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黄曲霉拮抗菌Bacillus amyloliquefaciens B10-6-1产生的脂肽类抗生素的分离和鉴别 被引量：8
1
作者 张学雯 张学彬 +3 位作者 李红亚 王树香 王全 李术娜 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期594-602,共9页
本文旨在对黄曲霉拮抗菌Bacillus amyloliquefaciens B10-6-1的脂肽类抗生素相关基因进行克隆,对其所产生的脂肽类抗生素进行组分分离,对有抑菌活性的脂肽类抗生素进行结构鉴别。以解淀粉芽孢杆菌B10-6-1基因组DNA为模板,采用PCR方法对I... 本文旨在对黄曲霉拮抗菌Bacillus amyloliquefaciens B10-6-1的脂肽类抗生素相关基因进行克隆,对其所产生的脂肽类抗生素进行组分分离,对有抑菌活性的脂肽类抗生素进行结构鉴别。以解淀粉芽孢杆菌B10-6-1基因组DNA为模板,采用PCR方法对ItuA、ItuB、ItuC、ItuD、FenA、FenB、FenD、Sfp、bmyA、bmyB、bmyC合成基因进行DNA扩增。将该菌发酵液经过离心、酸沉淀、甲醇抽提等步骤得到脂肽类抗生素的粗提物,采用高效液相色谱法分离,对收集的洗脱峰组分进行体外抑菌试验,对有抑菌活性的组分进行液质(HPLC-ESI-MS)分析。PCR扩增检测结果显示黄曲霉菌拮抗菌B10-6-1能扩增出ItuA、ItuC、ItuD、FenA、FenD、Sfp、bmyA、bmyB、bmyC合成基因,未能扩增出ItuB、FenB合成基因。高效液相色谱法收集到7种组分,体外抑菌试验证明组分5和7有抑菌活性。经液质测定,组分5和组分7分别为脂肽类抗生素C14Bacillocnycin D和C15Bacillocnycin D。本研究探明了黄曲霉菌拮抗菌B10-6-1所产生的天然抑菌活性成分,为该菌用于黄曲霉菌的生物防治奠定了理论基础。 展开更多
关键词 黄曲霉拮抗菌 解淀粉芽孢杆菌 脂肽类抗生素 分离 鉴别
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荧光标记解淀粉芽孢杆菌WK1在山核桃树体和土壤中的定殖规律 被引量：5
2
作者 高竞 方伟 +6 位作者 顾佳悦 严淑娴 邵帅 梁辰飞 秦华 陈俊辉 徐秋芳 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2021年第1期77-86,共10页
为探明解淀粉芽孢杆菌WK1在山核桃树和林地土壤的定殖动态及其最佳接种方式,采用电击转化方法导入绿色荧光蛋白(GFP)质粒,构建荧光标记菌株(GFP-WK1)。通过叶面喷施(喷叶法)、根系浇灌(灌根法)和树干滴注(挂液法)3种方式接种GFP-WK1菌液... 为探明解淀粉芽孢杆菌WK1在山核桃树和林地土壤的定殖动态及其最佳接种方式,采用电击转化方法导入绿色荧光蛋白(GFP)质粒,构建荧光标记菌株(GFP-WK1)。通过叶面喷施(喷叶法)、根系浇灌(灌根法)和树干滴注(挂液法)3种方式接种GFP-WK1菌液,定期测定GFP-WK1在山核桃树体和土壤中的定殖数量,以及不同土壤pH条件下GFP-WK1在山核桃幼苗根、茎、叶中的定殖量,分析GFP-WK1的定殖能力和移动规律。结果表明:GFP-WK1能够通过喷叶法、灌根法和挂液法的方式在土壤和山核桃树体定殖,GFP-WK1在山核桃树体和土壤之间有良好的移动性,定殖量可保持在104~106 CFU·g^-1。相较于灌根法和喷叶法,挂液法处理下GFP-WK1定殖稳定。不同土壤pH条件下,GFP-WK1在山核桃幼苗中的定殖量均表现为根>茎>叶,在pH值为6.8的土壤条件下定殖效果最好,植物体内的定殖量也相对较高。从短期定殖效果和施用方便的角度,田间实际应用推荐灌根法,并将土壤pH值调到6.8;长期使用的话,建议选择挂液法,以保证树体的菌株定殖量稳定。 展开更多
关键词 山核桃 解淀粉芽孢杆菌 干腐病 绿色荧光蛋白 定殖
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降解玉米赤霉烯酮菌株的筛选、降解机制及特性研究 被引量：5
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作者 吴宗芮 丁轲 +6 位作者 余祖华 李旺 李元晓 曹平华 何万领 贾艳艳 刘宁 《中国粮油学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期27-33,共7页
玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)是一种易于污染谷物和饲料的雌激素类真菌毒素,严重危害人类和动物健康。采集霉变饲料、土壤等样品,以ZEN为唯一碳源的培养基进行初筛,采用ELISA法筛选对ZEN的降解能力较强的菌株。采用形态学和分子生物... 玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)是一种易于污染谷物和饲料的雌激素类真菌毒素,严重危害人类和动物健康。采集霉变饲料、土壤等样品,以ZEN为唯一碳源的培养基进行初筛,采用ELISA法筛选对ZEN的降解能力较强的菌株。采用形态学和分子生物学方法对菌株进行鉴定。对菌株的菌体、上清液、细胞内容物分别进行降解实验,探讨其降解机制。研究不同温度、pH、接种量和时间对菌株降解效率的影响。接种到污染ZEN(1μg/mL)的原料,评价筛选菌株对原料中ZEN的降解效率。通过小白鼠攻毒实验评价菌株的安全性。结果表明,从96个分离菌株中筛选出1株ZEN降解能力较强的菌株G-6,最高达到81.19%。菌株为G+,呈杆状,中等大小,能够形成芽孢。16S rDNA序列分析表明G-6和解淀粉芽孢杆菌的亲缘关系最近。不同成分降解实验表明该菌株主要是通过细胞分泌的胞外酶降解ZEN。菌株G-6最佳降解ZEN的条件为:温度37℃,pH5.0,接种量3%,培养时间72 h。样品毒素降解实验证明菌株均能100%降解可溶性淀粉、玉米粉、豆粕粉中的ZEN。小白鼠实验结果表明该菌株不具致病性,是一种安全菌株。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮 解淀粉芽孢杆菌 筛选 降解机制 鉴定
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解淀粉芽孢杆菌B235对花生根腐病的防治效果研究
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作者 张丽芳 曹阳 张兰 《花生学报》 北大核心 2024年第1期72-78,共7页
利用功能微生物防治花生根腐病是一种环境友好、绿色高效的防控措施。本研究进行了盆栽及田间小区试验,观察花生根腐病的发病情况及解淀粉芽孢杆菌B235对镰孢菌的防治效果。病原菌接种试验结果表明:接种镰孢菌的花生种子出苗慢、主侧根... 利用功能微生物防治花生根腐病是一种环境友好、绿色高效的防控措施。本研究进行了盆栽及田间小区试验,观察花生根腐病的发病情况及解淀粉芽孢杆菌B235对镰孢菌的防治效果。病原菌接种试验结果表明:接种镰孢菌的花生种子出苗慢、主侧根短小、发病率高,出苗率最差的为混合F1和F2两株菌的处理,出苗率仅为28.2%。盆栽生防试验结果表明:与接种病原菌的处理组相比,接种生防菌B235后能显著提升花生的发芽率和出苗率,发芽率和出苗率均在60%以上,最高可分别达到68.5%和65.3%;根腐病病情指数显著降低,防治效果均达60%以上,最高可分别达69.5%和65.5%。小区试验结果表明:相较于对照处理组,生防菌处理组表现为出苗率高、根系发达;在开花期,发病率为4.5%,显著低于常规处理的6.7%和对照处理的10.5%;在成熟期,各处理组发病率差异明显,对照组花生镰孢菌根腐病发病严重,发生率达19.8%,生防菌B235处理组根腐病发生较轻,为5.0%,显著低于常规处理的7.3%,且增产显著;同时发现接种菌株B235对花生根际微生物群落结构及多样性也产生积极的影响。综上所述,生防菌B235能够显著降低根腐病的发生、促进花生生长和产量提升,且有利于保持土壤微生态,具有较强的推广应用前景。 展开更多
关键词 解淀粉芽孢杆菌 花生 根腐病 镰孢菌 生物防治
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降解脱氧雪腐镰刀菌烯醇菌株的筛选与鉴定
5
作者 王俊峰 耿凯伟 +6 位作者 刘宇翾 时子瑶 宫玉杰 田亚东 康相涛 王彦彬 孙向丽 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期5430-5440,共11页
