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BamHⅠ+XhoⅠ双酶切质粒电泳弥散原因初探
1
作者 金科华 张惠敏 +2 位作者 杨志珅 金天颖 卢晓晓 《山西医科大学学报》 CAS 2017年第11期1114-1117,共4页
目的探讨TaKaRa公司(中国大连)快速限制酶Bam HⅠ+XhoⅠ37℃双酶切质粒p ET-28a、p ET-28a-SDHA产生弥散的原因。方法比较4种条件下酶切对弥散的影响:(1)Bam HⅠ+XhoⅠ37℃双酶切Elution Buffer(EB)洗脱或水洗脱的质粒;(2)NdeⅠ+XhoⅠ3... 目的探讨TaKaRa公司(中国大连)快速限制酶Bam HⅠ+XhoⅠ37℃双酶切质粒p ET-28a、p ET-28a-SDHA产生弥散的原因。方法比较4种条件下酶切对弥散的影响:(1)Bam HⅠ+XhoⅠ37℃双酶切Elution Buffer(EB)洗脱或水洗脱的质粒;(2)NdeⅠ+XhoⅠ37℃双酶切EB洗脱或水洗脱的质粒;(3)先Bam HⅠ30℃酶切,再XhoⅠ37℃酶切;(4)Bam HⅠ分别于30℃、37℃单酶切。结果 (1)Bam HⅠ+XhoⅠ37℃双酶切EB或水洗脱的质粒均产生严重弥散;(2)NdeⅠ+XhoⅠ37℃双酶切EB洗脱或水洗脱的质粒无弥散;(3)Bam HⅠ30℃酶切+XhoⅠ37℃酶切,无弥散;(4)Bam HⅠ30℃单酶切无弥散,37℃单酶切严重弥散。结论 Bam HⅠ+XhoⅠ37℃酶切质粒电泳弥散是Bam HⅠ在此温度下的星活性所致。 展开更多
关键词 bamhⅰ 双酶切 弥散 星活性
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EB病毒的BARF1基因在人支气管上皮细胞恶性转化和肿瘤形成中的作用 被引量：1
2
作者 宋立兵 李隽 +5 位作者 曾木圣 张玲 廖雯婷 李满枝 郑美莲 汪慧民 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期10-13,共4页
目的探讨EBV-BARF1基因对人支气管上皮细胞生长特性的影响,并初步探讨其作用机制。方法构建真核重组表达载体pcDNA3-BARF1,转染人支气管上皮细胞(HBEC),检测BARF1基因的表达,观察细胞生长状况、生长速度,在软琼脂中集落形成能力及对裸... 目的探讨EBV-BARF1基因对人支气管上皮细胞生长特性的影响,并初步探讨其作用机制。方法构建真核重组表达载体pcDNA3-BARF1,转染人支气管上皮细胞(HBEC),检测BARF1基因的表达,观察细胞生长状况、生长速度,在软琼脂中集落形成能力及对裸鼠的致瘤能力。结果EBV-BARF1基因转染细胞生长旺盛,失去接触抑制能力,生长速度增快,在软琼脂中形成多个集落,并在裸鼠体内成瘤。结论EBV的早期基因BARF1能明显地改变上皮细胞的生物学行为,使细胞发生恶性转化、获得肿瘤细胞的生长特性,该基因不仅与上皮细胞的早期永生化有关,在细胞的恶性转化及肿瘤形成过程中亦可能起重要的作用。 展开更多
关键词 爱泼斯坦巴尔病毒 bam h ⅰ A区右向框1基因 转染 hBEC 细胞转化 肿瘤
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