关蛋白表达的影响,探讨低剂量光动力改善皮肤屏障功能的潜在机制。方法以0、0.01、0.05、0.1、0.5及1 mmol/L ... 目的通过研究低剂量5-氨基酮戊酸(5-aminolevulinic acid,ALA)光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)对HaCaT细胞中皮肤屏障相关蛋白表达的影响,探讨低剂量光动力改善皮肤屏障功能的潜在机制。方法以0、0.01、0.05、0.1、0.5及1 mmol/L ALA孵育HaCaT细胞后分别予以0、0.5、1.85、3.72及10 J/cm^(2)的(635±3)nm红光照射,CCK-8检测细胞存活率,摸索低剂量ALA-PDT促进HaCaT细胞活力的最佳ALA浓度及照光能量参数。将细胞分为对照组、光照组、ALA组、低剂量PDT组,分别予以相应处理后,用实时荧光定量PCR、Western blot实验检测细胞中丝聚合蛋白(filaggrin,FLG)、内皮蛋白(involucrin,IVL)、水通道蛋白3(aquaporin 3,AQP3)、紧密连接蛋白-1(claudin-1,CLDN1)、闭锁蛋白(occludin,OCLN)mRNA及蛋白表达。结果不同ALA浓度及不同照光能量处理HaCaT细胞的结果显示,在0.1 mmol/L ALA及3.72 J/cm^(2)照光能量的条件下,细胞的活力最佳。以该低剂量ALA-PDT处理HaCaT细胞后,FLG、IVL、AQP3、CLDN1及OCLN mRNA的相对表达量分别为10.25±6.34、5.10±2.74、4.89±1.33、8.53±6.43、4.06±2.01,对照组为1.01±0.01、1.02±0.02、1.01±0.01、1.01±0.00、1.02±0.01,光照组为2.64±1.04、2.29±1.49、2.49±1.87、4.51±4.41、1.57±1.12,ALA组为3.03±2.35、1.78±0.90、1.55±1.13、3.72±5.88、1.39±0.89,其中低剂量PDT组中FLG及AQP3表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。Wes-tern blot显示低剂量PDT组HaCaT细胞中FLG、IVL、AQP3、CLDN1蛋白表达水平均明显高于对照组、光照组及ALA组(P<0.05),OCLN的表达在几组中差异无统计学意义(P>0.05)。结论0.1 mmol/L ALA联合3.72 J/cm^(2)的照光能量为低剂量ALA-PDT对HaCaT细胞的最适ALA浓度及照光能量;低剂量ALA-PDT可能通过提高部分皮肤屏障相关蛋白的表达起到改善皮肤屏障的作用。 展开更多
关键词 光动力治疗 低剂量ALA-PDT 角质形成细胞 屏障蛋白 丝聚合蛋白 内皮蛋白 紧密连接蛋白质类 水通道蛋白3
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城市大气细颗粒物PM2.5对人角质形成细胞屏障相关蛋白表达的影响 被引量：2
2
作者 姚骐羽 罗阳 +1 位作者 姚煦 刘军 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期753-758,共6页
目的明确大气颗粒物PM2.5对人角质形成细胞中皮肤屏障相关蛋白和前炎症细胞因子表达的影响。方法取5例包皮环切术后的包皮分离培养人原代角质形成细胞。0(对照组)、10、50、100、200mg/LPM2.5分别刺激人原代角质形成细胞24h,CCK-8检测... 目的明确大气颗粒物PM2.5对人角质形成细胞中皮肤屏障相关蛋白和前炎症细胞因子表达的影响。方法取5例包皮环切术后的包皮分离培养人原代角质形成细胞。0(对照组)、10、50、100、200mg/LPM2.5分别刺激人原代角质形成细胞24h,CCK-8检测细胞存活率。50mg/LPM2.5处理原代角质形成细胞0、3、6、9、12、18和24h,以只加培养基的孔作为对照组,CCK-8检测细胞存活率。荧光定量PCR、Western印迹法分别检测不同浓度PM2.5刺激角质形成细胞24h后细胞内丝聚蛋白、角蛋白14和紧密连接蛋白1mRNA及蛋白表达,ELISA法检测各组角质形成细胞培养上清液中白细胞介素1α(IL-1α)、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)、IL-33水平。采用SPSS13.0统计软件进行单因素方差分析、LSD-t检验及Pearson相关性分析。结果不同浓度PM2.5处理24h后,10mg/LPM2.5组角质形成细胞存活率与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),而50、100、200mg/LPM2.5组细胞存活率均显著低于对照组(均P<0.05)。50mg/LPM2.5处理角质形成细胞不同时间,随PM2.5作用时间的延长,细胞生存率逐渐降低后稳定在一定水平,24h细胞生存率为72.37%±3.12%。不同浓度PM2.5刺激角质形成细胞24h后,10、50mg/LPM2.5组丝聚蛋白mRNA相对表达量(1.27±0.15、1.32±0.09)和角蛋白14mRNA相对表达量(1.15±0.13、1.08±0.16)均高于对照组(均P<0.05);100、200mg/LPM2.5组丝聚蛋白mRNA相对表达量(0.84±0.11、0.42±0.12)和角蛋白14mRNA相对表达量(0.67±0.09、0.74±0.11)均低于对照组(均P<0.05);而10、50、100、200mg/LPM2.5组紧密连接蛋白1mRNA表达均显著低于对照组(均P<0.05)。Western印迹显示,50、100mg/LPM2.5组丝聚蛋白表达高于对照组(均P<0.05),而10、200mg/LPM2.5组与对照组差异无统计学意义(均P>0.05)。各PM2.5组角蛋白14的表达均高于对照组(均P<0.05)。10mg/LPM2.5组紧密连接蛋白1表达与对照组相比差异无统计学意义(P=0.87),50、100、200m 展开更多
关键词 角蛋白细胞 颗粒物 细胞存活 角蛋白14 紧密连接蛋白质类 白细胞介素1Α PM2.5 屏障蛋白 丝聚蛋白 白细胞介素33 胸腺基质淋巴细胞生成素
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