本试验旨在筛选能够降解脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的微生物,应用于DON的脱毒。试验以DON为唯一碳源,从土壤、鸡和猪粪便等样品中筛选可以降解DON的菌株。选取其中降解率最高的菌株,通过细菌形态学、生理生化特征、16S rRNA以及特异性基因... 本试验旨在筛选能够降解脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的微生物,应用于DON的脱毒。试验以DON为唯一碳源,从土壤、鸡和猪粪便等样品中筛选可以降解DON的菌株。选取其中降解率最高的菌株,通过细菌形态学、生理生化特征、16S rRNA以及特异性基因gyrB序列测定进行菌株鉴定,并探究其降解DON活性成分,以及DON的降解产物对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2细胞)活力和凋亡的影响。结果表明:1)从小麦田土壤样品中分离出了1株能够降解DON(1μg/mL)的菌株,在37℃培养96 h后对DON的降解率为60.77%,经鉴定并命名为解淀粉芽孢杆菌H7(Bacillus amyloliquefaciens H7)。2)解淀粉芽孢杆菌H7菌株主要通过分泌胞外酶降解DON。3)在CCK-8试验中,处理IPEC-J2细胞24和48 h后,0.5和1.0μg/mL DON降解产物组细胞存活率极显著高于DON组(P<0.01);在细胞凋亡试验中,处理IPEC-J2细胞24和48 h后,0.5μg/mL DON降解产物组细胞早期凋亡率和总凋亡率都显著低于DON组(P<0.05)。综上所述,本试验筛选到1株可降解DON的解淀粉芽孢杆菌H7,其活性物质胞外酶主要分布在细菌培养液上清中;DON经降解后对猪小肠上皮细胞的毒性降低。 展开更多
关键词 解淀粉芽孢杆菌 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 酶降解 细胞毒性
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解磷菌PSBHY-3的发酵培养工艺参数优化 被引量：1
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作者 胡晓娟 许云娜 +3 位作者 徐创文 杨铿 文国樑 曹煜成 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期475-482,共8页
【目的】优化解磷菌PSBHY-3的培养参数,为水产养殖专用解磷菌的工业化发酵生产提供技术支持。【方法】通过单因素试验筛选适合解磷菌菌株PSBHY-3生长的发酵培养基碳氮源及其含量;采用Plackett-Burman试验筛选获得对菌量影响最显著的3个... 【目的】优化解磷菌PSBHY-3的培养参数,为水产养殖专用解磷菌的工业化发酵生产提供技术支持。【方法】通过单因素试验筛选适合解磷菌菌株PSBHY-3生长的发酵培养基碳氮源及其含量;采用Plackett-Burman试验筛选获得对菌量影响最显著的3个因子;通过最陡爬坡试验和Box-Behnken试验确定显著因子的最佳水平,建立主要培养参数的回归方程,得出优化后显著因子的最佳值及预测菌量;通过摇瓶试验验证,检验模型方程的准确性。【结果】菌株PSBHY-3的最佳碳源、氮源分别为可溶性淀粉和蛋白胨—酵母膏(1∶1)。以温度(A)、蛋白胨—酵母膏(B)和转速(C)为因素变量,菌株PSBHY-3的菌量为响应值,拟合得到二次多元回归方程Y=17.10-0.88A+0.55B+1.27C+0.24AB+0.34AC-0.24BC-3.57A^(2)-2.78B^(2)-6.13C^(2)。优化得到的解磷菌菌株PSBHY-3最佳发酵培养参数为:可溶性淀粉10.0 g/L,蛋白胨10.18 g/L,酵母膏10.18 g/L,氯化钠3.0 g/L,硫酸镁1.0 g/L,pH 7,培养温度35.54℃,转速164 r/min,接种量1%,装液量60%(V/V)。在最佳发酵培养条件下,菌量实际值为1.81×10^(9) CFU/mL,与理论菌量(1.72×10^(9) CFU/mL)间无显著差异(P>0.05),但显著高于优化前采用营养肉汤培养的菌量(1.90×10^(8) CFU/mL)(P<0.05)。【结论】通过单因素试验、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和Box-Behnken试验等优化了菌株PSBHY-3的发酵参数,显著提高了目的菌量,回归方程预测准确,优化后的发酵参数可用于水产养殖专用解磷菌的工业化发酵生产。 展开更多
关键词 解磷菌 解淀粉芽孢杆菌 发酵 培养参数
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